医学免疫学：实验2 凝集反应(ABO血型测定)
abo 血型实验报告
abo 血型实验报告
ABO血型实验报告
实验目的：通过实验观察ABO血型的遗传规律，了解不同血型之间的关系，并
探讨血型在人类群体中的分布情况。
实验材料：本实验使用了实验室提供的血液样本和试剂盒，以及显微镜、玻片
等实验器材。
实验步骤：
1. 取得实验样本：我们从实验室中获取了一些不同血型的血液样本，包括A型、B型、AB型和O型。
2. 实验操作：将不同血型的血液样本分别与相应的抗体试剂混合，观察凝集反
应情况。
根据凝集反应的结果，确定每种血型的特征。
3. 显微镜观察：将凝集反应后的血液样本放在玻片上，使用显微镜观察不同血
型的红细胞形态和凝集情况。
实验结果：
A型血液样本与抗A抗体试剂发生凝集反应，而与抗B抗体试剂无凝集反应，
表明该样本为A型血型。
B型血液样本与抗B抗体试剂发生凝集反应，而与抗A抗体试剂无凝集反应，
表明该样本为B型血型。
AB型血液样本与抗A和抗B抗体试剂均无凝集反应，表明该样本为AB型血型。
O型血液样本与抗A和抗B抗体试剂均发生凝集反应，表明该样本为O型血型。
实验结论：通过实验观察，我们确认了ABO血型的遗传规律，即A和B为共
显性基因，O为隐性基因。
同时，我们也了解到不同血型之间的关系，比如AB
型为接受者，O型为供者。
此外，我们还了解到不同血型在人类群体中的分布情况，为临床输血和器官移植提供了重要的参考依据。
总结：本次实验通过ABO血型的实验操作和观察，深入了解了ABO血型的遗传规律和不同血型之间的关系，为我们更好地了解人类血液系统提供了重要的实验数据和理论基础。
血凝集实验报告
实验名称：血凝集实验实验日期：2023年X月X日实验地点：XX大学医学院免疫学实验室实验目的：1. 掌握血凝集实验的基本原理和操作步骤。
2. 学习通过血凝集实验鉴定血型。
3. 了解血型鉴定的临床意义。
实验原理：血凝集实验是利用抗原抗体反应原理，通过观察红细胞凝集现象来鉴定血型。
当含有相应抗体的血清与含有相应抗原的红细胞接触时，会发生凝集反应，从而判断血型。
实验材料：1. 血型鉴定试剂：抗A、抗B、抗ABO标准血清。
2. 抗原红细胞：A型、B型、AB型、O型红细胞。
3. 试管、移液器、试管架、滴管等。
实验步骤：1. 将抗A、抗B、抗ABO标准血清分别滴入三个试管中。
2. 将A型、B型、AB型、O型红细胞分别滴入四个试管中。
3. 将标准血清与相应红细胞混合，观察凝集现象。
4. 将A型标准血清与B型、AB型、O型红细胞混合，观察凝集现象。
5. 将B型标准血清与A型、AB型、O型红细胞混合，观察凝集现象。
6. 将AB型标准血清与A型、B型、O型红细胞混合，观察凝集现象。
7. 将O型标准血清与A型、B型、AB型红细胞混合，观察凝集现象。
实验结果：1. A型标准血清与A型红细胞混合，出现凝集现象。
2. B型标准血清与B型红细胞混合，出现凝集现象。
3. AB型标准血清与AB型红细胞混合，出现凝集现象。
4. O型标准血清与O型红细胞混合，出现凝集现象。
5. A型标准血清与B型、AB型、O型红细胞混合，未出现凝集现象。
6. B型标准血清与A型、AB型、O型红细胞混合，未出现凝集现象。
7. AB型标准血清与A型、B型、O型红细胞混合，未出现凝集现象。
8. O型标准血清与A型、B型、AB型红细胞混合，未出现凝集现象。
实验结论：根据实验结果，本实验成功鉴定了A型、B型、AB型、O型四种血型。
讨论：1. 血凝集实验是血型鉴定的常用方法，具有操作简便、快速、准确等优点。
2. 在实际操作过程中，应严格按照实验步骤进行，避免人为误差。
免疫学实验课 凝集反应
2. 方法：对倍稀释法
0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5ml
0.5ml
不加血清 弃去
1 1:40
2 1:80
3
4
5
6 1:1280
7 control
1:160 1:320 1:640
标记
加NS
加血清 倍比稀释
加菌液 从第7管起
混匀
反应18－24h
0.5ml
0.5ml 1:10血清
Blood type antigen antibody
A
B
O
AB
A anti-B
B anti-A
－ anti-A, anti-B
A,B －
－ 效价：出现50％凝集（部分凝集:++)血清 最高稀释度为效价。
抗体 O H PA PB 1:40 ++++ ++++ 1:80 +++ +++ 1:160 ++ ++ 1:320 + ++ 效价
• 结果解释
– 正常参考值:
• H • O、PA、PB <1:160 <1:80
– 动态观察:在病程中逐周复查,若效价递增或 恢复期效价比初次高4倍以上说明有诊断意 义。
0.5ml
3. 操作注意点
1). 倍比稀释 2). 吸头勿混, 注意吹打 3). 加菌液从第7管加起 4). 所有抗原完成后方摇匀 5). 观察结果勿振摇。
4. 结果观察
1. 观察勿振摇。 2. 从对照管观察起，后观察试验管。 3. 效价判定
abo血型测定实验报告
abo血型测定实验报告ABO血型测定实验报告引言：ABO血型系统是人类体内最常见的血型系统之一，由A、B、O三种血型组成。
本次实验旨在通过血型抗体与抗原的反应，确定被测者的ABO血型。
实验方法：1. 实验前准备：a. 需要的试剂：A、B、O三种血型抗体；被测血液样本。
b. 实验器材：试管、滴管、显微镜等。
2. 实验步骤：a. 将被测血液样本分别滴入三个试管中。
b. 在第一个试管中加入A型抗体，第二个试管中加入B型抗体，第三个试管中加入O型抗体。
c. 轻轻摇动试管，观察是否出现凝集现象。
d. 使用显微镜观察试管中的血型反应。
实验结果：根据实验结果，可以得出以下结论：1. 如果被测血液样本与A型抗体发生凝集反应，则被测者血型为A型。
2. 如果被测血液样本与B型抗体发生凝集反应，则被测者血型为B型。
3. 如果被测血液样本与A、B型抗体均未发生凝集反应，则被测者血型为O型。
4. 如果被测血液样本与A、B型抗体均发生凝集反应，则被测者血型为AB型。
讨论与分析：1. ABO血型的遗传规律：A和B血型是由A和B基因控制的，而O血型则是由O基因控制的。
A和B基因都是显性基因，而O基因是隐性基因。
因此，A和B基因共存时，表现为AB型血型；而O基因与A、B基因共存时，表现为A 型或B型血型。
2. ABO血型的分布情况：在全球范围内，O型血型是最常见的，占人口的大约45%；A型血型占40%左右；B型血型占10%左右；AB型血型是最罕见的，仅占5%左右。
3. ABO血型与健康状况的关系：研究表明，不同血型的人群在某些疾病的易感性方面存在差异。
例如，A型血型的人更容易患心血管疾病，而O型血型的人则相对较少。
这种关联可能与血型抗原对血液凝块形成和炎症反应的影响有关。
结论：通过本次实验，我们成功地测定了被测者的ABO血型，并对ABO血型的遗传规律、分布情况以及与健康状况的关系进行了讨论。
ABO血型的测定在医学和血液输血等领域具有重要意义，有助于确保血液输血的安全性和有效性。
abo血型测定实验报告
abo血型测定实验报告ABO血型测定实验报告。
实验目的，通过实验掌握ABO血型的测定方法，了解不同血型间的抗体和抗原反应，加深对血型遗传规律的理解。
实验仪器和试剂，玻璃量筒、试管、移液管、洗涤皿、显微镜、抗A血清、抗B血清、洗涤液、试纸条。
实验步骤：1. 实验前准备，将玻璃量筒、试管、移液管等实验器材清洗干净，准备好所需试剂和试纸条。
2. 取一张试验纸，用移液管吸取一滴被测血液滴在试纸上，分别滴加抗A血清和抗B血清。
3. 轻轻摇晃试纸，观察凝集反应。
若出现凝集，表示被测血液中含有相应的抗原。
4. 观察血型凝集反应结果，并记录下来。
实验结果：实验结果显示，被测血液在抗A血清中出现凝集反应，而在抗B血清中未出现凝集反应。
根据实验结果，可判断被测血液为A型血。
实验分析：根据ABO血型遗传规律，A型血的基因型可以是AA或AO，而B型血的基因型可以是BB或BO。
因此，被测血液为A型血，可能的基因型为AA或AO。
实验结论：通过本次实验，我们成功地测定了被测血液的血型，并对血型遗传规律有了更深入的了解。
实验结果表明，被测血液为A型血，可能的基因型为AA或AO。
实验总结：本次实验通过简单的试剂和试纸条，成功地测定了被测血液的血型，加深了对ABO血型的理解。
同时，也展现了血型遗传规律的重要性，为进一步的相关研究提供了基础。
实验注意事项：1. 实验过程中要注意个人安全，避免血液直接接触皮肤和黏膜。
2. 实验器材要保持清洁，避免交叉污染。
3. 实验操作要准确无误，避免误差产生。
通过本次实验，我们成功地掌握了ABO血型的测定方法，并对血型遗传规律有了更深入的了解。
这将为我们的学习和研究提供重要的基础，也为今后的实验操作积累了宝贵的经验。
医学免疫学实验指导：凝集反应
医学免疫学实验指导：凝集反应内容：四、直接凝集反应（一）玻片凝集反应—细菌的鉴定、ABO血型鉴定（二）试管凝集反应五、间接凝集反应（一）正向间接凝集反应—间接凝集乳胶试验、间接血凝试验（二）反向间接凝集反应—反向间接血凝试验、协同凝集试验（三）间接凝集抑制试验试验、直接凝集反应（Direct agglutination reaction）细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与下直接与相应的抗体结合形成肉眼可见的凝集块，称为直接凝集反应。
常用的直接凝集试验有玻片法和试管法两种。
㈠玻片凝集反应（Slide agglutination test）玻片凝集反应是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质（如细菌，红细胞等）在玻片上混合，在有适当的电解质存在的条件下，如两者对应便发生特异性结合，形成肉眼可见凝集物，即为阳性；如两者不对应，便无凝集物出现，即为阴性。
此法属定性试验，主要用于细菌鉴定和分型、人类红细胞ABO血型的鉴定等。
⒈细菌的鉴定：【材料】⑴1∶20稀释的伤寒杆菌的诊断血清。
⑵伤寒杆菌、大肠杆菌18~24小时培养物、生理盐水。
⑶洁净载玻片、接种环、酒精灯、记号笔等。
【方法】⑴取洁净载玻片一张，用记号笔划分为三格，并依次编号为1、2、3。
⑵用灭菌的接种环取生理盐水于玻片的三格内，各加2~3环。
⑶将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌，冷却后自平皿挑取少量大肠杆菌置于第2格生理盐水中混匀。
然后，同法分别取少许伤寒杆菌于第1格及第3格，与生理盐水混匀。
⑷用灭菌接种环于第2格加伤寒杆菌诊断血清2~3环并混匀，同法取伤寒杆菌诊断血清2~3环，加于第1格中混匀。
⑸轻摇玻片，静置1~2分钟后，观察结果，【结果】如上述混合悬液由均匀混浊状变为澄清透明，并出现大小不等的乳白色凝集块者为阳性；如混合物仍呈均匀混浊，无凝集物者为阴性。
【注意事项】⑴每一待检菌均须作生理盐水对照，如对照凝集则表示细菌发生自凝，试验无效。
免疫学凝集试验
课程名称：病原生物学与免疫学实验指导老师:陈玮— ___________ ______ 成绩： _________________实验名称：凝集反应和吞噬作用 ______________ 实验类型： ________________ 同组学生姓名：钟一鸣__1■直接凝集反应——ABO 血型鉴定【实验原理】细菌、细胞等颗粒性抗原，在适当电解质参与下可直接与相应抗体结合出现凝集， 称为直接凝集反应。
常用的包括玻片法和试管法两种。
玻片凝集试验为定性实验， 一般用已知抗体作为诊断血清， 与受检颗粒性抗原如菌液或红细胞，各加一滴在玻片上，混匀，数分钟后即可用肉眼观察凝集结果，出现凝集颗粒的为阳性。
此法简便、快速，适用于从病人标本中分离得到的菌种的诊断或分型， 也可用于红细胞ABO 血型的鉴定。
在ABO 血型系统，根据红细胞膜上是否含有 A 、B 抗原而分为A （含A 抗原）、B （含 B 抗原）、AB （含A 、B 抗原）、O （均不含A 、B 抗原）型。
将受试者的红细胞加入抗 B 抗 体试剂和抗A 抗体试剂中，观察有无凝集现象， 从而测知受试者红细胞上有无 A 、B 抗原。
表1 ABO 血型鉴定表血型 抗A 分型试剂抗B 分型试剂A + -B - + AB + + O--【实验现象】汗巧‘丛漿实验报告专业:临床医学 _______________ 姓名：曹静 _________________学号：3120102956 ___________ 日期：2014.12.8 __________ 地点：教A401 _______________1)•在抗A抗体中，可见红细胞均匀分散，虽有时会见红细胞在圆孔中间沉积，但再加以摇晃便可发现红细胞分散。
整体液体较为浑浊2).在抗B抗体中，可见红细胞在圆孔中央凝集成块，加以摇晃也不分散，周围液体较为澄清。
【实验结论】该受试者血液红细胞含B抗原，为B型血【实验讨论】1)实验时应当注意抗体和抗原的比例。
免疫学凝集反应实验报告
免疫学凝集反应实验报告一、实验目的本实验旨在通过免疫学凝集反应实验，了解抗原-抗体反应的基本原理，掌握凝集反应的方法和技巧。
二、实验原理1. 抗原-抗体反应抗原是指能够诱导机体产生特异性免疫反应的物质，通常是蛋白质、多糖或脂质等大分子化合物。
当抗原进入机体后，会刺激机体产生相应的抗体，抗体与抗原结合形成复合物，从而发挥免疫作用。
2. 凝集反应凝集反应是指在特定条件下，由于抗原与抗体结合形成可见的凝集现象。
这种现象可以用于检测血清中是否存在某种特定的抗体或抗原。
三、实验步骤1. 制备试剂将所需试剂按比例配制好，并进行必要的消毒处理。
2. 样品处理将待测样品进行必要的处理，如离心、稀释等。
3. 加入试剂将样品加入已经配制好的试剂中，并混匀。
4. 观察结果观察混合液是否出现凝集现象，并记录结果。
四、实验注意事项1. 实验过程中应严格按照操作规程进行，避免操作失误。
2. 试剂的配制和消毒处理应注意卫生和安全。
3. 样品处理时应注意离心速度和时间，避免对样品造成损伤。
4. 操作时应注意洁净卫生，避免污染试剂和样品。
五、实验结果分析通过本次实验，我们成功地观察到了抗原-抗体反应产生的凝集现象。
根据观察结果，我们可以判断待测样品中是否存在特定的抗体或抗原。
此外，在实验过程中我们也掌握了凝集反应的方法和技巧，并了解了抗原-抗体反应的基本原理。
六、实验结论通过本次免疫学凝集反应实验，我们深入了解了抗原-抗体反应的基本原理，并掌握了凝集反应的方法和技巧。
这对于我们今后在医学、生物学等领域开展相关研究具有重要意义。
免疫学实验 凝集反应-ABO血型测定
思考题
• 凝集试验有哪些？可用于检测的原理是什 么？
精棉球等
实验方法与步骤
1、标记玻片：取玻片一张，一分为二， 分别标记为抗A，抗B。
2、采血：用酒精棉球消毒被检者左手无 名指或中指内侧，用采血针刺破皮肤， 用干棉球擦去第一滴血，稍加挤压，使 其流出第二滴血，装入盐水试管，摇匀， 即成血细胞悬液。
3、加抗血清：滴加抗A，抗B血清于玻片 标记处
4、加RBC：在抗A，抗B血清中滴加RBC 各一滴。
实验十一 ABO血型鉴定
目的与要求
• 掌握凝集反应的原理与类型 • 掌握玻片凝集法操作与结果判断 • 熟悉ABO血型鉴定的原理与操作
玻片凝集法-ABO血型鉴定
• 试验目的 通过标准血清抗体鉴定红细胞上ABO血型 系统抗原，掌握盐水介质法进行ABO血型 系统正定型的基本操作方法和结果判断。
实验原理
• 根据IgM类特异性血型抗体与红细胞上特 异性抗原结合能够出现凝集反应的原理， 用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红 细胞在盐水介质中反应（室温），若出现 凝集想象，表明被检红细胞膜上有与血型 抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定被检 者的血型。
实验材料与方法
• 试剂：抗A血清，抗B血清 • 材料：玻片，采血针，消毒干棉球，酒
5、混匀：前后左右摇动，观察有无血细 胞凝集出现。
6、结果：记录பைடு நூலகம்检者红细胞凝集情况及 血型鉴定结果
ABO血型结果判断
抗B
抗A
血型
-
+
+
-
+
+
-
-
试管凝集试验
• 多用于半定量试验，原则上是用定量抗原 悬液与一系列倍比稀释的受检血清混合， 在保温静置后观察结果，以判定受检血清 中有无相应抗体及其效价。
凝集反应(ABO血型的鉴定)
实验一凝集反应（ABO血型的鉴定）[实验目的]1．掌握凝集反应的原理，玻片法和试管法凝集实验的实验方法和结果分析。
2．了解凝集反应基本类型及血型鉴定的各种方法包括正、反定型，血型板鉴定法和血型卡鉴定法。
[实验原理]在一定浓度的电解质溶液中，颗粒性抗原与相应抗体结合后，出现肉眼可见的凝集块，称为凝集反应。
人类ABO血型抗原主要有A和B两种，根据红细胞表面这两种抗原的有无可把血型分为四种。
据此，将抗A和抗B抗体分别与待测红细胞混合，抗A或（和）抗B抗体与红细胞表面上的相应抗原结合而引起红细胞凝集，据其凝集情况便可判定出受试者的血型。
[实验器材]1．器材：光学学显微镜，消毒缸2．材料：消毒干棉球，一次性采血针，载玻片，玻璃试管，一次性带刻度朔料吸管，医用黄色垃圾袋3．试剂：75%医用酒精，0.9%NaCl注射液，抗血清试剂抗A、抗B[内容与方法](一)玻片法凝集实验1.用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。
滴1至2滴血液于含有1ml生理盐水的试管内，摇匀，制成约0.5%血球悬液。
用干棉球止血。
2．取洁净载玻片1块，在中间用蜡笔画一条竖线，将抗A、B分型试剂分别加1滴于载玻片两端。
3. 用毛细吸管吸取血球悬液，在白瓷板的两个圆孔内各加一滴,并充分混匀，放置5－10分钟。
4.肉眼观察红细胞有无凝集发生。
如有凝集，可见红细胞凝集成块；无凝集，红细胞呈均匀分散。
若肉眼观察不明显，可在显微镜下观察是否存在微小凝集5.记录凝集情况，判定受检者的血型。
（二）试管法凝集实验1．用酒精棉签消毒被检者手指尖端，以采血针刺破皮肤，稍加挤压，使血液流出。
滴1至2滴血液于含有生理盐水的试管内，摇匀，制成约0.5%血球悬液。
用干棉球止血。
2．取洁净试管2支，分别标记上A、B字样，将抗A、B分型试剂分别加1滴于相应标记的试管中3．用一次性吸管吸取血球悬液，在2支标记试管中各加一滴,并充分混匀，放置5－10分钟。
实验2、凝集反应(一)
• 实验方法：
对照区 试验区
NS 1d 抗伤1d 加伤寒菌液各1d 充分混匀，室温下静置数分钟，观察结果
• 结果观察：
1. 对照区不发生凝集，为均匀浑浊的乳状 液。 2.试验区，伤寒菌液（Ag）与相应的Ab发 生反应，出现肉眼可见的凝集块，为阳 性。 如与对照相同则为阴性。
反向间接血凝法
• 定义：
• 实验方法：
将待检血清作一系列倍比稀释，同微量法。
（ul） 1 2 3 4 5 6 7 8（对照） NS 25 25 25 25 25 25 25 25 血清 25 25 25 25 25 25 25 弃25 致敏SRBC 各加 25ul 置微量振荡器上振荡混匀30秒，37度水浴，45~60分钟 后观察结果。
实验2、 凝集反应（一）
凝集反应的定义
• 凝集反应：颗粒性Ag或可溶性Ag（Ab）与 载体颗粒结合成的致敏颗粒，与相应Ab （Ag）发生特异性反应。在一定条件下， 形成肉眼可见的凝集现象。 • 直接凝集反应：颗粒性Ag，与相应Ab直接 结合。在一定条件下，形成肉眼可见的凝 集现象。 • 间接凝集反应：必须借助颗粒性载体，将 可溶性Ag（Ab）致敏载体，成致敏颗粒， 察
实验内容
• 直接凝集试验：玻片法 • 间接凝集试验：反向间接血凝法 妊娠胶乳试验
玻片法凝集反应
• 原理：颗粒性Ag（细菌、红细胞等），与 相应Ab直接结合。在一定条件下，形成肉 眼可见的凝集现象。 • 意义： 1. 定性试验，可用已知抗体的诊断血清 来测未知的抗原。 2. 可用于细菌分型、ABO血型鉴定等。
间接凝集反应：将可溶性Ag挂在一个无 关免疫的载体上，制备成颗粒Ag， 与其相应的Ab相结合。 反向间接凝集反应：如果是将Ab制备成 颗粒性Ab，与其相应的Ag相结合。
abo血型鉴定的实验原理
abo血型鉴定的实验原理
ABO血型系统是人类最常见的血型系统之一，用于描述人们的血液类型。
ABO 血型由两种糖类抗原A和B以及血清中的两种抗体Anti-A和Anti-B组成。
在ABO血型鉴定中，根据患者血清中的抗体以及供体红细胞表面的抗原，可以确定其血型。
ABO血型鉴定的实验原理基于凝集反应。
在实验中，将待测血清与已知类型的红细胞混合，通过观察混合物中是否发生凝集反应，来确定该血清是否含有相应抗体。
如果混合物中发生凝集反应，表示待测血清中含有与供体红细胞表面抗原相对应的抗体。
例如，如果混合A型血液和Anti-A抗体，会出现凝集反应，因为A型血液上有A抗原，Anti-A抗体能与其结合形成凝集。
同理，如果混合B型血液和Anti-B 抗体，也会出现凝集反应。
此外，如果混合O型血液和Anti-A、Anti-B抗体，不会出现凝集反应，因为O 型血液上没有A、B抗原。
总之，ABO血型鉴定是一种简单而常用的凝集反应，通过混合血清和已知类型的红细胞，根据是否发生凝集反应来确定血型。
该方法方便、快速，具有良好的准确性和可重复性。
凝集法血型
凝集法血型测定是一种常用的血型鉴定方法，通过利用特定的凝聚剂，如抗A、抗B或抗AB抗体等，与血液中的红细胞发生凝集反应，从而确定血型。
下面是凝集法血型测定的基本步骤和注意事项：1. 准备试剂：根据需要准备相应的凝聚剂，如抗A、抗B或抗AB抗体等。
同时，还需要准备生理盐水或其他适当的缓冲液作为反应介质。
2. 采集血液：采集待测血液样本，通常使用静脉采血。
采集后应尽快将血液稀释并离心，以分离红细胞。
3. 加入凝聚剂：将准备好的凝聚剂加入到红细胞稀释液中，形成凝集反应。
注意控制凝聚剂的浓度和反应时间。
4. 观察结果：凝集反应发生时，红细胞会发生聚集，观察到明显的凝集现象。
通过观察结果可以确定血型为A、B或AB。
5. 结果判断：根据观察到的凝集程度，结合已知的对照样本进行判断。
通常在实验室中，可以通过肉眼或显微镜观察结果。
在凝集法血型测定过程中，需要注意以下几点：1. 血液样本的质量：为了保证结果的准确性，应采集新鲜的血液样本，避免溶血和乳糜血。
2. 离心速度和时间：离心速度和时间会影响红细胞与血浆的分离效果，因此需要控制好离心条件。
3. 凝聚剂的质量和浓度：凝聚剂的质量和浓度会影响凝集反应的强度，因此需要确保使用的凝聚剂符合质量标准，并按照说明书进行操作。
4. 反应温度和时间：反应温度和时间会影响凝集反应的进程，因此需要控制好反应条件。
总之，凝集法血型测定是一种常用的血型鉴定方法，通过利用特定的凝聚剂与血液中的红细胞发生凝集反应，可以确定血型。
在测定过程中，需要注意血液样本的质量、离心条件、凝聚剂的质量和浓度以及反应温度和时间等因素，以保证结果的准确性。
医学免疫学：第五章(2) 凝集反应
第五章（2）凝集反应Chapter 15 Agglutination Test第一部分教学内容和要求一、目的要求·掌握：凝集反应的原理、类型及临床应用；熟悉：凝集反应的技术要点、实验影响因素、方法评价、间接凝集常用的载体；了解：凝集反应各阶段的特征。
二、教学内容1。
凝集反应的特点与类型。
2。
直接凝集反应：玻片凝集试验，试管凝集试验。
3。
间接凝集反应：间接凝集反应的类型，间接血凝试验，胶乳凝集试验，间接凝集试验的临床应用。
4．自身红细胞凝集试验。
5．抗球蛋白试验。
第二部分测试题一、选择题（一）单项选择题（A型题）1．直接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体2．玻片凝集实验A．只能检测抗原，不能检测抗体B．既能检测抗原，又能检测抗体C．只能检测抗体，不能检测抗原D．为半定量实验E．不能用于ABO血型鉴定3。
下列哪一项不属于玻片凝集试验A。
菌种鉴定 B。
血清学分型 C。
人类ABO血型鉴定D．定量检测前筛选试验 E。
血清抗体效价测定4.试管凝集试验的效价判断标准是依据出现肉眼可见的如下凝集现象A．“+”B．“+或++”C．“++”D．“+++”E．“++++”5．间接抗球蛋白实验用于检测A．血清中结合的抗体B．血清中游离的不完全抗体C．红细胞表面结合的不完全抗体D．红细胞表面结合的完全抗体E．血清中游离的完全抗体6．协同凝集试验所用的载体是A．新鲜红细胞B．洗涤红细胞C．醛化红细胞D．聚苯乙烯颗粒E．金黄色葡萄球菌7．自身红细胞凝集试验红细胞是A．标准新鲜红细胞B．标准洗涤红细胞C．标准醛化红细胞D．受检者未致敏红细胞E．受检者致敏红细胞（二）多项选择题（X型题）1．实验中,促进凝集现象的措施有A．低温离心 B．增加电解质或蛋白质 C．加入右旋糖酐或葡聚糖D．用胰酶处理 E．加入抗原2。
实验2 凝集反应-ELISA(双抗原夹心法)
4
ABO血型鉴定步骤
红细胞悬液的制备（用于血型鉴定及ELISA实验） 1. 取EP管1支，加入5滴生理盐水 2. 消毒耳垂或手指皮肤 3. 用采血针采1-2滴血，加入盛有生理盐水的EP管中混匀 4. 2000rpm，离心3min
取上清用于ELISA实验
5. 取红细胞悬液用于ABO血型鉴定 6. 取已加有抗A血清与抗B血清载玻 片 1张，分别加入待测抗原各 1 滴， 并用牙签混匀。 7. 置室温5 分钟左右观察结果。
5
ABO血型鉴定的判断
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
B 型 A 型
示 意 图
抗A型标准血清 抗B型标准血清 抗A型标准血清 抗B型标准血清
O 型
AB 型
注意事项
用牙签研磨时，注意防止将抗A血清带到抗 B血清中，反之亦然。
如果凝集现象不太明显时，可用显微镜观察。
9
10
实验报告
玻片凝集反应-ABO血型鉴定
酶联免疫吸附试验（双抗原夹心ELISA）
免 疫 学 实 验 课
贵阳医学院免疫学教研室
1
实验内容
1、ABO血型鉴定--玻片凝集反应（1份/1人） 2、乙型肝炎病毒表面抗体检测--ELISA法(1份/1人）
2
（一）玻片凝集反应
已知抗血清与未知颗粒性抗原置于 清洁玻片上，在一定的条件下，若两者 相对应，则会发生凝集。本方法主要用 于抗原的定性分析，如菌种鉴定、ABO 血型鉴定等。
7
乙型肝炎病毒表面抗体的检测 ——双抗原夹心ELISA法
测定原理 采用纯化乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg） 包被反应板，加入待检标本，当标本中存在抗HBs时，该抗体与包被HBsAg结合，再加入辣根 过氧化物酶标记乙型肝炎病毒表面抗原 （ HBsAg –HRP），最后形成HBsAg-抗HBs-酶 标记抗原复合物，加入底物产生显色反应。
医学免疫学：实验2 凝集反应(ABO血型测定)
实验目的:
检测血清标本中有无HBsAb
材料:
48孔ELISA板
阳性对照血清（HBsAb） 阴性对照血清 酶标二抗
乙肝病毒表面抗体 诊断试剂盒
洗涤液
底物A和B
微量加样器，待测血清标本等
实验方法
微孔板已包被HBsAg
HBsAg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
+ + — — ① ① ① ① ② ② ② ②A + + — — ③ ③ ③ ③ ④ ④ ④ ④B + + — — ⑤ ⑤ ⑤ ⑤ ⑥ ⑥ ⑥ ⑥C + + — — ⑦ ⑦ ⑦ ⑦ ⑧ ⑧ ⑧ ⑧D
实验结果
颜色变化或OD（吸光度）值
酶标板
酶标仪
加样
+-1 2 3456
每孔加 50μl 不同的血清样本 Positive control (HBsAb) ：1 滴 Negative control (NS): 1 滴
加样
+
- sample
加酶结合物
enzyme
每孔加酶结合物1滴 混匀， 37 ℃ 30 min.
ELISA(酶联免疫吸附试验) 凝集反应(ABO血型测定)
凝集反应
原理:
颗粒性抗原与相应抗体发生特异性结合，并 在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。
应用：检测未知Ag或Ab
分类：
1.直接凝集反应： 玻片法---ABO血型鉴定、菌种鉴定
试管法---肥达反应
2.间接凝集反应
ABO血型测定
实验目的: 检测待测者ABO血型
材料: 抗A和抗B血清, 生理盐水, 载玻片, 采血针等.
实验方法
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实验目的:
检测血清标本中有无HBsAb
材料:
48孔ELISA板
阳性对照血清（HBsAb） 阴性对照血清 酶标二抗
乙肝病毒表面抗体 诊断试剂盒
洗涤液
底物A和B
微量加样器，待测血清标本等
实验方法
微孔板已包被HBsAg
HBsAg
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
+ + — — ① ① ① ① ② ② ② ②A + + — — ③ ③ ③ ③ ④ ④ ④ ④B + + — — ⑤ ⑤ ⑤ ⑤ ⑥ ⑥ ⑥ ⑥C + + — — ⑦ ⑦ ⑦ ⑦ ⑧ ⑧ ⑧ ⑧D
实验结果
颜色变化或OD（吸光度）值
酶标板
酶标仪Βιβλιοθήκη 样+-1 2 3456
每孔加 50μl 不同的血清样本 Positive control (HBsAb) ：1 滴 Negative control (NS): 1 滴
加样
+
- sample
加酶结合物
enzyme
每孔加酶结合物1滴 混匀， 37 ℃ 30 min.
放射物标记技术 酶标技术
免疫荧光技术
酶联免疫吸附试验
酶免疫组化技术
双抗体夹心法
竞争法
双抗原夹心法
间接法
直接法
原理：间接ELISA法(酶联免疫吸附试验)
不显色
洗涤
洗涤
1.包被已知抗原 2.加入待测标本 （未知抗体？） 3.加入酶标二抗 （即抗抗体 ：抗人Ig的抗体） 4.加入底物
颜色改变 = 待测标本中存在抗体
实验结果
呈红色片状凝集颗粒为阳性 实验结束后，洗涤试管；
玻片置于消毒缸中 塑料滴管弃去
ELISA
(酶联免疫吸附试验) Enzyme Linked Immunosorbent Assay
免疫标记技术: 将抗原、抗体的特异性反应与标记物相结
合的新技术，用于定性或定量检测未知的抗原 或抗体。
免疫标记技术
ELISA(酶联免疫吸附试验) 凝集反应(ABO血型测定)
凝集反应
原理:
颗粒性抗原与相应抗体发生特异性结合，并 在一定条件下形成肉眼可见的凝集物。
应用：检测未知Ag或Ab
分类：
1.直接凝集反应： 玻片法---ABO血型鉴定、菌种鉴定
试管法---肥达反应
2.间接凝集反应
ABO血型测定
实验目的: 检测待测者ABO血型
加酶标二抗
+
-
抗原抗体 复合物
游离
洗涤
+
-
加底物
每孔加底物 A and B 各一滴 混匀， 37 ℃ 10 min
实验结果
颜色变化或OD（吸光度）值 酶标板
思考
ELSA实验中，待测标本是否含有乙 肝表面抗体？为什么？
ABO血型鉴定实验中，待测者的血型 属哪一型？为什么？
血型鉴定在临床中有什么应用？
步骤：
1、加入待检标本50ul； 同时设阴性对照和阳性对照 (分别各加1滴)
go 2、加入酶结合物1滴/每孔，混匀，封板，
37℃30min 3、弃去每孔液体, 用洗涤液洗涤每孔，5秒×5
次， 拍干板
4、每孔加显色液A、B各1滴, 混匀, 37 ℃1015min
5、肉眼观察颜色深浅 （+：蓝色； —：无色）
材料: 抗A和抗B血清, 生理盐水, 载玻片, 采血针等.
实验方法
准备生理盐水管：0.5ml / 管
制备红细胞悬液: 碘酒、酒精消毒无名 指端, 采血, 1或2滴血液滴入生理盐水 管中
载玻片两端分别加抗A, 抗B血清各1滴
载玻片两端分别加红细胞悬液各1滴, 混 匀, 10-15分钟内观察结果