实验五放线菌形态观察
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实验五放线菌形态观察
Filamentous Actinomycetes
Typical appearance of a streptomycete growing on agar slants
The colors are due to the production of pigments
实验五放线菌形态观察
调节亮度 直接镜检
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
Filamentous Actinomycetes
Stages in the conversion of a streptomycete’s(链霉菌) aerial hypha into spores (conidia)
实验五放线菌形态观察
Filamentous Actinomycetes
Antibiotic action of soil microorganisms on a crowded plate
实验五放线菌形态观察
streptomycetes Bacillus
插片法
1.倒平板 2.接种：划线培养 3.插片：无菌操作将盖玻片以大约45度角插入培养基 4.培养 倒置培养28℃ ，通常4－6天 5.镜检
实验五放线菌形态观察
(1)链霉菌属（Streptomyces）
分枝菌丝 孢子体或气生菌丝 菌丝无横隔 好氧 原核生物 降解高分子底物 生长条件简单 抗生素
实验五放线菌形态观察
(2)棒状杆菌属（Corynrbacterium） 谷氨酸棒杆菌（C. glutamicum）
味精生产菌 氨基酸生物合成调节机制
实验五放线菌形态观察
插片法
28℃插片培养4-6d，轻轻取出盖玻 片，直接观察镜检。
观察菌丝和孢子丝自然生长的性状， 其中包括气生菌丝（较粗）、基内 菌丝（较细）和孢子丝的形状，如 分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘 图说明（本实验采用费氏轮生菌接 种后观察 ）。
首先寻找插在培养基的界面分界线， 观察营养菌丝、气生菌丝形态及分 枝情况。
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
浸染法放线菌形态观察
插片培养(高氏1号培养基)，取片 浸染： 把盖玻片上长有放线菌的部分，放入石碳酸复红染
液池中浸染0.5-1 min
染色液：A液：碱性复红 0.3g, 95%乙醇 10ml；B液：石碳酸 5.0g, 蒸馏水95ml。
实验五放线菌形态观察
青霉、黑曲霉 培养小室准备（干热灭菌） 无菌操作 半固体察氏培养基分别滴在载玻片两端 接菌种（孢子） 盖上盖玻片 吸入无菌水2-3ml（or 20％甘油） 28度培养
实验五放线菌形态观察
印片法放线菌菌丝（100 × ）
印片法放线菌孢子（实10验0 五×放）线菌形态观察
印片法放线菌孢子（100 × ）
浸染法放线菌形态观察
取片－石碳酸复红浸染0.5-1 min －干燥： 注意温度不宜高 －镜检： 滴入适量蒸馏水，将盖玻片放在滴有蒸馏水的地
方，有菌的一面朝上，显微观察。
实验五放线菌形态观察
插片法放线菌菌丝（ 40 × ）
插片法浸染法菌丝（ 40 × ）
插片法浸染法放线菌孢子实（验五10放0 ×线菌）形态观察
插片法浸染法放线菌孢子（ 100 × ）
印片染色法
1.接种培养 28℃培养4－7d 2.印片： 用镊子取一小块菌苔，置于载玻片上，取另
外一洁净玻片盖在菌苔上，轻轻粘一下菌苔表面，使 培养物（气丝、孢子丝、孢子）粘附载玻片中央，过 火焰2－3次固定 3.染色：石炭酸复红染色1min，水洗 4.镜检（油镜）.
放线菌形态的观察
实验五放线菌形态观察
放线菌形态的观察
目的要求 实验材料 实验程序 思考题
实验五放线菌形态观察
目的要求
学习观察放线菌的基本方法 加深理解放线菌的形态特征
实验五放线菌形态观察
实验材料
放线菌培养物：费氏链霉菌（Streptomyces fradiae ）或 “5406”产生菌（St. microflacus）细黄链霉菌四天培养物。
实验五放线菌形态观察
Various types of spore-bearing structures in the streptomycetes
实验五放线菌形态观察
Filamentous A百度文库tinomycetes
Several spore-bearing structures of actinomycetes: Streptomyces
染色时，混合A液及B液，再将混合液稀释5倍即成。
干燥： 染色完毕，用吸水纸吸掉盖玻片上多余的染液，将 盖玻片放于酒精灯火焰上部烘干，注意温度不宜高，以免 盖玻片碎裂。
镜检： 取一洁净载玻片，滴入适量蒸馏水，用镊子将干燥 好的盖玻片放在滴有蒸馏水的地方，有菌的一面朝上，操 作中尽量避免气泡的产生。盖玻片紧紧地贴附在载玻片上 后，切勿随意移动，随即进行显微观察。
印片染色法
载玻片－印片－ 固定 －石炭酸复红染色1min －水洗 －晾干－油镜
5406菌孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲 等，并绘图说明。
实验五放线菌形态观察
思考题
在用插片法观察气生菌丝和孢子丝的形态时， 要注意些什么？
实验五放线菌形态观察
结束
实验五放线菌形态观察
实验
霉菌的载片培养
显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊 子等。
酒精、蒸馏水等。
实验五放线菌形态观察
G＋
GC含量高（和另一类阳性菌——厚壁菌门相比）
好氧、少部分寄生兼性厌氧
放线菌重要的属有：
放线菌属(Actinomyces) 节杆菌属(Arthrobacter) 棒杆菌属(Corynebacterium) 弗兰克氏菌属(Frankia) 微球菌属(Micrococcus) 微单孢菌属(Micromonospora) 分枝杆菌属(Mycobacterium)
白喉棒状杆菌（C.diphtheriae）
实验五放线菌形态观察
(3)分枝杆菌属(Mycobacterium)
不规则杆状菌 抗酸性染色 细胞壁含有大量的脂类和分枝菌酸 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌
实验五放线菌形态观察
抗生素
链霉素
灰色链霉菌（Streptomyces griseus）
四环素 红霉素 新霉素 庆大霉素
Filamentous Actinomycetes
Typical appearance of a streptomycete growing on agar slants
The colors are due to the production of pigments
实验五放线菌形态观察
调节亮度 直接镜检
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
Filamentous Actinomycetes
Stages in the conversion of a streptomycete’s(链霉菌) aerial hypha into spores (conidia)
实验五放线菌形态观察
Filamentous Actinomycetes
Antibiotic action of soil microorganisms on a crowded plate
实验五放线菌形态观察
streptomycetes Bacillus
插片法
1.倒平板 2.接种：划线培养 3.插片：无菌操作将盖玻片以大约45度角插入培养基 4.培养 倒置培养28℃ ，通常4－6天 5.镜检
实验五放线菌形态观察
(1)链霉菌属（Streptomyces）
分枝菌丝 孢子体或气生菌丝 菌丝无横隔 好氧 原核生物 降解高分子底物 生长条件简单 抗生素
实验五放线菌形态观察
(2)棒状杆菌属（Corynrbacterium） 谷氨酸棒杆菌（C. glutamicum）
味精生产菌 氨基酸生物合成调节机制
实验五放线菌形态观察
插片法
28℃插片培养4-6d，轻轻取出盖玻 片，直接观察镜检。
观察菌丝和孢子丝自然生长的性状， 其中包括气生菌丝（较粗）、基内 菌丝（较细）和孢子丝的形状，如 分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘 图说明（本实验采用费氏轮生菌接 种后观察 ）。
首先寻找插在培养基的界面分界线， 观察营养菌丝、气生菌丝形态及分 枝情况。
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
实验五放线菌形态观察
浸染法放线菌形态观察
插片培养(高氏1号培养基)，取片 浸染： 把盖玻片上长有放线菌的部分，放入石碳酸复红染
液池中浸染0.5-1 min
染色液：A液：碱性复红 0.3g, 95%乙醇 10ml；B液：石碳酸 5.0g, 蒸馏水95ml。
实验五放线菌形态观察
青霉、黑曲霉 培养小室准备（干热灭菌） 无菌操作 半固体察氏培养基分别滴在载玻片两端 接菌种（孢子） 盖上盖玻片 吸入无菌水2-3ml（or 20％甘油） 28度培养
实验五放线菌形态观察
印片法放线菌菌丝（100 × ）
印片法放线菌孢子（实10验0 五×放）线菌形态观察
印片法放线菌孢子（100 × ）
浸染法放线菌形态观察
取片－石碳酸复红浸染0.5-1 min －干燥： 注意温度不宜高 －镜检： 滴入适量蒸馏水，将盖玻片放在滴有蒸馏水的地
方，有菌的一面朝上，显微观察。
实验五放线菌形态观察
插片法放线菌菌丝（ 40 × ）
插片法浸染法菌丝（ 40 × ）
插片法浸染法放线菌孢子实（验五10放0 ×线菌）形态观察
插片法浸染法放线菌孢子（ 100 × ）
印片染色法
1.接种培养 28℃培养4－7d 2.印片： 用镊子取一小块菌苔，置于载玻片上，取另
外一洁净玻片盖在菌苔上，轻轻粘一下菌苔表面，使 培养物（气丝、孢子丝、孢子）粘附载玻片中央，过 火焰2－3次固定 3.染色：石炭酸复红染色1min，水洗 4.镜检（油镜）.
放线菌形态的观察
实验五放线菌形态观察
放线菌形态的观察
目的要求 实验材料 实验程序 思考题
实验五放线菌形态观察
目的要求
学习观察放线菌的基本方法 加深理解放线菌的形态特征
实验五放线菌形态观察
实验材料
放线菌培养物：费氏链霉菌（Streptomyces fradiae ）或 “5406”产生菌（St. microflacus）细黄链霉菌四天培养物。
实验五放线菌形态观察
Various types of spore-bearing structures in the streptomycetes
实验五放线菌形态观察
Filamentous A百度文库tinomycetes
Several spore-bearing structures of actinomycetes: Streptomyces
染色时，混合A液及B液，再将混合液稀释5倍即成。
干燥： 染色完毕，用吸水纸吸掉盖玻片上多余的染液，将 盖玻片放于酒精灯火焰上部烘干，注意温度不宜高，以免 盖玻片碎裂。
镜检： 取一洁净载玻片，滴入适量蒸馏水，用镊子将干燥 好的盖玻片放在滴有蒸馏水的地方，有菌的一面朝上，操 作中尽量避免气泡的产生。盖玻片紧紧地贴附在载玻片上 后，切勿随意移动，随即进行显微观察。
印片染色法
载玻片－印片－ 固定 －石炭酸复红染色1min －水洗 －晾干－油镜
5406菌孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲 等，并绘图说明。
实验五放线菌形态观察
思考题
在用插片法观察气生菌丝和孢子丝的形态时， 要注意些什么？
实验五放线菌形态观察
结束
实验五放线菌形态观察
实验
霉菌的载片培养
显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊 子等。
酒精、蒸馏水等。
实验五放线菌形态观察
G＋
GC含量高（和另一类阳性菌——厚壁菌门相比）
好氧、少部分寄生兼性厌氧
放线菌重要的属有：
放线菌属(Actinomyces) 节杆菌属(Arthrobacter) 棒杆菌属(Corynebacterium) 弗兰克氏菌属(Frankia) 微球菌属(Micrococcus) 微单孢菌属(Micromonospora) 分枝杆菌属(Mycobacterium)
白喉棒状杆菌（C.diphtheriae）
实验五放线菌形态观察
(3)分枝杆菌属(Mycobacterium)
不规则杆状菌 抗酸性染色 细胞壁含有大量的脂类和分枝菌酸 结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌
实验五放线菌形态观察
抗生素
链霉素
灰色链霉菌（Streptomyces griseus）
四环素 红霉素 新霉素 庆大霉素