微生物实验基础知识考核试卷含答案

微生物实验基础知识考核试卷
一、填空题（28分）
1．总大肠菌群多管发酵法测定的复发酵试验，是每一管接种完同一发酵管的最典型菌落l～3个后，将发酵管置于℃恒温箱中，培养 h，有产酸产气者，则证实有大肠菌群存在。

①
答案：37 24
2．总大肠菌群多管发酵法测定的步骤分为、和。

答案：初发酵试验平板分离复发酵试验
3．总大肠菌群测定的滤膜灭菌是将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水后置于沸水浴中煮沸灭菌：次，每次 min，前两次煮沸后需更换水洗涤2～3次，以除去残留溶剂；也可用1 2 l℃蒸汽灭菌1 0min。

②
答案：3 1 5
4. 细菌总数的菌落数在100以内按报告，大于100时采用两位有效数字，用表示，在报告菌落数为无法计数时，应注明水样的稀释度。

答案：实有数 10的指数
6．用于细菌学检测的吸管上端要用填塞，并注意，使其快速、准确流出所用体积。

答案：普通棉花松紧适度
7．测定水中细菌学指标的采样瓶口用牛皮纸等防潮纸包扎后，置于干燥箱中，于℃干热灭菌2 h，或用高压蒸汽灭菌器℃灭菌15 min；不能用加热方法灭菌的塑料瓶，应浸泡在O．5％过氧乙酸lO min或环氧乙烷气体进行低温灭菌；聚丙烯耐热塑料瓶，可用℃高压蒸汽灭菌器灭菌1 5 mina
答案：1 60～1 70 12 1 12 1
8．测定自来水样中的细菌学指标时，采水前将水龙头开至最大，放水 min，然后关闭水龙头，用酒精灯火焰灼烧约 Inin消毒水龙头或用75％酒精溶液消毒水龙头，再打开水龙头、开足放水l min，以充分去除水管中的滞留杂质。

答案：3～5 3。

9．测定水样中细菌学指标时，从取样到检验不宜超过 h，否则应使用1 0℃以下冷藏设备保存样品，但不得超过。

答案：2 6
10．分层检测地表水中的细菌学指标时，应自而（方向）进行采样，以免不同层次的搅扰；与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品。

答案：上下
11．配制好的用于细菌学检测的培养基，不宜保存过久，以少量勤配为宜。

每批应注明，已灭菌的培养基可在4～10℃存放一个月，存放时应避免阳光直射，并且要避免和液体蒸发。

答案：专配制日期杂菌侵入
12．总大肠菌群多管发酵法测定的复发酵试验，是每一管接种完同一发酵管的最典型菌落l～3个后，将发酵管置于℃恒温箱中，培养 h，有产酸产气者，则证实有大肠菌群存在。

①
答案：37 24
13．总大肠菌群多管发酵法测定的步骤分为、和。

答案：初发酵试验平板分离复发酵试验
14．总大肠菌群测定的滤膜灭菌是将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水后置于沸水浴中煮沸灭菌：次，每次 min，前两次煮沸后需更换水洗涤2～3次，以除去残留溶剂；也可用1 2 l℃蒸汽灭菌1 0min。

②
答案：3 1 5
二、判断题（20分）
1．细菌总数培养后，应立即进行细菌总数平皿菌落计数，如果计数必须暂缓进行，应将平皿存放于5～1 0℃冰箱内，且不超过24 h。

（）
答案：正确
2．细菌总数菌落计数在求同稀释度的平均数时，如果其中一个平皿有大片状的菌落生长，不宜采用，而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的菌落数。

（）
答案：正确
3．检测水中的细菌学指标时，每次试验要以无菌水为样品，对培养基、滤膜、
玻璃器皿和冲洗用水做无菌性检验。

（）
答案：正确
4．新购置的用于细菌学指标测定的玻璃器皿，因含游离碱，应先在2％盐酸中浸泡数小时，用自来水冲洗干净后，再用蒸馏水冲洗1～2次沥干备用。

（）答案：正确
5．培养细菌的玻璃器皿，应先经灭菌，倒出培养基，用肥皂水或洗涤剂刷洗残渍，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗l～2次，沥干备用。

（）
答案：正确
6．细菌学检测用的高压蒸汽灭菌器，每次使用时，在压力上升之前，必须先用蒸汽将器内的冷空气完全驱尽，并要记录温度、气压和灭菌的时间。

（）
答案：正确
7．采集细菌学检测的水样时，不需用水清洗已灭菌的采样瓶，一般采样量为采样瓶容量的80％左右，以便接种时充分混匀样品。

（）
答案：正确
8．制备大量培养基时，除玻璃器皿外，还可用搪瓷桶或铝锅等容器，但不可用铜或铁锅，以免金属离子进入培养基中影响细菌生长。

（）
答案：正确
9．对受污染严重的水体样品，如果在初发酵中未发现产气，则应将其培养到48 h，然后再进一步证实有无大肠菌类细菌。

（）③
答案：正确．
10．粪大肠菌群多管发酵法的复发酵试验，是将培养物转接到EC培养液中，在35℃下培养24 h。

（）
答案：错误
正确答案为：应在（44．5 4-0．5）℃温度下培养（24 4-2）h。

三、选择题（12分）
1．细菌总数监测中，若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则细菌总数菌落计数应报告。

（）
A．按稀释倍数最大的平均菌落数乘以稀释倍数
B．按稀释倍数最小的平均菌落数乘以稀释倍数
C．任选一个稀释倍数的平均菌落数乘以稀释倍数
答案：A
2．报告细菌总数测定结果时，首先应选择菌落数进行计算。

（）
A．<300 B．30～300 C．>300
答案：B
3．测定含有高浓度重金属水样中的细菌学指标时，在灭菌前要在采样瓶中加入螯合剂，以减少金属毒性。

按500 ml采样瓶计，加入螯合剂的浓度和体积为。

（）
A．1 5％EDTA，1 ml B．1％EDTA，1 5 ml C．1 5％EDTA，l 0 ml
答案：A
4．为去除水中余氯对细菌学指标检测的干扰，在灭菌前要向采样瓶中加入足量的硫代硫酸钠，按500 ml采样瓶计，加入1 0％硫代硫酸钠的体积为皿。

（）A．3 B．O．3 C．1
答案：B
5．用于测定细菌学指标的培养基，，配制好以后不宜保存过久，已灭菌的培养基可在4～1 0℃保存。

（）
A．1 0 d B．一个月 C．三个月
答案：B
6. 滤膜法测定水中总大肠菌群和粪大肠菌群时，放置滤膜的操作应为；用已灭菌的镊子夹取灭菌滤膜的边缘，将其，贴放在已灭菌的滤床上，稳妥地固定好滤器。

（）
A．粗糙面向下 B．粗糙面向上
答案：B
四、简答题（40分）
1．简述如何进行培养基的质量控制。

答案：培养基的质量控制主要包括以下内容：（1）每批培养基在使用前，需经无菌检验。

可将培养基在37℃温箱内培养24 h，证明无菌，同时再用已知菌种检查在此培养基上的生长情况，符合后方可使用。

（2）对每批培养基要做阳性和阴性对照培养检查试验。

（3）配制每批培养基都要做好记录，包
括配制日期和橱培养基名称、成分、pH值，灭菌条件，配制方法，配制人员等；配好的培捐不宜久放，以少量勤配为宜．
2．简述多管发酵法测定水源水中总大肠菌群的初发酵操作步骤。

①
答案：（1）将水样做1：1 0稀释。

（2）在各装有5 ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管）各加入1 0 ml水样；在各装有1 0 ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管）各加入1 ml水样；在各装有1 0 ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管）各加入l ml l"1 0的稀释的水样。

（3）将各管充分混匀，置37℃恒温箱培养24 h。

3．简述总大肠菌群革兰氏染色的操作步骤及主要注意事项。

①②③
答案：（1）操作步骤依次为：涂片，固定，结晶紫染色，水洗，碘液媒染，水洗，酒精脱色，水洗，番红复染，水洗，干燥，镜检（低倍镜_油镜）。

（2）应注意：涂片：涂片要使菌体薄而且均匀；固定：应自然风干或微热促干，然后在火焰上通过1～2次；酒精脱色：用95％酒精脱色，直到酒精不出现紫色时即停止；同时应注意控制各步骤的操作时间。

4．测定细菌学指标的水样应如何保存?
答案：采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。

一般从取样到检验不宜超过2 h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6 h。

实验室接样后，应将水样立即放入冰箱，并在2 h内着手检验。

如因路途遥远，送检时间超过6 h者，则应考虑现场检验或用延迟培养法。