HPLC法测定盐酸多巴胺注射液的有关物质

HPLC法测定盐酸多巴胺注射液的有关物质【摘要】目的筛选合适的高效液相色谱条件，测定盐酸多巴胺注射液的有关物质。方法采用不加校正因子的主成分自身对照法，采用RP HPLC；色谱柱为Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相为［0.005 mol/mL十二烷基硫酸钠冰醋酸0.1 mol/mL乙二胺四醋酸二钠(700∶10∶2)］乙腈(6∶4)；柱温：40℃；流速：1.20 mL/min；检测波长280 nm。结果在1～12 μg/mL范围内线性良好，测定标准曲线为Y=36493X-629.88（r=0.9996，n=11）；最低检测限为0.9997 ng。结论该法专属性强，准确，灵敏，可用于盐酸多巴胺注射液有关物质的检查。

【关键词】 RP HPLC法；盐酸多巴胺注射液；有关物质

盐酸多巴胺（dopamine hydrochloride）注射液的有关物质检查，中国药典［1］中并没有收载。英国药典中收载的灭菌多巴胺浓溶液和注射用盐酸多巴胺采用薄层色谱法，需用盐酸甲基多巴胺对照品（4O methyldopamine hydrochloride和3O methyldopamine hydrochloride）测定系统适用性［2］。本文采用HPLC 法进行有关物质检查，方法准确，重现性好，灵敏度高，可作为本品的有关物质检查方法，更有效的对其进行质量监控。

1 仪器与试药

TU1901型紫外可见分光光度计，美国Waters 1525高效液相色谱仪，日本Shimadzu LC10Avp高效液相色谱仪。甲醇、冰醋酸、十二烷基硫酸钠和乙二胺四醋酸二钠均为分析纯试剂。盐酸多巴胺注射液由广州白云山明兴制药有限公司提供，批号为050107，050501，060703。

2 色谱条件

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：［0.005 mol/mL 十二烷基硫酸钠冰醋酸0.1 mol/mL乙二胺四醋酸二钠(700∶10∶2)］乙腈(6∶4)；流速：1.2 mL/min；检测波长280 nm；理论板数按盐酸多巴胺峰计算为3 600。在以上色谱条件下，盐酸多巴胺保留时间约为5 min，见图1。

A.酸性破坏试验

B.碱性破坏试验

C.加热破坏试验

D.氧化破坏试验

E.光照破坏试验

F.溶解介质氧化破坏试验

G.溶解介质碱性破坏试验

图1 盐酸多巴胺降解产物色谱图（略）

Fig.1 HPLC chromatograms of decomposition products of

dopamine hydrochloride

3 方法与结果

3.1 方法的专属性考察

取盐酸多巴胺对照品适量，用流动相制成每1 mL中含300 μg的溶液，取5 mL置试管中，加热30 min进行加热破坏试验；取5 mL 置试管中，加质量分数为10%的盐酸溶液2滴，加热30 min后用质量分数为10%的NaOH溶液调为中性作为酸性破坏试验；取5 mL置试管中，加质量分数为10%的NaOH溶液2滴，加热30 min后加质量分数为10%盐酸溶液调为中性作为碱性破坏试验；取5 mL置试管中，加质量分数为30%的过氧化氢2滴，加热30 min作为氧化破坏试验；取5 mL 置试管中，在紫外灯366 nm下光照1 h作为光照破坏试验；同时做溶解介质的破坏性试验。各取上述溶液20 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，结果酸性和碱性对盐酸多巴胺有明显的破坏，溶解介质约在1.1 min和1.4 min有杂质峰，拟定的色谱条件对分解产物与主峰有良好的分离，表明方法的专属性强，见图1。

3.2 方法的耐用性考察

选用Diamonsil C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）、江苏汉邦