细胞的芽孢染色法目的及要求

五、实验报告
绘图标识枯草芽孢杆菌及芽孢形态，芽孢的着生位 置。
六、思考题
1．为什么芽孢染色要加热?为什么芽孢及营养体能 染成不同的颜色?
2．试设计实验如何鉴定某一产芽孢菌株的芽孢形态、 着生位置及所属分类地位。
细胞的芽孢染色法
一、实验目的及要求
学习并掌握细菌的芽胞染色法， 初步了解芽孢杆菌的形态特征。
二、实验原理
芽胞又称内生孢子，能否形成芽孢及芽孢的形状、 芽孢在孢囊的位置、芽孢囊是否膨大等特征是鉴定 细菌的依据之一。 芽胞壁厚，透性低，不易着色，一般染色法只能使 菌体着色而芽胞不着色（芽胞呈无色透明状），而 一旦染上色后又难以脱色。
芽胞染色法根据芽胞特点设计，除了用着色力强的 染料外，还需要加热，以促进芽胞着色。当染芽胞 时，菌体也会着色，然后水洗，芽胞染上的颜色难 以渗出，而菌体会脱色。然后用对比度强的染料对 菌体复染，使菌体和ຫໍສະໝຸດ Baidu胞呈现出不同的颜色，因而 能更明显地衬托出芽胞，便于观察。
三、实验器材
1.菌种：枯草芽孢杆菌。
2.染色剂： 5%孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液 3.仪器、材料：二甲苯、香柏油、蒸馏水、95% 乙醇、显微镜、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻 片、擦镜纸、吸水纸。
四、实验方法（Schaeffer－Fulton氏染色法）
1.制片：常规方法涂片、干燥、固定。 2.染色：(1) 涂片上滴加3－5滴5%孔雀绿水溶液。 (2)用试管夹夹住载玻片一端，微火加热，自载玻 片上出现蒸汽时，计时5min。加热过程中切勿使 染料蒸干，及时补加染液。待玻片冷却后，用自 来水冲洗至孔雀绿不再褪色为止。 (3)0.5%碱性番红复染2min，水洗。 (4) 制片干燥后油镜观察。芽孢呈绿色，菌体红色