颜色鉴定类实验

奶粉被视为婴儿的理想食品, 请简述奶粉内含有蛋白 质的检验方法 。市场上出售的少数劣质奶粉中掺有 淀粉，请问用什么方法鉴别。
用双缩脲试剂检验，若溶液变为红紫色，则说明有蛋 白质存在；若不变色，说明没有蛋白质存在 . 用碘液检验，如变蓝，则说明有淀粉存在，如不 变蓝则说明无淀粉存在.
二、叶绿体色素的提取和分离
（２）脂肪的鉴定
操 作 方 法 低倍镜下找到花生 子叶薄片的最薄 处，可看到细胞 中有染成橘黄色 或红色圆形小颗 粒。
注 意 解 释 问 题 装片不 时间一长，油滴 宜久 会溶解在乙醇中。 放。
（３）蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 制备组织样液。 （浸泡、去皮 研磨、过滤。）
解 释 黄豆浸泡1至2天，容易 研磨成浆，也可购新 鲜豆浆以节约实验时 间。 鉴定。加样液约 A液和B液也 先加NaOH溶液，为 2ml于试管中， 要分开配制， Cu2+与蛋白质反应提 加入双缩脲试 储存。鉴定 供一个碱性的环境。 剂A，摇匀； 时先加A液 A、B液混装或同时加 再加入双缩脲 后加B液。 入，会导致Cu2+变成 试剂B液3~4滴， Cu ( OH ) 2沉淀， 摇匀，溶液变 CuSO4溶液 而失效。 紫色。 不能多加。 否则CuSO4的蓝色会 遮盖反应的真实颜色
4、实验试剂
斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和 乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）. 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液.
双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和 B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）. 体积分数为50%的酒精溶液，碘液，蒸馏水。
(2)下列生物材料中，可用于还原糖鉴定的是( B ) A.柑橘 B.苹果 C.新鲜肝脏 D.甘蔗
1．鉴定可溶性还原糖所用的试剂为 斐林试剂 ， 所出现的颜色为 砖红色 ，该试剂分为甲液和乙 液，使用时必须 现配现用 ， 混合使用 。 其原因是 该试剂不稳定，易生成蓝色沉淀 。 2．在蛋白质的鉴定实验中，必须先加双缩脲试 剂A（ 0.1g/mLNaOH 溶液），再加双缩脲试剂 B（0.01g/mLCuSO4 溶液），这样实验才能成功， 原因是 在碱性条件下,蛋白质与铜离子发生紫色 。 反应,否则产生蓝色Cu(OH)2沉淀,对实验 现象有遮蔽作用
（２）脂肪的鉴定
操 作 方 法 注 意 问 解 释 题 用吸水纸吸去薄片周围 酒精用于洗去浮色， 染液，用50%酒精洗 不洗去浮色，会影 去浮色，吸去酒精。 响对橘黄色脂肪滴 的观察。同时，酒 精是脂溶性溶剂， 可将花生细胞中的 脂肪颗粒溶解成油 滴。 用吸水纸吸去薄片周围 滴上清水可防止盖盖 酒精，滴上1~2滴蒸 玻片时产生气泡。 馏水，盖上盖玻片。
6、方法步骤： （１）可溶性糖的鉴定
操作方法 4. 试管放在盛 有50-65℃温水 的大烧杯中(水 浴加热)，加热 约2分钟，观察 到溶液颜色： 浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉 淀）
注意问题 解释 最好用试管夹 防止试管内的溶 夹住试管上部，液冲出试管，造 使试管底部不 成烫伤； 触及烧杯底部，缩短实验时间。 试管口不朝向 实验者。
1．实验原理： （1）叶绿体中的色素是有机物，不溶于水，易溶 于丙酮、乙醇等有机溶剂中，所以用丙酮、乙醇 等能提取色素。
（2）层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿 体色中素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的 随层析液在滤纸上扩散得快，溶解度低的随层析 液在滤纸上扩散得慢。所以用层析法来分离四种 色素。
（２）脂肪的鉴定
操 作 方 法 注 意 问 解 释 题 花生种子浸泡、去皮、 干种子要浸 因为浸泡时间短， 切下一些子叶薄片， 泡3~4小 不易切片，浸泡 将薄片放在载玻片 时，新花 时间过长，组织 的水滴中，用吸水 生的浸泡 较软，切下的薄 纸吸去装片中的水。 时间可缩 片不易成形。切 短。 片要尽可能薄些， 便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴 染色时间不 苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染 宜过长。 液，染色1分钟。
胡萝卜素（橙黄色）
叶黄素（黄色） 叶绿素a（蓝绿色） 叶绿素b（黄绿色）
胡萝卜素 叶黄素
类胡萝卜素 （占总量的1/4） 叶绿素 （占总量的3/4）
叶绿素a 叶绿素b
实验中几种化学试剂的作用： 1、无水乙醇用于提取绿叶中的色素。 2、层析液用于分离绿叶中的色素。 3、二氧化硅可增加杵棒与研钵间的摩擦力， 破坏细胞结构，使研磨充分。 4、碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
(3)．滤纸上的色素线一定不能没过层析液，否则： A、色素扩散会不均匀 B B、色素会溶解到层析液中 C、色素扩散速度变慢 D、色素带彼此重叠 (4).通过纸层析法分离叶绿体色素，结果在滤纸条上 出现4条色素带，从上而下依次为 A A．胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B．胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C．叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素 D．叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
2．实验目的： （1）尝试用过滤方法提取叶绿体中的色素和 用纸层析法分离提取到的色素。 （2）分析实验结果，探究叶绿体中有几种色 素，以及各自所呈现的颜色。
3、实验材料： 幼嫩、鲜绿的菠菜叶
来自百度文库
四、 实验步骤
1. 提取叶绿素
研磨法 材料剪碎 加入有机溶剂 研磨、匀浆 过滤 提取液 研磨法提取 光合色素
6、方法步骤： （１）可溶性糖的鉴定
操作方法 1. 制备组织样 液。（去皮、 切块、研磨、 过滤）
注意问题 苹果或梨组织 液必须临时制 备
解释 因苹果多酚氧化 酶含量高，组织 液很易被氧化成 褐色，将产生的 颜色掩盖。
2. 取1支试管， 向试管内注入 2mL组织样液。
6、方法步骤： （１）可溶性糖的鉴定
6、练习与巩固
(1).下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验描述 中，不属于实验要求的是 C A.提取高等植物叶绿体中的色素 B. 用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D. 验证叶绿体中所含色素的种类 (2).叶绿体色素的纸层析结果显示．叶绿素b位于层 析滤纸的最下端，原因是 C A.分子量最小 B.分子量最大 C.在层祈液中的溶解度最小 D.在层析液中的溶解度最大
4、实验步骤： （1）提取色素 加SiO2为了研磨得更充分。加CaCO3防止研磨时叶绿素 受到破坏。因为叶绿素含镁，可被细胞液中的有机酸产生 的氢代替，形成去镁叶绿素，CaCO3可中和液泡破坏释放 的有机酸，防止叶绿体被破坏。 快速研磨：减少研磨过程叶绿素的分解，减少有毒性 的丙酮挥发。 色素颜色：胡萝卜素（橙黄色，叶黄素（黄色，叶绿 素a（蓝绿色），叶绿素b（黄绿色） （2）收集滤液 （3）制备滤纸条 一端剪去二个角 （4）划滤液细线 滤液细线越细、越齐越好。防止色素带之间部分重 叠。重复三次。增加色素在滤纸上的附着量，实验结果 更明显。 （5）纸层析法分离色素 （6）观察实验结果
(1) 1. 鉴定还原糖、脂肪、蛋白质所用的试剂和所出 现的颜色分别是（ D ） A．斐林试剂（砖红色）、双缩脲试剂（紫色）、 苏丹Ⅲ染液（橘黄色） B．双缩脲试剂（紫色）、斐林试剂（砖红色）、 苏丹Ⅲ染液（橘黄色） C．苏丹Ⅲ染液（橘黄色）、双缩脲试剂（紫色）、 斐林试剂（砖红色） D．斐林试剂（砖红色）、苏丹Ⅲ染液（橘黄色）、 双缩脲试剂（紫色）
实验中注意的事项： 1、选材：应选取鲜嫩、颜色深绿的叶片，以保 证含有较多的色素。 2、提取色素：研磨要迅速、充分，且加入各物 质的量要成比例，以保证提取较多的色素和色 素浓度适宜。 3、画滤液细线：用力要均匀，快慢要适中。滤 液细线要细、直，且干燥后重复画一两次，使 滤液细线既有较多的色素，又使各色素扩散的 起点相同。 4、色素分离：滤液细线不要触及层析液，否则 滤液细线中的色素分子将溶解到层析液中，滤 纸条上得不到色素
鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，先向试管内注入 2mL黄豆组织样液；然后向试管内加入2mL双缩脲试剂 A，摇匀；再向试管内加入3～4滴双缩脲试剂B，摇匀。 为什么只加3～4滴双缩脲试剂B而不能过量？ 加入过量的双缩脲试剂B, CuSO4有碱性溶液中生成大 量蓝色沉淀会遮蔽所产生的紫色
鉴定蛋清组织中存在蛋白质时，为何充分稀释？ 如蛋清液稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在 试管的内壁,使试管不易刷洗干净 做鉴定糖和蛋白质的实验时，在鉴定之前，可以 留出一部分样液，以做 对照 之用，这样会增强说 服力。
５、讨论: (1)选取富含还原糖的生物材料时,能用甘蔗或者橘子吗? 为什么? 答:不行.橘子本身富含色素,会掩盖颜色反应的结果;而 甘蔗不含还原糖,蔗糖不是还原糖. (2)斐林试剂和双缩脲试剂有哪些区别？ a溶液浓度不同:斐林试剂中CuSO4溶液为0.05g/ mL, 双缩脲试剂中CuSO4溶液为0.01g/ mL b使用原理不同:斐林试剂实质是新制Cu(OH)2溶液, 双缩脲试剂实质是碱性条件下的Cu2+ c使用方法不同: 斐林试剂使用时,先把NaOH溶液和 CuSO4溶液混合,然后立即使用;双缩脲试剂是先加NaOH 溶液,然后再加入3至4滴CuSO4溶液
3．植物组织中部分有机物成分鉴定实验： （1）为鉴定组织中有可溶性还原糖的存在，常在梨果 肉的薄片上滴加 试剂，然后加热至呈 斐林试剂 现 砖红 色为止。 （2）为鉴定组织内有脂肪的存在，常用 花生子叶 的薄 片，经压片法将其压碎后，滴加2滴 苏丹Ⅲ染液 试剂， 3～5分钟后，进行显微镜检查，可见到在细胞内有染成 橘红色的脂肪滴。 （3）做鉴定细胞内脂肪实验时，实验材料滴加试剂后 的时间不能过长，否则将不能观察到脂肪滴，其原因 是 染液中的酒精溶解组织中的脂肪,使染色模糊不清,影 。 响实验结果 (4)若用物理方法鉴定脂肪的存在，请叙述鉴定方 法 烘烤花生种子后,把子叶放在白纸上用手指挤压,白 。 纸上出现透明的油渍,说明子叶中含有脂肪
（３）蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀 如果稀释不够，在实 释。 验中蛋清粘在试管 壁，与双缩脲试剂反 应后会粘固在试管内 壁上，使反应不容易 彻底，并且试管也不 易洗干净。 附：淀粉的检测和 碘液不要滴 以免影响颜色观察 观察用试管取2ml 太多 待测组织样液， 向试管内滴加2滴 碘液，观察颜色 变化。
操作方法 3. 向试管 内注入 1mL新制 的斐林试 剂，振荡。
注意问题 解释 应将组成斐林试 斐林试剂很不稳定， 剂的甲液、乙液 甲、乙液混合保存 分别配制、储存，时，生成的Cu 使用前才将甲、 ( OH ) 2在70~90℃ 乙液等量混匀成 下分解成黑色CuO 斐林试剂；切勿 和水； 将甲液、乙液分 甲、乙液分别加入 别加入苹果组织 时可能会与组织样 样液中进行检测。液发生反应， 无Cu ( OH ) 2生成。
一、检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
1、实验原理：
（1）斐林试剂鉴定还原糖时，溶液的颜色变化为：砖红色(沉 淀)。斐林试剂只能检验生物组织中还原糖存在与否，而不能 鉴定非还原性糖。葡萄糖、麦芽糖、果糖是还原糖 （2）双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1 g／mL的氢氧化钠溶 液和质量浓度为0.01 g／mL的硫酸铜溶液。蛋白质可与双缩脲 试剂产生紫色反应。
5、讨论题：
（1）滤纸条上的滤液细线，为什么不能触及层析液？ 答：滤纸条上的滤液细线如触及层析液，滤纸上的叶绿 体色素就会溶解在层析液中，实验就会失败。 （2）提取和分离叶绿体色素的关键是什么？ 答：提取叶绿体色素的关键是：①叶片要新鲜、浓绿； ②研磨要迅速、充分；③滤液收集后，要及时用棉塞 将试管口塞紧，以免滤液挥发。 分离叶绿体色素的关键是：一是滤液细线要细且直， 而且要重复划几次；二是层析液不能没及滤液线。
（3）苏丹Ⅲ染液遇脂肪的颜色反应为橘黄色，苏丹Ⅳ染液遇 脂肪的颜色反应为红色。
2、实验目的： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 3、实验选材： （1）做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色 为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较 浅，易于观察。） （2）做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花 生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时（也可用蓖 麻种子）。 （3）做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或 鸡蛋清。