乳腺癌分子分型及临床意义

评分标准（如图）：
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1+
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3+
HER2
2013年ASCO/CAP病理检查指南更新要点
ISH检测流程和判读标准 • 双探针
• 2007版：双探针检测体系仅根据 HER2/CEP17比值评判最终结果 。
• 2013版：需要结合HER2拷贝数 评判最终结果。
2007版：截断值为1.8和2.2
Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. [Epub ahead of print]
乳腺癌分子分型及临床意义
NP-BIO-2015.03-002 Valid Until 2017.03 专业资料，仅供医药卫生专业人士参考
声明
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中国癌症发病率及死亡率
乳腺癌分子分型
Weili H & W Ningxia . J Clin Exp Pathol 2012 May; 28( 5)
乳腺癌分子分型的由来
肿瘤分子分型最早是在1999 年由美国国立癌症研究所提出，通过综合的分子 分析技术使肿瘤的分类基础由形态学转向以分子特征为基础的新的肿瘤分类 系统[1]。 Peron在2000年分析8102个基因的互补DNA芯片，将乳腺癌分成5个类型[2]：
HER2检查的临床意义
HER2是乳腺癌预后判断因子，是影响乳腺癌生长与转 移的最重要的因素之一。（抑制凋亡，促进增殖；增加肿
瘤细胞的侵袭力；促进肿瘤血管新生和淋巴管新生。）
HER2在20%–30%的乳腺癌中都有表达的增加。 HER2过表达与无病生存期（DFS）的缩短及总生存率（
OS）的下降息息相关 HER2状态也可预测乳腺癌的药物治疗效果，包括
Ki-67的阈值为14%，根据2009年Cheng等用 GEP（基因表达分析）和IHC免疫组化评估预 后做的一项研究，确定以14%作为预后好、 坏的分界
Ki-67<14%为低表达 2011年St.Gallen共识：确定Ki-67 作为分子分型的重要标准 Ki-67 是Luminal A和B型分类诊断的关键，涉及不同治疗方案和预后评估
新辅助治疗后，Ki-67 的表达变化，可能预测患者的预后 Ki-67高表达，提示应在内分泌治疗的基础上加化疗，但不能预测疗效 Ki-67还不能作为治疗决策的成熟指标
J Natl Cancer Inst 2009,101:736
Ki-67
病理检测的要点
Ki-67用免疫组化（IHC）方法检测
Ki-67指数：细胞核Ki-67 呈阳性的细胞占全 部细胞的比例
管腔上皮A型（Luminal A） 管腔上皮B型（Luminal B ） HER2 过表达型 基底样型（BLBC） 正常乳腺样型（Normal-like）
目前比较公认的仍然是Perou 等提出的4 个亚型，4 个亚型的研究也最为深入
［1] Weili H & W Ningxia . J Clin Exp Pathol 2012 May; 28( 5) ［2］ Perou C M，et al［J］．Nature，2000， 406( 6797) : 747 － 52
DISH
FISH
判读标准（如图）：
Not amplified无扩增
Amplified扩增
HER2
2014中国指南与ASCO/CAP指南更新要点
每个浸润性原发灶和转移灶（若为Ⅳ期肿 瘤，且可获得标本）应进行HER2检测
病理报告可以HER2检测结果为无法确定， 但应注明原因
病理报告可以描述分析原位杂交（ISH） 肿瘤异质性问题
ER、PR
雌激素受体( ER)和孕激素受体( PR)
ER、PR是乳腺癌内分泌治疗和预后评估的重要指征
ER（ Estrogen Receptor）是存在于乳腺上皮细胞中的 一种蛋白质，能够与雌激素特异性结合，形成激素受体复合物，进入细胞核后发挥生物学效应。
ER水平与总生存（OS）、无病生存（DFS）、无复发 生存（RFS）、5年生存率、至治疗失败时间（TTF） 、内分泌治疗反应和复发时间呈正相关。
Reiki N，Tomofumi O，Yasuhiro O，et al．Exp Therap Med，2010，1: 747 － 54
对靶向治疗的反应 对紫杉醇及蒽环类药物治疗的反应 对三苯氧胺的耐药性 HER2在其它肿瘤中同样具有重要意义，例：HER2是胃 癌的临床靶向治疗的重要依据
Dawood S, et al. J Clin Oncol 2010;28:92–98. Bang YJ, et al. Lancet 2010;376:687–697.
J Natl Cancer Inst 2009,101:736
HER2
人类表皮生长因子受体2(human pidermalgrowth factor receptor-2）
HER4
HER3
HER2
HER1/EGFR
HER2/Neu 即c-erbB-2基因，定位于 染色体17q12-21.32上，编码相对分子 质量为185000的跨膜受体蛋白，具有 酪氨酸激酶活性。
HER2是表皮生长因子受体（ EGFR/ErbB）家族中的成员之一，参 与导致细胞生长和分化的信号转导。
HER2阳性的乳腺癌，基于临床特点和生物学行为有特殊表现，治疗模式也与其他 类型的乳腺癌有区别。
常用的检测方法有免疫组化（IHC）、荧光原位杂交（FISH）、银染原位杂交（ DISH）等
HER2
Luminal A 型高表达CK18、CK8 及AR。
Luminal A 亚型患者的生存预后与FOXA1 基因相关，该基因表达者无病生存率( disease free survival，DFS) 较高。
Micello D，Marando A，Sahnane N，et al． Virchows Arch，2010， 457( 4) : 467 － 76 Badve S，Turbin D，Thorat M A，et al． Clin Cancer Res，2007， 13( 15) : 4415 － 21
ER、PR
雌激素受体( ER)和孕激素受体( PR)检查临床意义
研究表明，ER/PR IHC染色阳性细胞百分比可提供有价值的疗效、预后预测信 息。
具有高水平HR表达的患者，其具有阳性转归的可能性很高，因此HR检测结果 可影响肿瘤医师和患者的治疗决定。
大规模研究表明，HR水平在肿瘤细胞低水平表达（1%）时即与临床疗效显著 相关。基于他莫昔芬和其他内分泌治疗药物在降低死亡率方面的确切作用及 其相对低毒的特点，专家组认为，在低水平ER状态下即可考虑采用内分泌治 疗，因此将≥1%阳性细胞作为阳性界值（<1%为阴性界值）。
Carlson RW, et al. JNCCN.2006:4(Suppl.3):S1–S22
HER2
2013年ASCO/CAP病理检查指南更新要点
免疫组化IHC检测流程和判读标准的更新
2007版：任何比例 2007版：无染色
2007版：30%
Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. [Epub ahead of print]
J Clin Oncol 2010, 28(16): 2784 Arch Pathol Lab Med 2010, 134(6): 930
ER、PR
2010年ASCO/CAP病理检查指南更新要点
IHC检测结果必须报告的内容包括以下3部分： ①染色阳性肿瘤细胞的百分比，应观察所有肿瘤细胞，而且应计数和评估 100个以上的细胞； ②应记录和报告染色强度（弱、中、强），并参照阳性对照评估整张切片 中阳性细胞的平均着色强度； ③结果解释，阳性（阳性肿瘤细胞 ≥1%），阴性（阳性肿瘤细胞<1%） 建议每张玻片添加对照（阴、阳性）；可报告应为“无法判读”，应特别 指出原因。
管腔上皮A型
病理IHC表达情况为: ER/PR阳性，且PR高表达（≥20%） HER2阴性 ,Ki-67低表 达（＜14%）
Luminal A型也称激素依赖型乳腺癌，约占全部乳腺癌的2/3，50岁以上多见，其特 点为对内分泌治疗敏感，预后好，对化疗的敏感性较其他亚型差，是乳腺癌最常 见类型。
Luminal A 型乳腺癌的雌激素受体( ESR1) 基因明显高表达，同时其他一些雌激素 诱导基因如LIV21、雌激素相关基因GATA 结合蛋白3、XBP1 及KRT8、KRT18 基因 等表达也明显上调，并出现具有特征性的survivin、ACAA1、ACOX1 基因表达下降 。
免疫组化技术（IHC）相关的分子分型
6种抗体组合进行分子分类：ER、 PR、HER2、CK5/6、EGFR、Ki-67 Peron等分析基因的互补DNA芯片，并根据IHC免疫组化（ER、PR、HER2
、Ki-67 ）4种指标将乳腺癌进行分子分型；Cheng等在2009年，用GEP（ 基因表达分析）和IHC免疫组化（ER、PR、HER2、Ki-67 ）及4046组织芯 片评估预后，并确定Ki-67的阈值。
PR （Progesterone Receptor）是ER作用于染色体后 ，新合成的另一种蛋白质，可以调节乳腺上皮细胞的 生长，而PR的合成受ER的调控，ER阳性者PR一般也 为阳性。
PR水平与OS、TTF、内分泌治疗反应和复发时间呈正 相关。
J Clin Oncol 2010, 28(16): 2784 Arch Pathol Lab Med 2010, 134(6): 930
Whitfifld M L，Sherlock G，Saldanha A J，et al． Mol Biol Cell，2002， 13( 6) : 1977 － 2000 Perou C M，Sorlie T，Eisen M B，et al． Nature，2000， 406( 6797) : 747 － 52 Goldhirsch A, et al. Annals of Oncology 24: 2206–2223, 2013
乳腺癌是一类分子水平上具有高度异质性的疾病。 以分子分型差异为依据，进行乳腺癌分子分型，对个体化治疗方案的选 择具有重要的参考价值，个体化治疗是乳腺癌治疗的发展方向。 乳腺癌分子分型的研究已从高分子水平深入到基因水平，其相关因子包 括ER、PR、HER2 基因、p53 基因、Ki-67 蛋白表达等，这些生物学指 标不但与肿瘤的生长、浸润、转移、复发等密切相关，而且对乳腺癌的 wenku.baidu.com疗有指导性的研究价值。
Luminal B 型
管腔上皮B型
病理IHC表达情况为: Luminal B（HER2阴性）ER阳性 HER2阴性
且至少一种以下情况： Ki67高表达（≥14%）、 PR阴性或低表达（＜20%）
Luminal B（HER2阳性） ER阳性 HER2阳性
任何状态的 Ki67 、任何状态的PR
Luminal B型乳腺癌因其激素受体阳性接受内分泌治疗无病生存率较高，但ER 又与HER-2通路之间的相互作用，使其对内分泌的反应性降低
Arch Pathol Lab Med 2010, 134(6): 930
Ki -67
增殖细胞核抗原检查的临床意义
Ki-67是一种与细胞周期相关的蛋白质，是目前 多种恶性肿瘤尤其是乳腺癌研究中的热门生物 指标，可以通过Ki-67抗原的检测，了解恶性肿 瘤的细胞增殖活性。 Ki-67 被认为是乳腺癌独立预后指标
可以采用亮视野ISH检测（DISH等） 实验染色过程中建议每张玻片上添加对照 组织处理用10%中性缓冲福尔马林固定由
原来的（6至48小时）改成（6至72小时 ），标本1小时内必须固定 报告的规范化：清晰、规范化书写报告 如：IHC 0、1+、2+、3+书写
分子分型及临床意义
Luminal A 型
Luminal B 发病率约占所有乳腺癌的8%
Luminal B 型表达低～ 中度的腔上皮特异基因，除CK8、CK18 表达水平低于 Luminal A 型外，其余肿瘤增殖性相关标记物较高。
目前Ki-67 作为划分Luminal 亚型的特异性指标尚存在争议，主要争论点在于 Ki-67 作为增殖性指标的临界点（14%），较高的Ki-67 表达率明显降低无病生 存率及总生存率。