第八章 实验一 寄生虫粪便检查法
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(五)拭子检查法
适用于在肛周、皮肤产卵(蛲虫),或常在 肛门附近发现虫卵(带绦虫)的虫卵检查法。 1、棉签拭子法 2、透明胶纸法
(六)粪便内蠕虫幼虫检查法
1、幼虫分离法:网尾线虫、类圆线虫 2、粪便内虫卵培养法:圆形线虫目 3、毛蚴孵化法:
漏斗幼虫分离法(贝尔曼法)。取粪便15-20g,放在漏斗内 的金属筛上,漏斗下接一短橡皮管,管下再接一个小试管。 加入40℃到淹没粪球为止,静置1-3小时。此时大部分幼 虫游走于水中,并沉淀于试管底部。取试管底部沉渣制成 涂片镜检。 平皿法。取被检粪球3-4个,放于平皿中,加适量40℃温 水,浸泡10-15min后,除去粪球,留下的液体在低倍显微 镜下检查。
1.040-1.060 1.045 1.085-1.09 1.115-1.13 >1.200 >1.200 >1.200 >1.200 >1.200
饱和盐水 硫酸锌溶液 氯化钙溶液 氯化钙溶液 硫代硫酸钠 饱和硫酸镁 饱和硝酸钠 甘油 饱和蔗糖溶液
1.17-1.19 1.14 1.05 1.25 1.37-1.39 1.26 1.2-1.49 1.226
结肠小袋纤毛虫 Balantidium coli
球虫
隐孢子虫
十二指肠贾第虫 Giardia duodenalis
肝片形吸虫虫卵
日本血吸虫虫卵
蛭形巨吻棘头虫
膜壳绦虫虫卵
犬复孔绦虫卵 细粒棘球绦虫虫卵
猪带绦虫虫卵
莫尼茨绦虫虫卵
犬鞭虫卵
犬弓首蛔虫卵
鸽毛细线虫卵,球虫卵囊
钩虫卵
猪蛔虫卵
肉鸽蛔虫卵
测 微 尺 的 使 用
漏斗架2个/组;漏筛6个/组;小烧杯(50ml)12个/ 组;500ml烧杯2个/组;100mL烧杯1个/组;青霉素 瓶6个/组;离心管6个/组;滴管1个/人;饱和盐水1 瓶/组;甘油水1瓶/组;100mL量筒1个/组;小方瓷 盘1个/组;擦镜纸1平皿/组;小棉块1份/组;载玻 片、盖玻片1份/组;离心机、小天平各1台;镊子2 个/组;显微镜;试管架1个/组;动物粪便1份/班; 50mL烧杯两个用于配平。
1.28
饱和盐水漂浮法操作示意图
1. 自粪便不同处挑取 如蚕豆大小的粪块, 置于盛有少量饱和盐 水的漂浮管中
2. 将粪便捣碎,与 盐水搅匀,再加饱 和盐水
3. 将满时,改 用滴管,加至 略高于管口但 不超出为止
4. 取洁净载玻片一张盖 在管口上,静止30分钟 左右
5. 如图垂直向上提 起载玻片
6. 敏捷地翻转, 覆以盖片镜检
实验一
ຫໍສະໝຸດ Baidu
寄生虫粪便检查法
一、目的要求
掌握粪便中寄生虫虫卵检查的饱 和盐水漂浮法;
应用显微镜观察粪便中虫卵的形 态结构。
二、方法概述
(一)直接涂片法
用以检查蠕虫卵、原虫的包囊、滋养体和卵囊。方 法简便,连续作3次涂片,可提高检出率。 1、蠕虫卵检查: 2、原虫检查: 1)活滋养体检查 2)包囊的碘液染色检查 3)隐孢子虫卵囊染色检查:改良抗酸染色法
(三)沉淀法 原虫包囊和蠕虫卵的比重大可 沉集于水底,有助于提高检出率。但比重较 小的钩虫卵和某些原虫包囊则效果较差。
1、自然沉淀法 2、离心沉淀法 (四)漂浮-沉淀法 该法的原理是利用粪便中各种 虫卵及粪渣中其它成份比重的差别,将不同比重的 虫卵分别集中进行检查,即先按漂浮法检查比重较 小的虫卵,然后将管中上层液倒掉,取沉淀物检查 不能上浮而沉在下面的比重较大的卵,所以,该法 可用于检查比重大小各异的寄生虫卵。
七、作业:绘制粪便样品镜检看到的虫卵
八、思考题:粪便中虫卵、卵囊的检查需要
注意那些问题?
通常的镜台测微尺是中央 部分刻有精确等分线的载 玻片,一般将lmm等分为 100格,每格长l0μm,是 专门用来校正目镜测微尺 的。
通常的目镜测微尺是一块 圆形玻片,在玻片中央把 5mm长度刻成50等分、把 10 mm长度刻成100等分或 将1mm长度刻成100等分。
测微尺的使用
三、试验内容
一)、实验用品
二)实验安排
1. 每2人操作1份饱和盐水漂浮法─静置滤液 30分钟; 2. 直接涂片法(每2人操作1份);
3. 离心沉淀法(每2人操作1份);
4. 继续“1”未完的操作。
六、注意事项
1.高倍镜下观察必须加盖玻片 2.采用直接涂片法时,不要涂得太多,必须分散 开, 均匀 3.观察寄生虫卵前,需校对目镜每格的长度;先在 低倍镜下观察,发现后换为高倍镜 4.使用离心机前,需配平离心管
(二)浮聚法
原理:利用比重较大的液体,使原虫包囊 或蠕虫卵上浮,集中于液体表面。常用的 方法有三种: 1、饱和盐水浮聚法 2、硫酸锌离心浮聚法 3、蔗糖离心浮聚法
虫卵比重与漂浮液比重
虫卵种类 比重 漂浮液的种类 比重
贾第虫包囊 猪蛔虫卵 钩虫卵 毛圆线虫卵 猪后圆线虫卵 肝片吸虫卵 姜片吸虫卵 华枝睾虫卵 复腔吸虫卵