第六章 园林苗圃育苗新技术
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• (2)芽的分化 接种后,要使材料分化Fra Baidu bibliotek许
多芽,必须对培养基及激素的种类和浓度 进行严格地筛选。在诱导芽的分化过程中, 常用的基本培养基为MS培养基,适当降低 MS培养基中无机盐的浓度,特别是降低氮 素水平,对芽的分化和生长都是有利的。
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• 激素的种类和浓度对芽的分化起着重要的作用。由于不
培养室:是培养试管苗的场所。要求室温25~27ºC 之间,需安装调节温度设备;将光源设计在培养 物的上方。培养室还要有培养装置如培养架等。
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2、仪器设备及器具
• (1)制备培养基设备:天平、冰箱 • (2)灭菌设备:高压灭菌锅烘箱和恒温箱 • (3)接种设备: • (4)培养设备: • (5)璃器皿和用具:如三角瓶、量筒、烧
• MS培养基 • 怀特培养基 • 米勒培养基 • B5培养基 • N6培养基
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3、培养基的配制技术
• 组织培养和整体植物在营养上的主要区别
是它的异养性,整体植物只需要无机营养, 而组织培养则需另外供给C源和许多有机养 料。各种植物以及同一植物的不同器官和 材料进行培养时对无机养料的要求也略有 区别,甚至在增减过程中也发生变化。因 此在培养过程中随着组织和细胞的分化发 育的进展正确选用培养基,及时调整培养 基中的某项成分(转换培养基)是成功的关 键之一。
6.5,植物在pH为5.5—6.5范围内生长 最好,不同的植物对营养液酸碱度的反应
及需求不同如凤梨类、马蹄莲、仙客来等 pH值为5,生长最好;而菊花、蔷薇类则要 求pH,为6.5—7。
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3.营养液用水的要求
• 配制营养液所用的水,要了解是否有污染,
含酸的或其他 工业费水不能用来配制营养 液,也最好不使用硬水,一般可用作饮用 的水均可用于水培。 自来水中含有较多的 碳酸盐和氯化物,防碍根系对铁的吸收, 可以用Na2-EDTA(乙二胺四乙酸二钠)进行 调节,使铁为Fe2+便于吸收。
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配制程序
• 按量吸取药液 混合 注入蔗糖、
琼脂的混合液中搅拌均匀 用0.4%的 NaOH或3.65%HCl溶液调节pH值 装入 三角瓶等培养容器内 灭菌待用
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4、培养材料的选择
• 一般常用作快速繁殖的材料有鳞茎、球茎、茎段、茎
尖、花柄、花瓣、叶柄、叶尖、叶片等,它们的生理 状态对培养时器官的分化有很大影响。一般来讲,发 育年幼的实生苗比发育年龄老的成年树容易分化,顶 芽比腋芽容易分化,萌动的芽比休眠的芽容易分化, 采用大树基部的萌蘖有利于芽的诱导和分化。此外可 以用未成熟的种子、子房、胚珠及成熟的种子为材料, 剥去种皮经过胚胎培养,打破休眠得到试管苗后,再 进行快速繁殖。
杯等。
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(四)培养基及其制备 1、培养基的组成
无机成分:
• (1)大量元素:包括N、P、K、Ca、S等元素的
无机盐。需要量大,具有重要作用。
• (2)微量元素:Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo、Co
等多种微量元素。植物生长必不可少。
有机成分
• (3)维生素:参与酶的形成和蛋白质、脂肪的代
谢等活动。
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2.营养液的浓度及酸度
• 营养液中大量元素浓度,一般不超过2—3
/1000,其营养液的总浓度不能超过4/ 1000,浓度过高有害生长,不同植物要求 浓度也不同,例如杜鹃所用营养液浓度不 超过1/1000;而蔷薇类则营养液浓度为 2—5/1000。
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• 营养液的酸度以微酸为好,一般pH值为
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一、容器育苗的优缺点
• 优点:1、容器苗的根系发育良好,起苗时
不伤根,减少了苗木因起苗、运输、假植 等作业时对根系的损伤和水分的损失,从 而提高苗木的移栽成活率。
• 2、采用容器苗可以延长绿化植树的时间,
不受植树季节的严格限制。
• 3、可以节省种子。
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• 4、容器育苗可提早播种,延长苗木生长期,
• (4)氨基酸:谷氨酸、甘氨酸等。 • (5)肌醇:
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• (6)糖:是碳元素提供者,调节培养基的渗透压。 • (7)支撑物质:琼脂是常用的固化剂,它能使培
养基固化。
• (8)植物生长调节剂;吲哚乙酸、萘乙酸等,促
进细胞分裂,刺激生长。
• (9)水: • (10)其他:活性炭
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2、常用培养基
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• (3)根的诱导 要促使试管苗生根,常用的有两种方
法:一种是把试管苗在无菌条件下从叶腋处剪下来,转
移到生根培养基上。生根培养基和分化培养基的差别主
要在于生长素和细胞分裂素的比例上,适当增加生长素
的浓度,不用细胞分裂素或极少量的细胞分裂素,一般
在茎的基部就能分化出根。但是不同的植物诱导生根时
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(四)组织培养的设备和条件
1、实验室
准备室:器具的洗涤、干燥、存放与蒸馏水的制备; 培养基的配制、分装、高压灭菌;存放天平、药 品及各种药品的配制等。面积在30m2左右。
接种室:也称为无菌操作室。主要供材料的消毒、 接种、无菌材料的继代转苗等。设备有超净工作 台及无菌的接种工具。面积在20m2左右。
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5、接种与培养
• (1)外植体的消毒与接种 将接种材料用自来水
冲洗干净,擦干。然后,在超净台上或接种箱内, 将接种材料浸在饱和漂白粉上清液里,作表面灭 菌15—30min,也可用0.1%的升汞溶液作表 面灭菌8—12min。灭菌时间快到时,即倾去灭 菌溶液,用无菌水涮洗多次,然后用无菌纱布吸 干接种材料外部的水分,最后在无菌的条件下接 种在培养基上以待器官分化。
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(二)组织培养分类
1、以所用外植体材料来分:
• 植株培养 • 器官培养 • 胚胎培养 • 组织培养 • 细胞培养 • 原生质体的培养
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(二)组织培养分类
2、依所用的培养基不同来划分:
• 固体培养 • 液体培养
静止培养、旋转培养、振荡培养
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(三)植物组织培养的应用
• 无性系的快繁 • 脱毒苗培育
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容器
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水平式水培槽装置1.框架2.苗床(基质)3.栅栏
4.空气层 5.营养液 6.防水槽
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容器
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流动式水培槽装置1、2.苗床(蛭石、砂砾等)
3.扬液槽 4.集液槽5.A 扬水泵
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容器
简易水培装置
1.营养液2.基质6.栅栏网7.玻璃缸
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可盛装营养液的育苗槽
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第二节水培育苗
• 用泥炭、岩棉、砂砾、珍珠岩、蛭石以及
其它基质或单纯采用营养液而不用天然土 壤来进行育苗的方法称为无土育苗。
• 水培是在化学溶液中培养植物的技术和科
学。植物在没有有机质存在的情况下,由 人工供给养分而生长。水培也需要用基质, 用于固定、支持苗木。
• 水培育苗是无土育苗的一种方法。
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6、炼苗与移栽
当试管苗长出白根后尚未老化之前,应打开瓶塞放在散 射光处锻炼3-4d,然后取出幼苗用温水将琼脂冲洗掉, 移栽到无菌的沙性土壤中。组培苗对基质的要求较高, 基质必须严格消毒。基质的成分一般以沙土、砻糠灰 (炭化稻壳)、江沙、泥炭、珍珠岩或蛭石为材料,移苗 应根据不同的园林苗木材料运用以上不同的基质材料的 不同配比,制成无菌的基质。移栽时要注意别伤根并使 其处于伸展状态,浇透水后,用塑料薄膜覆盖,保持空 气的相对湿度在90%以上,温度在25C左右(±5C),勿 使阳光直晒。过1星期后,注意逐渐通气及浇灌适量的 水,幼苗即能成活。试管苗成活后,再移至苗圃的幼苗 池中进行培养,待壮苗后移至大田栽培。
同的植物和不同的组织器官所含的内源激素的种类和浓 度不同,因而使细胞、组织、器官分化和分化所需要的 激素水平也不相同。原则上讲,细胞分裂素可以促进芽 的分化,常用的细胞分裂素有激动素、6·苄基腺嘌呤、 玉米素和异戊烯基腺嘌呤。在快速繁殖中,一般用6— 苄基腺嘌呤比激动素的效果好,合适的浓度一般为 0.25mg/L。少数种类的植物适合用玉米素和异戊烯基 腺嘌呤。生长素虽然不能促进芽的分化,但是一般植物 芽的分化需要它与细胞分裂素浓度有一定的比例。当细 胞分裂素的相对含量大于生长素时,有利于芽的分化和 生长,在MS培养基中,附加0.5mg/L吲哚乙酸,lmg/ L6—苄基腺嘌呤,是芽分化的最佳配比。
第六章 园林苗圃育苗新技术
一、组织培养育苗技术
• 植物组织培养是植物繁殖的新技术。是利
用植物的根、茎、叶、花、果、茎尖、种 子、胚甚至细胞,在无菌条件下,给以适 当的营养、温度、湿度、光照、激素等条 件,使植物组织再生的技术。
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(一)组培育苗的优缺点
• 优点:1、保持母树的优良特性; • 2、无性系快速大量地繁殖; • 3、茎尖脱毒培养脱毒苗; • 4、速度快、省时间、产量大; • 5、培育新品种; • 6、保存种质资源。 • 缺点:1、操作烦杂,要求有一定设备条件 • 2、试验阶段成本较高。
可以直接撒在苗床上,不需要覆盖,大粒 种子需插入苗床内。为了更好地保持湿度, 在播种之前,用稀释的营养液(水:营养 液=1:1),预先浇透苗床。
• (二)扦插 水培扦插所选用的插条,多用
当年生半木质化枝条。
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第三节 容器育苗
• 容器育苗又称营养钵育苗。指利用各种容
器装入培养基质培育苗木,称容器育苗。
但随着技术的不断发展和改进是可以提高 效率的。
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二、水培育苗的设备
• (一)场地 水培对场地要求不严,大小均
可,只要能满足阳光,空气及充足的水源 条件,人为提供矿质营养及基质条件即可。
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(二)容器
• 水培用容器的大小,依生产规模及要求而
定,任何大小的花盆、水桶、木箱等容器 都可进行水培;大规模的生产可用水培槽, 水培槽也可大可小。
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(四)水培用基质
• 水培槽上苗床中的基质,是代替土壤并列
起着固定、支撑苗木的作用。
• 选用培养基质的条件是疏松通气又能保持
水分。
• 常用的基质有蛭石、珍珠岩、 石英砂、泥
炭等,也可用它们的混合物。
• 基质的选择要依据植物的要求和材料的来
源而定。
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三、水培的播种与扦插
• (一)播种 利用水培进行播种,小粒种子
能使伤口处直接生长出根为合适。
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• 另一种方法是将无菌苗剪下后,浸泡在含有一定
浓度生长素的无菌水中,几小时后再接种到无激 素培养基上,一般1星期后即开始分化出根原基, 2--3星期后根生长良好即可移栽。
• 若适当降低培养基的含糖量,同时将大量元素的
含量减少一半左右,并适当增加培养基中维生素 B2、维生素B12的含量,也可以提高根的诱导频率。
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微量元素
• 微量元素一般主要有Mn、B、 Zn、Cu、Mo,
它们在植物体鲜重中,所占的量很少,大 约在O.001一 O.00001%范围内,但也 是不可缺少的。
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1、营养液的配制
• 我们在选择营养液时,必须注意到植物正
常生长的需要。这与我们进行常规育苗时 一样,苗木在不同的时期施肥量和施用的 种类也不同,所以配制营养液必须依不同 的植物,不同的生长发育时期对营养的要 求来定,同时还应考虑到环境因子的影 响.如温度、湿度、光照等条件。
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(三)营养液
• 1.营养液的矿质成分:植物根吸收的矿物
质元素主要有两大类,即大量元素和微量 元素。
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大量元素
• 大量元素主要有七种N、P、 K、Ca、Mg、
S、Fe2+,这些元素的每一种都至少可构成 植物体鲜重的 0.0l%,其比例的略微变化, 不会影响植物的正常生长,但缺少任何一 种都会影响植物的正常生长,甚至死亡。
有利于培育壮苗;
• 5、容器育苗管理方便,结合塑料大棚育苗,
可以满足苗木对温度湿度、光照的要求, 有利于促进苗木的迅速生长,培育优质壮 苗。
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缺点
• 容器育苗单位面积产苗量低;成本高;营
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一、水培的优缺点
水培的优点:
• 1、产量高、质量好、生长快。水培可以直接供给
植物生长所需要的养分和水分,为生长提供了优 越的条件,由于基质的恰当选用,改善了通气条 件,有利于苗木生长
• 2、水培在大小范围内均可进行,不受环境
条件的限制。
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水培的缺点:
• 它要求有一定的设备,比普通育苗成本高,
所需要的生长素的种类和浓度是不同的。一般常用的有
吲哚乙酸、萘乙酸、吲哚丁酸3种。在生产实践中,生
长素浓度过低不利于试管苗生根,而生长素浓度过高时,
先在茎的基部形成一块愈伤组织,而后再从愈伤组织上
分化出根,但是这样茎与根之间维管束往往连接不好,
影响了物质和水分的吸收和运输,这种苗移栽不易成活,
即使成活后生长速度也较慢,所以要求生长素的浓度以