白血病的实验室诊断 急性白血病的诊断与分型
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? M4c：原始细胞即具有粒细胞系又具有单核细 胞系形态特征＞ 30% （非红系）
? M4eo：除上述特点外，还有粗大而圆的嗜酸 颗粒及嗜碱颗粒细胞占 5~30% （非红系）
? 细胞化学染色： POX＞3%，NSE：阳性， NSE-NaF：抑制，， CE：部分阳性，
M4
M4 NSE 单为主
NSE-NaF
? 急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和 急性非淋巴细胞白血病。
? 常用的细胞化学染色：POX 、NSE 、 NSE-NaF 、CE、NAP 、ACP 、PAS 等
急性白血病形态学特点：
? 血象：贫血，白细胞大部分明显最高，少 数减少，可见原始、幼稚细胞，血小板明 显减少。
? 骨髓象：常增生明显活跃或极度活跃，原 始、幼稚细胞明显增多，常常伴有形态学 异常，红系、巨核系受抑制。
个亚型：M2a：骨髓中原粒细胞 30~90% （非红系），早幼粒以下阶段＞ 10%，单核细 胞＜20%；M2b：异常中性中幼粒＞ 30%。
? 细胞化学染色： POX＞3%，NSE：阴性~弱 阳性，NSE-NaF ：不抑制， NAP：减低，CE： 阳性， PAS ：阴性
M1、M2a
POX
NSE
NSE-NaF
识别髓系细胞的抗体有CD13、CD14、CD15、 CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、 CD166等。 识别淋巴细胞系列的抗体有：CD1、CD2、 CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、 CD10、CD19、CD20、CD52、CD77等。 识别巨核细胞和血小板的抗体有CD41、 CD42、CD61、等。 识别红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白A或B， CD71。
? 根据细胞化学染色将急性白血病分型
≥3% ANLL
POX ＜3% ALL
NSE，NSE-NaF
NSE，NSE-NaF
不抑制
抑制
抑制
不抑制
细胞体积大小、胞浆空泡
早幼粒
原始
原始 + 幼稚 红系 ≥50%
小细胞 大小细胞 大细胞胞浆有空泡
M3 M1、M2 M6 M4 M5 L1 L2
L3
细胞免疫分型的临床应用 1 有助于识别不同系列的细胞
白血病 的实验室诊断
安徽省立医院 丁邦胜
患者有不明原因的持续或 反复发热，贫血，恶液质，有 出血倾向，肝、脾、淋巴结肿 大，骨骼疼痛或胸骨有压痛， 不明原因的消瘦，体力逐渐下 降等症状就诊时，医生要高度 警惕。考虑是否为血液病？
血常规的检测是必不可少的
血常规中 会发现原 始或幼稚 细胞，或 某一种细 胞明显增 多或减少
NSE
粒为主
NSE-NaF
M4eo
? 免疫表型： CD13,CD14,CD15.CD33.HL A-DR阳性
? 遗传学：M4Eo有16号染色体 异常，inv(16)(p13;q22)或 t(16;16)(p13;q22)
白血病细胞形态特点
? 细胞大小不均及形态异常 ? 胞核异常，核形不规则，可见扭曲、
折叠 ? 核仁异常，核仁有的大而明显，有
的不清 ? 变性的征象：Auer`s小体、蓝细胞。
? 骨髓检查是诊断白血病的主要方法
? 骨髓中原始粒细胞或原始（单、淋）+ 幼稚（单、淋）细胞≥20% 方可诊断 为急性白血病
NSE
M3
NSE-NaF
?免疫表型： CD33,CD13阳性， CD34、HLA-DR阴性
? 遗传学：t（15；17）及 PNL/RARa融合基因
? M4：急性粒-单细胞白血病。分为 4个亚型
? M4a：原始和早幼粒细胞为主，原、幼单和单 核细胞 ≥20% （非红系）
? M4b：原、幼单核细胞为主，原始和早幼粒细 胞＞ 20%（非红系）
识别不同的淋巴系统 识别成熟T淋巴细胞的抗体有 CD2、CD3、CD4、CD7、 CD8等。 识别成熟B淋巴细胞的抗体有 CD19、CD20、CD22等。 识别NK细胞的抗体有CD16、 CD56等。
用于识别不同分化阶段的细胞 CD34+、CD90+、Lin-被认为
使造血干细胞的主要标志 ; CD34+、CD33+为造血干细胞
向髓系定向的标志 ; CD34+、TDT+、CD10+、
CD7+为T淋巴细胞系祖细胞标志； CD34+、CD19+为B淋巴细胞
系祖细胞标志。
? 急性粒细胞白血病（ M1、M2）
? M1：急性粒细胞白血病未成熟型，骨髓中原
粒细胞≥90% （非红系），早幼粒很少，中 幼粒以下阶段不见或罕见。
? M2：急性粒细胞白血病部分成熟型，分为两
M1免疫表型：
HLA─DR,MPO, CD34,CD33,CD13阳性， CD11,CD15 阴性 有t(9;22)形成BCR/ABL融合 基因
M2免疫表型： HLA─DR,MPO, CD33,CD13 阳性， 有t(6; 9)形成DEK-CAN融合基 因
M2b
?免疫表型： HLA-DR,MPO, CD57,CD33,CD13阳性，其 中CD33,CD13阳性率减低， 更成熟的抗原CD15和 CD11b阳性率增高
其起病急，发展快，未经治疗一般病程 6个月
之内。
? 病因：1、电离辐射
?
2、化学因素
?
3、病毒
?
4、遗传因素
按白血病细胞成熟障碍的情况， 以及病情发展快慢将白血病划分为 急性白血病和慢性白血病
急性白血病的分型由过去 的单一的FAB形态学分型方法 发展为: 形态学（Morphological)、 免疫学(Immunological)、细胞 遗传学(Cytogenetics)、分子生 物学（Molecular biology)的 MICM分型方法
当高度怀疑是白血病，骨
髓穿刺是首要进行的，骨髓细 胞学检测是诊断白血病及疗效 观察、判断预后有着重要作用。
?
白血病是起源与造血系统的恶性肿瘤性
疾病，其特征是造血组织中某一系列或几系列
血细胞无控制地增生、并侵润其他组织，骨髓
及外周血中以原始及早期幼稚细胞为主，临床
常见贫血、发热和肝、脾、淋巴结肿大等表现，
有t(8;21)（q22;q22)或 AML1基因重排
? M3：急性颗粒增多的早幼粒 细胞白血病
?分为两个亚型： M3a（粗颗 粒型），M3b（细颗粒型）
? 细胞化学染色：POX： 100%强阳性，NSE：阳性， NSE-NaF：不抑制，NAP： 减低，CE：阳性
M3aห้องสมุดไป่ตู้
M3b
M3
POX
M3
? M4eo：除上述特点外，还有粗大而圆的嗜酸 颗粒及嗜碱颗粒细胞占 5~30% （非红系）
? 细胞化学染色： POX＞3%，NSE：阳性， NSE-NaF：抑制，， CE：部分阳性，
M4
M4 NSE 单为主
NSE-NaF
? 急性白血病分为急性淋巴细胞白血病和 急性非淋巴细胞白血病。
? 常用的细胞化学染色：POX 、NSE 、 NSE-NaF 、CE、NAP 、ACP 、PAS 等
急性白血病形态学特点：
? 血象：贫血，白细胞大部分明显最高，少 数减少，可见原始、幼稚细胞，血小板明 显减少。
? 骨髓象：常增生明显活跃或极度活跃，原 始、幼稚细胞明显增多，常常伴有形态学 异常，红系、巨核系受抑制。
个亚型：M2a：骨髓中原粒细胞 30~90% （非红系），早幼粒以下阶段＞ 10%，单核细 胞＜20%；M2b：异常中性中幼粒＞ 30%。
? 细胞化学染色： POX＞3%，NSE：阴性~弱 阳性，NSE-NaF ：不抑制， NAP：减低，CE： 阳性， PAS ：阴性
M1、M2a
POX
NSE
NSE-NaF
识别髓系细胞的抗体有CD13、CD14、CD15、 CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、 CD166等。 识别淋巴细胞系列的抗体有：CD1、CD2、 CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、 CD10、CD19、CD20、CD52、CD77等。 识别巨核细胞和血小板的抗体有CD41、 CD42、CD61、等。 识别红细胞系列的抗体常用血型糖蛋白A或B， CD71。
? 根据细胞化学染色将急性白血病分型
≥3% ANLL
POX ＜3% ALL
NSE，NSE-NaF
NSE，NSE-NaF
不抑制
抑制
抑制
不抑制
细胞体积大小、胞浆空泡
早幼粒
原始
原始 + 幼稚 红系 ≥50%
小细胞 大小细胞 大细胞胞浆有空泡
M3 M1、M2 M6 M4 M5 L1 L2
L3
细胞免疫分型的临床应用 1 有助于识别不同系列的细胞
白血病 的实验室诊断
安徽省立医院 丁邦胜
患者有不明原因的持续或 反复发热，贫血，恶液质，有 出血倾向，肝、脾、淋巴结肿 大，骨骼疼痛或胸骨有压痛， 不明原因的消瘦，体力逐渐下 降等症状就诊时，医生要高度 警惕。考虑是否为血液病？
血常规的检测是必不可少的
血常规中 会发现原 始或幼稚 细胞，或 某一种细 胞明显增 多或减少
NSE
粒为主
NSE-NaF
M4eo
? 免疫表型： CD13,CD14,CD15.CD33.HL A-DR阳性
? 遗传学：M4Eo有16号染色体 异常，inv(16)(p13;q22)或 t(16;16)(p13;q22)
白血病细胞形态特点
? 细胞大小不均及形态异常 ? 胞核异常，核形不规则，可见扭曲、
折叠 ? 核仁异常，核仁有的大而明显，有
的不清 ? 变性的征象：Auer`s小体、蓝细胞。
? 骨髓检查是诊断白血病的主要方法
? 骨髓中原始粒细胞或原始（单、淋）+ 幼稚（单、淋）细胞≥20% 方可诊断 为急性白血病
NSE
M3
NSE-NaF
?免疫表型： CD33,CD13阳性， CD34、HLA-DR阴性
? 遗传学：t（15；17）及 PNL/RARa融合基因
? M4：急性粒-单细胞白血病。分为 4个亚型
? M4a：原始和早幼粒细胞为主，原、幼单和单 核细胞 ≥20% （非红系）
? M4b：原、幼单核细胞为主，原始和早幼粒细 胞＞ 20%（非红系）
识别不同的淋巴系统 识别成熟T淋巴细胞的抗体有 CD2、CD3、CD4、CD7、 CD8等。 识别成熟B淋巴细胞的抗体有 CD19、CD20、CD22等。 识别NK细胞的抗体有CD16、 CD56等。
用于识别不同分化阶段的细胞 CD34+、CD90+、Lin-被认为
使造血干细胞的主要标志 ; CD34+、CD33+为造血干细胞
向髓系定向的标志 ; CD34+、TDT+、CD10+、
CD7+为T淋巴细胞系祖细胞标志； CD34+、CD19+为B淋巴细胞
系祖细胞标志。
? 急性粒细胞白血病（ M1、M2）
? M1：急性粒细胞白血病未成熟型，骨髓中原
粒细胞≥90% （非红系），早幼粒很少，中 幼粒以下阶段不见或罕见。
? M2：急性粒细胞白血病部分成熟型，分为两
M1免疫表型：
HLA─DR,MPO, CD34,CD33,CD13阳性， CD11,CD15 阴性 有t(9;22)形成BCR/ABL融合 基因
M2免疫表型： HLA─DR,MPO, CD33,CD13 阳性， 有t(6; 9)形成DEK-CAN融合基 因
M2b
?免疫表型： HLA-DR,MPO, CD57,CD33,CD13阳性，其 中CD33,CD13阳性率减低， 更成熟的抗原CD15和 CD11b阳性率增高
其起病急，发展快，未经治疗一般病程 6个月
之内。
? 病因：1、电离辐射
?
2、化学因素
?
3、病毒
?
4、遗传因素
按白血病细胞成熟障碍的情况， 以及病情发展快慢将白血病划分为 急性白血病和慢性白血病
急性白血病的分型由过去 的单一的FAB形态学分型方法 发展为: 形态学（Morphological)、 免疫学(Immunological)、细胞 遗传学(Cytogenetics)、分子生 物学（Molecular biology)的 MICM分型方法
当高度怀疑是白血病，骨
髓穿刺是首要进行的，骨髓细 胞学检测是诊断白血病及疗效 观察、判断预后有着重要作用。
?
白血病是起源与造血系统的恶性肿瘤性
疾病，其特征是造血组织中某一系列或几系列
血细胞无控制地增生、并侵润其他组织，骨髓
及外周血中以原始及早期幼稚细胞为主，临床
常见贫血、发热和肝、脾、淋巴结肿大等表现，
有t(8;21)（q22;q22)或 AML1基因重排
? M3：急性颗粒增多的早幼粒 细胞白血病
?分为两个亚型： M3a（粗颗 粒型），M3b（细颗粒型）
? 细胞化学染色：POX： 100%强阳性，NSE：阳性， NSE-NaF：不抑制，NAP： 减低，CE：阳性
M3aห้องสมุดไป่ตู้
M3b
M3
POX
M3