抗酒石酸酸性磷酸酶检测试剂盒(PNP比色法)
抗酒石酸酸性磷酸酶
30-40岁2型糖尿病患者血清TRACP-5b及BALP临床分析目的:分析30-40岁糖尿病患者血清骨形成指标TRACP-5b及BALP 骨吸收指标水平与骨重建失衡的机理,为糖尿病骨质疏松的早期诊断提供可能的依据。
方法:选择30-40岁2型糖尿病患者23例及对照组病例21例,分别对其血清TRACP-5b及BALP进行测量,并做统计分析。
结果:T2DM患者组血清TRACP-5b水平高于对照组(P<0.05)具有统计学差异,T2DM患者组血清BALP水平低于对照组(P<0.05)具有统计学差异。
结论:1. 2型糖尿病患者较健康对照组患者血清骨吸收指标TRACP-5b水平升高,骨形成指标BALP 水平降低,成骨作用小于破骨作用,骨质疏松的风险有增加的可能性。
(2型糖尿病患者骨质疏松风险的增加可能与BALP及TRACP-5b 存在一定的关系)。
2.骨形成标记物BALP及骨吸收标记TRACP-5b可能是2型糖尿病骨质疏松早期预测的敏感指标。
引言:2型糖尿病是一种严重威胁人类健康的慢性疾病,在造成起心、脑、肾损伤的同时,还极易引起骨重建负平衡,导致骨质疏松。
有研究明,TRACP-5b是骨吸收的特异性标志物,可反映破骨细胞的活性及骨吸收的状态;BALP是骨形成的特异性标志物,可反映成骨细胞的活性及骨形成的状态。
本课题通过对40岁以下T2DM患者观察组和健康人对照组的血清TRCAP-5b及BALP水平测量,分析骨重建失衡的机理,为糖尿病骨质疏松的早期诊断提供可能的理论依据。
1.对象和方法1.1研究对象观察组:选取23例为我院2015年3月~2015年6月住院病人,按WHO标准确诊为T2DM 患者,其中男10例,女13例,年龄30-40岁,平均年龄(65. 5 ±1 0. 7)岁, 体质量指数[ BMI=体重( kg) /身高2( m2)] 平均为24. 4 ±3. 1, 病程6月~21 年, 均为口服降糖药及通过饮食控制血糖健康对照组:同期我院健康体检者21例,其中男10例,女11例,年龄30-40岁,平均年龄xx岁,体重指数xx.且经口服葡萄糖耐量试验排除糖尿病。
土壤酸性磷酸酶活性测定方法
土壤酸性磷酸酶活性测定方法土壤酸性磷酸酶活性的测定⑴原理该方法以对硝基苯磷酸二钠(即pNPP)为基质,基质在土壤酸性磷酸酶的催化下水解生成黄色色的对硝基苯酚(即pNP),该黄色溶液在410nm处有最大吸收光值,根据对硝基苯酚的生成数量与黄色溶液的吸光度呈正比来进行定量分析,以此来反映土壤酸性磷酸酶的活性,采用的是对硝基苯磷酸二钠比色法。
⑵测定方法①称取壤土0.2g、砂土0.5g、粘土0.1g风干土于10mL离心管中,加入0.2 mL甲苯和4 mL ph6.5 磷酸缓冲液,再加1 mL 0.05 mol/L对硝基苯磷酸二钠溶液(用磷酸缓冲液配制),摇匀后加盖,放进36~37℃的培养箱中进行培养1个小时;②培养完成后取出加入0.5 mol/L的CaCl2 1 mL 及0.5 mol/L的NaOH 4 mL,摇匀;③而后在2500r/min下离心5min;取上层清夜于10ml 离心管4000r/min下再离心5min.④取上清液在410 nm处比色,并记录吸收光值。
⑶标准曲线的制作①取13支玻璃试管,按顺序编号,并按表2加入试剂。
表2对硝基苯酚标准曲线配制表离心管号0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、120.005?mol/mLpNP(mL)0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08 0.09 0.10 0.11 0.12H2O(mL)0.8、0.79、0.78、0.77、0.76、0.75、0.74、0.73、0.72 0.71 0.70 0.69 0.68pNP的含量(?mol)0、0.00005、0.0001、0.00015、0.0002、0.00025、0.0003、0.00035、0.0004 0.00045 0.0005 0.00055 0.0006摇匀0.2mol/LpH6.5磷酸缓冲液(mL) 40.5mol/L CaCl2(mL) 10.5mol/L NaOH(mL) 4②混匀后,转入10mL的离心管中,在2500r/min下离心5min,再在4000r/min下离心5min以0号作为对照,在A410nm波长下测光吸收值,并记录光吸收值A410。
抗洒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)定量测定
抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)定量测定一、简介和用途、适用范围大量的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)是由骨吸收的破骨细胞和有活力的巨噬细胞所释放的。
在血液循环中的TRACP有TRACP 5b 和TRACP 5a二种形式, TRACP 5b 来源于破骨细胞,而TRACP 5a来源于巨噬细胞。
由破骨细胞刚分泌到血液中的TRACP 5b是有活性的酶,但当TRACP 5b在血液循环中被清除之前已无活性,并被降解为碎片。
这样TRACP 5b不会因肝、肾功能受损而在血液中积蓄。
血清中TRACP 5b均来源于破骨细胞,此酶在昼夜的活性水平变化不明显,且不受进食的影响,故可在一天的任何时候都可以采集标本进行检验。
此试剂盒依据测定由破骨细胞释放的TRACP 5b的特异性测定方法。
它可以用于测定骨吸收亢进的病人,如原发性骨质疏松和肾性骨病,也可以预测骨折的危险性,并便于了解抗骨吸收治疗的效果。
在肿瘤病人中,当TRACP 5b 的活力增高提示肿瘤骨转移。
在体外,培养基中TRACP 5b的活力大小代表了破骨细胞数量的多少,因此应用于此试剂盒在进行人的破骨细胞培养时,可用于检测破骨细胞的数量。
二、试验原理测试孔内已包被抗TRACP单克隆抗体→加入校准液、质控品和样品→加入释放剂→有活性的TRACP 5b从结合蛋白质上离解→TRACP 5b与孔内包被的抗TRACP单克隆抗体结合→加入底物pNPP孵育→加入终止液终止反应→在酶标仪上检测结果。
此试验的优点1、所测定的TRACP 5b是由破骨细胞专一释放的。
2、此试验对TRACP 5a或其它磷酸酶没有干扰。
3、溶血不影响结果。
4、不受昼夜变化的影响。
5、不受肝脏、肾脏疾病的影响。
6、不受进食的影响。
7、酶标板容易拆卸,方便检测。
三、试剂盒(一)组成1、酶标板:96孔,已包被抗—TRACP抗体。
2、质控液:3×0.5ml。
3、校准液:3×0.5ml(3×1U/L,3×5U/L,3×10U/L)。
2020年高考生物 专题3.1 降低化学反应活化能的酶(精练)(含解析)
A.以本尼迪特试剂作指示剂,用淀粉酶探究温度对酶活性的影响
B.以本尼迪特试剂作指示剂,用淀粉酶探究 pH对酶活性的影响
C.用 H2O2酶探究温度对酶活性的影响
D.用 H2O2酶探究 pH 对酶活性的影响
【答案】D
第1节 降低化学反应活化能的酶
1。(2019·河北衡水中学调研)无机催化剂和酶都可以加快化学反应的速率,下列叙述正确的是( )
A。反应前后,无机催化剂和酶自身会发生变化
B。与无机催化剂不同,酶催化化学反应的机理是降低化学反应的活化能
C.与酶相比,无机催化剂降低活化能的效果更显著
D。通过加热也可以提高化学反应的速率,但原理与催化剂不同
【答案】D
【解析】无机催化剂和酶反应前后自身均不发生变化,A错误;无机催化剂和酶催化化学反应的机理相同,都是降低化学反应的活化能,B错误;与无机催化剂相比,酶降低活化能的效果更显著,C错误;加热提高化学反应速率的原理是提高反应物中高能量分子的数目,D正确。
2.(2019·湖南株洲一中期末)如图是温度影响某种酶活性的曲线图,据图分析正确的是( )
12.(2019年河南省八市重点高中联盟高三测评)用一种半透膜(允许单糖和水分子通过,二糖不能通过)将水槽从正中间隔开,均分为等体积的两部分。左侧放入100mL浓度为10%的蔗糖溶液,右侧放入100mL浓度为10%的麦芽糖溶液,然后两侧均加入10mL浓度为5%的麦芽糖酶溶液。将装置置于适宜条件下,一段吋间后达到平衡,在两侧分别取等量的部分样液,加入斐林试剂后水浴加热,观察颜色变化。下列有关分析正确的是
14.(2019年浙江省高考模拟)下列实验能证明蛋白酶具有水解蛋白质作用的最佳方案是
破骨细胞酸性磷酸酶染色后快速半定量分析
tal, Guangzhou 510515,Guangdong ,China Co ̄esponding author:YANG De—hong .E —mail:drmyang@ yahoo.con
【Abstract】 Objective To select a suitable solvent for dissolving osteoclast tartrate resistant acid phosphatase stai. ning(the TRAP in situ staining);to explore the optimal wavelengths of light absorption;and to compare with tartrate re—
sistant acid phosphatase detection kit method.thus evaluate the stability of fast seni—quantitative analysis.M ethods
抗酒石酸酸性磷酸酶染色方法的改良
临床与实验病理学杂志 JClinExpPathol 2019Jul;35(7)
·865·
①
②
图 1 大鼠股骨的破骨细胞,传统 TRAP染色:组织切片表面有颗粒 沉淀 图 2 大鼠股骨的破骨细胞,改良 TRAP染色:组织切片表 面干净整洁,无颗粒沉淀
色液(pH50~52)为亮红色,切片染色后背景出现颗粒沉 淀,且染色液不易冲洗,导致水洗时间延长,易脱片。当染色 液 pH值逐渐升高时,染液逐渐由亮红色转变为淡黄色,组 织上非特异性沉淀密集,背景干扰严重,染色效果不理想,脱 片严重。当 TRAP染色液 pH值调至 50以下时,随着 pH值 的下降染色液颜色逐渐变浅,且切片染色后非特异性沉淀逐 渐减少,当 pH46时,染色液呈淡红色,切片染色后无非特 异性沉淀产生,组织不脱片(表 2)。
37℃温箱中温育 3h,使盐酸副品红充分溶解,冷却至室温 经 022μm微孔滤膜制成盐酸副品红溶液,置于 4℃避光贮 存;称取亚硝酸钠 400mg,溶解于 10mL蒸馏水中,制成 4% 亚硝酸钠溶液(现用现配);临用前取 1mL新配置的亚硝酸 钠溶液,缓慢滴加到等量的盐酸副品红溶液中,边滴加边搅 拌,静置 1min后备用。(3)萘酚 ASBI磷酸盐溶液配制:称 取萘酚 ASBI磷酸盐 10mg,溶解于 05mL的 N,N二甲基 甲酰胺中,混匀备用。(4)TRAP染色液:将 9mL乙酸铵缓 冲液与 05mL六偶氮副品红溶液混合,微调 pH46(传统 方法 pH50~52),再加入 05mL萘酚 ASBI磷酸盐溶液 混匀,后加入酒石酸钾钠 141mg,充分溶解经 022μm微孔 滤膜配制成 TRAP染色液。 1.2.2 取材与固定 采用 CO2麻醉法处死大鼠,取其股骨, 剔除周边软组织,经 4%多聚甲醛固定,10%EDTA脱钙(28 天),梯度乙醇脱水,二甲苯透明,常规石蜡包埋等步骤后,制 成厚度为 5μm的组织切片。 1.2.3 TRAP染 色 取 大 鼠 骨 组 织 切 片,使 用 改 良 后 的 TRAP染色方法染色。切片于二甲苯Ⅰ脱蜡 8min,二甲苯Ⅱ 彻底脱蜡 8min,随后经 100% Ⅰ、100% Ⅱ、95% Ⅰ、95% Ⅱ、80%梯 度 乙 醇 中 逐 步 水 化 (各 5min),水 洗 3min,用 TRAP染色液(传统方法 pH50~52)37℃避光浸染 3h, 蒸馏水充分水洗,Harris苏木精复染 1min,蒸馏水充分水 洗,最后切片经梯度乙醇(80%、95% Ⅰ、95% Ⅱ、100% Ⅰ、 100% Ⅱ)逐步脱水,二甲苯透明,中性树胶封固,置于 45℃ 烤片机中烤片 1h,光镜下观察(表 1)。
2020届高三生物3-4月模拟试题汇编专题01 细胞的组成(解析版)
专题01 细胞的组成1.(2020·东北师大附中高三一模)下列关于组成细胞的糖类和脂质的说法正确的是()A.糖类和脂质均只由C、H、O三种元素组成B.糖类与脂质相连构成的糖脂位于细胞膜外侧C.一分子乳糖由一分子半乳糖和一分子果糖形成D.细胞主要通过氧化分解脂肪为生命活动供能【答案】B【解析】糖类和脂质共同的元素有C、H、O三种元素,磷脂中还有P元素,A错误;在细胞膜上由糖类与脂质相连可以形成糖脂,位于细胞膜的外侧,B正确;一分子乳糖由一分子半乳糖和一分子葡萄糖形成,C 错误;细胞主要通过氧化分解葡萄糖为生命活动供能,D错误。
故选B。
2.(2020·福建省莆田市高三教学质量检测)下列有关生物体内化合物的叙述,正确的是()A.葡萄糖、纤维素、肝糖原都是生物大分子B.ATP、DNA、RNA都含有C、H、O、N、P五种元素C.酶、抗体、激素都是由氨基酸脱水缩合而成的D.脂肪、磷脂、胆固醇都是动物细胞膜的组成成分【答案】B【解析】生物大分子是指由多个单体聚合而成的多聚体,一般以若干个相连的碳原子形成的碳链构成基本骨架。
大多数酶的本质为蛋白质,少部分酶的本质为RNA。
识记生物大分子的组成元素、基本单位和功能等,是本题的解题关键。
葡萄糖属于单糖,不是生物大分子,A错误;ATP、DNA和RNA中都含有五碳糖、含氮碱基和磷酸,因此组成元素均为C、H、O、N、P,B正确;部分酶的本质为RNA,激素不都是蛋白质,例如性激素的本质为固醇,不都是由氨基酸脱水缩合形成的,C错误;动物细胞膜的成分不包含脂肪,D错误;故选B。
3.(2020·广东省广州市育才中学高三零模)阐明生命现象的规律,必须建立在阐明生物大分子结构的基础上。
下列有关生物大分子核酸和蛋白质的叙述正确的是()A.血红蛋白的功能与其分子组成中的大量元素Fe有关B.胰岛素和抗体的差异与组成它们的氨基酸数目、种类和连接方式有关C.伞藻细胞主要的遗传物质是DNAD.变形虫细胞DNA与RNA的基本骨架组成成分不同【答案】D【解析】Fe是构成生物体的微量元素,A错误;组成不同蛋白质的氨基酸的连接方式相同,都是形成肽键,B错误;伞藻细胞的遗传物质是DNA,C错误;磷酸、脱氧核糖交替连接,构成DNA的基本骨架,磷酸和核糖交替连接,构成RNA的基本骨架,D正确。
南京建成生物工程研究所价目表
南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂:(注:**为新试剂盒)序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛(MDA)测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力(T-AOC)测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基(O )测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶(MPO)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶(CAT)测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢(H2O2)测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶(GSH—ST)测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶(GSH—PX)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽-还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基(-SH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶(MAO)测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮(NO)测试盒(化学法测NO2—)100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[(T-NOS、iNOS、cNOS)三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[总NOS(T-NOS)] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸(LD)测试盒(测全血)50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸(LD)测试盒(测血清、组织)50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶(LDH)测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒(组织及细胞膜需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒(组织及细胞膜不需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶(Cu-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢-钾A TP酶(H+-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase)200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒(可测总A TPase)100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶(CK)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶(CHE)测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶(PACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶(CaN)测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸(两种均可测)50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶(PK)测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶(HK)测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸(SA)测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒(TdT酶、稀释液、POD)10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒(TdT介导的原位末端切口平移双标记法)(全套)10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E(VE)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C(VC)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1(V B1)测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2(V B2)测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸(T—AA)测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸(Hyp)测试盒(可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等)50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶(5’-NT)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白(GHb)测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白(a)[LP(a)]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶(LPL)/肝脂酶(HL)】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白(CP)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒(溴甲酚绿法)100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒(双缩脲法)100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒(考马斯亮兰法)100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲(溶脲)支原体快速培养基(UU培养基)每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒(AsAb)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾(K)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C002 钠(Na)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C003 氯(Cl)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比色法(手工)28.00 建成C004 钙(Ca)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)40.00 建成30T 盒比色法(手工)30.00 建成C006 磷(Pi)测试盒(带标准)100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶(SGPT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶(SGOT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶(Υ—GT)测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮(BUN)测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰-肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶(AMS)测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(除蛋白)60.00 建成C011-2 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(不除蛋白)40.00 建成C021 血红蛋白稀释液(测试液)5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液(脱落细胞染色)套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液:(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。
初级临床医学检验技士专业知识60
[模拟] 初级临床医学检验技士专业知识60以下每一道考题下面有A、B、C、D、E五个备选答案。
请从中选择一个最佳答案。
第1题:用魏氏法测血沉,抗凝剂与血液的比例为A.1:1B.1:2C.1:4D.1:3E.1:9参考答案:C魏氏血沉法应严格控制采血量,使抗凝剂与血液比例为1:4。
第2题:瑞特染料包括A.伊红与亚甲蓝B.伊红与丙酮C.煌焦油蓝D.苏木素E.沙黄参考答案:A瑞特染料由酸性染料伊红(E-)和碱性染料亚甲蓝(M+)组成。
第3题:阴道清洁度检查指标中不包括A.杆菌B.球菌C.上皮细胞D.红细胞E.白细胞参考答案:D阴道分泌物加生理盐水涂片后高倍镜检查,根据所见的上皮细胞、白细胞、阴道杆菌、球菌的数量进行判断,并划分清洁度。
第4题:尿液中吞噬细胞来自血液中的A.红细胞B.嗜酸性粒细胞C.嗜碱性粒细胞D.单核细胞E.淋巴细胞参考答案:D根据尿液吞噬细胞的来源得知:尿中吞噬细胞包括来自中性粒细胞的小吞噬细胞和来自组织细胞的大吞噬细胞。
第5题:嗜酸性粒细胞减少见于A.支气管哮喘B.猩红热急性期C.慢性粒细胞白血病D.伤寒急性期E.寄生虫病参考答案:D嗜酸性粒细胞减少见于伤寒、副伤寒、大手术后、长期使用肾上腺皮质激素。
第6题:试带法测定尿蛋白,错误的是A.采用指示剂的蛋白质误差原理B.患者用奎宁丁、奎宁使干化学法出现假阴性结果C.尿液pH≤3.0时,会引起干化学出现假阴性结果D.主要对清蛋白敏感E.大量滴注青霉素可能对干化学产生假阴性参考答案:B患者服用奎宁、奎宁丁,引起尿液呈碱性(pH≥9),超过了试带的缓冲能力,使干化学出现假阳性结果。
第7题:正常粪便中水分约占A.1/4B.1/2C.3/4D.1/3E.1/5参考答案:C正常粪便中水分约占3/4,固体成分约占1/4。
第8题:脑脊液呈胶胨状多见于A.病毒性脑膜炎B.蛛网膜下腔梗阻C.脑出血D.结核性脑膜炎E.化脓性脑膜炎参考答案:B蛛网膜下腔梗阻时,远端的脑脊液蛋白质含量高达15g/L,脑脊液呈黄色胶胨状。
大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP))说明书活性
Stop Solution
3ml×1 bottle
6ml×1 bottle
2-8℃
wash solution
(20ml×20fold)
×1bottle
(20ml×30fold)
×1bottle
2-8℃
Specimen requirements
1.serum-coagulation at room temperature 10-20 mins,centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,If precipitation appeared,Centrifugal again.
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4.cell culture supernatant-detect secretory components,collect sue a sterile container,centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,detectthe composition of cells, Dilut cell suspension withPBS(PH7.2-7.4),Cell concentration reached 1 million / ml,repeated freeze-thaw cycles,damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-minat the speed of2000-3000 r.p.m. removesupernatant,Ifprecipitation appeared,Centrifugal again.
trap含量检测
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)酶联免疫分析(ELISA)最近更新时间:2011年3月8日提供商:上海研辉生物科技有限公司资料大小:0K文件类型:下载次数:0次资料类型:浏览次数:48次相关产品:详细介绍:小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)浓度。
样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
抗酒石酸酸性磷酸酶-主要是在多核的破骨细胞和单个核的破骨前体细胞中表达
抗酒石酸酸性磷酸酶-主要是在多核的破骨细胞和单个核的破骨前体细胞中表达,抗酒石酸酸性磷酸酶染色是检测破骨细胞的特异标志性酶抗酒石酸酸性磷酸酶-主要是在多核的破骨细胞和单个核的破骨前体细胞中表达,抗酒石酸酸性磷酸酶染色是检测破骨细胞的特异标志性酶。
学术术语来源---不同氧环境中破骨细胞特异性基因的表达文章亮点:1 文章的特点在于,用破骨前体细胞株体外经核因子κB受体活化因子配体和巨噬细胞集落刺激因子联合诱导为成熟破骨细胞,后分别置于常氧(体积分数20%O2)、组织氧(体积分数7%O2)、低氧(体积分数2%O2)环境中培养,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测不同氧环境下成熟破骨细胞数目的差异,定量PCR检测不同氧环境下在不同时间破骨细胞特异性基因表达的差异。
2 文章结果显示,低氧下形成的成熟破骨细胞数明显少于常氧和组织氧培养下的破骨细胞数,不同氧环境下特异性基因核因子κB受体活化因子表达没有明显改变,常氧和组织氧培养时肿瘤坏死因子受体相关因子6第5天表达最高,抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白激酶K表达随着氧浓度下降,表达时间延后,组织氧培养下可以保持在最高水平。
关键词:组织构建;骨组织构建;破骨细胞;抗酒石酸酸性磷酸酶;联合诱导;肿瘤坏死因子受体相关因子6,巨噬细胞集落刺激因子;氧浓度;核因子κB受体活化因子;组织蛋白酶K主题词:破骨细胞;骨吸收;骨质疏松;组织工程摘要背景:课题组以往研究证实,氧浓度过低乃至处于低氧时(体积分数2%O2),破骨前体细胞的增殖及破骨细胞的分化和功能都受到抑制,但体外培养的破骨细胞在不同氧环境下的基因表达未见有相关报道。
目的:实验拟观察不同氧环境下破骨细胞各特异性基因的表达规律,探寻氧环境改变影响破骨细胞分化的表达机制。
方法:将破骨前体细胞株经质量浓度均为10 μg/L的核因子κB受体活化因子配体和巨噬细胞集落刺激因子联合诱导成为成熟的破骨细胞,然后分别置于常氧、组织氧、低氧(体积分数20%,7%,2%)条件下培养,用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞形成的变化,并分别在培养第1-7天收集细胞,通过定量PCR方法检测核因子κB受体活化因子,肿瘤坏死因子受体相关因子6,抗酒石酸酸性磷酸酶,组织蛋白酶K基因mRNA的表达。
人抗酒石酸酸性磷酸酶
人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)水平。
用纯化的人TRAP抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被抗原的微孔中依次加入TRAP抗体,再与HRP标记的酒石酸酸性磷酸酶抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b测定在老年人中的临床应用
重庆 医 学 2008年 1月 第 37卷 第 2期
159
· 临 床 研 究 ·
血 清 抗酒 石 酸 酸 性磷 酸 酶 5b测 定在 老 年 人 中的临 床应 用
肖 恩 ,司 良毅 △,孟 萍 (第三 军 医大 学西 南 医院老年 病科 ,重 庆 400038)
Determination of serum tartrate-resistant acid phosphatase 5b and its application in aged people XIAO En,SI Liang—Yi ,M ENG Ping
(Department of Gerontology,Southwest Hospital,Third M ilitary M edical University,Chongqing 400038,China) Abstract:Objective To study the value of serum tartrate-resistant acid phosphatase 5b (sTRACP5b)in the metabolic diseases of bone.M ethods Using the Bone TRACP5 b reagent box of the British IDC Company,sTRQCP5 b was measured in 79 cases of ,关 注 老 年 人 身 心 健 康 及 生 存 质量 已成 为 世 界 卫 生 组 织 关 注 的焦 点 ,尤 其 是 骨 质 疏 松 症 已成 为 临 床 研 究 热 点 。该 病 的 发 生 多 见 于 老 年 人 及 绝 经 后 妇 女 ,但 一 些 疾 病 如 糖 尿 病 、肿 瘤 等 也 可 以继 发 导致 骨 质 疏 松 症 。正 常 人 骨 骼 代 谢 是 通 过 骨 转 换 过 程 进 行 ,在 骨 转 换 过 程 中 ,破 骨 细 胞 吸 收 骨 质 形 成 的 吸 收 陷 窝 由 成 骨 细 胞 合 成 分 泌 类 骨 质 ,并 矿 化 形 成 新 的 骨 基 质 予 以 填 补 ,在 全 身 激 素 和局 部 因 子 的 调 节 下 ,骨 吸 收 和骨 形 成 的功 能 保 持 动 态 平 衡 。 骨 转 化 功 能 过 高 或 过 低 均可 导致 骨质 疏 松 疾 病 的发 生 。 国 内 外 研 究 表 明 :血 清 抗 酒 石 酸酸 性 磷 酸 酶 5h(TRAcP5b)作 为 第 2代 骨 吸 收 标 记 物 ,是 一 个 具 有 特 异性 和 高 敏感 度 的 骨 吸 收 指 标 _】 ]。 因 此 ,本 组 选 择 住 院老 年 人 群 进 行 血 清 TRACP5b水 平 测 定 ,以期 发 现 哪 些 疾 病 能 够 引起 骨 吸收 增 加 ,从 而 进 行 临 床 干 预 治 疗 ,预 防 骨 质 疏 松 症 的发 生 。 1 对 象 与 方 法 1.1 对 象 1.1.1 正 常 对 照 组 老 年 健 康 体 检 者 6O例 ,男 、女 各 3O例 , 女 性 均 已绝 经 ,绝 经 年 限 8年 以上 。肝 肾功 能 正 常 。排 除 以 下 情 况 :(1)有腰 椎 或 髋 部 骨折 史 ;(2)有 影 响 骨 代 谢 的 疾 病 ,包 括 甲状 腺及 甲状 旁腺 疾病 ,糖 尿 病 、柯 兴 综 合 征 等 代 谢 内 分 泌 系
2023年检验类之临床医学检验技术(师)模拟考试试卷B卷含答案
2023年检验类之临床医学检验技术(师)模拟考试试卷B卷含答案单选题(共50题)1、监测普通肝素治疗时首选的指标是A.BTB.FDPC.APTTD.凝血酶-抗凝血酶Ⅲ复合物E.PT【答案】 C2、中性粒细胞空泡变性是A.由脂蛋白变性而来B.由胞质内残留的RNA变性而来C.脂肪变性D.核碎裂或溶解后的残余物E.异常溶酶体【答案】 C3、医院感染最重要的传染源是()。
A.探视者B.病人C.陪同人员D.医院工作人员E.被患者接触过的物品【答案】 B4、不属于血糖正常性的糖尿的疾病是()A.家族性肾性糖尿B.甲状腺功能亢进C.慢性肾小球肾炎D.肾病综合征E.妊娠后期【答案】 B5、百日咳病原体A.羊布鲁菌B.百日咳鲍特菌C.杜克嗜血杆菌D.流感嗜血杆菌E.葡萄球菌属【答案】 B6、抗酒石酸酸性磷酸酶染色阳性的是A.慢性淋巴细胞白血病B.淋巴肉瘤C.多毛细胞白血病D.尼曼-匹克病【答案】 C7、使用时要注意防止Ⅰ型超敏反应的免疫制剂是A.丙种球蛋白B.胎盘球蛋白C.抗毒素D.白细胞介素E.干扰素【答案】 C8、与人体内酸碱平衡有密切关系的是()A.HCOB.KC.NaD.CaE.Cl【答案】 A9、现已明确传染性单核细胞增多症是下列哪种病毒引起的A.肝炎病毒B.疱疹病毒C.流感病毒D.EB病毒【答案】 D10、似蛔线虫卵A.椭圆形,个体大,壳薄而均匀,有盖,内含卵细胞及卵黄细胞B.灯泡形,个体很小,有盖,内含毛蚴C.卵圆形,无盖,一侧有小棘,内含毛蚴D.椭圆形,壳厚而均匀,壳外有凹凸不平蛋白质膜,内含卵细胞E.圆球形,外有较厚具放射状条纹的胚膜,内含六钩蚴【答案】 D11、止凝血试验中常用的抗凝剂是A.EDTA盐B.枸橼酸钠C.草酸钠D.双草酸盐E.肝素【答案】 B12、肠出血型大肠埃希菌的英文简称是A.ESBLsB.MRSAC.ETECD.EHECE.VRE【答案】 D13、血清淀粉酶和脂肪酶于发病后明显升高,最常见于哪种疾病?()A.急性胰腺炎B.腮腺炎C.急性胆囊炎D.注射吗啡后8小时E.消化性溃疡穿孔【答案】 A14、氰化高铁血红蛋白的最大吸收峰是A.560nmB.540nmC.520nmD.510nmE.450nm【答案】 B15、阴道分泌物检查,白带外观呈豆腐渣样,提示为A.老年性阴道炎B.滴虫性阴道炎C.念珠菌性阴道炎D.宫颈息肉E.子宫内膜炎【答案】 C16、内毒素的中心成分是A.特异性多糖B.脂多糖C.核心多糖D.类脂质AE.脂蛋白【答案】 D17、治疗药物浓度监测的标本采集时间一般选择在A.任一次用药后1个半衰期时B.血药浓度达稳态浓度后C.药物分布相D.药物消除相E.随机取样【答案】 B18、患者,女,50岁,有慢性乙肝病史30年, HBsAg(+),HBeAg(+),HBsAb(+)。
基于STING
广东药科大学学报Journal of Guangdong Pharmaceutical University Mar.2024,40(2)基于STING/NF-κB信号通路探讨茯苓酸对去卵巢小鼠骨质疏松的作用黄成硕1,陈驹2,吴晓静3,郑锦畅1,梁振1,郭伟雄1,陈继铭1(1.广东医科大学附属医院骨科中心,广东湛江524001;2.广东医科大学附属医院药学部,广东湛江524001;3.广东医科大学附属医院培训部,广东湛江524001)摘要:目的评价茯苓酸通过调控STING/NF-κB信号通路对去卵巢小鼠骨质疏松的影响。
方法取40只SPF级雌,10µg/kg)和茯苓酸组(FL,5mg/kg),性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(OVX)、17β-雌二醇组(E2通过切除双侧卵巢建立小鼠骨质疏松模型。
8周实验结束后分别检测血清碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)水平,观察股骨远端形态学和胫骨(皮质骨)骨形成动态变化,测定右侧股骨的生物力学和STING/NF-κB通路关键蛋白表达水平。
结果与OVX组比较,E组和FL组小鼠血清StrACP和ALP水平明显降低(P<0.01),2股骨远端骨小梁面积百分数明显增加(P<0.01),皮质骨双荧光间距明显减少(P<0.01),股骨最大载荷和断裂载荷明显升高(P<0.01),股骨STING和p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。
结论茯苓酸通过调控STING/NF-κB信号通路抑制骨吸收和促进骨形成,从而有效减少去卵巢小鼠骨丢失。
关键词:茯苓酸;小鼠;卵巢摘除;骨质疏松;17β-雌二醇中图分类号:R285.5文献标识码:A文章编号:2096-3653(2024)02-0119-05DOI:10.16809/ki.2096-3653.2023122001Effect of pachymoic acid on osteoporosis in ovariectomized mice based on STING/NF-κB signaling pathwayHUANG Chengshuo1,CHEN Ju2,WU Xiaojing3,ZHENG Jinchang1,LIANG Zhen1,GUO Weixiong1,CHEN Jiming1*(1.Orthopaedic Center,Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang524001,China;2.Department of Pharmacy,Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang524001,China;3.Training department,Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang524001,China)*Corresponding author Email:**************Abstract:Objective To evaluate the effect of pachymoic acid on osteoporosis in ovariectomized mice by regulatingSTINGNF-κB signaling pathway.Methods Forty SPF female C57BL/6mice were divided into sham operation,10µg/kg)and pachymoic acid group(FL,5mg/kg),and group(Sham),model group(OVX),17β-estradiol group(E2the osteoporosis model of mice was established by bilateral ovariectomy.After8weeks,the levels of serum alkalinephosphatase(ALP)and tartrate-resistant acid phosphatase(StrACP)were detected,the morphology of distal femurand the dynamic changes of tibia(cortical bone)bone formation were observed,and the biomechanics of the rightfemur and the expression levels of key proteins in STING/NF-κB pathway were determined.Results Compared withgroup and FL group were significantly lowered(P<0.01),the OVX group,the levels of serum StrACP and ALP in E2area percentage of trabecular bone in distal femur was increased(P<0.01),and the double-fluorescence distancebetween cortical bones was decreased(P<0.01).The maximum load and fracture load of femur were significantlyelevated(P<0.01),and the expression levels of STING and p-NF-κB p65/NF-κB p65protein in femur weresignificantly increased(P<0.01).Conclusion Pachymoic acid can inhibit bone resorption and promote boneformation by regulating STING/NF-κB signaling pathway,thereby effectively reducing bone loss in ovariectomized mice.Key words:pachymoic acid;mice;ovariectomization;osteoporosis;17β-estradiol收稿日期:2023-12-20基金项目:广东省医学科学技术研究基金项目(B2021148);2021年度广东省科技专项资金(“大专项+任务清单”)竞争性分配项目(2021A05234);湛江市非资助课题(2020B01275)作者简介:黄成硕(1986-),男,副主任医师,主要从事骨科疾病诊治,Email:*****************通信作者:陈继铭(1980-),男,主任医师,主要从事骨科疾病诊治,Email:**************。
酸性磷酸酶检测试剂盒(PNP比色法)
酸性磷酸酶检测试剂盒(PNP比色法)酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(PNP 比色法)简介:酸性磷酸酶(acid phosphatase ,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。
溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内,各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜pH 为4.5~5.5。
酸性磷酸酶是一个蛋白家族,哺乳动物中其分子量从18kD 到100kD 不等,该酶分为两类,一类为酒石酸盐敏感型,一类为氟离子敏感型。
溶酶体中的酸性磷酸酶为酒石酸盐敏感型,而红细胞和巨噬细胞中的酸性磷酸酶为氟离子敏感型。
Leagene 酸性磷酸酶(ACP)检测试剂盒(PNP 比色法)(Acid Phosphatase Colorimetric Assay Kit)检测原理是利用Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶的作用下生成p -nitrophenol 。
在碱性条件下p -nitrophenol 呈黄色,产物黄色越深,说明酸性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过分光光度比色法(分光光度计)测定处吸光度,据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的酸性磷酸酯酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:自备材料:1、比色杯2、水浴锅或恒温箱3、分光光度计操作步骤(仅供参考):1、准备样品:①血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,编号名称TE0034 60T Storage试剂(A): ACP Assay buffer 50ml 4℃ 试剂(B): pNPP2支 -20℃ 避光试剂(C): p -nitrophenol(10mM) 0.2ml-20℃ 避光使用说明书1份尿液通常也可以直接用于测定,冻存,用于酸性磷酸酶的检测。
抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒
西安赫特生物科技有限公司 XAHT-01-014-019-2015抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒抗酒石酸酸性磷酸酶染色试剂盒该试剂盒可用于血液、骨髓或组织来源的白细胞的酸性磷酸酶染色。
抗酒石酸酸性磷酸酶是一种糖基化的含金属蛋白酶,在破骨细胞(osteoclast)和破软骨细胞(chondroclast)中高表达。
在活化的巨噬细胞和神经元中也有表达。
抗酒石酸酸性磷酸酶在细胞信号转导、细胞增殖和分化等方面起重要作用,也和活性氧产生和铁离子转运等有关。
抗酒石酸酸性磷酸酶可以被破骨细胞释放到血液中,几乎被认为是是机体破骨活性的唯一血液指标。
使用naphthol AS-BI phosphate及fast garnet GBC salt进行染色。
在酸性环境下,可快速偶联,形成不溶解的染料沉淀。
试剂准备1. Fast Garnet GBC Base溶液的配制:使用前,将1管Fast Garnet GBC Base溶于2mL FastGarnet GBC Base缓冲液中,新鲜配置。
2. 固定液:将25mL柠檬酸溶液,65mL丙酮及8mL 37%甲醛混合。
置于玻璃瓶中,盖紧盖子。
保存于2–8°C,可稳定2个月。
如果明显挥发,应丢弃。
使用说明1. 去离子水37°C预热备用;2. 固定液放置室温至18~26°C,将载片浸泡于固定液中,固定30sec。
去离子水冲洗,不要让载片干燥;也可使用4%多聚甲醛固定;3. 准备两支检测试管,每支中均加入0.5mL Fast Garnet GBC Base溶液与0.5mL亚硝酸钠溶液,将其混匀30sec,静置2min;4. 准备两个100mL烧杯,分别标记为A和B,按照下表将各成分混合,尽量避光操作;试剂烧杯A 烧杯B(对照)45mL预热至37°C的去离子水 45mL1.0mL从第三步得到的混合液 1.0mL0.5mLNaphthol AS-Bl Phosphate溶液 0.5mL2.0mL 乙酸缓冲液 2.0mL1.0mL 酒石酸盐溶液 —5. 准备两个玻片染缸,分别标记为A和B,分别将烧杯的溶液倒入相应的染缸中。
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抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒(PNP比色法)简介:
酸酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。
溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内,各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶适宜pH。
存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistnt acid phosphatase,TRAP)均在细胞滤泡中,并不是释放入血液,血液中的TRAP绝大多数来源于破骨细胞,因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功能状态,几乎被认为是是机体破骨活性的唯一血液指标。
TRAP一种糖基化的含金属蛋白酶,在破骨细胞(osteoclast)和破软骨细胞(chondroclast)中高表达,在活化的巨噬细胞和神经元中也有表达。
Leagene抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)检测试剂盒(PNP比色法)(Tartrate Resistnt Acid Phosphatase Colorimetric Assay Kit)检测原理是利用Para-nitrophenyl phosphate(pNPP)为一种常用的磷酸酶显色底物,在酸性条件下,可在酸性磷酸酶的作用下生成p-nitrophenol。
在碱性条件下p-nitrophenol呈黄色,产物黄色越深,说明酸性磷酸酶活性越高,反之则酶活性越低,通过分光光度计测定吸光度,据此通过比色分析就可以计算出酸性磷酸酶活性水平。
在适量的酒石酸存在的情况下进行酸性磷酸酶的活性检测,检测得到的酸性磷酸酶的活性就是抗酒石酸酸性磷酸酶的活性。
该试剂盒可用于检测细胞或组织的裂解液或匀浆液、血浆、血清、尿液等样品中内源性的抗酒石酸酸性磷酸酯酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
自备材料:
1、比色杯
2、水浴锅或恒温箱
3、分光光度计编号
名称TE0045
60T
Storage
试剂(A): ACP Assay buffer50ml 4℃
试剂(B): pNPP 2支-20℃避光试剂(C): T artrate Solution 2ml 4℃
试剂(D): p-nitrophenol(10mM) 0.2ml -20℃避光试剂(E): Stopping Solution 80ml RT
使用说明书1份
操作步骤(仅供参考):
1、配制检测工作液:
①配制显色工作液:取出1支pNPP,恢复至室温后溶解于ACP Assay buffer,混匀,冰上预冷备用。
新配制的显色工作液应及时用完。
②配制标准品工作液:取出p-nitrophenol(10mM) 恢复至室温后,取溶解于μl ACP Assay buffer,使浓度达到一定程度。
2、准备样品:
①血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,尿液通常也可以直接用于测定,冻存,用于抗酒石酸酸性磷酸酶的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如果有必要可用PBS或生理盐水进行适当匀浆,一般细胞数量在106以上,组织应在100mg以上,离心取上清,冻存,用于抗酒石酸酸性磷酸酶的检测。
③植物样品:取适量的植物组织加入少量生理盐水或PBS,充分捣碎或研磨,静置,用纱布或滤纸过滤,离心,留取上清液并测量体积,冻存,用于抗酒石酸酸性磷酸酶的检测。
④高活性样品:如果样品中含有较高活性的抗酒石酸酸性磷酸酶,可以使用ACP Assay buffe、PBS或生理盐水稀释后再行检测。
3、加样:按照下表设置空白对照、标准品、待测样品,溶液应按照顺序依次加入,并注意
避免产生气泡。
标准品的用量分别为0.03、0.06、0.12、0.18、0.24、0.3ml,待测样品直接加0.3ml。
如果样品中的酸性磷酸酯酶活性过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置平行管。
空白对照管标准品管待测样品管
ACP Assay buffer 0.3ml (0.3-x)ml (0.3-y)ml
显色工作液0.3ml 0.3ml 0.3ml
Tartrate Solution 30μl 30μl 30μl
待测样品——yml
标准品工作液—xml —
4、轻轻混匀,孵育。
5、每孔加入Stopping Solution终止反应。
6、酶标仪检测处吸光值,如果无法检测,亦可检测范围内吸光值,一般应数小时内检测完
毕。
计算:
酸性磷酸酶活性单位的定义:pH4.8 37℃条件下,每分钟水解para-nitrophenyl
phosphate显色底物产生1微摩尔p-nitrophenol所需的酸性磷酸酶的量定义为一个酶活力单位。
根据酶活性定义,计算出样品中的抗酒石酸酸性磷酸酶活性。
注意事项:
1、待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
2、建议每次测定时都做标准曲线,以使标准更准确,另外标准品需避免反复冻融。
3、如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但应考虑根据比色杯的最小检
测体积,尽量采用小体积的比色杯。
4、所测样本的值高于标准曲线的上限,应用ACP Assay buffer稀释样品后重新测定。
5、一支显色工作液配制后需当日使用完毕,因此请注意适当多准备一些样品一起检测。
6、p-nitrophenol溶液对人体有害,反应终止液有腐蚀性,请小心操作。
7、如果希望进行酶活性的绝对定量,进行酶反应时应精确计时,此时推荐采用孵育30min
或更长时间,以减小操作过程中的时间误差。
8、待测样品中抗酒石酸酸性磷酸酶活性较低时,可适当延长孵育时间至30min。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
相关:
编号名称
CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
DC0032 Masson三色染色液
DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)
NR0001 DEPC处理水(0.1%)
PS0013 RIPA裂解液(强)
TE0002 碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒(PNP微板法)。