Waters四极杆质谱培训
串连四级杆的扫描模式
扫描
扫描
MS1质量分析器扫描能丢失指定中性碎片的母离子，MS2质量 分析器扫描丢失指定中性碎片的离子，所得到的质谱图是由 MS1扫描的母离子，母离子只能是丢失指定中性碎片的离子
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中性碎片丢失扫描质谱图
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选择离子监测示意图 (SIR)
Waters 中国有限公司 培训中心
串联四极杆 的扫描模式
扫描类型选择
全扫描 (Full Scan) 子离子扫描 (Daughter Scan) 母离子扫描 (Parent Scan) 中性碎片丢失扫描 (Constant Neutral Loss Scan) 选择离子监测 (SIR) 多反应监测 (MRM)
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多反应监测色谱图
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MS1 碰撞池 MS2
静态 MS1质量分析器是静态，并且只监测指定的离子
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选择离子监测色谱图
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多反应监测示意图(MRM)
MS1 碰撞池 MS2
静态
静态
指定的母离子产生一指定的子离子,两个质量分析器都是静态的
waters中国有限公司培训中心串联四极杆的扫描模式扫描类型选择?全扫描fullscan?子离子扫描daughterscan?母离子扫描parentscan?中性碎片丢失扫描constantneutrallossscan?选择离子监测sir?多反应监测mrm?2006waterscorporation全扫描和选择离子监测?全扫描质谱扫描得到一段质量范围从而获得质谱图用于未知物的结构分析用于sir方法的开发以及mrm方法开发寻找母离子最佳电离参数?选择离子监测selectedorsingleionrecording监测单个离子或一系列单个离子目标化合物的跟踪提高采集灵敏度?2006waterscorporationmsms扫描和多反应监测?msms扫描包括子离子扫描母离子扫描和中性丢失扫描子离子扫描常用于mrm方法开发寻找最强碎片离子并确定其最佳碰撞能量及相关质谱参数母离子扫描中性丢失扫描可用来研究结构相似性化合物如具有相同结构碎片或相同结构基团的化合物?多反应监测multiplereactionmonitor监测特定母离子产生特定子离子碎片的化合物目标化合物的跟踪提高采集灵敏度是灵敏度最高的定量采集方式?2006waterscorporation子离子扫描方式示意图ms1碰撞池ms2静态扫描用ms2质量分析器扫描指定母离子的子离子碎片所得到的质谱图只能是由指定母离子经碰撞产生?2006waterscorporation子离子扫描质谱图?2006waterscorporation母离子扫描方式示意图ms1碰撞池ms2扫描静态用ms1质量分析器扫描能丢失指定质谱碎片的母离子所得到的母离子质谱峰一定是能丢失指定质谱碎片的母离子?2006waterscorporation母离子扫描质谱图?2006waterscorporation中性碎片丢失扫描示意图ms1碰撞池ms2扫描扫描ms1质量分析器扫描能丢失指定中性碎片的母离子ms2质量分析器扫描丢失指定中性碎片的离子所得到的质谱图是由ms1扫描的母离子母离子只能是丢失指定中性碎片的离子?2006waterscorporation中性碎片丢失扫描质谱图?2006waterscorporation?2006waterscorporation选择离子监测示意图sirms1碰撞池ms2静态质量分析器是静态并且只监测指定的离子ms1选择离子监测色谱图?2006waterscorpor
串连四级杆的扫描模式
串联四极杆 的扫描模式
扫描类型选择
全扫描 (Full Scan) 子离子扫描 (Daughter Scan) 母离子扫描 (Parent Scan) 中性碎片丢失扫描 (Constant Neutral Loss Scan) 选择离子监测 (SIR) 多反应监测 (MRM)
扫描
扫描
MS1质量分析器扫描能丢失指定中性碎片的母离子，MS2质量 分析器扫描丢失指定中性碎片的离子，所得到的质谱图是由 MS1扫描的母离子，母离子只能是丢失指定中性碎片的离子
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中性碎片丢失扫描质谱图
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选择离子监测示意图 (SIR)
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子离子扫描方式示意图
MS1 碰撞池 MS2
静态
扫描
用MS2质量分析器扫描指定母离子的子离子碎片，所得到的质 谱图只能是由指定母离子经碰撞产生
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子离子扫描质谱图
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全扫描和选择离子监测
全扫描 –质谱扫描得到一段质量范围从而获得质谱图 –用于未知物的结构分析 –用于SIR方法的开发以及MRM方法开发寻找母离子 最佳电离参数 选择离子监测 (Selected or Single Ion Recording) –监测单个离子或一系列单个离子 –目标化合物的跟踪 –提高采集灵敏度
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MS/MS扫描和多反应监测
(完整word版)Waters Xevo TQS液相色谱质谱操作
Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)操作指南1.适用范围：本使用规范适用于有机室所备有的Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)。
2.仪器设备的主要技术指标：1) 梯度性能：保留时间标准偏差（SD）≤0.047min。
2) ESI正离子灵敏度和精密度：测试样品：磺胺二甲基哒嗪(Sulfadimethoxine)，浓度：0.1pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥3000:1；平均峰面积≥60000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:4500psi；峰面积：120000；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.5%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
3) ESI负离子灵敏度和精密度：测试样品：氯霉素(chloramphenicol)，浓度：0.05pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥400:1；平均峰面积≥1000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:520psi；峰面积：1500；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.8%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
4) 系统精密度（TUV/PDA）：峰面积相对标准偏差（%RSD）≤0.5%；峰高相对标准偏差（%RSD）≤0.9%。
5) NanoFlow正离子灵敏度指标要求：峰强（m/z =785.8）≥1×107，测试样品：Glu-Fibrinopeptide B，浓度：100fmol/μl测试结果：峰强度（m/z =785.8）：1.48×107；符合指标要求。
6) T RIZAIC正离子模式MS说明：测试样品：ADH T19, PHO T33, ENL T4, BSA T59, ENL T43, ADH T17, BSAT10, PHO T88指标要求：保留时间标准偏差：≤0.25%测试结果：ADH T19：标准偏差为0.02% (23.77min)；PHO T33：标准偏差为0.03% (25.12min)；ENL T4：标准偏差为0.02% (21.83min)；BSA T59：标准偏差为0.01% (21.58min)；ENL T43：标准偏差为0.04% (22.33min)；ADH T17：标准偏差为0.03% (23.31min)；BSA T10：标准偏差为0.02% (24.41min)；PHO T88：标准偏差为0.03% (24.81min)7) 系统性能测试一维系统精密度测试：测试样品17α-OHP。
WatersLCMS液质联用培训讲义
MS1
Argon gas Collision
Cell
MS2
Precursors
Static m/z 609.1
Product
Static m/z 195.1
Waters 四极杆质谱培训
定性实验 调谐仪器
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样品1．利血平标样1ppm, 根据全扫描获得最佳实验锥孔 （CV），调谐特定碎片最佳实验碰撞能量（CE），进行 多反应监控MRM实验准备
仪器质量校正
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时 按此页面OK键就会开始进行质量校正。
9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起 来，从质量校正页面的档案（File）选取另存新 档（Save As）。输入所欲储存之文件名称后按 OK即可。
峰进行准确质量测量 (如在全扫描方式)
• scan speed compensation扫描速度补偿: 当仪器进行
快速扫描时，对系统进行‘延时’补偿校正。
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7. 设定采集参数：
选择适当的校正质量范 围，校正大范围的全质 量从22校正到2000，其 余的参数可以使用预设 参数default即可，设定 完后按OK键。
Cell
MS2
Products
Scanning (m/z M-46Da)
样品：混合氨基酸实验 中性丢失46(甲酸) 中性丢失63(甲酸+NH3)
Waters 四极杆质谱培训
Waters LC MS培训讲义
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碰撞压力 3×10-3mbar
定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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50
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仪器质量校正
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2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括 号内的数值即为设定值：
• LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） • Entrance（50） Collision（2） Exit（50） • LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5）
:609 (CV=45)
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定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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2．子离子扫描 daughter scan
Argon gas
Collision
MS1
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
液相色谱串联三重四级杆质谱基础知识
数据处理系统 液相色谱
质谱
一 液质联用
液质联用仪的组成
大气 真空系统
液相色 谱
样品入 口
离子化 （离子源 ）
质量分析 器
检测器
数据系 统
质谱部分
一 液质联用
离子源
最常用的离子源-电喷雾离子源（ESI)
干燥 气 四极预 杆
喷雾针装置
喷雾室
毛细 管
一 液质联用
质量分离器
兽药残留最常用的是三重串联四级杆（QqQ）
我们所做的已知化合物，并且有现成 的方法
整个质谱仪的模式图
电喷雾离子源 Q1 q2 Q1 检测器
二 质谱基本原理
质谱：称量离子质量的工具
12 units 0 m/e
二 质谱基本原理
质谱：称量离子质量的工具
12 units 12 m/e
二 质谱基本原理
质谱：称量离子质量的工具
12 units 12 m/e
选择离子流图（SIM)：选取其中几个 特征离子扫描，对保留时间作图，即 得到选择离子色谱图。
三 质谱基本概念
选择离子流图（SIM)：
SIM通过去除本底和其 他无关离子的干扰， 降低噪声，提高选择 性、分辨率和灵敏度， 可使复杂的TIC简化， 对特定化合物的分析 或化合物的分类十分 有用。
三 质谱基本概念
8
9
10 11 12 13 14 15 16
二 质谱基本原理
质谱：称量离子质量的工具
12 units 14 m/e
8
9
10 11 12 13 14 15 16
沃特世液相色谱质谱联用仪器现场培训总结
沃特世液相色谱质谱联用仪器现场培训总结我有幸参加了沃特世液相色谱质谱联用仪器的现场培训课程，通过课程的学习和实践，我对这一仪器的原理、操作和应用有了更深入的了解。
以下是我对这次培训的总结。
首先，这次培训给我们提供了扎实的理论知识。
在培训的第一部分，讲师详细介绍了液相色谱和质谱两个技术的原理和应用领域，并对联用仪器的工作原理进行了详细阐述。
通过理论的学习，我们对仪器的原理有了清晰的认识，对分析方法也有了更深入的理解。
这为后续的实验操作奠定了扎实的基础。
其次，在培训的第二部分，我们进行了仪器的操作演示。
讲师详细讲解了仪器的各个部分的功能和使用方法，并现场演示了方法的建立、样品的制备和仪器的操作流程。
我们一边观看演示，一边跟随操作指南进行了实际操作。
通过亲自操作，我们更加熟悉了仪器的操作流程，并掌握了一些常见样品的制备方法和操作技巧。
这次实践对于我们的学习非常重要，它让我们更加深入地理解了仪器的使用和操作要点。
另外，培训的第三部分是实验的开展。
在这一部分，我们分组进行了一些实验项目。
在实验前，讲师详细介绍了实验的目的和操作步骤，并提供了必要的实验方法和数据处理的指导。
我们根据讲师的指导，合理安排实验的步骤和时间，并进行了实验的操作和数据处理。
这次实验让我们亲自参与到科研工作中，体验到了科学研究的严谨性和艰辛性，同时也提高了我们的实验技能和数据处理能力。
最后，在培训的最后一部分，我们进行了实验结果的分析和讨论。
我们把实验结果进行整理和汇总，并与其他组的结果进行对比和分析。
通过结果的对比和分析，我们发现了一些问题和不足之处，并进行了讨论和改进。
这次讨论和交流对于我们的学习和提高非常重要，它让我们明白了科学研究是一个不断探索和进步的过程。
通过这次培训，我学到了很多关于沃特世液相色谱质谱联用仪器的知识，不仅从理论上了解了仪器的原理和应用，还亲自参与了实验操作和结果分析。
这次培训不仅提高了我的实验技能和数据处理能力，还培养了我们的科学研究思维和团队合作精神。
waters xevo TQ-S三重四级杆质谱仪培训文件
启动仪器仪器系统控制台做系统的启动Unifi欢迎界面，点击My Work选择Instrument System标签，双击仪器系统进入仪器系统控制台，左边System 菜单选仪器系统,Me 勾选Prime Seal Wash, Run time 设3min.,Menu 选 System Startup. 右边Prime Solvents-Binary Solvent Ma ent Manager 勾选要灌注的管路,右边Prime Solvents-Sample Manager FTN勾选Prime wame wash solvent for:15s,勾选Prime purge solvent for:5 cycles.右边Prime Solvents-Xevo TQs 选择流路为waste,同时质同时质谱保持待机standby 状态(高压不开)右边Equilibrate to Method-Binary Solvent Manager设置设置灌注后的流速和比例.右边Equilibrate to Method-Sample Manager FTN设置设置样品室温度和柱温.状态(开高压)那么系统完成启动后,质谱仪将开氮气,转到操作operate右边Equilibrate to Method-XevoTQ-s设置流路状态.那么右上角点击Start.系统正在做system startup.等待……启动仪器,调谐(手动,自动) 仪器系统控制台做质谱调谐Unifi欢迎界面，点击My Work选择Instrument System标签，双击仪器系统进入仪器系统控制台，左边System菜单选仪器系统,Menu选Setup, Setup选Manual Tuning. 右边是质谱的调谐窗口,可以调整和查看状态.例如,开关高压;开关氮气,碰撞气;选择电离模式,四极杆工作模式;源参数设置及反馈值等等.实时显示最多四个离子质量范围出峰.样品调谐XevoTQs质谱源一般性参数设定:Capillary=3, Sample cone=30, Source offset=60, Source Temperature=150, Desolvation temperature=450, Cone gas flow=150, Desolvation gas flow=1000, Nebulizer gas pressure=7.0, Collision=4, Collision gas flow=0.15点击Fluidcs,可以进行质谱流路设置.建议调谐液用目标化合物标准溶液,浓度不高于100ng/mL,放入A/B/C其中一个流路.先选择Reservoir-Wash(质谱清洗液,用1:1 ACN:Water),purge2次,然后Reservior选择调谐液流路,如A/B/C,purge1次.Flow path选Combined,流动相选择LCMS实验使用的A/B路,一般比例为1:1,流速设0.3ml/min(或LCMS实验用流速),Infusion flow rate设为10ul/min.点击Startinfusion.下方,调整质谱峰观察窗口,仅打开一个峰窗口如Plot1,MS1 scan监测目标母离子,span用10.质谱采集模式用MS,关碰撞气.结合Source标签下的参数,主要调整毛细管电压, 锥孔电压,脱溶剂温度,气流量,将母离子信号调整到最高;母离子质量数精确到小数点后一位,在下方的监测窗口使用Daughter scan,span设大,确保范围包括50Da到母离子质量数,质谱采集模式用MS/MS,开碰撞气.结合Source标签下的参数,主要调整碰撞能量.确定主要碎片,之后改变span为10,确定该主要碎片对应的最佳碰撞能量.全部调整好后点击保存按钮,保存调谐界面参数.如果调谐标准品纯度高,目标母离子峰附近无干扰峰,强度足够,信号稳定,也可以使用自动调谐,做compound optimization.左边质谱仪的Setup里选Compound Optimization.右边点Create,输入化合物名称,单同位素准确分子量(精确到小数点后一位)或分子式,完成后点OK之后,点Settings,输入最小碎片,碎片数目,锥孔电压和碰撞能量优化的范围,完成后点OK点击Start开始,在Optimization对话框输入毛细管电压优化范围,推荐手动设定值,锥孔电压和碰撞能量在一定的范围优化,Sample Reservoir 选择实际调谐液位,最后点击OK等待.优化完成后,结果如图勾选要导出的MRM,并点击Export.在导出结果对话框,输出报告名称,描述,位置.一定勾选Export to,选择一个库.最后点击OK.那么导出到库的化合物方法便可在以后的Analysis method里调用了.运行样品-建Analysis Method（仪器方法）新建一个含仪器方法的Analysis MethodUnifi欢迎界面,点击左上角图标,Create-Analysis Method选Generate an acquire and process method填入Analysis Method名称,描述,文件夹,点Next选择MRM Assay for Regulated Bioanalysis(Small Molecule),点Next选择仪器系统,点NextAnalysis Method总结,点Finish等待Purpose标签,点Manage ComponentsManage Componets部分,可以手动输入组分名,母离子,碎片等信息;更多情况下,点击Import,导入库优化好的组分信息. 初次实验,保留时间可以先不填写,液相方法固定后,再修改保留时间信息.库搜索界面,选择库,点击Search,执行搜索.选中结果表中的组分,点击ImportAnalysis Method界面选Instrument左边选Column Chemistry,右边点Select Column,设置色谱柱,点OK左边选Method Instrument,右边勾选仪器;完成后左边左边选Instrument Method Configuration左边选Binary Solvent Manager,右边设置流动相流路相流路,勾选seal wash,时间间隔设1min,编辑梯度表左边选Sample Manager FTN,右边设置柱温,样品室温室温,洗针液左边选XevoTQs,右边Settings标签设置质谱分辨率,参数可以手动输入,或点击右上角Tools>Update using ,源及能量参数.其中,校正用Instrument代表调用仪器控制台使using manual tuning,即可加载仪器控制台上的参数.制台使用的校正文件;源及能量左边选XevoTQs,右边Experiment标签设置质谱方法,自动添加MRM方法(前提,在Purpose标签设定时,必须调,可以点击Add,手动添加一个MRM方法;或者点击右上角Tools>S 必须调用了库里的component).选中某个Function MRM方法,点击ols>Select from components,点击Modify可以修改方法MRM方法修改界面,start time和end time是该组分的质为电离极性;Ionization type是电离模式;如果勾选了能量电压值;Product输入子离子;建议勾选Auto dwell选Sample List标签左边选Sample List Setup,右边设置初始进样列表格式.你可以点击Add/remove columns,改变列内容,点OK.最后点右上角保存.点OK运行样品-编辑Analysis(处理方法)在Analysis的Review界面可编辑Analysis method Review界面,点击Edit-Analysis methodPurpose标签,选择Manage Components,右边输入正确的保留时间.内标法分析时,内标物需要勾选Internal standard,Use internal standard选择相应内标物组分名称.Purpose标签,选择Default Amounts,右边输入标准品中各组分的浓度水平,点Add可以添加样品类型.内标法分析时,内标物浓度留空Processing标签,选择Smooth,右边平滑方法选Mean,宽度2,次数1,如果峰形差,毛刺多,次数可增加.Processing标签,选择Integrate,右边点Add,可输入积分窗口,点OK. 注意在 Peak rejection 部分, 可以设定最小峰高或面积以避免所选积分区域内不需要的小峰的积分.下一步是Targeted Screen Settings, 可以用蓝色箭头倒退,或选择Home找到回到Home 界面, 点击 Targeted Screen Settings (Target by Retention Time) > Components (components default). 在该窗口可以设定目标峰的积分方式,如closest, 时间单位如 minutes,限定范围如 0.1.在 Target by Mass, 将 0.1改成0.3Da. 该值是MRM通道查找的质量数窗口.点击蓝色返回箭头回到Home界面 (Processing), 选择 Quantitation Settings (Quantify) > Components (Component default). 选择Area作为相应值, (如果需要可以选其它选项).如图Quantitation Settings (Calibrate), 选择合适的参数.点击更新,保存Analysis内部的Analysis method修改,注意,该Analysis method并不会改变原先保存的方法版本.点OK.回到Analysis-Review界面,点Process选Full application processing on all samples那么Analysis-Review显示处理后的数据.可顺序察看Component和Injections的处理结果.如做了标准曲线,结果图如下。
waters三重四极杆质谱仪离子参数
Waters三重四极杆质谱仪离子参数摘要本文档介绍了W at er s三重四极杆质谱仪的离子参数，包括离子产生、离子传输和离子检测等相关内容。
通过对这些参数的了解，能够帮助用户更好地进行质谱实验设计和数据分析。
1.引言W a te rs三重四极杆质谱仪是一种常用的质谱仪器，广泛应用于生物医药、环境分析、食品安全等领域。
在使用该仪器进行质谱实验前，了解离子参数是非常重要的。
2.离子产生离子产生是质谱实验中的第一步，它决定了样品分子在质谱仪中是否能够形成离子。
常见的离子产生方式包括电离源和化学离化源。
2.1电离源电离源是将样品分子转化为离子的装置，常用的电离源包括电喷雾源（E SI）和化学电离源（AP CI）。
ES I常用于水溶性样品的离子化，而A P CI适用于脂溶性样品。
2.2化学离化源化学离化源通过化学反应将样品分子转化为离子。
常见的化学离化源包括化学电离源（CI）和电喷雾化学离化源（A PC I）。
C I适用于不易电离的分子，而AP CI则适用于易挥发的分子。
3.离子传输离子传输是离子从离子源进入质谱仪分析区的过程，它主要涉及离子传输管道和离子激发。
3.1离子传输管道离子传输管道是质谱仪中的核心组件，它负责将产生的离子引导到质谱仪分析区。
离子传输管道的设计要考虑离子的稳定传输和损耗尽量减小。
3.2离子激发离子传输过程中，离子可能会因与传输过程中的气体分子碰撞而发生激发。
离子激发会影响质谱实验的灵敏度和分辨率，需要合理控制。
4.离子检测离子检测是确定样品中离子种类和含量的过程，常用的离子检测器包括串行质谱检测器和飞行时间质谱检测器。
4.1串行质谱检测器串行质谱检测器将分子离子分成不同的质荷比，通过电场对离子进行分离和选择，最后进行离子检测。
4.2飞行时间质谱检测器飞行时间质谱检测器利用离子在磁场中的偏转或电场中的加速来实现质荷比的分离，从而进行离子检测。
5.结论通过对W at er s三重四极杆质谱仪离子参数的介绍，我们了解了离子产生、离子传输和离子检测等关键环节。
三重四级杆质谱仪原理详解培训课件
– 在质谱应用领域里三重四极杆是最灵敏 和定量重现性最好的仪器。
– 在质谱应用领域里三重四极杆在执行中 性丢失扫描和母子扫描模式具有最好的灵 敏性和准确性。
三重四极杆不是最好的获取质谱图的 仪器，平行测量的质谱系统会更好些：
• 三重四极杆质谱/质谱不如离子阱质谱仪
时间串联多级质谱分析：通过离子阱质量分析器实现
时间串联多级质量分析是通过同一个分析器实现的，分 离出所需的离子，使之断裂，并分析碎片离子。
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时间串联的多级质谱: 离子阱（质谱n）
离子在离子阱中静电捕获（无线电频率场见下图） 通过改变阱里的电场，从而选择特定的离子留在阱里，
把其他的排除出离子阱。
在与惰性气体原子（氦，氩或者氮）碰撞后，所选择的 离子被激活，所产生的更大动能使它们变成碎片。
所得的碎片离子通过分析后，得到碎片离子谱图。
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时间串联的多级质谱：优点
• 离子阱的一个优点就是它们能
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质量分析器的性能特点
分辨率= M/ΔM 分辨率为200时，准确率是～2000ppm 分辨率为2500时，准确率是～100ppm
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Waters_液质联用基础知识(waters中国培训中心)
质量过滤器 质子过滤器
离子检测器
数据采集及控制
离子源
分析器
检测器
数据处理
接口
HPLC
色谱分离 质谱图
样品引入 样品引入
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质谱的种类及相关联用技术
GC LC CE Flow Inj Probe FB/EI ESI APCI TSP FAB MALDI Quadrupole Magnetic Sector Time of Flight Ion Trap FT-MS Electron Multiplier Photomultiplier Microchannel Plate
C
原子序数 = 质子数 具有相同的元素符号,在元素符号的左上角表明其质量数
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天然同位素丰度
原子符号 氮
14N 15N
质量, amu 14.0031 15.0001 31.9721 32.9715 33.9679 34.9689 36.9659 78.9183 80.9163
4.00 2.27 7.22 9.12 11.59 14.87 2.04 9.98 19.12 13.15 17.40 25.16 21.42 22.52 26.8228.84
1: Scan AP+ BPI 8.29e4
%
33.78 35.04 38.26 39.52 33.32
0 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00
MS的历史
60’s-70’s 大气压电离(APcI)源被发现(但并未被广泛 应用) 70’s-80’s 开始广泛研究 LC/MS 1979年 1982年 1984年 1988年 …... 传送带式 LC/MS 接口成为商业产品 离子束LC/MS接口出现 第一台电喷雾 MS仪宣告诞生 电喷雾离子源 MS 首次应用于蛋白质的分析
液质联用-三重串联四极杆质谱标准培训报告
液质联用-三重串联四极杆质谱标准培训报告（LC/MS QQQ）时间：2023年5月15日~19日地点：北京市朝阳区望京北路3号内容：了解液质联用-三重串联四极杆质谱的基本原理、相关硬件和软件应用、仪器日常维护和实际应用。
培训单位：安捷伦培训中心（北京）一、培训主要内容：15号：1.Agilent LC/MS QQQ 系统概述；2.质谱基础知识；3.Agilent LC/MS QQQ 的调谐；4.上机实操训练。
16号：1.电离的影响因素及溶液化学基础知识；2.Agilent LC/MS QQQ 工作原理；3.Agilent LC/MS QQQ 采集方法的建立；4.上机实操训练。
17号：1.LC 采集参数的编辑；2.Worklist 的建立与编辑；3.QQQ参数优化4.上机实操训练。
18号：1.定性数据分析；2.定量数据分析；3.上机实操训练。
19号：1.液相仪器的日常维护；2.质谱仪器的日常维护；3.上机实操训练。
4.答疑二、培训心得1、自己之前已经学习和使用过液质联用有半年多，对液质联用已经有了一定的了解。
这次参加安捷伦的液质联用-三重串联四极杆质谱标准培训，对液质联用有了一个全面和系统的了解。
2、本次开设的培训课是面向安捷伦1200-6410B型液质联用仪用户，实验课程也是使用同型号仪器，针对性强。
培训老师在培训过程中详细介绍了仪器各部件名称、作用及工作原理，同时，培训老师对于易损部件及损坏原因进行了详细剖析，力求以预防为主，合理使用仪器，减少不必要耗损。
3、培训老师对采样方法及数据分析方法进行了系统性的指导，特别是一些技术的使用，可以帮助提高仪器分辨率。
利用软件进行批量数据处理等，结合仪器原理的学习，系统性的纠正了原先样品采集和数据分析中的一些误区，提高样品分析速度。
4、在本次培训中，培训老师指导我们拆装、清洗毛细管、离子源等所有可以由用户自己维护和清洗的部件，在过程中详述了注意事项，同时利用培训中心的仪器进行动手操作，学习如何避免拆装过程中的二次损伤。
Waters Xevo TQS液相色谱质谱操作
Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)操作指南1.适用范围：本使用规范适用于有机室所备有的Waters Xevo TQ-S液相色谱/质谱联用仪(三重串连四级杆质谱)。
2.仪器设备的主要技术指标：1) 梯度性能：保留时间标准偏差（SD）≤0.047min。
2) ESI正离子灵敏度和精密度：测试样品：磺胺二甲基哒嗪(Sulfadimethoxine)，浓度：0.1pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥3000:1；平均峰面积≥60000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:4500psi；峰面积：；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.5%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
3) ESI负离子灵敏度和精密度：测试样品：氯霉素(chloramphenicol)，浓度：0.05pg/μl指标要求：平均信噪比（S/N）≥400:1；平均峰面积≥1000；峰面积相对标准偏差（%RSD）≤3.0%；保留时间标准偏差（SD）≤0.047min测试结果：信噪比（S/N）:520psi；峰面积：1500；峰面积相对标准偏差（%RSD）：2.8%；保留时间标准偏差（SD）：0.00min，均符合指标要求。
4) 系统精密度（TUV/PDA）：峰面积相对标准偏差（%RSD）≤0.5%；峰高相对标准偏差（%RSD）≤0.9%。
5) NanoFlow正离子灵敏度指标要求：峰强（m/z =785.8）≥1×107，测试样品：Glu-Fibrinopeptide B，浓度：100fmol/μl测试结果：峰强度（m/z =785.8）：1.48×107；符合指标要求。
6) T RIZAIC正离子模式MS说明：测试样品：ADH T19, PHO T33, ENL T4, BSA T59, ENL T43, ADH T17, BSA T10, PHO T88指标要求：保留时间标准偏差：≤0.25%测试结果：ADH T19：标准偏差为0.02% (23.77min)；PHO T33：标准偏差为0.03% (25.12min)；ENL T4：标准偏差为0.02% (21.83min)；BSA T59：标准偏差为0.01% (21.58min)；ENL T43：标准偏差为0.04% (22.33min)；ADH T17：标准偏差为0.03% (23.31min)；BSA T10：标准偏差为0.02% (24.41min)；PHO T88：标准偏差为0.03% (24.81min)7) 系统性能测试一维系统精密度测试：测试样品17α-OHP。
WATERS公司的UPLCTQD培训资料 MS4QpHWOper.ppt
前级泵的外观
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涡轮分子泵
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Z－喷雾离子源: 两级正交取样
Isolation Valve
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电喷雾毛细管
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操作电压
Electrospray Probe APcI Discharge Needle
Tune Page Name
Capillary
Corona
ESI +ve -ve
APcI +ve -ve
+3.0 (kV) -3.0 (kV) Not applicable
Source temp.
120
Desolvation temp. 300
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电喷雾 Tune Page 设置
气流
锥孔气 ~100
去溶剂气
300
1000
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探头位置
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将HPLC 洗脱液导入MS离子源 75 m 内径不锈钢管 高电压给液滴提供过量电荷 对于正离子方式通常在 2-4 kV 之间优化 对于负离子方式通常在 2-3 kV 之间优化
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APCI 电晕(冠状)放电针
高电压促使溶剂分子发生化学电离 对于正离子方式通常在 3-5 kV 之间优化 对于负离子方式通常在 2-4 kV 之间优化
waters液质联用-质谱基础知识介绍讲义
1: Scan AP+ BPI 8.29e4
%
33.78 35.04 38.26 39.52 33.32
0 5.00 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00
Time 40.00
为什么使用 LC/MS? …...
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快速得到丰富的结果
世界上第一台现代意义质谱仪在英国剑桥Cavendish实验室出现 电喷雾(Electrospray) 物理现象被发现 (并非为了 MS) 世界上第一台实际意义质谱仪在美国芝加哥大学实验室出现 (扇型磁场MS) 世界上第一台商业质谱仪 四极杆质量分析器质谱仪 飞行时间质量分析器质谱仪 开发GC/MS 大气压电离(APcI)源被发现(但并未被广泛应用) 开始广泛研究 LC/MS 传送带式 LC/MS 接口成为商业产品 离子束LC/MS接口出现 第一台电喷雾 MS仪宣告诞生 电喷雾离子源 MS 首次应用于蛋白质的分析
LC/MS中的质谱
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Mass Spectrometry-质谱
质量是物质固有特征之一，不同的物质有不同的质量谱 分析物被转化为气相离子而被分析 这些离子按其质荷比 (m/z)被分离而被检测 质谱图即是相关的离子流对m/z的图
•灵敏度高 •定性/定量本领高 •脉冲扫描采集数据 •高真空环境工作 •溶剂参与反应(API电离源)
为什么使用 LC/MS?
极高的灵敏度 (2)
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为什么使用 LC/MS?
极佳的定量结果(3)
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5 orders of magnitude linear dynamic range . over the concentration range 0.1pg to 10000pg, producing a coefficient of determination of 0.9975 for sulfadimethoxine injected on column,
液质联用培训讲义
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可，确认所 有的扫描模式都已经被校正。
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
样品2. 对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲 酸丁酯1ppm实验，调谐最佳实验锥孔电压（CV）/碰撞 能量（CE） ESI 对羟基苯甲酸甲酯 MRM :151/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丙酯 MRM :179/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丁酯 MRM :193/136,92 CV 30/ CE 18/ CE 25
• 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量
校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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仪器质量校正
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仪器质量校正
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M+H+ 134 106 148 76 156 175 120 90 116 121 182 118 150 147 132 132 166 备注： * 碱性氨基酸 易中性丢失63(甲酸+NH3) ▼ 带苯环氨基酸 ● 仲氨酸 易中性丢失46(甲酸)
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定性实验 调谐仪器
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三重四极杆质谱仪培训证书
三重四极杆质谱仪培训证书
三重四极杆质谱仪培训证书是一种证明您已经接受过三重四极杆质谱仪相关知识和技能培训的证明。
通常情况下，这种证书由权威机构或专业组织颁发，以证明您具备了使用和维护三重四极杆质谱仪的能力。
如果您想获得三重四极杆质谱仪培训证书，可以参加相关的培训课程或培训计划。
这些课程通常由专业培训机构或仪器厂商提供，课程内容涵盖了三重四极杆质谱仪的基本原理、操作方法、维护技巧等方面。
在完成培训后，您需要通过一定的考核，证明您已经掌握了所学的知识和技能，才能获得三重四极杆质谱仪培训证书。
获得三重四极杆质谱仪培训证书的好处是显而易见的。
首先，它可以证明您具备了使用和维护三重四极杆质谱仪的能力，为您的职业发展提供有力支持。
其次，它可以提高您在相关领域的专业素养和竞争力，使您更有机会获得更好的职业机会。
最后，它可以增加您对三重四极杆质谱仪的深入了解和使用经验，为您在相关领域的研究和应用提供更广阔的思路和方法。
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定性实验 调谐仪器
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仪器质量校正
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
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仪器质量校正
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仪器质量校正
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• static calibration静态精确校正:使四极杆质量分析器准
确地‘停’在指定的质荷比上 (如： Tuning， SIR ， MRM)。 峰进行准确质量测量 (如在全扫描方式)
• scanning calibration 扫描校正:能确保所采集到的质谱 • scan speed compensation扫描速度补偿: 当仪器进行
常见17种混合氨基酸m/z 天门冬氨酸(Asp或D) 丝氨酸(Ser或S) 谷氨酸(Glu或E) 甘氨酸(Gly或G) *组氨酸(His或H) *精氨酸(Arg或R) 苏氨酸(Thr或T) 丙氨酸(Ala或A) ●脯氨酸(Pro或P) 半胱氨酸(Cys或C) ▼酪氨酸(Tyr或Y) 缬氨酸(Val或V) 蛋氨酸(Met或M) *赖氨酸(Lys或K) 异亮氨酸(Ile或I) 亮氨酸(Leu或L) ▼苯丙氨酸(Phe或F)
实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电压,锥 孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参 数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.
1．全扫描 full scan
MS1 Collision Cell MS2
Scanning (m/z M)
确认讯号良好及注射针内样品量充足!
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仪器质量校正
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仪器质量校正
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• ESI +参数设置(参数设置确保校正样品最大质谱信号响应)
Capillary (kV) Cone (V) Extractor (V) RF lens (V) Source Temp Desolvation Temp Gas Flow - Desolvation Gas Flow- Cone 3.5 30 3 0.3 100 200 350 50
• 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量
校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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3. 在质谱调机页面（MS Tune）选择校正仪器以开启 的质量校正页面。
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仪器质量校正
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4. 开启质量校正页面后，质量校正前请先确定目前仪器处 于未校正的状态，所有六种校正都为未校正（No Calibration），若不然则开启一个未校正（Uncal.cal）的 档案。
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样品2. 对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲 酸丁酯1ppm实验，调谐最佳实验锥孔电压（CV）/碰撞 能量（CE） ESI 对羟基苯甲酸甲酯 MRM :151/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丙酯 MRM :179/136,92 CV 30/ CE 15/ CE 20 对羟基苯甲酸丁酯 MRM :193/136,92 CV 30/ CE 18/ CE 25
Quattro LC/Micro 液质联用培训讲义
内容
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• 仪器质量校正 • 定性实验 调谐仪器 • 定量实验 • 维护及故障排除 • 常用备件号
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仪器质量校正
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1. 注射泵注入校正溶液，以碘化钠铯（异丙醇/水 = 1：1, NaI 2ug/L , CsI 50ng/L）溶液为例，流速5ul/min 在质谱调机页面（MS Tune）监看四个扫描质量： 172.9 ,622.6 ,1072.2 , 1971.6
6. 按开始键后会跳出自动校正选单 请勾选所有种类（Type） 处理程序部分选择讯号采集和校正 （Acquire & Calibrate），可勾选打 印报告（Print Report） 勾选完成后点压采集参数 （Acquisition Parameters）
！注意，在设定采集参数前请不要按
OK键。
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3. 多反应监控MRM
MS1 Collision Cell Argon gas MS2
Product Precursors
Static m/z 609.1
Static m/z 195.1
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定性实验 调谐仪器
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样品1．利血平标样1ppm, 根据全扫描获得最佳实验锥孔 （CV），调谐特定碎片最佳实验碰撞能量（CE），进行 多反应监控MRM实验准备 ESI + MRM :609 /195(CV=45,CE=55)
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定性实验 调谐仪器
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碰撞压力 3×10-3mbar
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定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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Scanning (m/z M)
Scanning (m/z M-46Da)
样品：混合氨基酸实验 中性丢失46(甲酸)
中性丢失63(甲酸+NH3)
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定性实验 调谐仪器
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• • • • • • • • • • • • • • • • • •
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仪器质量校正
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2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括 号内的数值即为设定值：
• LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） • Entrance（50） Collision（2） Exit（50） • LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5）
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定性实验 调谐仪器
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4．母离子扫描
MS1
Collision Cell
Argon gas MS2
Products Products Precursor Precursor
Scanning
Static 92
m/z
样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯实验 与氨基酸混合液。 调谐最佳实验锥孔电压（CV）/碰撞能量（CE），对羟基苯甲酸甲 酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲酸丁酯三种化合物有共同碎片92， 可进行母离子扫描将其与氨基酸区别开。
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定性实验 调谐仪器
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Full scan(MS),daughter scan(MS/MS),MRM 实验参数设置建议如下：
Full scan(MS) daughter scan(MS/MS)
MRM(MS /MS)
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仪器质量校正
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8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时 按此页面OK键就会开始进行质量校正。
9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起 来，从质量校正页面的档案（File）选取另存新 档（Save As）。输入所欲储存之文件名称后按 OK即可。
快速扫描时，对系统进行‘延时’补偿校正。
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仪器质量校正
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7. 设定采集参数： 选择适当的校正质量范 围，校正大范围的全质 量从22校正到2000，其 余的参数可以使用预设 参数default即可，设定 完后按OK键。
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RF only
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定性实验 调谐仪器
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• 样品： 利血平标样,调谐最佳实验锥孔cone
voltage(CV)、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数 ，进行全扫描获最大分子离子峰609。
• 样品：利血平1ppm (乙腈：水=1:1配置) ESI + scan
Products Precursor