牛奶中乳糖含量的测定——直接滴定法

牛奶中乳糖含量的测定——直接滴定法

1. 1试验样品新鲜牛奶.

1. 2试验试剂碱性酒石酸铜甲液（300g硫酸铜和0.1g亚甲基蓝）; 碱性酒石酸铜乙液（100g酒石酸钠、150g氢氧化钠和8g亚铁氰化钾）;

21. 9%乙酸锌溶液; 10. 6%亚铁氰化钾溶液; 1mg /mL和0. 1mg /mL标准乳糖溶液。

1.3 溶液的配置

碱性酒石酸铜甲液：取300g硫酸铜粉末，加适量温蒸馏水溶解；取0.1g亚甲基蓝适量蒸馏水溶解。前者冷却后加入2L容量瓶，再加入后者，之后用蒸馏水定容至2L。

碱性酒石酸铜乙液：取100g酒石酸钠和8g亚铁氰化钾用适量蒸馏水溶解；取150g氢氧化钠，冷水浴，先加入500mL蒸馏水不停搅拌直至溶解，再加500mL蒸馏水搅拌，待溶解由浑浊变为澄清时方可拿下。二者加入2L容量瓶中，用蒸馏水定容。

21. 9%乙酸锌溶液：取21.9g乙酸锌，溶于100mL蒸馏水中。

10. 6%亚铁氰化钾溶液：取10.6g亚铁氰化钾溶液，溶于100mL蒸馏水中。

1mg/mL乳糖标准溶液：称取预先在100℃烘箱中干燥2h 的分析纯乳糖1.000g，经水溶解后移入1000mL 容量瓶，定容至刻度。每毫升溶液相当于1mg 乳糖。

0.1mg/mL乳糖标准溶液：称取预先在100℃烘箱中干燥2h 的分析纯乳糖0.100g，经水溶解后移入1000mL 容量瓶，定容至刻度。每毫升

溶液相当于0.1mg 乳糖。

2.1 样品处理: 准确吸取25mL 新鲜牛奶于250mL 容量瓶中,加50mL 水, 缓慢加入5mL 乙酸锌及5mL10. 6%的亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀,静置30min 过滤,滤液备用.

2.2 标定碱性酒石酸铜: 准确吸取5. 0mL 碱性酒石酸铜甲液及5. 0mL 乙液置150mL 锥形瓶中,加水10mL 从滴定管中滴加约14mL( 1mg /mL)标准乳糖溶液,加热至沸,趁沸以1滴/秒的速度继续滴加乳糖标准液,至蓝色刚好退去为终点,记录消耗的乳糖标准液的体积,平行操作三份,取其平均值,计算每10mL 碱性酒石酸铜液相当于乳糖的质量( mg ) .

2.3 样品测定: 准确吸取5. 0mL 碱性酒石酸铜甲液及5. 0mL 乙液置150mL 锥形瓶中,加水10mL ,从滴定管中滴加约2mL 前述制备的样品溶液,加热至沸,趁沸以1滴/秒的速度继续滴加样品液,至兰色刚好退去为终点,记录消耗的样品液的体积,平行操作三份,得出平均消耗体积.

2.4 结果计算: 样品中乳糖含量按如下公式计算

1001000

25021⨯⨯⨯⨯=V m m X 式中：X ——样品中乳糖含量，g/mL ；1m ——10ml 碱性酒石酸铜溶液相当于乳糖的质量,mg ；2m ——样品的总量，mL ；V ——测定时平均消耗样品液的体积, mL 。