木瓜蛋白酶1448551
木瓜蛋白酶的纯化和鉴定方法研究
木瓜蛋白酶的纯化和鉴定方法研究木瓜蛋白酶（Papain）是一种广泛存在于木瓜中的天然酶，具有优异的蛋白水解能力和广泛的应用领域。
对于木瓜蛋白酶的纯化和鉴定方法的研究，可以为其在食品、药物和生物技术等领域的应用提供重要的理论和实践基础。
纯化木瓜蛋白酶的常用方法主要包括：硫酸铵沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析和亲和层析等。
首先，通过将木瓜果肉或木瓜乳剂进行初步的提取和分离，得到粗木瓜酶液或浓缩液。
接下来，通过酸性、碱性或酶处理等方法，将杂质蛋白质去除，然后经过一系列的层析纯化步骤，最终获得纯度较高的木瓜蛋白酶。
其中，离子交换层析是最常用的纯化方法之一。
离子交换层析是根据蛋白质与固定在固定相上带电的离子交换基团之间的相互作用进行纯化的。
通常使用阳离子交换剂如DEAE-Sepharose CL-6B或阴离子交换剂如CM-Sepharose CL-6B作为固定相，可实现木瓜蛋白酶与其他蛋白质之间的分离。
通过控制缓冲液的pH和离子强度，可以调节木瓜蛋白酶在层析柱上的吸附和洗脱，从而实现对其的纯化。
凝胶过滤层析是另一种常见的纯化方法，其基本原理是根据蛋白质分子大小的差异进行纯化。
凝胶过滤层析对分子量较大且较纯的蛋白质具有较好的分离效果。
在纯化木瓜蛋白酶时，可以选择适当的凝胶过滤层析介质，如Sephadex G-75或Sephadex G-100等，将混合溶液在凝胶柱上进行层析，分离出目标蛋白质。
除了纯化方法的研究外，正确鉴定木瓜蛋白酶的纯度和活性也是非常重要的。
鉴定木瓜蛋白酶的常用方法主要包括：SDS-PAGE电泳、活性测定和质谱鉴定等。
其中，SDS-PAGE电泳是一种常用的蛋白质分子量分析方法，它可将蛋白质按照分子量大小进行分离和定量。
通过在分离凝胶上染色或通过Western blotting方法检测，可以确定木瓜蛋白酶的纯度和分子量。
活性测定是评价木瓜蛋白酶酶活性的重要手段。
常用的活性测定方法包括卟啉-酪蛋白分光光度法、酪蛋白分解能力法等。
木瓜蛋白酶
食品添加剂木瓜蛋白酶学院:食品与营养工程学院专业:食品加工班级:食工102学号:010*******姓名:王瑞真木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶又称木瓜酶，是一类疏基蛋白酶。
广泛存在与番木瓜的根、茎、叶和果实内，在未成熟的乳汁中含量最丰富。
它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特色，因此在食品、医药、饲料、皮革及纺织等行业得到广泛应用[1]。
一、木瓜蛋白的组分工业用的木瓜蛋白酶一般都是未经纯化的多酶体系。
由木瓜乳胶提取粗制酶,除含有木瓜蛋白酶外,还含有半耽氨酸蛋白酶、纤维素酶、溶菌酶、谷氨酞胺以及低相对分子质量的疏基化合物,还有葡萄糖酶等。
其中大部分都是疏基蛋白酶,主要的两种组分是木瓜凝乳酶和木瓜蛋白酶[2]。
二、木瓜蛋白的结构木瓜乳汁中四种已知半肤氨酸蛋白酶的一级结构具有高度同源性,其氨基酸数目和同源性比较如表1所示。
除chymopapain含有8个半肤氨酸外,其余三种酶都只含有7个半肤氨酸。
25位的流基是活性位点,不参与二硫键的形成（chymopapain的117位琉基也不参与二硫键的形成 ）,其余疏基以相同的方式形成三个二硫键，具有同样的保守性。
人们在不同清晰下得到了四种酶的X 一射线结构。
四种酶的肤链折叠方式相似,形成两个大小相、构型不同的区域。
一个是由a一螺旋构成的L一区,另一个是由大量反向平行的片层构成的R一区。
活性位点氨基酸残基Cys25,Asn179和His159 就位于这些区域的表面,其中Cys25位于 L一区,起始a一螺旋上。
木瓜蛋白酶家族的Cys25 ，Gly23，Gly65 形成的S。
亚部位是一个大口袋，对底物专一性影响较小；S亚部位由于酶不同其氨基酸组成不同,几何形状亦不同,对酶的性质影响较大[3]。
三、木瓜蛋白酶的提取工艺1.过去的常规提取方法木瓜蛋白酶最原始的提取方法是烘干法，就是在番木瓜浆液中加入保护剂，然后将浆液离心取上清液放置于鼓风干燥箱中，在55～60℃烘干，粉碎后即得到粗酶制品。
木瓜酶的功效有哪些
木瓜酶的功效有哪些很多的食物中都可以提炼出一些对身体非常有好处的东西，或者是提炼出一些用途非常广泛的东西。
比如从番木瓜中可以提炼出木瓜酶，这是用途就比较广泛的一种蛋白酶。
很多人对木瓜酶的功效可能还都不知道。
那么，木瓜酶的功效有哪些？对于这个问题，一起来看看下文的具体的介绍。
木瓜蛋白酶（Papain），又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。
木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。
木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。
在食品行业中，木瓜蛋白酶可用于肉类嫩化、啤酒澄清、饼干松化等用途。
啤酒澄清剂引起啤酒冷藏混浊时主要原因是啤酒中的蛋白质极易与多元酚结合成大分子的复合物。
利用啤酒澄清剂中的木瓜蛋白酶对形成混浊的蛋白质有广泛的特异性，能把大分子的蛋白质降解成小分子的物质，提高了蛋白质与多元酚复合物的溶解度；另一方面，木瓜蛋白酶是一种具有生物活性的蛋白质，该蛋白质可与引起啤酒冷藏混浊的多元酚形成稳定状态平衡，防止了啤酒的冷藏混浊。
肉类嫩化剂利用木瓜蛋白酶能裂解肉类中的胶原蛋白和肌肉纤维，而使肉的结构松散。
由于木瓜蛋白酶是半胱氨酰基蛋白酶，能降解胶原纤维和结缔组织蛋白质，它将肌动球蛋白和胶原蛋白降解成为小分子的多肽甚至氨基酸, 令肌肉肌丝和筋腰丝断裂, 使肉类变得嫩滑，并简化蛋白质结构使人体食用后易于消化吸收。
饼干松化剂利用木瓜蛋白酶的酶促反应, 将面团的蛋白质降解为小分子的肤或氨基酶, 降低了面团的拉伸阻力, 使面团变得柔软、更有可塑性, 减少弹性, 易于成型。
用量视饼干厂的加工方法和面团中蛋白质的含量不同而不同，研究表明每公斤面添加0.6-1.0万单位/ 克为佳。
木瓜酶的功效有哪些？木瓜酶的功效是非常的多的，可以用作啤酒澄清剂、肉类嫩化剂以及饼干松化剂等等。
木瓜蛋白酶
食品工业应用
可利用酶促反应，使食品大分子的蛋白质 水解成小分子肽或氨基酸。用于水解动植 物蛋白、制成嫩肉粉、水解羊胎素、水解 大豆、饼干松化剂、面条稳定剂、啤酒饮 料澄清剂、高级口服液、保健食品、酱油 酿造及酒类发酵剂等。有效转化蛋白质的 利用，大大提高食品营养价值，降低成本。 有利于人体的消化和吸收。
美容化妆品工业应用
将木瓜蛋白酶加入到含有蛋白质和油脂的 化妆品中，具有独特的美白嫩肤、美颜保 健、祛斑除污垢、促进血液循环、改善肌 肤等功效，提高产品档次。可制成减肥茶、 美容护肤品等。
日化品工业应用
用于香皂、肥皂、洗涤剂、洗衣粉、洗手 液等，去污力强，除菌消毒、安全放心。
饲料工业应用
特点
木瓜蛋白酶papain属巯基蛋白酶，具有较宽的底物特异 性，作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L瓜 木瓜蛋白酶 氨酸残基羧基参与形成的肽键。此酶属内肽酶，能切开 全蛋蛋白质分子内部肽链—CO—NH—生成分子量较小 的多肽类。 存在于木瓜胚乳中的蛋白酶。 EC3．4．22．2。作为植物来源的蛋白酶来说，此酶研 究进展的最快。此酶主要是以内肽酶的形态起作用。活 性的产生，而半胱氨酸残基是不可缺少的，所以是硫基 蛋白酶的一种，底物的特异性不太严格，分子量为 23400，氨基酸残基数212。 木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能 分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的粉末，
在免疫学中，木瓜蛋白酶可被用于将免疫 球蛋白（即抗体）的Fc片段（可结晶）和 Fab片段（抗原结合）切割开。
催化机制
木瓜蛋白酶的剪切肽键的机制包括：在 His-159作用下Cys-25去质子化，而Asn158能够帮助His-159的咪唑环的摆放，使 得去质子化可以发生；然后Cys-25亲核攻 击肽主链上的羰基碳，并与之共价连接形 成酰基－酶中间体；接着酶与一个水分子 作用，发生去酰基化，并释放肽链的羰基 末端。
木瓜蛋白酶简介
木瓜蛋白酶产品用途
• 木瓜蛋白酶能够将纤维蛋白酶原激活成为纤 维蛋白溶酶。它只作用于坏死组织，溶解病灶内 的纤维蛋白、血凝块和坏死物质。清洁创面，助 长新生肉芽，促进排脓排液。加速伤口愈合。 • 木瓜蛋白酶常用于治疗水肿，炎症以及驱虫（线 虫）等疾病。但是用药后有轻度皮肤炎和局部出 血、疼痛感。反复使用可引起过敏反应。严重肝 肾病患者慎用，血凝机能不全及全身感染病人忌 用，忌同抗凝剂配伍。
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木瓜蛋白酶生产方法工艺
• 木瓜蛋白酶生产方法一：干木瓜乳液硅藻 土；沙子；0.04mol· L-1半胱氨酸→抽提， 过滤粗提取液NaOH;Ph9→除Ph9不溶物上 清液沉淀、离心粗提取液(NH4)2SO{4→沉 淀；离心沉淀0.02mol· L-1半胱氨酸;Ph7→ 溶解溶液NaCl(固体）→沉淀；离心沉淀 0.02mol· L-1半胱氨酸；Ph6.5→溶解溶液冷 冻、离心、重结晶溶液40→冷冻；离心结 晶^H2O;NaCl→重结晶成品
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木瓜蛋白酶生产方法工艺
• 木瓜蛋白酶生产方法二：从未成熟的木瓜 果实中提取胶乳，并将其沉降、凝固、干 燥即制得产品。 • 木瓜蛋白酶生产方法三：由木瓜(Caric paቤተ መጻሕፍቲ ባይዱaya)的未成熟果实，经提取乳液、凝固、 沉降、干燥而成粗制品。一般工业上以粗 制品的应用为主。
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木瓜蛋白酶酶活测定
• 木瓜蛋白酶基本原理 • 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯 （底物）水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸， 其释出量可用氢氧化钠液滴定，以此确定 酶活力。 • 木瓜蛋白酶酶活单位 • 在25℃下，每分钟内能催化分解1umol底物 的酶量，称为1单位。
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶，重要的生物学植物酶：综述Ezekiel Amri and Florence Mamboya Department of Science and Laboratory Technology,Dar es Salaam Institute of Technology (DIT), P. O. Box 2958, Dar es Salaam, TanzaniaReceived 2012-05-13; Revised 2012-05-20; Accepted 2012-06-02摘要木瓜蛋白酶是一种植物蛋白水解酶，属于半胱氨酸蛋白酶家族的半胱氨酸蛋白酶，我们对于其功能的研究已经取得了重大进展。
木瓜蛋白酶天然存在于木瓜(番木瓜番木瓜属) ，由木瓜果实的胶乳中提取。
能够分解为氨基酸，多肽等有机分子，在生理，病理，药物设计，工业用途，如肉嫩化和药物制剂等不同的生物学过程扮演重要角色。
木瓜蛋白酶的独特的结构有助于阐明蛋白水解酶的工作原理，实现一系列生物学价值。
现在研究认为，其生物学重要性，特性和结构特点对于对其生物功能的理解十分重要。
同时我们对其潜在的生产和市场价值进行了讨论。
1. 引言木瓜蛋白酶(EC3.4.22.2)是一种内源性植物半胱氨酸，它是从番木瓜中分离出的蛋白酶(番木瓜番木瓜属) 胶乳。
木瓜蛋白酶是通过切割未成熟木瓜表皮，收集并干燥从切口中流出的胶乳得到的。
在不成熟的水果中木瓜蛋白酶的活性更高。
木瓜酶属于木瓜蛋白酶超家族，作为蛋白水解酶，木瓜蛋白酶在所有活的生物体是许多重要的生物过程中至关重要的物质(黄杨等人，1999)。
木瓜蛋白酶示在蛋白，短链肽，氨基酸酯和酰胺链接中表现出广泛的蛋白水解活性，并在食品和医学领域被广泛应用(尤利格，1998 年)。
它优先切割的肽键包括碱性氨基酸，特别是精氨酸，赖氨酸和苯丙氨酸残留物(梅纳尔等人，1990年)。
木瓜蛋白酶的独特的结构有助于理解蛋白水解酶如何工作的并且达到多种生物学目的。
木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶(papain)
（六）羧肽酶
一类肽链端解酶，作用于肽链的游离羧基末端释放单个氨基酸。羧肽酶是催化 水解多肽链含羧基末端氨基酸的酶。酶活性与锌有关。
羧肽酶A：是水解由芳香族和中性脂肪族氨基酸形成的羧基末端。比如酪氨酸， 苯丙氨酸，丙氨酸等
羧肽酶B：主要水解碱性氨基酸形成的羧基末端。羧肽酶A可以切割C端除了 Lys、Arg、Pro的氨基酸羧肽酶B可以切割C端的Lys或Arg，但如果倒数第二个氨基 酸为Pro，两种羧肽酶均不能作用羧肽酶是一种消化酶。可专一性地从肽链的C端开 始逐个降解，释放出游离氨基酸的一类肽链外切酶。以酶原形式存在于生物体内。常 用的有A、B、C及Y，4种羧肽酶。
（1）常用于肉的嫩化 （2）啤酒的澄清 （3） 饼干、糕点生产 （4）在啤酒中加0.0001％～0.0004％木瓜蛋白酶(通常是在啤酒巴氏杀菌之前加入)。 啤酒在低温下储存发生浑浊主因。 （5）固定化木瓜蛋白酶
（二）胃蛋白酶
胃蛋白酶是一种消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主细胞所分泌，功能是 将食物中的蛋白质分解为小的肽片段。胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌，在 pH1.5 ～ 5.0条件下，被活化成胃蛋白酶，将蛋白质分解为胨，而且一部分 被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。可分解蛋白质中苯丙氨酸或酪氨酸与 其他氨基酸形成的肽键，产物为蛋白胨及少量的多肽和氨基酸，该酶的最适 pH为2左右。
第十一章 食品酶制剂
第三节 蛋白酶
一、蛋白酶的概念、作用及分类
（一）蛋白酶的概念
蛋白酶(protease)是水解肽键的一类酶。
蛋白质在蛋白酶作用下依次被水解(proteose)
蛋白胨
多肽
肽
氨基酸
蛋白酶按其作用方式可分为两大类：
内肽酶
可从蛋白质或多肽的内部切开肽键生成分子质量较小的胨和多肽，是真正的蛋白酶。称氨肽酶
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶，重要的生物学植物酶：综述Ezekiel Amri and Florence Mamboya Department of Science and Laboratory Technology,Dar es Salaam Institute of Technology (DIT), P. O. Box 2958, Dar es Salaam, TanzaniaReceived 2012-05-13; Revised 2012-05-20; Accepted 2012-06-02摘要木瓜蛋白酶是一种植物蛋白水解酶，属于半胱氨酸蛋白酶家族的半胱氨酸蛋白酶，我们对于其功能的研究已经取得了重大进展。
木瓜蛋白酶天然存在于木瓜（番木瓜番木瓜属），由木瓜果实的胶乳中提取。
能够分解为氨基酸，多肽等有机分子，在生理，病理，药物设计，工业用途，如肉嫩化和药物制剂等不同的生物学过程扮演重要角色。
木瓜蛋白酶的独特的结构有助于阐明蛋白水解酶的工作原理，实现一系列生物学价值。
现在研究认为，其生物学重要性，特性和结构特点对于对其生物功能的理解十分重要。
同时我们对其潜在的生产和市场价值进行了讨论。
1.引言木瓜蛋白酶（EC3.4.22.2）是一种内源性植物半胱氨酸，它是从番木瓜中分离出的蛋白酶（番木瓜番木瓜属）胶乳。
木瓜蛋白酶是通过切割未成熟木瓜表皮，收集并干燥从切口中流出的胶乳得到的。
在不成熟的水果中木瓜蛋白酶的活性更高。
木瓜酶属于木瓜蛋白酶超家族，作为蛋白水解酶，木瓜蛋白酶在所有活的生物体是许多重要的生物过程中至关重要的物质（黄杨等人，1999）。
木瓜蛋白酶示在蛋白，短链肽，氨基酸酯和酰胺链接中表现出广泛的蛋白水解活性，并在食品和医学领域被广泛应用（尤利格，1998年）。
它优先切割的肽键包括碱性氨基酸，特别是精氨酸，赖氨酸和苯丙氨酸残留物（梅纳尔等人，1990年）。
木瓜蛋白酶的独特的结构有助于理解蛋白水解酶如何工作的并且达到多种生物学目的。
木瓜蛋白酶的应用简介
木瓜蛋白酶的应用简介木瓜蛋白酶在食品加工中的应用1木瓜蛋白酶的概述木瓜酶就是一种运用很广为的植物蛋白酶，纯天然，安全并无毒素，在食品加工业中应用领域广为，属食品添加剂，已在啤酒酿造和肉类嫩化等行业被广泛应用领域。
利用木瓜酶的酶促发展反应，可以把食品中的大分子的营养物质（例如蛋白质、脂肪、麦芽糖、纤维素等）水解成小分子的氨基酸或多肽等，存有助消化，不易人体稀释，十分适宜体弱多病或消化系统疾病患者的营养须要，更有利于老人、儿童、病人的消化吸收；木瓜酶能够有效率转变肉质汤料，用作生产高级便利食品。
可以做成肉类甜化剂、酒类回应剂、饼干吉化剂、高级口服液、保健食品、营养食品等。
由于酶促发展反应的专一特性，使应用领域木瓜酶制剂的食品加工过程中副产品极少，更易于产品的纯化和精简工艺步骤；木瓜酶反应条件保守、催化效率低、安全性低、能够有效率减少食品生产成本，提升食品质量，增加收入。
2木瓜蛋白酶的组成与结构未成熟番木瓜果实中所含木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶a、木瓜凝乳蛋白酶b、木瓜肽酶b等多种蛋白水解酶。
且未知4种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具备高度的同源性。
其中木瓜蛋白酶属于巯基蛋白酶可以水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨酸的羧基端，并能够优先水解在肽键的n端的具备2个羧基的氨基酸或芳香l氨基酸的肽键。
木瓜蛋白酶就是一种蛋白水解酶，分子量为27000u，由一种单肽链共同组成，所含212个氨基酸残基。
至少存有3个氨基酸残基存有于酶的活性中心部位，它们分别就是cys25、his159和asp158，另外6个半胱氨酸残基构成了三对二硫桥，且都无此活性部位。
3木瓜蛋白酶的制备及保存木瓜蛋白酶的制取就是将未成熟番木瓜果实生口乳液回去杂，在室温下重新加入半胱氨酸溶液在研钵中充份搓坯，静置后挑上清液即为为粗制酶，其水溶液呈圆形浑浊状，然后在通过Vergt回去卤的上清液中重新加入硫酸铵分级分离得结晶，重新加入半胱氨酸溶液后经盐析重结晶潮湿得精制酶。
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶的固定方法摘要：木瓜蛋白酶[ EC 3. 4. 22. 2 ]是一种重要的生化产品，在食品、医药工业中有广泛的用途, 还用于饲料、纺织及制革等领域[ 1 ]。
由于木瓜蛋白酶价格昂贵并且无法重复利用,促使人们研究和制备固定化木瓜蛋白酶。
此研究始于20世纪60年代初, 至今已有许多文献报道[ 2 ] 。
酶的固定化方法主要有：包埋法、吸附法、共价键结合法、交联法等,这些方法各有利弊[ 3 ]。
木瓜蛋白酶（Papain）简称木瓜酶，又称为木瓜酵素。
是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya）果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。
它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，还具有合成功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。
最适合PH值5.7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点18.75；最适合温度55～60℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
一、木瓜蛋白酶的固定方法1包埋法固定包埋法:将酶或含酶菌体包埋在多孔载体中,使酶固定化的方法称为包埋法。
凝胶包埋法是将酶包埋在各种凝胶内部的微孔中,制成一定形状的固定化酶的方法。
最常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、海藻酸钙、卡拉胶、聚丙烯酰胺等。
微胶囊包埋法是将酶包埋在高分子半透膜中,制成微胶囊固定化酶的方法。
1. 1 海藻酸钠- 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶( Immobilized papain on sodium alginate - chitosan,IPSAC)海藻酸是从褐藻提取的,是甘露糖醛酸以β-1, 4键相连接的多糖类物质,它是包埋酶较为理想的载体,其固定化方法较为简单,条件温和,操作可在室温下进行,酶很少失活。
木瓜蛋白酶的功效与作用
木瓜蛋白酶的功效与作用木瓜蛋白酶是从番木瓜里提取出来的，一般产于广西、广东、海南等地方。
木瓜蛋白酶不仅可以食用，还在美容行业、医疗行业都有一定的利用价值。
那么木瓜蛋白酶到底有哪些作用呢？木瓜蛋白酶的功效与作用1、木瓜蛋白酶是一种有用的消化酶，能帮助胃更好的分解蛋白质，并促进营养吸收。
例如，它对消化不良的人很有帮助。
2、它有溶解脂肪和软化皮肤作用。
此外，它还帮助清除死亡细胞并保持皮肤健康。
这也是这种酶广泛用于美容产品的原因所在。
3、它有抗炎作用，能抚慰肠胃并减轻水肿。
木瓜蛋白酶的抗炎特性还能治疗烧伤和唇疱疹。
4、木瓜蛋白酶能有效治疗胃溃疡，溶解白喉薄膜。
5、它的用途还包括治疗肿胀和擦伤，并能抑制手术后的肿胀和发烧。
6、木瓜蛋白酶能缓解不同的食物过敏，尤其对食物蛋白质不消化引起的问题最有效。
7、木瓜蛋白酶中的氨基酸能通过防止胃酸倒流，帮助减轻肠易激综合征症状。
8、后腰痛，扭伤和拉伤的患者可以将木瓜蛋白酶纳入饮食缓解不适。
此外，它还能减轻喉咙肿胀和窦性疼痛。
9、研究发现木瓜蛋白酶还是很好的免疫刺激剂，有助于加强免疫系统。
10、由于是一种蛋白水解酶，木瓜蛋白酶还能帮助应对肠道寄生虫。
此外，它还有分解食物蛋白质的作用。
木瓜蛋白酶是什么番木瓜未成熟果实中含有木瓜蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶A、木瓜凝乳蛋白酶B、木瓜肽酶B等多种蛋白水解酶。
且已知四种半胱氨酸蛋白酶的一级结构具有高度的同源性。
其中，木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶，可水解蛋白质和多肽中精氨酸和赖氨酸的羧基端，并能优先水解那些在肽键的N-端具有二个羧基的氨基酸或芳香L-氨基酸的肽键。
木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。
至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，当Cys25被氧化剂氧化或与金属离子结合时，酶的活力被抑制，而还原剂半胱氨酸（或亚硫酸盐）或EDTA能恢复酶的活力。
木瓜蛋白酶
在番木瓜的茎、叶中含有木瓜蛋白酶,但在实际生产中,主要是 从未成熟的生番木瓜果实中收集果皮创口流出的白色浆液,经 过加工提纯后得到。
生产工艺
提取与纯化途径： 1.主要流程：
番木瓜 (采集浆液)→浆液(过滤)→滤液(单宁法去杂质干燥)→ 粗酶制品(加半胱氨酸混合研磨)→研磨混合液(调PH后过滤)→滤液 (硫酸铵和氯化钠两次盐析) →盐析物(低温半胱氨酸溶液中结晶)→ 结晶体(重结晶) →精酶
木瓜蛋白酶的生产工艺和成本控制
木瓜蛋白酶(Papain), 又称木瓜酶，广泛存在于 番木瓜茎叶和果实中,以未成熟果实的乳汁中为最高。 它既有很强的蛋白水解催化活性又含凝乳和溶菌活性, 还具脂解能力及蛋白合成功能, 主要是催化蛋白质水 解, 也能分解小肽。它的切割分解点很多, 大致优先分 解精氨酶, 苯丙氨酸的肽键。又因其含量高、稳定性 好、能有效地分解明胶、酪蛋白、谷蛋白、弹性蛋白、 球蛋白和肌纤维蛋白等常用蛋白质，被广泛应用于肉 类嫩化、啤酒澄清、明胶制造、蚕茧脱胶、皮革脱毛 等工业，另外还在医学方面主要用于治疗消化不良、 各种炎症和水肿，防止腹膜粘连，处理血检及创伤脱 痂；此外，它还可以用于研究蛋白质结构等等。
最后,在果实外面套上一个比果实稍大的塑料 袋，并将其固定在果柄处,用于收集流出的浆液。 番木瓜开始采浆液后,就可以每隔5-8天,在没有刀 口的部位破皮采集浆液,直到番木瓜果皮开始变黄 为止。
2、番木瓜浆液的加工：
采集的番木瓜浆液要及时加工，一般不要超过24小时。 将木瓜乳汁倾入不锈钢锅中，在搅拌的条件下加入含0.1％四 乙酸乙二胺化二钠和0.3％氯化钠溶液，并加入还原剂 0.06mmol／L硫代硫酸钠和0.08mmol／L半胱氨酸的混合液， 混匀后过滤，收集滤液。再将浆液装入搪瓷浅盘中，浆液的深 度在8-12mm为好。最后，将搪瓷浅盘装入鼓风式热风干燥箱 中，在55-60℃的条件下对浆液进行热风干燥（如果条件允许， 最好是采用低温真空干燥法或喷雾干燥法进行干燥）。当浆液 的含水量下降至5-8%时，即可从搪瓷浅盘中取出片状的木瓜 蛋白酶，再经过粉碎,即可得到木瓜蛋白酶粗品。
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶活性测定方法及特点
1.以酪蛋白为底物的紫外分光光度法 （操作简 便,成本低,适于酶纯化过程中的活性比较、系 列产品的酶活性测定） 2.茚三酮显色法（操作烦琐,但所需仪器简单, 在条件简陋的地区也可以用） 3. BAEE(苯甲酰-L-精氨酸-乙酯)法（反应稳 定、重复性好,适于酶学性质的理论研究和试剂 酶的活性测定。 ）
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶的基本信息
木瓜蛋白酶（papain）简称木瓜酶，又 称为木瓜酵素，别名番木瓜酶,木瓜朊酶, 番瓜酵素，是一类琉基蛋白酶，广泛地 存在于番木瓜(Carie a p a p a y a)的根、 茎、叶和果实内其中在未成熟的乳汁中。 它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生 安全等特点 。
木瓜蛋白酶的固定化研究代生物技术的重要手段,利 用不同载体制备固定化木瓜蛋白酶,可以 大大节约用酶,并能反复利用。 我国在这一领域主要有两个方面 1.纤维素固定化木瓜蛋白酶的研究 2.琼脂固定化木瓜蛋白酶的研究
木瓜蛋白酶的应用
1.在食品行业中的应用：肉类嫩化，啤 酒澄抗寒……
木瓜蛋白酶的应用
2.在医药行业中的应用：治疗水肿、炎症、驱 虫、已经清除创面，加速伤口愈合…… 3.在纺织行业中的应用：可用于处理羊毛、蚕 蛹脱胶、蚕丝精炼，能达到手感柔软、舒适、 抗收缩、抗张强度等效果。 4.在皮革行业中的应用：利用木瓜蛋白酶制成 脱毛剂，鞣制皮革，具有毛孔细腻，皮纹光亮 效果。
取新鲜乳汁→搅拌使其液化并过滤→加入等量 含0.2 mmol/ EDTA, 1 mmol/ NaCl 和 0.04mol/ Cys的溶液,并混均→加入已溶解的 丹宁溶液至浓度达到0.1%,静置→用盐酸调pH 至3.4 → 离心→沉淀→真空干燥→粉碎后即得 粗酶。（用该法制备木瓜蛋白酶设备简单,投 资少, 而且酶稳定性好,适合用于食品及制革等对酶 纯度要求不高的工业。） 实验室用酶需进一步纯化
木瓜蛋白酶
定义2： 定义 ： 编号： 编号：EC 3.4.22.2。番木瓜中含有的一种低 。 特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸， 特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯 基蛋白酶，应用于啤酒及食品工业。 基蛋白酶，应用于啤酒及食品工业。
木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶， 木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水 蛋白水解酶 解为3个片段 个片段。 解为 个片段。是番木瓜中含有的一种低特异性蛋 白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶， 白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶， 应用于啤酒及食品工业。 应用于啤酒及食品工业。
木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、 木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能 分解蛋白质的蛋白酶。 分解蛋白质的蛋白酶。它的外观为白色至浅黄色的 粉末，微有吸湿性。 粉末，微有吸湿性。 酪蛋白被木瓜蛋白酶降解生成的酪氨酸在紫外 处有吸收峰。 光区 275nm 处有吸收峰。
木瓜蛋白酶（ 木瓜蛋白酶（Papain）简称木瓜酶，又称为木瓜 ）简称木瓜酶， 酵素。是利用未成熟的番木瓜（ 酵素。是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya） ） 果实中的乳汁，采用现代生物工程技术 生物工程技术提炼而成的 果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的 纯天然生物酶制品。 生物酶制品 纯天然生物酶制品。
Байду номын сангаас 谢 谢
3.美容化妆品工业应用： 美容化妆品工业应用： 美容化妆品工业应用 将木瓜蛋白酶加入到含有蛋白质和油脂的化妆品 具有独特的美白嫩肤、美颜保健、祛斑除污垢、 美白嫩肤 中，具有独特的美白嫩肤、美颜保健、祛斑除污垢、 促进血液循环、改善肌肤等功效，提高产品档次。 促进血液循环、改善肌肤等功效，提高产品档次。 可制成减肥茶、美容护肤品等。 可制成减肥茶、美容护肤品等。 4.日化品工业应用： 日化品工业应用： 日化品工业应用 用于香皂、肥皂、洗涤剂、洗衣粉、洗手液等， 用于香皂、肥皂、洗涤剂、洗衣粉、洗手液等， 去污力强，除菌消毒、安全放心。 去污力强，除菌消毒、安全放心。
木瓜蛋白酶的正确使用方法
木瓜蛋白酶的正确使用方法木瓜蛋白酶是一种天然的酶类蛋白质，在食品加工和医药领域有着广泛的应用。
它具有分解蛋白质的作用，能够帮助人体更好地消化食物，促进新陈代谢，增强免疫力。
然而，要充分发挥木瓜蛋白酶的作用，正确的使用方法至关重要。
本文将介绍木瓜蛋白酶的正确使用方法，希望能够帮助大家更好地使用这一天然酶类蛋白质。
首先，正确的存储木瓜蛋白酶非常重要。
木瓜蛋白酶应该存放在阴凉干燥的地方，远离阳光直射和高温环境。
避免暴露在空气中，以免受潮结块。
另外，木瓜蛋白酶应该远离有害气体和异味，以免受到污染影响品质。
其次，正确的使用木瓜蛋白酶需要注意其适用温度和pH值。
一般来说，木瓜蛋白酶的最适工作温度为50-60摄氏度，pH值为6-8。
在使用过程中，要根据具体情况控制好温度和pH值，以确保木瓜蛋白酶的活性和稳定性。
另外，正确的使用木瓜蛋白酶需要根据具体的应用领域和需求进行配比和添加。
在食品加工中，可以根据食品的种类和加工工艺确定木瓜蛋白酶的添加量和添加时间；在医药领域，需要根据药物的性质和用途确定木瓜蛋白酶的使用方法和剂量。
此外，正确的使用木瓜蛋白酶还需要注意其作用时间和作用条件。
木瓜蛋白酶的作用时间一般为30分钟至数小时不等，具体取决于温度、pH值和添加量等因素。
在使用过程中，要根据具体情况确定作用时间和作用条件，以达到最佳的效果。
最后，正确的使用木瓜蛋白酶需要注意其安全性和卫生问题。
在使用过程中，要严格遵守相关的操作规程和安全规定，做好个人防护，避免接触皮肤和呼吸道。
同时，要保持操作场所的清洁和卫生，避免污染和交叉感染。
总之，木瓜蛋白酶作为一种天然的酶类蛋白质，在食品加工和医药领域有着广泛的应用前景。
正确的使用方法可以帮助我们充分发挥其作用，提高生产效率，改善产品质量，受益医药健康。
希望本文介绍的木瓜蛋白酶的正确使用方法能够对大家有所帮助，更好地应用这一天然酶类蛋白质。
木瓜蛋白酶
木瓜蛋白酶在食品中的应用木瓜蛋白酶, 又称木瓜酶,源于番木瓜末成熟的果实。
国际上作工业用途的木瓜酶都指末纯化品, 是成分复杂的多酶体系, 蛋白电泳带多在 5 条以上; 其中含木瓜蛋白酶, 木瓜乳蛋白酶A和B,木瓜肽酶A。
它既有很强的蛋白水解催化活性又含凝乳和溶菌活性，还具脂解能力及蛋白合成功能, 主要是催化蛋白质水解, 也能分解小肽。
它的切割分点很多, 大致优先分解精氨酶, 苯丙氨酸的肽键。
目前应用较多的是它的蛋白分解活性和凝乳作用。
最适pH6.0～8.0, 最适温度70℃左右, 半胱氨酶, 硫化物, 亚硫酸盐,二胺四乙酸能增加它的功效, 人们常用此物质促进它作用。
表面活性物质（如去污剂、洗衣粉）, 氧化剂（如双氧水）, 有机溶剂（如石油醚、酒精）, 重金属盐, 强酸、强碱乃至抗坏血酸, 及各种微生物污染都能使它失活, 应尽量避免接触。
木瓜酶广泛应用于轻纺、食品、啤酒、饲料、化工及医药。
在我国，木瓜种植主要分布在广西的横县和邕宁县等地，属于广西特产水果，因此，木瓜蛋白酶生产厂家主要集中在广西南宁市，木瓜蛋白酶的生产和研究有将近20年的时间。
本文主要论述其在食品中的作用。
豆类食品大豆蛋白营养价值较高其中必需氨基酸含量在植物蛋白中较为合理，并有良好的胶凝乳化起泡能力。
但大豆蛋白在使用过程中存在着在等电点易沉淀，粘度随浓度增高而迅速升高等不利因素。
研究发现，用酶改性来改善大豆蛋白的理化性质效果较好。
木瓜蛋白酶适用于大豆蛋白改性，但水解效率较低、易失活。
为充分发挥木瓜蛋白酶的水解效率，添加半胱胺酸、亚硫酸钠、异VC钠等添加剂对其起到保护作用。
吴建中等研究木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳条件是：水解温度50摄氏度，底物浓度4.5%-8%，酶与底物之比为8000U/g，半胱氨酸浓度为0.25%，反应时间150-200min。
并发现半胱胺酸能显著地提高木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白的水解作用。
在传统的豆腐制作工艺中采用加热法使大豆蛋白质展开。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究木瓜蛋白酶是一种天然的酶类催化剂，广泛应用于医疗器械清洗中。
它具有高效、安全、环保等特点，在去除器械表面蛋白质残留方面表现出卓越的效果。
本文将探讨木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究，包括其特性、机理及实际应用。
首先，我们来了解一下木瓜蛋白酶的特性。
木瓜蛋白酶是从木瓜果实中提取的酶，主要是一种混合酶，包括内蛋白酶、分蛋白酶和胰蛋白酶等多种酶。
它具有较广的工作温度范围，能在较低的温度下也能发挥良好的清洁效果。
此外，木瓜蛋白酶对不同类型的蛋白质残留有较强的降解能力，具有良好的清洁效果。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用主要是基于其降解蛋白质的作用。
在清洗过程中，医疗器械表面会残留一些蛋白质，这些蛋白质对器械的使用安全构成威胁。
木瓜蛋白酶可以针对这些残留蛋白质进行降解，彻底清除表面的污垢，从而确保器械的清洁度和卫生安全。
相比传统的清洗方法，木瓜蛋白酶能更加高效、安全地去除蛋白质残留，提高清洗效果。
木瓜蛋白酶的降解机理是通过与蛋白质相互作用，降低蛋白质的分子量从而实现蛋白质残留的去除。
木瓜蛋白酶能与蛋白质中的特定位点结合，将蛋白质分子切割成较小的碎片，同时释放出新的氨基酸。
这些碎片易于清洗剂迅速清洗掉，从而完成了对蛋白质的有效降解和去除。
此外，木瓜蛋白酶还能与其他清洁剂协同作用，提高清洁效果。
在实际应用中，木瓜蛋白酶的使用方法相对简单。
首先，将木瓜蛋白酶制剂溶解在适量的水中，形成清洁液。
然后，将器械浸泡在清洁液中，经过一定时间的浸泡，木瓜蛋白酶能够充分降解蛋白质残留。
最后，用清水对器械进行彻底的冲洗，以确保木瓜蛋白酶及其降解产物完全去除。
需要注意的是，使用木瓜蛋白酶清洗器械时，应根据器械材质和设计选择适当的清洗剂和方法，避免对器械造成损害。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用具有一系列优势。
首先，木瓜蛋白酶是从天然植物中提取的酶，安全无毒，对人体和环境无害。
其次，木瓜蛋白酶具有较高的催化活性和降解能力，能够快速有效地清除蛋白质残留，提高清洗效果。
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食品添加剂木瓜蛋白酶学院:食品与营养工程学院专业:食品加工班级:食工102学号:010*******姓名:王瑞真木瓜蛋白酶木瓜蛋白酶又称木瓜酶，是一类疏基蛋白酶。
广泛存在与番木瓜的根、茎、叶和果实内，在未成熟的乳汁中含量最丰富。
它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特色，因此在食品、医药、饲料、皮革及纺织等行业得到广泛应用[1]。
一、木瓜蛋白的组分工业用的木瓜蛋白酶一般都是未经纯化的多酶体系。
由木瓜乳胶提取粗制酶,除含有木瓜蛋白酶外,还含有半耽氨酸蛋白酶、纤维素酶、溶菌酶、谷氨酞胺以及低相对分子质量的疏基化合物,还有葡萄糖酶等。
其中大部分都是疏基蛋白酶,主要的两种组分是木瓜凝乳酶和木瓜蛋白酶[2]。
二、木瓜蛋白的结构木瓜乳汁中四种已知半肤氨酸蛋白酶的一级结构具有高度同源性,其氨基酸数目和同源性比较如表1所示。
除chymopapain含有8个半肤氨酸外,其余三种酶都只含有7个半肤氨酸。
25位的流基是活性位点,不参与二硫键的形成（chymopapain的117位琉基也不参与二硫键的形成 ）,其余疏基以相同的方式形成三个二硫键，具有同样的保守性。
人们在不同清晰下得到了四种酶的X 一射线结构。
四种酶的肤链折叠方式相似,形成两个大小相、构型不同的区域。
一个是由a一螺旋构成的L一区,另一个是由大量反向平行的片层构成的R一区。
活性位点氨基酸残基Cys25,Asn179和His159 就位于这些区域的表面,其中Cys25位于 L一区,起始a一螺旋上。
木瓜蛋白酶家族的Cys25 ，Gly23，Gly65 形成的S。
亚部位是一个大口袋，对底物专一性影响较小；S亚部位由于酶不同其氨基酸组成不同,几何形状亦不同,对酶的性质影响较大[3]。
三、木瓜蛋白酶的提取工艺1.过去的常规提取方法木瓜蛋白酶最原始的提取方法是烘干法，就是在番木瓜浆液中加入保护剂，然后将浆液离心取上清液放置于鼓风干燥箱中，在55～60℃烘干，粉碎后即得到粗酶制品。
乙引等用这种方法所获得的酶得率为23.1%，但此法不利于酶活的保持，其酶活力仅为0.16×105U/g，而且产品的纯度较低[4]。
木瓜蛋白酶的提取也曾广泛采用单宁沉淀法，乙引等用单宁沉淀法提取了木瓜蛋白酶。
先将番木瓜乳汁离心，于上清液中缓慢加入已溶解的单宁溶液，不断搅拌，使溶液中单宁达到一定浓度。
静置，沉淀单宁-酶复合物，调节pH值，沉淀后进行真空干燥，得到酶制品。
结果表明，这种方法生产的酶得率较低，仅有7.3%，但酶活力较高，为3.53×105U/g。
但是这种方法存在环境污染等问题。
2.目前较为常见的提取方法目前生产中多采用超滤、絮凝、盐析等方法分离提取木瓜蛋白酶。
2.1 超滤法提取木瓜蛋白酶刘叶青等用超滤技术纯化木瓜蛋白酶。
先将中空纤维超滤膜洗净, 然后取一定量絮凝处理后之清液, 控制一定压力和流量, 进行超滤。
在超滤过程中被截留, 而水及小分子杂质透过膜, 从而达到浓缩和纯化的目的, 试验截留率可达93% 以上。
超滤过程操作条件温和, 无相变化，不易引起生化物质破坏, 是一种较好的分离技术[5]。
2.2 盐析法提取木瓜蛋白酶王丽彬等曾用硫酸铵沉淀法分离木瓜蛋白酶。
在粗酶液中加入一定浓度的硫酸铵溶液进行盐析，然后调pH值，离心取沉淀，干燥，得酶产品。
实验结果表明，用该法制备的木瓜蛋酶纯度相对较高，酶的比活力达到了1184U/mg，适宜作为化妆品成分。
但这种方法由于用了大量的盐，使酶中灰分增加，同时降低了木瓜蛋白酶的活性。
因此，盐析法并不是理想的木瓜蛋白酶提取方法[6]。
2.3絮凝法分离纯化木瓜蛋白酶絮凝法是在木瓜乳胶水提取液中添加某种化合物，该化合物能与木瓜蛋白酶生成难溶性的复合物，从而使酶从溶液中沉淀析出。
何继等研究了用絮凝技术纯化木瓜蛋白酶。
实验结果表明，在适宜的条件下进行絮凝处理，可使木瓜蛋白酶在这步的收率达95～97%。
但这种方法提取专一性不强，制得的木瓜蛋白酶纯度不高，杂质含量较高[7]。
3木瓜蛋白酶的提取新技术3.1超声波法提取木瓜蛋白酶超声波提取法作为一种新型的提取技术已经比较广泛地应用于天然植物有效成分的提取。
超声波产生的空化效应，一方面赋予溶剂对细胞壁更大的渗透力，并强化细胞内外的质量传输，另一方面破坏细胞壁，使细胞内含物更易释放，从而强化了提取过程。
4.木瓜蛋白酶的固定化研究固定化酶是近代生物技术的重要手段,利用不同载体制备固定化木瓜蛋白酶,可以大大节约用酶,并能反复利用.目前国外已开始在酿造、牛奶加工等多种领域中广泛应用。
我国在这一领域尚处于试验阶段。
大力开发固定化木瓜蛋白酶的系列产品,已成为当务之急[8]。
酶的固定化方法主要有: 吸附法、包埋法、共价键结合法、交联法等。
这些方法各有利弊。
载体材料作为固定化酶的重要部分, 其结构和性能对固定化酶的酶学性质产生很大的影响[9]。
四、木瓜蛋白酶的应用进展木瓜蛋白酶具有较强的蛋白酶水解能力，还具有凝乳、解脂和溶菌活力，是能作用与各类蛋白质的纯天然产物。
具有耐高温、活性强、稳定性好、蛋白质水解能力强等特性，对PH变化和金属离子及去垢剂不敏感，用途很多，目前已广泛的应用于各个行业。
1.在食品行业的应用1.1 肉类嫩化在肉类加工中，木瓜蛋白酶是最好的肉类嫩化剂[10]，这是因为木瓜蛋白酶与其他蛋白酶相比，其热稳定性较高。
一般蛋白酶在较低温度时即失活，而肉类结缔组织中胶原蛋白和弹性蛋白在60度以上开始变性，并变的容易被木瓜蛋白酶降解，而且70度断裂最多，木瓜蛋白酶对肉类在40-70度温度范围内有最强的活性，而嫩化作用主要发生在当肉类被烧煮，温度逐渐升高，而酶还没有完全失活这个阶段。
所以在肉类嫩化中，使用最多的是木瓜蛋白酶。
1.2改良啤酒品质采用木瓜蛋白酶处理冷冻贮存过程中的啤酒，能有效防止冷冻浑浊的形成，保证啤酒的高清晰度和良好的外观，提高啤酒泡沫覆盖度；同时，还可以提高啤酒的营养价值。
当木瓜蛋白酶的浓度为0.08mg/(100ml)时，对啤酒的澄清效果最佳，并能够改变各种游离氨基酸的含量，除His和Pro外，所以氨基酸含量均有不同程度增加。
因此木瓜蛋白酶可用作啤酒的澄清剂、稳定剂，并可改善啤酒的营养成分[11]。
1.3处理葡萄酒中非稳定性蛋白利用木瓜蛋白酶水解白葡萄酒中的不稳定蛋白，以提高葡萄酒的稳定性，同时增加酒的营养价值通过查阅大量文献及参考实际生产情况，采用测定酶处理后的白葡萄酒中的蛋白质含量来确定最佳酶反应条件木瓜蛋白酶可以对影响葡萄酒稳定性的蛋白质进行水解，来解决白葡萄酒的稳定性[12]。
1.3松化饼干以木瓜蛋白酶为主要成分的饼干松化剂，能降低面团筋度、提高饼干疏松度、成形性好、花纹清晰、碎饼率低，成品光泽度增加。
饼干质地疏松，口感舒适，此外还可减少油脂和糖的用量。
适合各种风味的高、中、低档饼干、糕点及面包的制造。
1.4改性豆类制品大豆蛋白营养价值较高，其中必须氨基酸含量在植物蛋白中较为合理，采用木瓜蛋白酶可以提高大豆分离蛋白的水解作用，克服了一般酶水解法效率较低、易失活的不足，且改性产品口味较好。
木瓜蛋白酶在特定条件下，体系中游离氨基酸和蛋白质表面疏水性发生变化，在大豆蛋白质凝固的反应中起重要作用，可促进豆腐凝胶的形成[13]。
1.5在饮料制作中的应用张驰等利用木瓜蛋白酶进行莼菜饮料的研制，莼菜一定温度烫漂杀青一定时间后搅碎打浆，用一定浓度的Vc护色，以木瓜蛋白酶作用于莼菜浆液一定时间，以加倍水进行沸水浴提取一定时间，调配后可制成具有良好风味和优良品质的莼菜饮料。
1.6提高谷朊粉乳化性实验证明[14]木瓜蛋白酶对谷朊粉的乳化性和溶解度的提高有显著作用，最佳条件为：谷朊粉质量分数为11.0%，酶浓度为25uL/g谷朊粉，反应时间为20h,pH 为7.0，反应温度为55度。
在此条件下测得的改性谷朊粉的乳化活性为72.4%，乳化稳定性为75.5%，水解度为3.5%。
1.7用于营养保健品木瓜蛋白酶用于保健食品的一种途径是辅助消化, 另一种途径是将蚂蚁等昆虫的特殊蛋白源食品分解制成各种营养保健液[15]。
1.8木瓜蛋白酶水解玉米胚芽蛋白张鸣镝等利用胰蛋白酶水解玉米胚芽蛋白,水解度为1014%。
利用木瓜蛋白酶对玉米胚芽蛋白进行水解,可使其变成可溶的肽类而被提取出来,水解度较高且制得的水解液无苦味[16]。
2、在化学方面的应用2.1促进中药成分煎出用木瓜蛋白酶预处理补骨脂粉后煎提,与普通煎煮法比较，煎液总氮量提高了2倍，磷脂提高了4倍，补骨脂素、异补骨脂素提高了近1倍。
结果提示，蛋白酶水解蛋白质的同时，促进了磷脂的溶出，发挥增溶作用，最终导致各种有效成分煎出量增加[17]。
2.2降解壳聚糖壳聚糖是年产量仅次于纤维素的第二大天然高分子，低壳聚糖是壳聚糖的降解产物，它有独特、优越的生于活性和理化性质。
木瓜蛋白酶价格便宜且稳定性好，对壳聚糖的降解效率很高。
结果表明[18]测定木瓜蛋白酶降解壳聚糖的较佳条件是底物浓度0. 5%、pH4. 0、40℃,酶底物比10%。
在最适条件下木瓜蛋白酶降解壳聚糖时,起始降解速率很快,特别在30min内导致粘度下降百分比达到70. 77%, 1h之后粘度变化平缓[19]。
3.在医疗方面的应用3.1医药方面3.1.1治疗皮肤溃疡可以清除挫伤、切断伤、烧烫伤等各种皮肤表面的溃疡，可以有效去除腐烂组织而防止皮肤的感染，而对健康组织无影响[20]。
3.1.2辅助Rh血型的鉴定用木瓜蛋白酶法对Rh血型的抗D、抗E抗体等的免疫初期具有良好的检出力。
在木瓜蛋白酶交叉配血中发现了1例木瓜蛋白酶型抗C、抗E抗体。
3.1.3建立关节炎实验模型将木管蛋白酶注入新西兰大鼠的关节内，经连续三次注射，大鼠的关节在12周内出现了慢性关节炎的症状。
3.2兽医方面华南农业大学与广西亚热带作物研究所协作，用木瓜蛋白酶、抗菌素和凡士林作膏剂，对百多例深层蹄心部化脓性外伤的奶牛进行治疗，酶将严重阻隔药物进入的疮痂分解，令抗菌素直接接触及创面细菌，治愈了广州朱村奶牛场病患达几个月的顽固蹄腐病牛，开创了木瓜蛋白酶兽药的先河[7]。
在其他方面的应用4.1在纺织工业中的应用由于木瓜蛋白酶只溶解丝胶而对纤维蛋白全无作用，所以能令丝织物等滑爽柔软。
4.2在化妆品工业方面木瓜蛋白酶有溶解死细胞的能力，加入化妆品可消除黑斑、雀斑，有美化肌肤的功效;可处理坏死组织和伤疤、治疗粉刺、脱毛和皮肤净化。
五．展望目前，木瓜蛋白酶被广泛地应用于食品行业，如肉类、啤酒、调味品等的生产。
随着我国人民生活水平的提高，人们对食品安全和食品营养的问题越来越注，而木瓜蛋白酶可用来生产安全、营养的食品，如具有保健功能的口服液等，具有良好的市场前景。
同时，为了满足各行各业对木瓜蛋白酶的需求，尤其是食品与医药行业，研究如何分离纯化得到成本低、纯度高的木瓜蛋白酶就很有意义。