血小板聚集的测定

• （2）PRP（富血小板血浆）制备：抗凝血800转/分，10min。
• （3）PPP（贫血小板血浆）制备：将抗凝管第二次离心，3000转/min，10min。
• 2.光路矫正
• 加300 μl蒸馏水于测试杯中，逐各检查测试孔光路，比色结果为0.171~0.178为正常
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3.测试步骤：
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血小板聚集的临床应用
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常规检测
• 可用于人群的健康查体，筛检出血小板聚集高凝的病人，可与血 脂、血糖和血液黏度等一样进行常规检查，临床医生根据临床综 合分析给与降脂、降糖，应用抗血小板药物，（临床已证明抗血小
板的药物能明显的降低冠心病，脑血管疾病，及周围性动脉血栓形成的发病 率。）
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• 在血液中，血小板是最小的有形细胞。
• 血小板在电子显微镜下像橄榄形盘状．也有梭形或 不规则形，电镜下血小板的膜表面有糖衣，能吸附 血浆蛋白和凝血因子。 • 正常人血液中血小板计数为(100～300)×109/L • 三分之一的血小板平时贮存在脾脏中。
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血小板形态
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采血注意事项
• 总原则采血要顺利，不可反复穿刺。 • 标本从采集到操作完成在3小时内完成，放置过久降低血小板的 聚集强度和速度。 • 用凝血蓝帽的抗凝管采血4毫升分两管，立即轻轻颠倒混匀至少35次。 • 用3.2%的枸橼酸钠按和血液1：9混合。
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采血注意事项
血小板聚集的测定 与临床应用
检验科 方媛
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血小板聚集与临床应用
• 再认识血小板 • 血小板聚集的病理生理 • 血小板聚集的测定方法 • 血小板聚集的临床应用
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血小板
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血小板
• 血小板是骨髓中巨核细胞质脱落下来的小块，故无细胞核，表面 有完整的细胞膜。 • 血小板体积小，直经为2～4微米，呈双凸圆盘状。 • 易受机械、化学刺激，此时便伸出突起，呈不规则形。
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血小板的主要功能
凝血和止血，修补破损的血管
• 血小板的表面糖衣能吸附血浆蛋白和凝血因子Ⅲ，血小板颗粒内含有与凝血有关的
物质。
• 血小板颗粒物质的释放，则进一步促进止血和凝血。当血管受损害或破裂时，血小 板受刺激，由静止相变为机能相，迅即发生变形，表面粘度增大，凝聚成团。 • 在表面第Ⅲ 因子的作用下，使血浆内的凝血酶原变为凝血酶，后者又催化纤维蛋 白原变成丝状的纤维蛋白，与血细胞 共同形成凝血块止血。
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血小板聚集-诱导剂
• 二磷酸腺苷（ADP） • 胶原（COLL） • 花生四烯酸（AA） • 瑞斯托霉素（RIS） • 肾上腺素（Ad）
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测定血小板聚集的方法
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血小板聚集的测定
• 1.样品制备 • （1）抗凝剂采用3.28%的枸橼酸钠，抽血量与抗凝剂应为9：1。
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•
在动脉硬化、冠心病、脑血栓、高血压、糖尿病等血栓性疾病 中，血小板聚集率往往会升高。 • 急性冠脉综合征（ACS）。 • 通过治疗，血小板聚集率降低时，不但可抑制血栓形成，还会 使已形成的血栓溶解，因此测定血小板聚集率可以有观察疗效、 筛查药物的作用。
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• 饮食，采血前须空腹或12小时内未进高脂食物。 • 烟酒，采血前12小时内禁用烟酒。 • 药物，一周内不用阿司匹林类药物。 • 三天内不用影响血小板功能的药物，如潘生丁、消炎痛、维生素E、维生素B6、氨茶碱、 血管扩张剂(硝普钠、硝酸甘油、亚硝酸钠)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、 苯海拉明、安妥明、青霉素、羧苄青霉素、呋喃坦丁、蝮蛇类降纤药（Svate）、丹参、 川芎、赤芍、红花、当归等活血化瘀中药等。 • 采血前需处于安静状态,运动可使血小板激活。 • 注意年龄、经期、妊娠期等生理因素的影响。月经和妊娠，雌激素对聚集和释放功能 有影响。
• 中医药的活血化瘀治疗。
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血小板聚集与相关疾病
• 高血压，糖尿病，脑血管疾病，高血脂，缺血性脑病，肾病综合 症，妊娠高血压等应定期检测。 • 术前检测。当血小板聚集明显降低，或服用阿司匹林、氯吡格雷 等药物时，若血小板聚集的明显降低则术中有出血的风险。 • 介入治疗后的血小板定期检测，指导临床用药。
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• 血液中的血小板数低于10万/μ1(100×10 /L)为血小 板减少，低于5万/μL(50×10 /L)则有出血危险。 • 静息血小板的寿命平均为7～14天。 • 循环血小板的寿命平均是5～9天。
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血小板聚集的病理生理
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• 血小板聚集（platelet aggregation,PAgT）是指血小板与血 小板之间的相互粘附，活化的血小板相互作用聚集成团 的生理（病理）特征。
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• 聚集性增高：糖尿病、高血压、冠心病、急性心肌梗塞、高β脂 蛋白血症等。 • 缺血性脑血管疾病（脑卒中）。 • 手术后、静脉注射葡萄糖后、高脂饮食及吸烟后。 • 多发性硬化症、静脉血栓形成。
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• 聚集性减低：见于血小板无力症，轻型血小板病；胶原 无效性血小板病（胶原诱导聚集消失）；巨大血小板综 合征（瑞斯托霉素诱导聚集消失，其他诱导聚集正常） • 继发性血小板功能障碍性疾病（如尿毒症、ITP、原发性 血小板增多症、真性红细胞增多症）
（1）加PPP 250 μl于测试杯中，放预热孔中预热备用。 （2）加PRP 2250 μl于另一测试杯中（杯内预先放入搅拌珠一粒），放预热孔中预热备用。
（3）用微量进样器吸取25μl AA、ADP聚集剂备用。
（4）将盛有PPP血浆的测试杯插测试孔中。 （5）按键，测试孔对应绿灯亮，表明已调好基准点。
（6）将PPP测试杯取出，将PRP测试杯插到底，将预先吸好试剂的微量进样器沿管角插
到底，迅速注入试剂，即刻按“TEST”键，仪器自动完成测试 （7） 完毕后显示屏显示当时的血小板聚集率。
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药物影响
抑制血小板聚集的药物： ⑴ 制花生四烯酸代谢的药物 磷酯酶A2抑制剂 ：阿托品、 氢化可的松 环氧化酶抑制剂 ：阿司匹林、吲哚美辛、保泰松 ⑵ 酸二酯酶抑制剂：西洛他唑双嘧达莫、茶碱 ⑶ ADP受体拮抗剂： 氯吡格雷、噻氯匹定、腺苷 ⑷ 肾上腺素受体拮抗剂：酚妥拉明、普萘洛尔 ⑸ 血酶拮抗剂：肝素 阿昔单抗、潘生丁、消炎痛、维生素E、维生素B6、氨茶碱、血管扩张剂(硝普钠、硝酸甘油、 亚硝酸钠)、心得安、速尿、利尿酸、氨丙嗪、非那根、苯海拉明、安妥明、青霉素、羧苄青 霉素、呋喃坦丁、蝮蛇类降纤药（Svate）、丹参、川芎、赤芍、红花、当归等。 提高血小板聚集的药物： 迈格尔（注射用人重组白细胞介素-11）、利可君、强的松、糖皮质激素、甲泼尼龙片仙鹤草、 紫珠草、白芨。
亚健康 血栓前状态 未病防治 • 对于目前没有这类疾病的血小板聚集率增高 者（血栓前状态）来说，这一指标可作为预 测这些疾病发生的重要参考指标，如果根据 指标的提示采取合理的治疗措施，则有预防 这类疾病发生的可能。
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临床适应症的总结
• 可用于人群的健康查体 • 中医药的活血化瘀治疗 • 术前检测。介入治疗后
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谢 谢
二00七年七月二十日
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ຫໍສະໝຸດ Baidu11
• ADP、肾上腺素、凝血酶和胶原等都是血小板的致聚剂。 • 不同的致聚剂引起的聚集过程表现有所不同。
• 激活的血小板中，血小板膜里的花生四烯酸游离出来，最后在不同酶的作用 下，形成血栓烷A2（TXA2）。血栓烷A2是迄今已知的最强的致聚剂。 • 内皮细胞释放的前列腺素I2（PGI2）可通过激活腺苷酸环化酶使环腺苷酸 （cAMP）水平升高，抑制血小板聚集。
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• 使用某些抗血小板药物后（如阿司匹林、潘生丁、保泰 松、消炎痛、右旋糖苷等） • 放射性损伤（肾上腺素及胶原诱导聚集消失，ADP诱导聚 集减弱）。
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开申请单的注意事项
申请单应注明疾病的诊断。 如使用抗血小板药物，应注明 使用类型，剂量，如结果与临 床不符，请及时联系，进行重 采血，复测，找出原因。
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血小板功能
• 血小板的主要功能是凝血和止血作用，修补破损的血管。
• 血小板和血液中的其他凝血物质——钙离子和凝血酶等，在破损 的血管壁上聚集成团，形成血栓，堵塞破损的伤口和血管。
• 血小板还能释放肾上腺素，引起血管收缩，促进止血。有保护血 管内皮、参与内皮修复、防止动脉粥样硬化的作用。
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• 血小板在执行生理性止血的同时，也在病理 性血栓形成过程中起重作用。 • 血小板功能检测对于临床相关疾病的诊断和 抗血小板药物的筛选及相关研究有着重要的 意义。
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血小板聚集的测定方法
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血小板聚集-比浊法
• 在富含血小板的血浆（PRP）或全血（WB）中，加入致聚剂（亦 称诱导剂）连续搅拌能诱发血小板聚集。 • 快速，经济，操作简单，高度敏感的特性，应用广泛。
• 血小板聚集是指活化的血小板导致粘附的血小板之间聚集成团的 特性。 • 血小板聚集功能主要与血小板膜GPⅡb／Ⅲa、Ⅰb、血浆纤维蛋 白原及细胞外钙离子等有关。
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导致血小板聚 集的病理因素
• 动脉粥样硬化 • 冠状动脉疾病，CAD和急性心肌梗死 • 脑血管疾病和中风 （脑血管意外） • 周围动脉闭塞性疾病 （PAOD） • 糖尿病