药物分析生物碱类药物的分析
生物碱类药物分析_真题-无答案
生物碱类药物分析（总分40,考试时间90分钟）一、A型题题干在前，选项在后。
有A、B、C、D、E五个备选答案其中只有一个为最佳答案，其余选项为干扰答案。
考生须在5个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。
1.口引噪类生物碱的特征反应A.发烟硝酸反应，显黄色B.药物酸性水溶液加稍过量漠水呈绿色的特征反应C.与香草醛等缩合反应显色D.钥硫酸试液显紫色-蓝色.棕紫色E.双缩服反应2.常用的生物碱薄层色谱显色剂是A.硅钙酸B.磷钙酸C.改良碘化秘钾D.氢氧化铉E.雷氏铉盐3.咖啡因，茶碱等黄噤吟生物碱的特征反应A.双缩腿反应B.紫缩酸反应C.与香草醛等缩合反应D.钥硫酸试液显紫色-蓝色.棕紫色E.硝化显色反应4.生物碱中具有两性的是A.奎宁B.小案碱C.阿托品D.麻黄碱E.吗啡5.吗啡生物碱的特征反应A.发烟硝酸反应，显黄色B.C+DC.甲醛硫酸试液显紫堇色D.钥硫酸试液显紫色■蓝色■棕紫色E.双缩服反应6.非水碱量法测定药物含量时，一般以消耗O.lmol/L高氯酸溶液为A.5mlB.8mlC.15mlD.30mlE.20ml7.阿托品，山莫若碱等托烷类生物碱，特征反应A.发烟硝酸反应，呈黄色B.药物酸性水溶液加稍过量漠呈绿色C.甲醛硫酸试液显紫堇色D.钥硫酸试液显紫色■蓝色■棕紫色E.双缩服反应8.用0.1mol/L高氯酸溶液直接滴定硫酸奎宁时，硫酸奎宁与高氯酸的摩尔比为A. 1:1B.1:2C.1:3D.1:4E.1:59.具有Vitali反应的药物是A.毒扁豆碱B.阿托品C.氯化琥珀碱D.哌仑西平E.漠丙安太林10.非水碱量法不适用的生物碱类药物为A.盐酸麻黄碱B.盐酸吗啡C.咖啡因D.硫酸奎宁E.硫酸阿托品11.生物碱中提取中和法最常采用的溶剂是A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.乙酰E.氯仿和乙醍12.奎宁，奎尼丁等含氮哇琳类生物碱的特征反应A.发烟硝酸反应，显黄色B.药物酸性水溶液加稍过量漠水呈绿色的特征反应C.甲醛硫酸试液显紫堇色D.钥硫酸试液显紫色-蓝色.棕紫色E.双缩服反应13.酸性染料比色法中，水相的pH值过小，则A.能影响离子对B.有机溶剂提取能完全C.酸性染料以阴离子状态存在D.生物碱几乎全部以分子状态存在E.酸性染料以分子状态存在14.非水碱量法测定生物碱含量的限制条件是A. PkbV8〜10B.pKb< 10—12C.pKb<12D.pkb<13E.pKb<10~1415.生物碱类（PKb多为6〜9）提取分离测定时，须加碱化试剂，应考虑含酯结构，含酚结构等的影响，最适宜的碱化试剂是A.小苏打B.碳酸钠C.氢氧化钠D.氨溶液E.氧化钙16.有机含氮药物中碱性最强的胺类是A.伯胺B.脂肪仲胺C.季胺D.芳胺E.叔胺17.生物碱的含量测定，容量法可采用A.直接法，碱法B.提取中和法C.非水碱量法D.A+CE.A+B+C18.生物碱的鉴别反应中麻黄碱等芳香环侧链氨基醇的特征反应，是A.发烟硝酸反应，显黄色B.药物酸性水溶液加稍过量漠呈绿色C.甲醛.硫酸试液显紫堇色D.铜硫酸试液显紫色-蓝色.棕绿色E.双缩腿反应呈蓝色19.非水溶液滴定法测定盐酸吗啡含量时，为排除盐酸对滴定的影响需加入A.硝酸银B.三氯醋酸C.醋酸钠D.醋酸汞E.氤化钾20.生物碱提取中和法中最常采用的碱化试剂是A.氢氧化钠B.氢氧化钾C.氨溶液D.三乙胺E.碳酸钠二、B型题是一组试题(2至4个)公用一组A、B、C、D、E五个备选。
生物碱类药物
（1）荧光反应
取本品约20mg，加水20ml溶解后，分取溶液
3
N H , HCl , 3H2O O H 吗啡生物碱的显色反应 H OH
HO
盐酸吗啡
盐酸 吗啡可与甲醛硫酸、钼硫酸试 液分别发生反应，可用于鉴别 ，亦可与铁氰化钾试液反应， 生成蓝绿色而与可待因区别
（四）异喹啉类
无酚羟基，仅含叔胺基团， 碱性比吗啡强 CH3
N H , H3PO4 , 1 2 H2O H3CO O H H OH
冰醋酸
醋酐-冰醋酸蓝色 蓝绿色
硝酸有干 扰
2 3
10～12 ﹥12
硫酸奎宁
需加醋酐
硫酸奎尼丁
咖啡因
冰醋酸
醋酐-冰醋酸
结晶紫
结晶紫
绿色
黄色
需加醋酐
二、实例分析
（二）硫酸阿托品及其制剂的分析
N
CH3 H O O 2 OH , H2SO4 , H2O
1. 鉴别
（1）托烷生物碱反应（维他立） （2）红外光谱 （3）氯化物的反应
1
磷酸可待因
二、实例分析
（一）盐酸麻黄碱及其制剂的分析
1. 鉴别
H OH CH3 H N CH3 H , HCl
（1）双缩脲反应 （2）红外光谱 （3）氯化物的反应
二、实例分析
（一）盐酸麻黄碱及其制剂的分析
H
OH CH3 H N CH3 H
1. 鉴别
, HCl
（1）双缩脲反应
取本品约10mg，加水1ml溶解后，加硫酸铜试液2滴与 20%氢氧化钠溶液1ml，即显蓝紫色；加乙醚1ml，振 摇后，放置，乙醚层即显紫红色，水层变成蓝色。
与高氯酸反应不同
H HC CH , H2SO4 , 2H2O 2 2
生物碱类药物的含量测定
适用于碱性比较强的的药物分析。(pkb=6-9)
生物碱类药物的含量测定
（二）滴定方式
1.直接滴定法----用于碱性较强的生物碱。 2.剩余滴定法----用于碱性较弱的生物碱。 3.提取剩余滴定法----用于对热不稳定的生物碱。
生物碱类药物的含量测定
生物碱类药物的含量测定
一、非水溶液滴定法（非水碱量法）
(一)原理和方法
游离生物碱：生成生物碱的高氯酸盐
生物碱盐：置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的
较弱的酸。
BH+·A- + HClO4
BH+·ClO4- + HA
生物碱法
生物碱类药物的含量测定
三、酸性染料比色法
生物碱与某些酸性染料，在一定pH条件下可定量结合显色， 然后用比色法测定含量。 特点：灵敏度高、方便，并且具有一定专属性和准确性。适 用于含量较低的样品测定。
生物碱类药物的含量测定
四、紫外-可见分光光度法 五、荧光分析法 六、高效液相色谱法
生物碱类药物分析
原理：其他生物碱的碱性比阿托品弱
方法：取本品0.25g，加盐酸溶液1ml溶解，用水稀
释成15ml，分取5ml，加氨试液2ml，不得立即发
生浑浊。
二、利用药物和杂质在化学性质上的差异
1、盐酸吗啡中阿扑吗啡的检查
本品
加水溶解
加乙醚振摇
乙醚层不得显红色
加NaHCO3+碘试液
水层不得显绿色
sol(BH +) 水层
过滤 OH-
sol
中和法测定
有机层（B）
有机溶剂
用内容量移液管，精密量取本品10ml，以水洗出移液管内的 附着液，置分液漏斗中，加氨试液使成碱性，用氯仿振摇 提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因 提尽为止，每次得到的氯仿液均用同一份水10ml 洗涤， 洗液用氯仿5ml 振摇提取，合并氯仿液，置水浴上蒸干， 精密加硫酸滴定液(0.01mol/L) 25ml，加热溶解，放冷，加 甲基红指示液2 滴，用氢氧化钠滴定液(0.02mol/L)滴定。
生物碱+生物碱显色试剂=呈现不同颜色
显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、甲醛硫酸等 磷酸可待因的鉴别：
取本品1mg，置白瓷板上，加含亚硒酸2.5mg的硫酸
0.5ml，立即显绿色，渐变蓝色。
（三）熔点测定法
例：磷酸可待因（10版药典） 加入20％NaOH溶液至白色沉淀出现，用玻璃 棒摩擦器壁使沉淀完全，滤过；沉淀用水洗净， 在105℃干燥1小时 ，依法测定，熔点为154℃158℃。
4.氨基醇结构：双缩脲反应
H
OH CH3 H NH
CH3
H
OH NH H3 C H
CH3
.HCL
药物分析试题(五)
药物分析试题及答案第八章生物碱类药物的分析一、选择题1．用非水滴定法测定生物碱氢卤酸盐时，须加入醋酸汞，其目的是（）A 增加酸性B 除去杂质干扰C 消除氢卤酸根影响D 消除微量水分影响E 增加碱性2．提取容量法最常用的碱化试剂为（）A 氢氧化钠B 氨水C 碳酸氢钠D 氢氧化钾E 氯化铵3．非水溶液滴定法测定生物碱含量时，通常加入溶剂为10~30 ml，消耗0.1mol/L 标准溶液（）mlHClO4A 8B 5C 9D 4E 74．关于生物碱类药物的鉴别，哪项叙述是错误的（）A 在生物碱类药物分子中，大都含有双键结构，因此具有紫外特征吸收峰，据此用于鉴别。
B 紫外吸收光谱较红外吸收光谱丰富，是更好的药物鉴别方法。
C 化学鉴别最常用的是沉淀反应和显色反应。
D 生物碱可用生物碱沉淀试剂反应来进行鉴别。
E 薄层色谱分离鉴别中生物碱必须以游离碱的形式存在。
5．常用的生物碱沉淀试剂有（）A 碘-碘化钾B 碘化铋钾C 钼硫酸D 磷钼酸E 碘化汞钾6．常用的生物碱显色试剂有（）A 硅钨酸B 浓硫酸C 浓硝酸D 苦味酸E 钼硫酸7．咖啡因和茶碱的特征鉴别反应是（）A 双缩脲反应B Vitali反应C 紫脲酸铵反应D 绿奎宁反应E 甲醛-硫酸反应8．非水溶液滴定法测定硫酸奎宁含量的反应条件为（）A 冰醋酸-醋酐为溶剂B 高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定C 1 mol的高氯酸与1/3mol的硫酸奎宁反应D 仅用电位法指示终点E 溴酚蓝为指示剂9．酸性染料比色法中，水相的pH值过小，则（）A 能形成离子对B 有机溶剂提取能完全C 酸性染料以阴离子状态存在D 生物碱几乎全部以分子状态存在E 酸性染料以分子状态存在二、填空题1．双缩脲反应为芳环侧链具有结构的特征反应。
2．Vitali反应为类生物碱的特征反应。
本类药物与发烟硝酸共热，水解并得到黄色的三硝基衍生物，遇醇制KOH显色。
3．绿奎宁反应为衍生物的特征反应，在性水溶液中，滴加微过量的溴水或氯水，再加入过量的氨水，应显色。
药物分析讲稿-第九章生物碱类药物分析
第九章生物碱类药物分析生物碱(alkaloids)是一类存在于生物体内的含氮有机化合物，绝大多数存在于植物体内，大部分呈碱性，目前通过提取或人工合成方式得到的生物碱已有约一万余种之多，而其中近百种具有显著的药理及生理作用，已广泛应用于临床医疗。
但生物碱同时也具有较强的毒性，因此，一方面临床应用须十分慎重，另一方面，对其质量也应严格控制，以保证用药安全有效。
生物碱的数目多，结构复杂，其基本母核多种多样，现按其结构重点讨论六类生物碱的结构，以及与鉴别，检查，含量测定相关的性质，以便详细阐述药物结构、性质与分析方法的关系。
第一节典型药物的结构与性质一、苯烃胺类药物这类生物碱的结构特点是氮原子不在环状结构内，其代表药主要有盐酸麻黄碱(ephedrine hydrochloride)，盐酸伪麻黄碱(pseudoepedrine hydrochloride)，秋水仙碱(eolchicin)等。
麻黄碱与伪麻黄碱在结构上均属于有机胺大类中的苯丙胺小类，其氮原子在侧链上，都是仲胺，碱性较强，易与酸成盐；而秋水仙碱由于酰胺键p-π共轭，故碱性减弱，几乎呈中性。
苯烃胺类生物碱分子结构中，都含有芳环，因此都在紫外光谱区有特征吸收。
该类生物碱侧链上具有不对称碳原子，盐酸麻黄碱的比旋度为-330～-35.50，盐酸伪麻黄碱的比旋度为+61.00～+62.50，秋水仙碱为左旋体，比旋度为-4250～-4500。
二、托烷类药物(莨菪烷类)这类生物碱大多数是由莨菪烷衍生的氨基醇和不同有机酸缩合成酯类的生物碱，常见的有颠茄生物碱类和古柯生物碱类，现以硫酸阿托品(atropine sulfate)和氢溴酸山莨菪碱(anisodamine hydrobmmide)为例进行讨论。
阿托品和山莨菪碱，具有酯的结构，易水解，五元酯环上有氮原子，故碱性较强，易与酸成盐。
氢溴酸山莨菪碱结构中有不对称碳原子，为左旋体，比旋度-9.00～-11.50，而阿托品虽也有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。
沈阳药科大学《药物分析》II(药物分析专论)课件
2、茚三酮反应
具有类似-氨基酸结构如氨甲苯酸，可 与茚三酮反应，产生蓝紫色的缩合物
COOH
+
CH2NH2
O
C OH C
C OH
O
OH
O
CNC
O
O
二、阿斯匹林水解产物的反应
CO OH
OC OC H3 + Na2CO 3
COONa
OH
2
+ H2SO4
CO ON a
OH
+ CH3COONa +CO2
中性乙醇：①溶解供试品 ②防止酯水解。
目的：扣除乙醇中酸的影响。
2. 水解后剩余滴定法
原理:阿斯匹林酯结构在碱性溶液中易于 水解,加入定量过量的氢氧化钠滴定液, 加热使酯水解,剩余的碱用酸回滴.
需做空白试验校正. 目的：NaOH在加热时易吸收CO2, 用酸回滴定会消耗酸，影响结果
3.两步滴定法 适用于阿斯匹林片剂
（2） 多糖：一般不溶于水。
4、 鉴别 （1） 灼烧试验：
糖类→直火燃烧并产生焦糖臭味（一般 用于蔗糖的鉴别）
（2） Molish试验 糖类→浓H2SO4（脱水）→糠醛或糠醛衍 生物+-萘酚呈色
（3） 游离醛基或酮基的还原反应： 单糖或含半缩醛基的双糖均具有还原性。
(4) . 比旋度
葡萄糖：+52.5°～53° （10%水溶液，并100ml中加氨试液0.2ml） 无水葡萄糖：+52.6°～53.2°
CH2SH
CH2 S
CHSH +I2→ CH S
+2HI
CH2OH
CH2 OH
(2) 方法：
本品0.1g 10ml乙醇中 0.1mol / LI2 滴定至持续的微黄色
生物碱类药物分析详解
7.非水滴定法测定生物碱的氢卤酸盐含量时，若加入醋酸汞的
量不足，则会使测定结果
A、偏高 B、偏低
C、不变
D、可能偏高，也可能偏低
8.非水滴定法测定硫酸阿托品含量时，该药物与高氯酸的的摩
尔比为
A、1：1 C、2：1 B、1：2 D、1：3
9.冰醋酸是各种无机强 酸的区分溶剂，各种无机强酸再起中的
酸性强弱顺序为
26.提取酸碱滴定法测定生物碱含量时，不易用强碱进行碱化 的生物碱的分子结构特点为 A、含有碱性氮原子 D、含莨菪酸 B、含酯结构 C、含酚羟基结构
E、芳香环侧链伪氨基醇结构
27.提取酸碱滴定法测定生物碱的含量时，规定提取溶剂的用量
原则包括
A、通常提取四次
B、第一次的用量至少应为药物溶液体积的1/2
1.中国药典规定鉴别盐酸麻黄碱的方法如下：取本品加水溶解
后，加硫酸铜试液与20％氢氧化钠试液，即显色，加乙醚振 摇后，乙醚层显紫红色，水层的颜色为 A、蓝紫色 B、蓝色 C、紫色 D、红色
2.双缩脲反应鉴别盐酸麻黄碱的原理为 A、盐酸麻黄碱分子结构中含有仲胺基和铜离子形成紫堇色 配位化合物 B、盐酸麻黄碱分子结构中含有羟基与铜离子形成有色化合物 C、麻黄碱的碱性使铜离子形成碱式铜盐有色物 D、麻黄碱分子与铜离子形成有色化合物
C、以后几次用量应为第一次的1/2
D、第一次的用量应和药物溶液体积相等
E、以后几次的用量依次适当递减
28.提取酸碱滴定法测定生物碱盐类药物含量时，所用有机溶
剂应具备的主要条件为
A、与生物碱能相互结合 B、与水不相混溶
C、与生物碱或碱化试剂不发生任何反应
D、对生物碱溶解度大，对其他共存物溶解度尽可能小
17.盐酸吗啡属于下列哪类生物碱 A、托烷类 B、黄嘌呤类 C、苯烃胺类 D、异喹啉类
9-6生物碱类药物分析
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第四节磷酸可待因及其制剂的分析 三、磷酸可待因体内样品分析
☆1.血液浓度测定方法: HPLC法 固定相（BDSC18）； 流动相（0.25%醋酸铵液（pH=7.0）：乙腈 =65:35）； 流速：1.5ml/min；柱温：40℃ 检测波长（212nm）； 2.药动学试验
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1.酸度：pH=5.7-6.6 2.三氯甲烷-乙醇中不溶物：重量法；限量＜2mg 3.其他金鸡纳碱：薄层色谱法（自身稀释对照法）
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第五节 硫酸奎宁的分析
四、★含量测定 药典采用非水滴定法 滴定反应关系：硫酸奎宁：高氯酸=1:3
2 2 2 （QH ) 2 SO4 3HClO4 QH 2 2ClO4 QH 2 ClO4 HSO4
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第一节 盐酸麻黄碱及其制剂的分析
二、盐酸麻黄碱制剂的分析 1.注射剂的含量测定：药典采用HPLC法；
色谱条件与系统适用性试验： 固定相（ODS）； 流动相（磷酸盐缓冲液：乙腈=90:10）； 检测波长（210nm）； n>3000； R>1.5 2.滴鼻剂含量测定：同注射剂
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第四节磷酸可待因及其制剂的分析 一、磷酸可待因的分析
（二）检查★ 1.酸度：pH=4.0-5.0 2.溶液澄清度与颜色：比色法；比浊法 3.有关物质：HPLC法； （三）含量测定★ 药典采用非水滴定法测定含量
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第四节磷酸可待因及其制剂的分析 二、磷酸可待因制剂的分析 ★1.磷酸可待因片的含量测定
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第三节盐酸吗啡及其制剂的分析
一、盐酸吗啡的分析 （三）含量测定★ 药典采用非水滴定法测定含量 滴定剂：高氯酸滴定液（0.1mol/L） 溶剂：冰醋酸 其他试剂 ：醋酸汞 指示剂：结晶紫 终点：显纯蓝色
生物碱类药物分析 非水滴定法
非水滴定基本原理
BH+·A- + HClO4
BH+·ClO4- + HA
BH+·A 生物碱类盐
HA
置换出的弱酸
02
测定方法
供试品
以消耗标准液8ml计算
溶剂
HAc，一般用量10~30ml
滴定剂
0.1mol/L HClO4/HAc
溶液
指示剂
结晶紫
做空白试验
03
问题讨论
溶剂的选择
Kb﹤10-8的有机碱盐
（1）水中酸强度相等 （2）HAc中酸强度不相同 HClO4＞HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3＞其它弱酸
03
问题讨论
终点指示方法
最常用的指示剂是： 结晶紫 Crystal Violet（CV）
紫 蓝 蓝绿 黄绿 黄
（碱性区）
（酸性区）
终点的颜色应用电位法校准
03
问题讨论
注意事项
水分的影 响及排除
0
0
1
2
适用范围
Kb为10-8~10-10 选冰醋酸作溶剂
0 4
Kb ﹤10-12 选醋酐作溶剂
0 3
Kb为10-10~10-12
选冰醋酸和醋酐作溶剂
03
问题讨论
酸根的影响
01 置换滴定，即用强酸（HClO4），
置换出与生物碱结合的较弱的 酸（HA）
02 HA不同，对滴定反应的影响也不同
HClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3
05
思考题
在测定硫酸奎宁含量时，为什么用 非水滴定法？
非水滴定法
目录
01 02 03
非水滴定法概述 测定方法 问题讨论
生物碱类药物分析课件
K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞、磷钼酸 、硅钨酸等。
• 生物碱+生物碱显色试剂=呈现不同颜色 • 显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、甲醛
硫酸等 • 磷酸可待因的鉴别： 取本品1mg，置白瓷板上，加含亚硒酸2.5mg的
（三）熔点测定法
BH+·A- + HClO4
BH+·ClO4- + HA
(二)测定方法 • 取供试品，加冰醋酸10-30ml溶解。 • 供试品若为氢卤酸盐，应再加5%醋酸汞的
冰醋酸溶液3-5ml • 加指示剂，用高氯酸滴定液滴定
(三)注意事项 • 除水：加入酸酐，吸收冰醋酸及高氯酸中
的水分 • 温度：滴定液浓度受温度影响 • 滴定终点：电位法或指示剂法
一、利用药物和杂质在物理性质上的差异
硫酸奎宁中“氯仿乙醇中不溶物”的检查
利用溶解行为的差异
硫酸阿托品中“莨菪 碱”的检查*
利用旋光度的差异
利血平中“氧化产物” 的检查
利用对光选择性吸收的差异
二、利用药物和杂质在化学性质上的差异
（一）酸碱性的差异 硫酸阿托品中其他生物碱的检查
原理：其他生物碱的碱性比阿托品弱 方法：取本品0.25g，加盐酸溶液1ml溶解，
• 例：磷酸可待因（10版药典） 加入20％NaOH溶液至白色沉淀出现，
用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，滤过；沉 淀用水洗净，在105℃干燥1小时 ，依法测 定，熔点为154℃-158℃。
（四）紫外吸收光谱法 （五）红外吸收光谱法 （六）薄层色谱法
二、特征鉴别试验**
OH NHCH3 CH3
HH
（1）双缩脲反应 芳环侧链氨基醇结构的特征 反应
生物碱类药物的分析—生物碱含量测定(药物分析课件)
1. 基本原理
游离生物碱不溶于水，易溶于有机溶剂 依据性质
生物碱盐类可溶解于水，不溶于有机溶剂
2. 操作
游离生物碱或 生物碱盐类
H2O 或 稀酸
sol(BH+) 水层
中和法测定
有机层（B）
过滤 sol
OH有机溶剂
3. 测定方法 （1）直接滴定法
用于碱性较强的生物碱
有机层（B），蒸干 残渣（B） 中性乙醇 sol（B）酸滴定液滴定 终点
溶剂：硝基甲烷、丙酮、二氧六环
2.滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液
3.指示终点的方法 电位法：玻璃-甘汞电极系统 指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等
（二）适用范围
有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类
8＜pKb＜10 冰醋酸作溶剂
10＜pKb＜12 冰醋酸+醋酐
pKb＞12
醋酐
（三）生物碱盐类的滴定
无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：
（BH+·ln-）有机
（二）影响定量分析的因素
1. 水相的最适pH值 如果水相pH值过
小，酸性染料几乎仍以分子状态存在；
如果水相pH值过大，则生物碱几乎全部
以游离碱的形式存在
2. 有机溶剂的选择 苯、甲苯等
CHCl3、CH2Cl2、
3. 酸性染料的选择 常用溴甲酚绿、
溴麝香草酚蓝（BTB）、溴甲酚绿等
高氯酸＞氢溴酸＞硫酸＞盐酸＞
HSO
4
＞硝酸＞其它弱酸 （磷酸、有机酸）
1.游离生物碱
需用醋酐-冰醋酸（5：1）为溶剂。
2. 氢卤酸盐的测定
一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2 的 冰醋酸溶液，以消除氢卤酸对滴定的干扰。
2BH X Hg(Ac) 2 2BH Ac HgX 2 理论量1～3倍
药物分析生物碱类药物分析
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性质
性状及溶解性
盐酸麻黄碱水中易溶，乙醇中溶解，三氯甲烷 和乙醚中不溶；盐酸伪麻黄碱极易溶于水，易 溶于乙醇，微溶于三氯甲烷；秋水仙碱无臭， 遇光色渐变深，乙醇、三氯甲烷中易溶，水中 溶解，乙醚中极微溶。
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性质
②托烷类药物理化性质
旋光性
氢溴酸东莨菪碱为左旋体，50mg/ml溶液比 旋度为－24～－27；硫酸阿托品和消旋山 莨菪碱均为消旋体，无旋光。
一、生物碱类药物性质与结构分析
②托烷类药物理化性质 莨菪酸反应
水解生成莨菪酸，可为发烟硝酸硝化，在碱性 醇溶液中呈现深紫色，后转暗红色，最后颜色 消失（Vatili反应）；
hydrobromide） ①药物结构
②理化性质
一、生物碱类药物性质与结构分析
①托烷类药物结构
硫酸阿托品 （atropine sulfate）
N CH3 OH
O O
·H2SO4 ·H2O
2
无色结晶或白色结晶性粉末，无臭
一、生物碱类药物性质与结构分析
①托烷类药物结构
消旋山莨菪碱 （raceanisodamine）
一、生物碱类药物性质与结构分析
（一）概述
（二）常见药物的结构与性质
（一）概述
性状
大部分由C、H、O、N等元素组成 多为结晶或非晶型固体 无色，少数为有色物质 多具有苦味，个别味极苦而辛辣，一般无臭 固体多具有确定的熔点，部分具有挥发性或升华性。
碱性
多具有碱性，受电效应及立体效应等影响，强弱差异较大。
①药物结构 ②理化性质
一、生物碱类药物性质与结构分析
天然药物化学生物碱类药物分析
天然药物化学生物碱类药物分析天然药物是指从动植物以及微生物等天然来源中提取的药物物质，一直以来在医学领域中扮演着重要的角色。
其中，化学生物碱类药物作为天然药物的主要分类之一，具有广泛的药理活性和药物应用。
本文将对天然药物化学生物碱类药物进行分析与探讨。
1. 对化学生物碱类药物的定义和分类进行介绍化学生物碱类药物是一类从植物、动物等自然资源中提取得到的含有生物碱结构的药物物质。
它们具有较复杂的结构和多样的药理活性，常被用于治疗多种疾病。
根据其来源和结构特点，可以将化学生物碱类药物分为植物生物碱、动物生物碱和微生物生物碱等几个子类。
2. 分析化学生物碱类药物的提取与分离方法2.1 植物生物碱的提取与分离植物生物碱的提取与分离一般采用溶剂提取法、薄层色谱、液-液萃取等方法。
溶剂提取法是最常用的提取方法之一，通过选择合适的溶剂，将药材中的化学生物碱溶解出来。
随后，可以利用薄层色谱和液-液萃取等技术来分离和纯化目标物质。
2.2 动物生物碱的提取与分离动物生物碱的提取与分离方法相对较为复杂。
一般采用超声波提取、超临界流体萃取、膜分离等技术。
超声波提取利用超声波的机械效应和热效应促进生物碱的析出和转移，从而实现提取的目的。
超临界流体萃取则是利用压力和温度调节流体的性质，加速目标物质的转移和提取。
2.3 微生物生物碱的提取与分离微生物生物碱的提取与分离方法主要包括微生物发酵、固相微萃取等技术。
微生物发酵是指通过培养微生物，在特定条件下使其合成生物碱物质。
而固相微萃取则是利用富集柱或吸附材料将目标生物碱富集起来，再进行分离和纯化。
3. 分析化学生物碱类药物的质量控制方法质量控制是药物研发和生产过程中的关键环节。
对于化学生物碱类药物而言，质量控制方法主要包括外观检查、熔点测定、红外光谱分析、光学旋光度测定、高效液相色谱、质谱等。
外观检查是一种直观观察化学生物碱药物颗粒的形态和颜色，以判断其是否符合质量要求。
熔点测定则通过检测物质的熔化温度来确定其纯度和认证。
药物分析生物碱类药物的分析
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性质
紫外特征吸收
盐酸伪麻黄碱0.5mg/ml溶液在251、257、263nm 波长处有最大吸收；
秋水仙碱在243与350nm波长处的吸光度比值为 1.70～2.00，
一、生物碱类药物性质与结构分析
2. 托烷类生物碱
硫酸阿托品 atropine sulfate
OH HH
N ·HCl
CH3 H3C H
白色结晶性粉末,无臭、味苦
一、生物碱类药物性质与结构分析
①苯烃胺类药物结构
秋水仙碱 colchicine
H3CO
H3CO H3CO
H N
CH3
HO
O OCH3
淡黄色结晶性粉末
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性质
性状及溶解性 碱性 氨基醇双缩脲反应 旋光性 紫外特征吸收
吗啡兼有两性；茶碱显酸性，
碱性的生物碱可利用碱性与酸成盐,如盐酸麻黄碱；
碱性极弱的生物碱,以游离状态存在,如咖啡因和利血平，
溶解性
游离生物碱大都不溶或难溶于水,溶于或易溶于有机溶剂 碱性生物碱在稀酸溶液中成盐而溶解， 生物碱的盐类多易溶于水,不溶或难溶于有机溶剂
旋光性
多具旋光性， 中国药典中对许多生物碱都规定了旋光度测定，
麻黄碱和伪麻黄碱,碱性较强,易与酸成盐；
碱性
秋水仙碱碱性很弱,不与酸成盐，
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性 质
氨基醇双缩脲反应
盐酸麻黄碱和伪麻黄碱具有氨基醇结构, 可发生双缩脲反应，
一、生物碱类药物性质与结构分析
②苯烃胺类药物理化性质
旋光性
盐酸麻黄碱为左旋体,50mg/ml溶液测定比旋度 为 － 33 ～ － 35.5 ； 盐 酸 伪 麻 黄 碱 为 右 旋 体,50mg/ml溶液测定比旋度为＋61.0～＋62.5； 秋水仙碱为左旋体, 10mg/ml溶液比旋度为－ 425～－450，
生物碱类成分的主要性质及分析特征
3、蒽醌类单体成分的测定
•中药制剂中蒽醌类单体成分的测定一般要将样品水解 后再进行测定，测定方法主要有薄层扫描法和高效液相 色谱法。 • 薄层扫描法为蒽醌类成分常用定量分析方法，经层析 分离后，可在可见光、紫外光及荧光下扫描测定。 • 蒽醌类成分在紫外及可见光下均有强吸收，利用高效 液相色谱-紫外可见光检测器测定蒽醌类单体成分，具 有灵敏、准确、简便等特点。在含蒽醌类化合物的中药 制剂分析中应用日趋增多。
（二）中药中生物碱分析 1、总碱分析 （1）定性鉴别 由于中药制剂中成分复杂，有些成分如蛋白质、多肽和 鞣质等也可与试剂生成沉淀而造成假阳性结果，因此，制 备样品供试液时必须净化处理，除去干扰成分，方能用沉 淀反应进行中药制剂中生物碱类成分的鉴别. （2）总生物碱的含量测定 • 化学分析法 化学分析法包括重量分析法和容量分析法。目前主要使 用酸碱滴定法。
强碱滴定生物碱盐时,在70%-90%的乙醇介质中终点比 在水中明显,因此常将生物碱盐溶于90%乙醇,再用标准碱 乙醇液滴定. 酸碱滴定法指示反应终点可用指示剂和各种电位法。 • 分光光度法 目前多用单波长光度法，测定波长可选用待测生物碱 成分本身的吸收波长，也可加入某些试剂如亚硝酸钠试剂、 雷氏盐试剂及酸性染料等反应显色后用可见光波测定。 常用方法：直接测定、离子对萃取比色法
（三）应用示例
戊已丸中生物碱的含量测定 处方组成：黄连、吴茱萸（制）、白芍（炒）。 取本品粉末（过三号筛）0.7-0.9g，精密称定，置索 氏提取器中，加盐酸-甲醇（1：100）适量，加热回 流至提取液无色，提取液浓缩后移至25ml量瓶中， 加乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取5ml，置氧化铝 柱（内径约0.9cm，中性氧化铝5g，湿法装柱，用乙 醇30ml预洗）上，用乙醇35ml洗脱。收集洗脱液， 置50ml量瓶中，加乙醇稀释到刻度，摇匀，照分光 光度法，在345nm处测定吸收度，按盐酸小糪碱的 吸收系数728计算，即得。本品按干燥品计算，每1g 含生物碱以盐酸小糪碱(C20H18ClNO4)计，不得少于 30mg。
天然药物化学 生物碱类药物分析
梯度洗脱
第三节
含量测定
一、非水碱量法 在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和 滴定（滴定突跃不明显，难以判断滴定 终点）。 在酸性非水介质中（如gHAc中），则能 显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可 以顺利地进行中和滴定。
1．测定方法 ＊ 供试品：以消耗标准液8ml计算。 ＊ 溶剂：gHAc，一般用量10~30ml， ＊ 滴 定 剂 ： 0 . 1 mol/L HClO4/ 无 水 gHAc 溶液 ＊ 指示剂：结晶紫 ＊ 做空白试验
常用试剂：I2—KI 碘化铋钾 碘化汞钾 鞣酸 硅钨酸
2．显色反应 生物碱固体 + 生物碱显色试剂→颜色 常用：C· H2SO4、C· HNO3、钼硫酸 特征鉴别试验 1.双缩脲反应（具有氨基醇结构的生物碱 的特征反应）
例如：盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱
2.Vitali反应（托烷类）
供试品 发烟HNO3 黄色 醇制KOH 深紫色
2
反应的摩尔比是1∶1
ⅱ．加入高氯酸钡消除H2SO4的影响
CH CH2 CH(OH) CH3O N CH CH2 CH(OH) CH3O N
N 2 H 2 SO 4 N 2
N+ H
. SO2 4
N+ H
N 2 H 2 SO 4 2( N HClO 4 ) Ba (ClO 4 ) 2 BaSO 4 N 2 N 2
2( N HClO 4 ) 2( N HClO 4 ) 2HClO 4 N 2 2( N HClO 4 )
加入高氯酸钡，摩尔比是1∶2
iii 硫酸奎宁片的含量测定
供试品适量
分取氯仿液 氢氧化钠 溶液 高氯酸滴定 二甲基黄指示液 醋酐 氯仿
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3. 指示终点的方法
电位法：玻璃—甘汞电极系统
指示剂法：结晶紫、喹哪啶红等
4. HClO4溶液稳定性
C1
C0
10.0011(t1
t0)
（二）适用范围
有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类
8＜pKb＜10 冰醋酸作溶剂
10＜pKb＜12 冰醋酸+醋酐
pKb＞12
醋酐
（三）一般测定方法
一般采用半微量法。Chp（2000）测定方法为：取供试品适量 〔约消耗高氯酸滴定液（0.1 mol/L）8 ml〕，加冰醋酸10～30 ml 使溶解。若供试品为氢卤酸盐，应再加5％醋酸汞的冰醋酸溶液 3～5 m1，加各药品项下规定的指示液1～2滴，用高氯酸滴定液 （0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空白试验校正。
溶剂，在稀酸中成盐而溶解 生物碱盐类易溶于水，不溶于有机溶剂
3. 旋光性 一般多为左旋体有效。
第二节 鉴别试验
一、特征鉴别反应
（一）双缩脲反应
侧链具有氨基醇结构
醚层
盐 盐酸 酸麻 伪 +C 黄 麻 uSO 碱 黄 4O H -碱 紫堇 乙色 醚
水层
（二）Vitali反应 托烷生物碱
紫 兰
氢硫 溴酸 酸阿 山托 莨 +品 发 菪碱 烟 HNO3· 黄色醇制深紫色
（1）直接滴定
B + · H C O - 4+ l + · H S O B 4 -
注意硫酸盐的结构，正确判断反应的 摩尔比。
A. 硫酸阿托品 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为1∶1
CH3 N
O CO CH CH2OH
H2SO4 H2O
2
B. 硫酸奎宁 HClO4直接滴定时，反应摩尔比为1∶3
CH3O
利用药物与杂质在溶解性方面的差异进行检查。如 硫酸奎宁中无机盐的检查；吗啡中其他生物碱的检查。 （二）旋光性质的差异
如 硫酸阿托品中“ 莨菪碱 ”的检查。
（三）对光吸收性质的差异
如利血平中氟化产物的检查，利血平供试品置于365nm 紫外光灯下检查，不得显明显荧光。
（四）吸附或分配性质的差异
如硫酸奎宁中“其他金鸡纳碱”的检查，利用其吸附性质的
KOH
（三）绿奎宁反应 硫酸奎宁、硫酸奎尼丁
（四）Marquis反应 吗啡生物碱
盐酸 +吗 甲 啡 醛硫 紫酸 堇色
（五）Frohde反应 吗啡生物碱 盐酸吗 +钼啡 硫酸 紫色 兰色棕绿色
（六） 官能团反应 吲哚生物碱 1. 利血平 + 新制香草醛→玫瑰红色
2. 利血平 对二甲氨基苯甲醛
冰 醋 酸 、 硫 酸 绿色冰 醋 酸 红色
一般均预先在溶液中加入Hg(Ac)2 的冰醋酸溶液， 以消除氢卤酸对滴定的干扰。
2B X H Hg 2 (2 A B A c H ) c H2gX 理论量1～3倍
3. 硫酸盐的测定
生物碱的硫酸盐，在冰醋酸介质中只能被滴定至生物碱
的硫酸氢盐。 (B + )2 · H O 4 2 S -+C O 4 H l
CH 3 N
N
pKb=14.15
pKb=6.13
N CH 3 H
HO
pKa=9.85
O
OH
吗啡
O CH 3
N
ON CH 3 茶碱
H N
N
二、生物碱类药物的通性
1. 碱性 季铵碱＞脂肪胺、脂环胺＞芳胺、N-芳杂环＞酰胺 小檗碱＞麻黄碱、阿托品＞罂粟碱＞咖啡因 吗啡具酸碱两性
2. 溶解性 游离生物碱不溶或难溶于水，能溶或易溶于有机
（七）紫脲酸胺反应 黄嘌啉类生物碱
咖啡因
茶碱+HCl+KClO3 氨 蒸气 干紫色 KOH紫色消失
（八）还原反应 吗啡与磷酸可待因的区分反应
吗啡 + 3K [Fe(C 6] N) K2[Fe(C 6] N Fe3+)普鲁士兰
二、一般鉴别反应
（一）熔点测定法 （二）沉淀反应
生物碱 + 生物碱沉淀试剂H+ ↓
常用的生物碱沉淀试剂为： 1. 重金属盐类，如K2HgI4、KBiI4、I2—KI、二氯化汞等； 2. 大分子酸类，如磷钼酸、硅钨酸等。
（三）显色反应 常用的显色试剂：浓硫酸、浓硝酸、钼硫酸、钒硫
酸、硒硫酸、甲醛硫酸等
（四）UV （五）IR （六）色谱法
1. HPLC
2. TLC
硅胶为吸附剂：游离生物碱能顺利迁移，生物碱盐类吸附 太牢，造成严重拖尾。
二、化学法
利用药物与杂质在化学性质上的差异进行检查。 如生成沉淀或显色反应。
第四节 含量测定
一、非水溶液滴定法（非水碱量法） 原料药 （一）原理
水溶液中滴定突跃不明显，在非水介质中，碱性增 强，使滴定顺利进行
1. 溶剂：冰醋酸、冰醋酸+醋酐、醋酐
2. 滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液 或高氯酸的二氧六环溶液
第九章 生物碱类药物的分析 The Analysis of Alkaloid
第一节 概述 一、生物碱（Alkaloids）
生物碱是生物体内含氮有机化合 物的总称
典型药物的结构
CH 3O CH 3O
OH-N+
pKb=2.5
O
O 小檗碱
pKb=4.42
OH NHCH3 C C CH3 HH 麻黄碱
CH 3
N
pKb=4.35
O CO 阿托品
CH CH 2OH
CH CH 2
CH 3O
H
OH C
N
H
pKb1=5.07
N 奎宁
pKb2=9.7
pKb1=6.0
N
N O
pKb2=11.7 O
士的宁
CH 3O
N pKb=7.87
罂粟碱
O CH 3
N
ON CH 3 咖啡因
OH C
N
H
CH CH2
H H2SO4 H2O
N
2
滴定反应如下：
CH3O
CH3O CH3O
CH CH2 CH(OH)
N+ H
N
+ .
SO
2 4
-
CH CH2
3HClO4
CH(OH) N+
H
N CH3O
解决方法： （1）在展开剂中加少量的碱性试剂，如氨、二乙胺、有机脂 烃胺类； （2）硅胶板用碱处理
第三节 特殊杂质检查
• 特殊杂质检查主要根据药物与杂质的理化性质差 异来进行。
一、物理法 利用药物和杂质在颜色、溶解行为、旋光性质、
对光吸收选择性等物理性质上的差异，检查杂质是否 符合限量规定
（一）溶解行为的差异
（四）生物碱盐类的滴定
置换滴定： B A H H4 C B l O C H 4 l H OA
无机酸在冰醋酸中的酸性次序为：
高氯酸＞氢溴酸＞盐酸＞硫酸＞HSO4-＞硝酸＞其它 弱酸 （磷酸、有机酸）
1. 有机酸盐的测定
由于有机酸系弱酸，被高氯酸置换出的HA，对滴定无 干扰，能准确滴定。
2. 氢卤酸盐的测定