木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展
木瓜蛋白酶研究进展
食品酶学课程论文题目木瓜蛋白酶研究进展姓名孟超学号2010309110045 专业食品科学评分中国·武汉二○一○年一月木瓜蛋白酶研究进展摘要：木瓜蛋白酶是一类巯基蛋白酶，大量存在于木瓜乳汁中。
对其组成成分、结构、制备、固定化、在非水介质中的特性及在医药上的用途等方面的研究进展进行了综述。
关键词：木瓜蛋白酶；固定化；医药用途Abstract: Papain is a sulfhydry lprotease from the latex of the papaya fruit. The paper summarized the research development abou t it’s composition,structure, processing, immobilization, properties in non-aqueous medium and uasage in medicine.Keywords: Papain; Immobilization; Uasage in medicine前言木瓜蛋白酶（Papain）简称木瓜酶，又称为木瓜酵素。
是利用未成熟的番木瓜（Carica papaya）果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。
它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，还具有合成功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。
最适合PH值5.7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点18.75；最适合温度55～60℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
1.木瓜蛋白酶的组分工业用的木瓜蛋白酶一般都是未经纯化的多酶体系。
木瓜蛋白酶的生物合成和分泌机制研究
木瓜蛋白酶的生物合成和分泌机制研究木瓜蛋白酶（Papain）是一种重要的天然蛋白酶，广泛存在于木瓜等植物中。
其生物合成和分泌机制的研究对于深入了解蛋白质合成过程及其应用具有重要意义。
本文将探讨木瓜蛋白酶的生物合成和分泌机制以及相关研究进展。
生物合成是指在细胞内通过基因表达、转录和翻译等过程，将DNA信息转化为具有生物活性的蛋白质的过程。
而分泌则是指细胞将合成的蛋白质经过适当的转运和包装作用释放到细胞外的过程。
研究发现，木瓜蛋白酶的生物合成和分泌过程主要发生在木瓜果实细胞中。
首先，木瓜蛋白酶的合成依赖于相关基因的表达和转录。
在转录过程中，DNA中的木瓜蛋白酶基因被转录为mRNA分子。
该mRNA分子随后通过RNA聚合酶酶的作用将其转录为mRNA前体。
经过转录的mRNA进一步经过剪接和修饰等过程，形成成熟的mRNA。
该mRNA含有编码木瓜蛋白酶的氨基酸序列。
随后，该mRNA通过核糖体进行翻译，将氨基酸按照特定的顺序合成为蛋白质链。
在木瓜果实细胞中，成熟的木瓜蛋白酶由内质网（ER）合成并进入到高尔基体（Golgi）。
在内质网中，木瓜蛋白酶的氨基酸链被翻译后进一步经过蛋白质修饰，如糖基化和硫醇化等。
这些修饰过程可以增加蛋白质的稳定性和生物活性。
经过修饰后的木瓜蛋白酶进入高尔基体进行包装和排序。
在高尔基体，蛋白质会经过进一步的修饰和包装，形成成熟的蛋白质颗粒。
这些颗粒包含了大量的木瓜蛋白酶，并且被液泡所包裹。
这些液泡可以将成熟的木瓜蛋白酶从高尔基体运输到细胞膜的负责分泌的区域。
经过运输的成熟的木瓜蛋白酶颗粒和液泡最终融合在细胞膜上，并释放到细胞外环境中。
这个过程被称为分泌。
在此过程中，细胞膜扮演了关键角色，它通过与液泡融合，将木瓜蛋白酶包裹在囊泡内，并释放到细胞外环境。
尽管对木瓜蛋白酶的生物合成和分泌机制的研究已经有了一定的进展，但仍然有许多问题需要进一步探讨。
例如，目前尚不清楚木瓜蛋白酶的mRNA剪接和修饰等过程中所涉及的详细机制。
木瓜蛋白酶在制革过程中的应用研究
木瓜蛋白酶在制革过程中的应用研究摘要：木瓜蛋白酶是一种天然的酶类，具有广泛的应用潜力。
本文主要研究了木瓜蛋白酶在制革过程中的应用，探讨了其在革制过程中的功能和优势，并对其应用进行了实验验证。
研究结果表明，木瓜蛋白酶在制革过程中具有良好的脱毛和软化皮革的效果，且对环境友好，具有较高的应用价值。
引言：制革是一项古老而重要的工艺，用于将动物皮革转化为高质量、可用于各种用途的产品。
制革过程中，脱毛和软化是非常关键的步骤。
传统制革方法大多依赖化学试剂，如硫酸盐和碱性试剂，但这些方法存在环境污染和健康风险等问题。
因此，寻找一种环境友好、高效的替代方法变得尤为重要。
木瓜蛋白酶是一种天然的酶类，可以从木瓜果实中提取得到。
它具有卓越的蛋白水解活性和广泛的应用潜力，因此被广泛研究和应用于食品、制药和皮革等领域。
本文主要研究了木瓜蛋白酶在制革过程中的应用，并评估了其在脱毛和软化方面的效果。
木瓜蛋白酶在制革过程中的应用主要有两个方面：脱毛和软化。
一、脱毛脱毛是制革过程的关键步骤之一，通过去除动物皮革上的毛发来改善其外观和质量。
传统的脱毛方法通常使用硫酸盐和碱性试剂，但这些试剂对环境具有较大的污染风险。
相比之下，木瓜蛋白酶具有良好的蛋白酶水解能力，可有效降解皮肤表面的蛋白质结构，从而实现脱毛效果。
实验结果表明，木瓜蛋白酶能够在较短的时间内实现有效的脱毛。
研究者在实验中使用了具有不同浓度的木瓜蛋白酶溶液进行处理，并对处理后的皮革进行观察和评估。
结果显示，随着木瓜蛋白酶浓度的增加，脱毛效果逐渐增强，且未观察到对皮革表面的损害。
这表明木瓜蛋白酶在脱毛过程中能够达到良好的效果，并且具有较高的选择性，不会对皮革造成不可逆的损伤。
二、软化皮革在制革过程中需要经历一系列的处理步骤，以去除皮肤中的角质层和硬化物质，使其具有柔软、光滑的质地。
传统的软化方法依赖于化学试剂的使用，使得制革过程更加复杂和耗费资源。
然而，木瓜蛋白酶的应用为制革过程带来了新的可能性。
木瓜蛋白酶应用及研究进展
木瓜蛋白酶应用及研究进展摘要本文主要介绍了木瓜蛋白酶的作用机理，在医药、食品、化工、科研等方面的应用，以及在木瓜蛋白酶的固定等方面的最新研究进展。
关键字木瓜蛋白酶应用酶的固定化发展一、简介木瓜蛋白酶，是一种蛋白水解酶，可将抗体分子水解为3个片段。
是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶，活性中心含半胱氨酸，属巯基蛋白酶，主要应用于啤酒及食品工业。
二、作用机理木瓜蛋白酶属巯基蛋白酶，具有较宽的底物特异性，作用于蛋白质中L-精氨酸、L-赖氨酸、甘氨酸和L-瓜木瓜蛋白酶氨酸残基羧基参与形成的肽键。
这种酶属于内肽酶，能切开蛋白质分子内部肽链—CO—NH—生成分子量较小的多肽类。
是一种存在于木瓜胚乳中的蛋白酶。
作为植物来源的蛋白酶来说，此酶研究进展的最快。
木瓜蛋白酶主要是以内肽酶的形态起作用。
活性的产生，而半胱氨酸残基是不可缺少的，所以是硫基蛋白酶的一种，底物的特异性不太严格，分子量为23400，氨基酸残基数212。
木瓜蛋白酶是一种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质的蛋白酶。
它的外观为白色至浅黄色的粉末，微有吸湿性。
这种酶是利用未成熟的番木瓜果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼而成的纯天然生物酶制品。
它是一种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，还具有合成功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。
最适合PH值5.7(一般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作用，等电点18.75；最适合温度55～60℃(一般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
三、制备及保存木瓜蛋白酶的制备是将未成熟番木瓜果实割取乳液去杂，在室温下加入半胱氨酸溶液在研钵中充分磨匀，静置后取上清液即为粗制酶，其水溶液呈混浊状，然后在通过离心去杂的上清液中加入硫酸铵分级分离得沉淀，加入半胱氨酸溶液后经盐析重结晶干燥得精制酶，木瓜蛋白酶室温贮存活力稳定性与活力高低呈反比，正常使用时造成活力下降的主要因素为干燥失重，温度和空气氧化，粗制的酶比精制的酶稳定，热风吹干和喷雾干燥的酶比冷冻干燥的酶稳定，因此，酶应存放在低于10℃条件下。
木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用研究
木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用研究木瓜蛋白酶是一种取自木瓜中的蛋白水解酶，被广泛应用于食品、医药和酒类等领域。
在酿造过程中，木瓜蛋白酶的应用研究不仅能够改善酿造产品的品质，提高酿造效率，还能减少生产成本。
本文将探讨木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用研究。
首先，木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用可以帮助改善酿造产品的品质。
在啤酒酿造中，木瓜蛋白酶能够降解麦芽中的大分子蛋白质和多肽，使得麦汁中的蛋白质含量降低，从而减少啤酒的混浊度，使得啤酒呈现出清澈透明的外观。
同时，木瓜蛋白酶还能够去除啤酒中的苦味，提高啤酒的口感。
在葡萄酒酿造中，木瓜蛋白酶可以降解葡萄汁中的蛋白质，减少葡萄酒中的浑浊物质，提高葡萄酒的清澈度和稳定性。
其次，木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用还能够提高酿造效率。
在啤酒酿造中，木瓜蛋白酶能够缩短糖化和过滤时间，加快酿造过程。
这是因为木瓜蛋白酶能够将麦芽中的蛋白质降解成小分子肽或氨基酸，促进糖化反应的进行，使得糖化过程更加完全。
此外，木瓜蛋白酶还能够降低酿造中的粘度，改善酿造物料的流动性，便于酿造过程的操作。
最后，木瓜蛋白酶在酿造过程中的应用还能够减少生产成本。
传统上，酿造过程中清理蛋白质和多肽是一项费时费力的工作，并且需要高温处理。
而木瓜蛋白酶能够在较低的温度下快速降解蛋白质，减少能耗，降低生产成本。
此外，木瓜蛋白酶的应用还可以减少使用化学品的数量，对环境的污染更小，符合可持续发展的要求。
当然，在实际应用木瓜蛋白酶时还需要注意一些问题。
首先，选择适合酿造过程的木瓜蛋白酶种类和用量是非常重要的。
不同种类的木瓜蛋白酶具有不同的温度、pH值和酶活性适应范围，选择合适的酶种和用量能够最大限度地发挥酿造效果。
其次，酿造过程中的温度和pH值的控制也会影响木瓜蛋白酶的酶活性和稳定性，需要根据具体情况进行调节和掌握。
另外，木瓜蛋白酶的添加时间和保温时间也需要根据产品的要求和工艺流程进行合理安排。
总之，木瓜蛋白酶在酿造过程中具有广泛的应用前景。
木瓜蛋白酶在制药业中的应用研究
木瓜蛋白酶在制药业中的应用研究在制药业中，酶技术被广泛应用于药物的研发、生产和检测过程中。
木瓜蛋白酶作为一种天然酶，具有高效、特异性和安全性的特点，在制药业中得到了广泛的关注和应用。
本文将重点探讨木瓜蛋白酶在制药业中的应用，并阐述其在药物研发、药物生产和药物检测等方面的重要作用。
1. 木瓜蛋白酶在药物研发中的应用木瓜蛋白酶在药物研发中具有多种应用，其中最重要的一项是在蛋白质表达和纯化过程中的应用。
蛋白质表达和纯化是药物研发过程中的关键步骤，木瓜蛋白酶可以作为一种特异和高效的切割酶，用于从表达系统中切割和纯化目标蛋白。
木瓜蛋白酶能够识别并切割特定的氨基酸序列，因此可以将目标蛋白从其融合表达的载体中切割下来，并得到高纯度的目标蛋白。
木瓜蛋白酶的这一特性使得蛋白质的表达和纯化过程更加高效和简化，从而提高了药物研发的效率。
此外，木瓜蛋白酶还可用于药物的结构优化和改造。
在药物研发过程中，药物的活性和稳定性往往是研究人员关注的重点。
木瓜蛋白酶可以通过切割蛋白质分子的特定位点来实现药物结构的调整和改造，从而提高药物的活性和稳定性。
这一应用使得木瓜蛋白酶成为了药物结构优化和改造的重要工具之一。
2. 木瓜蛋白酶在药物生产中的应用木瓜蛋白酶在药物生产中也有重要的应用。
药物制剂往往需要经过多个工序才能最终得到成品，其中包括固体分散剂、胶囊、片剂等形式。
木瓜蛋白酶可以在药物制剂中用作助溶剂，用于促进药物的溶解和吸收。
它能够降低药物微粒的粒径，增加药物的表面积，从而提高药物的可溶性和生物利用度。
同时，木瓜蛋白酶还能够加速药物的释放速率，提高药物的吸收效果。
这些特性使得木瓜蛋白酶成为药物生产中的一个重要辅助剂。
此外，木瓜蛋白酶还可被用于药物的控释系统中。
控释系统是一种将药物缓慢释放到体内的系统，可以使药物效果持续更长时间，并降低药物用量和频次。
木瓜蛋白酶可以用于控释系统的制备过程中，通过制造与药物共存的多孔材料、聚合物或凝胶，使药物缓慢释放。
木瓜蛋白酶的开发与应用
木瓜蛋白酶的开发与应用一、本文概述木瓜蛋白酶，一种源于木瓜果实中的天然酶类，凭借其独特的催化性能和广泛的应用价值，近年来在生物科技领域引起了广泛关注。
本文旨在全面探讨木瓜蛋白酶的开发与应用，通过深入了解其生物特性、提取工艺、纯化技术等方面，以期推动木瓜蛋白酶在食品、医药、化妆品等多个领域的广泛应用。
文章将从木瓜蛋白酶的基本性质出发，详细阐述其开发过程中的关键技术和应用现状，并展望未来的发展趋势和潜在挑战。
通过本文的阐述，希望能够为相关领域的研究人员和企业提供有益的参考和启示，推动木瓜蛋白酶产业的持续发展和创新。
二、木瓜蛋白酶的开发木瓜蛋白酶，一种源自木瓜乳液的巯基蛋白酶，自被发现以来，其在多个领域的应用价值逐渐被人们所认识。
其独特的催化特性，如高效性、特异性和温和的反应条件，使得木瓜蛋白酶在食品、医药、化妆品、皮革和纺织等多个行业中都有广泛的应用。
木瓜蛋白酶的提取过程主要包括乳液的收集、离心分离、沉淀和纯化等步骤。
在提取过程中，需要注意保持酶的活性，避免在高温或酸性环境中失活。
随着技术的发展，研究者们也在不断探索更高效的提取和纯化方法，如利用超滤、离子交换层析和凝胶电泳等技术，以提高木瓜蛋白酶的纯度和活性。
对木瓜蛋白酶的酶学性质进行深入研究，是开发其应用的基础。
这包括对其最适pH值、最适温度、热稳定性、抑制剂敏感性等方面的研究。
通过深入研究，可以更准确地掌握木瓜蛋白酶的催化特性，为其在各个领域的应用提供理论依据。
随着生物技术的飞速发展，遗传工程技术在木瓜蛋白酶的开发中也发挥了重要作用。
通过基因克隆、基因表达和蛋白质工程等技术，可以实现对木瓜蛋白酶的定向改造和优化，如提高其热稳定性、拓宽其底物特异性等。
这为木瓜蛋白酶在更广泛领域的应用提供了可能。
基于木瓜蛋白酶的特性和应用需求，可以开发出一系列新产品。
例如，在食品工业中，可以利用木瓜蛋白酶制作低过敏性的食品；在医药领域，可以开发木瓜蛋白酶作为药物载体或治疗某些疾病的特效药；在化妆品行业，木瓜蛋白酶可以作为天然酶制剂用于皮肤护理等。
木瓜蛋白酶提取及在食品工业中的应用
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木瓜蛋白酶作为一种天然的酶类，在食品工业中有着重要的应用价值。
木瓜蛋白酶的研究进展
另一方面，由于嫩化剂比较充分的发挥作用是在肉品被
蒸煮的期间，温度较高，而木瓜蛋白酶最适合温度55～60℃， 热稳定性强，在90℃时也不会完全失活，因此常用于生产嫩 肉粉水解啤酒内的蛋白质，部分水解一些 已形成的复合物，产生更多的多肽或氨基酸，保证啤酒 在冷冻过程中的高清澈度，同时改善啤酒口感及原有多 肽和氨基酸的组成和比例，有效地改良啤酒品质。
木瓜蛋白酶的研究进展
一 木瓜蛋白酶的简介 二 木瓜蛋白酶的提取 三 木瓜蛋白酶的固定化 四 木瓜蛋白酶的应用 五 木瓜蛋白酶的展望
一 木瓜蛋白酶的简介
中文名称：木瓜蛋白酶，别名番木瓜酶,木瓜朊酶, 番瓜酵素,木瓜酶 英文名称：papain 定义：一种蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的 根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含 量最丰富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸， 属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、 天然卫生安全等特点
双水相萃取具有目标产物收率高、易于连续化操作、 不存在有机溶剂残留、分离过程经济等优点。
三 木瓜蛋白酶的固定化
由于木瓜蛋白酶价格昂贵且无法重复利用， 促使人们研究和制备固定化木瓜蛋白酶。固 定化的木瓜蛋白酶可以避免其在酸碱和有机 介质中失活，实现酶的反复利用，达到节约 生产成本的目的。常用的固定化方法有吸附 法、载体交联法和包埋法。
3.包埋法
将酶或含酶菌体包埋在多孔载体中，使酶固定化的 方法称为包埋法。
金锋采用微孔淀粉-海藻酸钠包埋法固定化木瓜蛋 白酶，结果表明，最佳固定化木瓜蛋白酶制备条件为 微孔淀粉浓度4%，海藻酸钠浓度3%，CaCl2浓度5.5%。此 时固定化木瓜蛋白酶的最适pH值为5.7，最适温度72℃， 其耐热性、操作稳定性、机械强度都不同程度增加， 操作成本低，适合工业推广。
木瓜蛋白酶的提取
木瓜蛋白酶的提取一、实验内容与目的从青木瓜中提取木瓜蛋白酶，用考马斯亮蓝结合法测定蛋白质浓度。
通过本实验，掌握天然活性化合物的提取和蛋白质浓度的测定技术。
二、实验原理（一）木瓜天然酶木瓜蛋白酶（papain），简称木瓜酶，又称为木瓜酵素。
他是一种含硫基（—SH）肽链内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力，同时，它还具有合成功能，能把蛋白质水解物合称为蛋白质。
木瓜蛋白酶溶于水和甘油，水溶液无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于乙醇。
氯仿和乙醚等有机溶剂。
其最适pH为5.7（一般3~9.5皆可），在中性或偏酸性时亦有作用，等电点18.75；最适温度为55~60℃（一般10~85℃皆可），耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，受还原性物质激活。
木瓜蛋白酶广泛存在于番木瓜（Carica papaya）茎叶和果实中，以未成熟果实的乳汁中为最高。
提取未成熟的番木瓜果实中的乳汁，采用现代生物工程技术提炼可得纯天然生物酶制品。
（二）考马斯亮蓝结合法（Bradford法）测定蛋白质浓度的原理在一定范围内，考马斯亮蓝G250蛋白复合物呈色后，在595nm下，吸光度与蛋白质含量关系呈线性关系，故可以用蛋白质浓度的测定。
三、实验材料1.材料青木瓜2.试剂氢氧化钠、磷酸、考马斯亮蓝G250、牛血清蛋白、95%乙醇3.主要仪器设备离心机、磁力搅拌器、刀片、电子天平、紫外可见分光光度计、冰箱、pH计。
四、实验步骤（一）木瓜蛋白酶的提取（1）用薄不锈钢刀片沿未成熟的番木瓜过时的纵线将果皮割破，深度为2~3nm，根据果实大小的不同，每个果实可以切5~10条刀口。
（2）将木瓜放于一个大烧杯中，适度挤压木瓜，使木瓜乳汁流入大烧杯中。
（3）将手机的乳液按1:1量加入蒸馏水，搅拌1h，用NaOH将pH调至9.0。
（4）将乳液用离心机在3500r/min的条件下，离心15min。
木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展_New
木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展赵电波，陈茜，张丽尧(郑州轻工业学院食品与生物工程学院，河南郑州450002)摘要：本文主要介绍木瓜蛋白酶的组成，重点阐述提取方法、提取工艺的研究进展，进一步介绍木瓜蛋白酶在食品工业特别是在食品加工中的应用，并对其在医药、化工及未来食品加工方面的应用前景进行展望。
关键词：木瓜蛋白酶；提取工艺；食品加工；应用Progress of Extraction and Application of Technology of PapainZHAO Dianbo, CHEN Xi, ZHANG Liyao（College of Food and Biotechnology Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, HenanZhengzhou 450002, P. R. China）Abstract: The composition of papain was described, and its extraction methods, research of extractiontechnology had been highlighted. Applications of papain in food industry, particularly in food processing itwas further described, and its applicationsinpharmaceutical, chemical industry and the future prospects offood processing have been prospected in this article.Key words:papain;extractiontechnology; food processing; application中图分类号：TS201.1文献标识码：A文章编号：1001-8123(2010)11-0019-05木瓜蛋白酶（papain）来源于未成熟番木瓜（Carica papaya）果实的新鲜乳汁，是一种含疏基（-SH）肽链的内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力；同时还具有合成的功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展_New
⽊⽠蛋⽩酶的提取及应⽤研究进展_New⽊⽠蛋⽩酶的提取及应⽤研究进展⽊⽠蛋⽩酶的提取及应⽤研究进展赵电波，陈茜，张丽尧(郑州轻⼯业学院⾷品与⽣物⼯程学院，河南郑州450002)摘要：本⽂主要介绍⽊⽠蛋⽩酶的组成，重点阐述提取⽅法、提取⼯艺的研究进展，进⼀步介绍⽊⽠蛋⽩酶在⾷品⼯业特别是在⾷品加⼯中的应⽤，并对其在医药、化⼯及未来⾷品加⼯⽅⾯的应⽤前景进⾏展望。
关键词：⽊⽠蛋⽩酶；提取⼯艺；⾷品加⼯；应⽤Progress of Extraction and Application of Technology of PapainZHAO Dianbo, CHEN Xi, ZHANG Liyao（College of Food and Biotechnology Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, HenanZhengzhou 450002, P. R. China）Abstract: The composition of papain was described, and its extraction methods, research of extractiontechnology had been highlighted. Applications of papain in food industry, particularly in food processing itwas further described, and its applicationsinpharmaceutical, chemical industry and the future prospects offood processing have been prospected in this article.Key words:papain;extractiontechnology; food processing; application中图分类号：TS201.1⽂献标识码：A⽂章编号：1001-8123(2010)11-0019-05⽊⽠蛋⽩酶（papain）来源于未成熟番⽊⽠（Carica papaya）果实的新鲜乳汁，是⼀种含疏基（-SH）肽链的内切酶，具有蛋⽩酶和酯酶的活性，有较⼴泛的特异性，对动植物蛋⽩、多肽、酯、酰胺等有较强的⽔解能⼒；同时还具有合成的功能，能把蛋⽩⽔解物合成为类蛋⽩质。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究木瓜蛋白酶是一种天然的酶类催化剂，广泛应用于医疗器械清洗中。
它具有高效、安全、环保等特点，在去除器械表面蛋白质残留方面表现出卓越的效果。
本文将探讨木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用研究，包括其特性、机理及实际应用。
首先，我们来了解一下木瓜蛋白酶的特性。
木瓜蛋白酶是从木瓜果实中提取的酶，主要是一种混合酶，包括内蛋白酶、分蛋白酶和胰蛋白酶等多种酶。
它具有较广的工作温度范围，能在较低的温度下也能发挥良好的清洁效果。
此外，木瓜蛋白酶对不同类型的蛋白质残留有较强的降解能力，具有良好的清洁效果。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用主要是基于其降解蛋白质的作用。
在清洗过程中，医疗器械表面会残留一些蛋白质，这些蛋白质对器械的使用安全构成威胁。
木瓜蛋白酶可以针对这些残留蛋白质进行降解，彻底清除表面的污垢，从而确保器械的清洁度和卫生安全。
相比传统的清洗方法，木瓜蛋白酶能更加高效、安全地去除蛋白质残留，提高清洗效果。
木瓜蛋白酶的降解机理是通过与蛋白质相互作用，降低蛋白质的分子量从而实现蛋白质残留的去除。
木瓜蛋白酶能与蛋白质中的特定位点结合，将蛋白质分子切割成较小的碎片，同时释放出新的氨基酸。
这些碎片易于清洗剂迅速清洗掉，从而完成了对蛋白质的有效降解和去除。
此外，木瓜蛋白酶还能与其他清洁剂协同作用，提高清洁效果。
在实际应用中，木瓜蛋白酶的使用方法相对简单。
首先，将木瓜蛋白酶制剂溶解在适量的水中，形成清洁液。
然后，将器械浸泡在清洁液中，经过一定时间的浸泡，木瓜蛋白酶能够充分降解蛋白质残留。
最后，用清水对器械进行彻底的冲洗，以确保木瓜蛋白酶及其降解产物完全去除。
需要注意的是，使用木瓜蛋白酶清洗器械时，应根据器械材质和设计选择适当的清洗剂和方法，避免对器械造成损害。
木瓜蛋白酶在医疗器械清洗中的应用具有一系列优势。
首先，木瓜蛋白酶是从天然植物中提取的酶，安全无毒，对人体和环境无害。
其次，木瓜蛋白酶具有较高的催化活性和降解能力，能够快速有效地清除蛋白质残留，提高清洗效果。
木瓜蛋白酶在肉制品加工中的应用研究
木瓜蛋白酶在肉制品加工中的应用研究肉制品是人们日常生活中重要的食品之一，高蛋白质含量是其最主要的特点和优势之一。
为了改善肉制品的质量和口感，提高其消化率和营养价值，研究人员一直在寻找新的方法和技术。
木瓜蛋白酶作为一种天然酶，被广泛应用于肉制品加工过程中，并取得了显著的应用效果。
本文将重点探讨木瓜蛋白酶在肉制品加工中的应用，并分析其效果和作用机制。
首先，木瓜蛋白酶可以促进肉制品的嫩化和涨心。
在肉制品加工过程中，木瓜蛋白酶可以通过降解肌肉中的结缔组织和蛋白质，达到增加肉制品的嫩度和涨心效果。
木瓜蛋白酶中的主要活性成分--木瓜蛋白酶能够有效地降解肉品中的胶原蛋白，从而使肉质更加鲜嫩。
同时，它还可以改善肉制品的质地和口感，使其更具可口性，增加消费者的食欲。
其次，木瓜蛋白酶可以提高肉制品的水溶性和可消化性。
由于多肽和胜肽的形成，木瓜蛋白酶可以使肉制品的蛋白质分子更加细小并与水结合，从而提高肉制品中蛋白质的水溶性。
这一过程不仅能增强肉制品的口感，还可以提高其可溶性蛋白质的吸收率。
此外，木瓜蛋白酶还能够降解肉制品中的韧带蛋白质，从而提高其消化率，使其更易于消化和吸收。
第三，木瓜蛋白酶可以改善肉制品的防腐性能。
在肉制品加工过程中，木瓜蛋白酶可以有效控制细菌和真菌的生长，从而延长肉制品的保鲜期。
这是由于木瓜蛋白酶具有广谱的抗菌活性，能够破坏细菌和真菌的细胞壁，抑制其生长和繁殖。
因此，加入适量的木瓜蛋白酶可以改善肉制品的防腐性能，减少腐败和食品中毒的风险。
另外，木瓜蛋白酶还可以改善肉制品的色泽和风味。
通过木瓜蛋白酶的作用，可以加速二肽和胜肽的形成，这些物质具有较强的酸碱度，可以使肉制品呈现明亮的红色或粉红色，增加其色泽的吸引力。
此外，木瓜蛋白酶还可以改善肉制品的风味，增加其口感和风味的丰富性，提高食品的口感和满足度。
总的来说，木瓜蛋白酶在肉制品加工中具有广泛的应用前景。
它可以改善肉制品的质地、水溶性和可消化性，增加其口感和营养价值。
木瓜蛋白酶的生产及其在食品中的应用
在啤酒酿造过程中，木瓜蛋白酶可以水解麦芽中的蛋白质， 提高麦汁的过滤速度和啤酒的清澈度。
木瓜蛋白酶的使用可以减少啤酒中的沉淀物，提高啤酒的稳 定性和口感。
乳制品加工
在乳制品加工中，木瓜蛋白酶可以水解酪蛋白，提高乳液的稳定性，防止乳液分 离和沉淀。
木瓜蛋白酶在奶酪、酸奶等乳制品的生产中也有广泛应用，可以提高产品的口感 和品质。
详细描述
木瓜蛋白酶的生产成本较高，主要是 由于其所需的原材料木瓜和生产工艺 的复杂性所致。为了降低生产成本， 可以采取优化生产工艺、寻找低成本 的替代原材料等方法。
酶活性的保持问题
总结词
保持酶活性是木瓜蛋白酶生产中的另一个关键问题，直接影响到产品的质量和应用效果。
详细描述
木瓜蛋白酶是一种生物催化剂，其活性会受到温度、pH值、金属离子等多种因素的影响。为了保持酶活性，需 要在生产过程中严格控制这些因素，同时采用适当的储存方式，以确保木瓜蛋白酶的活性在应用源， 降低生产成本和环境负担。
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提高生产效率
01
优化发酵工艺
通过改进发酵条件和工艺参数， 提高木瓜蛋白酶的产量和生产效 率。
02
03
基因工程技术
酶的固定化
利用基因工程技术对木瓜蛋白酶 基因进行改造，提高酶的活性或 产量。
将木瓜蛋白酶固定在载体上，实 现酶的重复使用，降低生产成本。
开发新型应用领域
保健品开发
01
利用木瓜蛋白酶的生物活性，开发具有保健功能的食品或补充
基因工程法
通过基因工程技术重组微生物或植物 细胞，实现木瓜蛋白酶的高效表达和 生产。
02 木瓜蛋白酶在食品中的应 用
肉类嫩化
木瓜蛋白酶在肉食品中的功能性改良研究
木瓜蛋白酶在肉食品中的功能性改良研究摘要：木瓜蛋白酶是一种天然酶类，具有良好的消化作用和活性。
其在肉食品中的应用可以改善其质地、增强风味、提高蛋白质的消化利用率等。
本文旨在探讨木瓜蛋白酶在肉食品中的功能性改良研究，包括制备方法、应用效果和发展前景等。
一、引言木瓜蛋白酶是从木瓜中提取的一种酶类，能够有效地分解蛋白质，具有较强的酶活性和水解能力。
因此，它被广泛应用于食品工业中，特别是肉食品的加工过程中。
通过添加木瓜蛋白酶，可以改善肉食品的质地、增强风味、提高蛋白质的消化利用率等。
二、制备方法木瓜蛋白酶的制备方法多种多样，包括传统的提取法、分离纯化法以及基因工程法等。
传统的提取法主要通过切碎木瓜果肉，用适量的酸性溶液浸泡提取，然后通过离心、过滤等步骤得到木瓜蛋白酶。
分离纯化法则是利用各种色谱技术（如凝胶过滤层析、离子交换层析、亲合层析等）将木瓜蛋白酶从其他杂质分离出来。
基因工程法是利用遗传学的技术手段，将木瓜蛋白酶的基因导入到其他生物体中，通过重组蛋白表达系统大量制备。
三、应用效果1. 改善肉食品质地木瓜蛋白酶通过水解蛋白质中的纤维素、弹性蛋白等成分，能够使肉食品的质地更加细嫩。
研究表明，加入适量的木瓜蛋白酶后，能够显著降低肉类中的黏性和嚼劲，使其具有更好的口感。
2. 增强肉食品风味木瓜蛋白酶能够水解肉类中的氨基酸和胜肽，产生大量芳香化合物和呈现出特殊的味道。
研究显示，添加木瓜蛋白酶后的肉食品具有更浓郁的香气和更鲜美的风味，能够提高消费者对产品的接受度。
3. 提高蛋白质消化利用率肉食品中的蛋白质往往存在于结构复杂的纤维素中，难以被人体充分消化利用。
木瓜蛋白酶可以水解这些复杂的蛋白质结构，转化为易于消化吸收的小分子肽和氨基酸。
因此，加入木瓜蛋白酶的肉食品能够提高蛋白质的消化率和利用率。
四、发展前景木瓜蛋白酶在肉食品中的应用前景广阔。
随着人们对健康和营养需求的提高，木瓜蛋白酶作为一种天然酶类具有优势，符合人们对无添加剂、健康食品的追求。
木瓜蛋白酶的提取纯化实验报告
木瓜蛋白酶的提取纯化实验报告实验报告：木瓜蛋白酶的提取纯化摘要：本实验旨在提取和纯化木瓜蛋白酶。
首先将木瓜果肉和磷酸盐缓冲液混合，经过搅拌、离心和滤过将悬浮液收集。
然后使用硫酸铵沉淀法对混合液进行蛋白质沉淀，再经过柱层析纯化得到木瓜蛋白酶。
通过测定酶活，纯化程度和回收率，验证提取和纯化方法的有效性。
结果表明，经过提取纯化的木瓜蛋白酶具有较高的纯化程度和酶活，回收率较高。
1.引言木瓜蛋白酶是一种广泛存在于木瓜中的蛋白酶，具有广谱的活性，可以降解多种蛋白质。
因此，木瓜蛋白酶在食品、制药等工业中具有广泛的应用价值。
本实验旨在研究提取和纯化木瓜蛋白酶的方法，为其进一步应用奠定基础。
2.材料与方法2.1材料：-木瓜果肉-磷酸盐缓冲液-硫酸铵-超滤膜-柱层析填料2.2方法：1)将木瓜果肉剁碎后加入磷酸盐缓冲液中，搅拌均匀。
2)将混合液经过离心，收集上清液。
3)对上清液进行反复滤过，去除颗粒杂质。
4)将上清液与硫酸铵混合，使其浓度达到80%，沉淀蛋白质。
5)使用超滤膜对上清液进行浓缩，得到蛋白质浓缩液。
6)将蛋白质浓缩液加入柱层析柱，经过洗脱得到纯化酶溶液。
7)对纯化后的酶溶液进行酶活测定、纯化程度测定和回收率计算。
3.结果与讨论经过提取纯化，得到的木瓜蛋白酶具有较高的酶活。
酶活测定结果显示，提取纯化后的酶活达到了5000单位/毫升。
与未经提取纯化的酶溶液相比，酶活提高了约2倍，表明提取纯化方法可以有效提高木瓜蛋白酶的酶活。
纯化程度测定结果显示，经过柱层析纯化后，木瓜蛋白酶的纯化程度较高。
使用SDS-方法对柱层析纯化前后的样品进行分析发现，纯化后的酶样品中只存在单一的酶带，而纯化前的样品中存在多个酶带，进一步说明了提取纯化方法的有效性。
回收率计算结果显示，经过提取纯化后，木瓜蛋白酶的回收率较高。
计算结果表明，提取纯化后酶的回收率在80%以上，较未经处理的酶溶液回收率有明显提高。
综上所述，本实验通过提取和纯化方法成功得到了酶活高、纯化程度较高且回收率较高的木瓜蛋白酶样品。
木瓜蛋白酶的结构与功能研究进展
木瓜蛋白酶的结构与功能研究进展植物蛋白酶是一类在许多生物过程中发挥重要功能的蛋白质酶，木瓜蛋白酶（Papain）作为其中一种重要的酶类，在生物医学领域中广泛应用。
木瓜蛋白酶具有较高的催化活性和特异性，对肿瘤细胞、病毒和细胞外基质等有很好的抑制作用。
本文将重点介绍木瓜蛋白酶的结构和功能，并对相关研究进展进行综述。
首先，木瓜蛋白酶的结构特点是其由一个单一的多肽链组成，而没有任何配体或辅基。
具体来说，木瓜蛋白酶分为三个结构域：N-端丝氨酸蛋白酶活性中心、CAT（cysteine proteinase catalytic center）结构域和C-端结构域。
其中，N-端丝氨酸蛋白酶活性中心通过其活性位点Ser195形成了一个催化三元复合物，其中还包括His57和Asp102。
这个复合物在蛋白酶底物结合并发生催化反应时起到关键作用。
其次，木瓜蛋白酶的功能与结构密切相关。
该酶在消化、抗病毒、抗炎和抗氧化等生理过程中发挥着重要作用。
在消化过程中，木瓜蛋白酶能够降解蛋白质，帮助生物体消化并吸收养分。
此外，木瓜蛋白酶还表现出抗病毒活性，能够抑制病毒进入宿主细胞，并抑制其复制过程。
这使得木瓜蛋白酶成为药物研发领域的重要候选。
近年来，对木瓜蛋白酶结构与功能的研究取得了许多进展。
首先，科学家们通过X射线晶体学和核磁共振等技术获得了高分辨率的木瓜蛋白酶晶体结构图像，揭示了其三维结构和催化机制。
这为深入了解其功能奠定了基础。
其次，使用基因工程和相关技术，科学家们提高了木瓜蛋白酶的表达水平和纯化效率，使其更易于研究和应用。
此外，还有研究通过对木瓜蛋白酶进行结构修饰，进一步提高其催化效率和抗病毒活性。
除了以上基础研究外，木瓜蛋白酶的应用价值也得到了广泛关注。
例如，在生物医学领域中，木瓜蛋白酶已被用于制备医用胶原、生物活性肽和药物载体等。
由于木瓜蛋白酶具有较强的蛋白降解能力和特异性，因此在这些应用中发挥了重要作用。
此外，在生物清洗和制药过程中，木瓜蛋白酶也被广泛运用，以去除杂质和提高产品纯度。
木瓜蛋白酶应用及研究进展
⽊⽠蛋⽩酶应⽤及研究进展⽊⽠蛋⽩酶应⽤及研究进展摘要本⽂主要介绍了⽊⽠蛋⽩酶的作⽤机理，在医药、⾷品、化⼯、科研等⽅⾯的应⽤，以及在⽊⽠蛋⽩酶的固定等⽅⾯的最新研究进展。
关键字⽊⽠蛋⽩酶应⽤酶的固定化发展⼀、简介⽊⽠蛋⽩酶，是⼀种蛋⽩⽔解酶，可将抗体分⼦⽔解为3个⽚段。
是番⽊⽠中含有的⼀种低特异性蛋⽩⽔解酶，活性中⼼含半胱氨酸，属巯基蛋⽩酶，主要应⽤于啤酒及⾷品⼯业。
⼆、作⽤机理⽊⽠蛋⽩酶属巯基蛋⽩酶，具有较宽的底物特异性，作⽤于蛋⽩质中L-精氨酸、L-赖氨酸、⽢氨酸和L-⽠⽊⽠蛋⽩酶氨酸残基羧基参与形成的肽键。
这种酶属于内肽酶，能切开蛋⽩质分⼦内部肽链—CO—NH—⽣成分⼦量较⼩的多肽类。
是⼀种存在于⽊⽠胚乳中的蛋⽩酶。
作为植物来源的蛋⽩酶来说，此酶研究进展的最快。
⽊⽠蛋⽩酶主要是以内肽酶的形态起作⽤。
活性的产⽣，⽽半胱氨酸残基是不可缺少的，所以是硫基蛋⽩酶的⼀种，底物的特异性不太严格，分⼦量为23400，氨基酸残基数212。
⽊⽠蛋⽩酶是⼀种在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋⽩质的蛋⽩酶。
它的外观为⽩⾊⾄浅黄⾊的粉末，微有吸湿性。
这种酶是利⽤未成熟的番⽊⽠果实中的乳汁，采⽤现代⽣物⼯程技术提炼⽽成的纯天然⽣物酶制品。
它是⼀种含疏基(-SH)肽链内切酶，具有蛋⽩酶和酯酶的活性，有较⼴泛的特异性，对动植物蛋⽩、多肽、酯、酰胺等有较强的⽔解能⼒，同时，还具有合成功能，能把蛋⽩⽔解物合成为类蛋⽩质。
溶于⽔和⽢油，⽔溶液⽆⾊或淡黄⾊，有时呈乳⽩⾊；⼏乎不溶于⼄醇、氯仿和⼄醚等有机溶剂。
最适合PH值5.7(⼀般3～9.5皆可)，在中性或偏酸性时亦有作⽤，等电点18.75；最适合温度55～60℃(⼀般10～85℃皆可)，耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
三、制备及保存⽊⽠蛋⽩酶的制备是将未成熟番⽊⽠果实割取乳液去杂，在室温下加⼊半胱氨酸溶液在研钵中充分磨匀，静置后取上清液即为粗制酶，其⽔溶液呈混浊状，然后在通过离⼼去杂的上清液中加⼊硫酸铵分级分离得沉淀，加⼊半胱氨酸溶液后经盐析重结晶⼲燥得精制酶，⽊⽠蛋⽩酶室温贮存活⼒稳定性与活⼒⾼低呈反⽐，正常使⽤时造成活⼒下降的主要因素为⼲燥失重，温度和空⽓氧化，粗制的酶⽐精制的酶稳定，热风吹⼲和喷雾⼲燥的酶⽐冷冻⼲燥的酶稳定，因此，酶应存放在低于10℃条件下。
木瓜蛋白酶在制药工业中的应用研究
木瓜蛋白酶在制药工业中的应用研究摘要：木瓜蛋白酶是一种重要的天然酶类，其在制药工业中具有广泛的应用前景。
本文将从木瓜蛋白酶的特性及制备方法、制药工业中的应用领域以及未来发展方向等方面进行探讨和研究，以期更好地了解木瓜蛋白酶在制药领域中的应用前景。
1. 引言木瓜蛋白酶是从木瓜果实中提取得到的一种酶类，具有广泛的应用前景。
随着制药工业的发展，对高效、经济、环保的生物催化剂的需求逐渐增加，使得木瓜蛋白酶在制药工业中越来越受到关注。
本文将探讨木瓜蛋白酶的特性及制备方法、制药工业中的应用领域以及未来发展方向等内容。
2. 木瓜蛋白酶的特性及制备方法2.1 木瓜蛋白酶的特性木瓜蛋白酶是一种丝氨酸蛋白酶，具有广泛的底物特异性。
它在中性到碱性环境中表现出最佳活性，其酸性品种的活性较弱。
同时，木瓜蛋白酶具有较高的催化效率和良好的热稳定性。
2.2 木瓜蛋白酶的制备方法目前，常见的木瓜蛋白酶制备方法主要包括酵母表达系统、细胞内外表达系统和人工合成等。
其中，酵母表达系统因其高效、易操作等优势而被广泛应用于木瓜蛋白酶的生产。
此外，通过蛋白工程的手段，还可以通过改造木瓜蛋白酶的结构和活性，使其更适应制药工业的需求。
3. 木瓜蛋白酶在制药工业中的应用领域3.1 制剂生产木瓜蛋白酶在制剂生产中具有广泛的应用。
它可以通过其较强的蛋白水解功能，用于制备口服药物、注射剂以及制剂辅助成分等。
尤其在肽药物的制备过程中，木瓜蛋白酶可作为一种天然的消化酶，对蛋白质药物进行特异性降解，提高药物的生物利用度和吸收率。
3.2 酶替代治疗木瓜蛋白酶的表观生物利用度高、生物相容性好以及对厌氧性菌的特异性使其在酶替代治疗中具有广阔的应用前景。
举例来说，木瓜蛋白酶可以用于基因缺陷引起的倒错性遗传疾病的治疗。
它能够促进蛋白质的降解，减少堆积和毒性产物的形成，从而缓解疾病症状。
3.3 生物传感器木瓜蛋白酶作为一种天然催化剂，在生物传感器中扮演着重要的角色。
通过将木瓜蛋白酶与适当的蛋白质配对，构建生物传感器可以检测特定分子的含量或活性。
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木瓜蛋白酶的提取及应用研究进展赵电波，陈茜，张丽尧(郑州轻工业学院食品与生物工程学院，河南郑州450002)摘要：本文主要介绍木瓜蛋白酶的组成，重点阐述提取方法、提取工艺的研究进展，进一步介绍木瓜蛋白酶在食品工业特别是在食品加工中的应用，并对其在医药、化工及未来食品加工方面的应用前景进行展望。
关键词：木瓜蛋白酶；提取工艺；食品加工；应用Progress of Extraction and Application of Technology of PapainZHAO Dianbo, CHEN Xi, ZHANG Liyao（College of Food and Biotechnology Engineering, Zhengzhou University of Light Industry, HenanZhengzhou 450002, P. R. China）Abstract: The composition of papain was described, and its extraction methods, research of extractiontechnology had been highlighted. Applications of papain in food industry, particularly in food processing itwas further described, and its applicationsinpharmaceutical, chemical industry and the future prospects offood processing have been prospected in this article.Key words:papain;extractiontechnology; food processing; application中图分类号：TS201.1文献标识码：A文章编号：1001-8123(2010)11-0019-05木瓜蛋白酶（papain）来源于未成熟番木瓜（Carica papaya）果实的新鲜乳汁，是一种含疏基（-SH）肽链的内切酶，具有蛋白酶和酯酶的活性，有较广泛的特异性，对动植物蛋白、多肽、酯、酰胺等有较强的水解能力；同时还具有合成的功能，能把蛋白水解物合成为类蛋白质。
工业用的木瓜蛋白酶一般都是未经纯化的多酶体系。
现已知经木瓜乳汁干燥而得的木瓜蛋白酶至少含有四种主要酶类：木瓜蛋白酶（papain）、木瓜凝乳蛋白酶（chymopapain）、木瓜蛋白酶Ω（papaya proteinaseΩ）、木瓜凝乳蛋白酶M（chymopapain M）[1]，其中木瓜凝乳蛋白酶的含量最多，占可溶性蛋白的45%。
木瓜蛋白酶易溶于水和甘油，水溶液为无色或淡黄色，有时呈乳白色；几乎不溶于有机溶剂。
它的最适pH值为5.7（一般3～9.5皆可），在中性或偏酸性时亦有作用；最适温度为55～60℃（一般10～85℃皆可），耐热性强，在90℃时也不会完全失活；受氧化剂抑制，还原性物质激活。
1木瓜蛋白酶的提取工艺1.1过去的常规提取方法木瓜蛋白酶最原始的提取方法是烘干法，就是在番木瓜浆液中加入保护剂，然后将浆液离心，取上清液放置于鼓风干燥箱中，在55～60℃烘干，粉碎后即得到粗酶制品。
乙引等[2]用这种方法所获得的酶得率为23.1%，但此法不利于酶活的保持，其酶活力仅为0.16×105U/g，且产品的纯度较低。
木瓜蛋白酶的提取也曾广泛采用单宁沉淀法，乙引等[2]用单宁沉淀法提取了木瓜蛋白酶。
先将番木瓜乳汁离心，于上清液中缓慢加入已溶解的单宁溶液，不断搅拌，使溶液中单宁达到一定浓度。
静置，沉淀单宁-酶复合物，调节pH值，沉淀后进行真空干燥，得到酶制品。
结果表明，这种方法生产的酶得率较低，仅有7.3%，但酶活力较高，为3.53×105U/g。
但是这种方法存在环境污染等问题。
1.2目前较为常见的提取方法目前生产中多采用超滤、絮凝、盐析等方法提取木瓜蛋白酶。
1.2.1超滤法提取木瓜蛋白酶用超滤技术分离木瓜蛋白酶。
先将中空纤维超滤膜洗净，经过处理后，控制一定压力和流量，进行超滤。
木瓜蛋白酶是大分子物质，在超滤过程中被截留，而水及小分子杂质透过膜，从而达到分离和纯化的目的。
实验结果表明，超滤后木瓜蛋白酶的活力是超滤前的1.22倍，蛋白质含量为超滤前的2.8倍，说明超滤后木瓜蛋白酶的纯度有所增加。
但由于木瓜蛋白酶属于大分子物质，在超滤过程中会在膜表面聚积而产生浓差极化现象，使超滤速率逐渐下降，影响酶得率。
1.2.2盐析法提取木瓜蛋白酶曾用硫酸铵沉淀法分离木瓜蛋白酶。
在粗酶液中加入一定浓度的硫酸铵溶液进行盐析，然后调pH值，离心取沉淀，干燥，得酶产品。
实验结果表明，用该法制备的木瓜蛋白酶纯度相对较高，酶的比活力达到了1184U/mg，适宜作为化妆品成分。
但这种方法由于用了大量的盐使酶中灰分增加，同时降低了木瓜蛋白酶的活性[5]。
因此，盐析法并不是理想的木瓜蛋白酶提取方法。
1.2.3絮凝法分离纯化木瓜蛋白酶絮凝法是在木瓜乳胶水提取液中添加某种化合物，该化合物能与木瓜蛋白酶生成难溶性的复合物，从而使酶从溶液中沉淀析出。
何继芹[6]等研究了用絮凝技术纯化木瓜蛋白酶。
实验结果表明，在适宜的条件下进行絮凝处理，可使木瓜蛋白酶在这步的收率达95～97%。
但这种方法提取专一性不强，制得的木瓜蛋白酶纯度不高，杂质含量较高。
1.3木瓜蛋白酶的提取新技术1.3.1超声波法提取木瓜蛋白酶超声波提取法作为一种新型的提取技术已经比较广泛地应用于天然植物有效成分的提取。
超声波产生的空化效应[7]，一方面赋予溶剂对细胞壁更大的渗透力，并强化细胞内外的质量传输，另一方面破坏细胞壁，使细胞内含物更易释放，从而强化了提取过程[8]。
超声波形成的微射流效应也是提高提取率的一个重要原因。
肖贵平[9]曾用超声波法提取木瓜蛋白酶。
选择新鲜的番木瓜，清洗后切块破碎，称取果肉，打浆；果浆在一定条件下进行超声波处理，离心、除杂、过滤后，上清液进行超滤浓缩，收集酶液样品。
结果表明：超声功率300W，超声时间200s，果浆质量分数30%，这时酶活力是未经超声波处理的1.71倍。
采用超声波提取工艺得到的粗酶液的含量较低，含有较多杂质，经膜分离初步纯化浓缩后，还需作进一步纯化处理，这有待于进一步深入研究，以提高酶的活性和纯度。
1.3.2亲和膜色谱法提取木瓜蛋白酶亲和膜色谱技术是一种20世纪80年代末发展起来的生物大分子分离纯化的新技术，把膜分离与亲和分离结合起来，使之兼具膜分离与亲和分离的特点。
聂华丽等[10]以尼龙膜为基质，键合壳聚糖进行表面改性处理，以降低尼龙膜的非特异性吸附，并偶联染料配体Cibacron Blue F3GA，得到一种新型的亲和膜色谱材料，并用其对木瓜蛋白酶进行分离。
结果表明，该亲和膜具有良好的色谱性能，对木瓜蛋白酶有较高的吸附量（235.3mg/g），使用该亲和膜对木瓜粉中的木瓜蛋白酶进行分离纯化，纯化倍数可达46.5倍。
亲和膜色谱与传统的膜分离、亲和色谱相比，不仅具有纯化倍数高、压降小，分析时间短、生物大分[3]谭晶, 陈季旺, 夏文水等. 超滤分离具有壳聚糖酶活力的木瓜蛋白酶[J]. 食品与机械, 2007,23(6):20-23.[4]王丽彬, 张弢, 王旻. 高纯度木瓜蛋白酶的分离纯化和性质研究[J]. 中国生化药物杂志, 2006, 27(3):159-162.[5]Mohamed A., Anouar E. M., Delphine V. W.,etal. Fractionation and purification of the enzymesstored in the latex of Carica papaya [J]. Journal ofChromatography B, 2003, 790: 229-238.[6]何继芹, 张海德. 木瓜蛋白酶的分离方法及其应用进展[J]. 食品科技, 2006,10: 66-69.[7]KNORRD, ZENKERM, HEINZV, et al.Applications and potential of ultrasonic in foodprocessing [J]. Trends in Food Science andTechnology, 2004, 15: 261-266.[8]王静, 韩涛, 李丽萍. 超声波的生物效应及其在食品工业中的应用[J]. 北京农学院学报, 2006, 21(1) :67-75.[9]肖贵平. 木瓜蛋白酶超声法提取工艺及其酶学性质. 福建农林大学学报, 2005, 34(3):318-323.[10] 聂华丽, 陈天翔, 朱利民. 尼龙亲和膜的制备及其对木瓜蛋白酶的分离纯化研究[J]. 膜科学与技术,2008, 28(1): 16-20.[11] Guo W., Ruckenstein E. Separation and purificationof horseradish peroxidase by membrane affinitychromato-graphy [J]. Membr Sci , 2003 , 211 :101-111.[12] Sarote N., Rajni H. K., Pawinee K. Puri cationof papain from Carica papaya latex: Aqueous two-phase extraction versus two-step salt precipitation[J]. Enzyme and Microbial Technology, 2006, (39)5:1103-1107.[13] 方焕, 高向阳, 张洪利等. 多孔陶瓷膜固定木瓜蛋白酶的研究[J]. 华南农业大学学报, 2006, 27(4):36-39.[14] 高明侠, 苗敬芝, 曹泽虹等. 壳聚糖固定化木瓜蛋白酶提取牛蒡多糖的研究[J]. 食品科学, 2007, 28(9):226-229.[15] 金锋. 微孔淀粉-海藻酸钠固定化木瓜蛋白酶的研究. 中国酿造, 2009, (7): 83-85.[16] 邹泽昌, 韦奇, 纳薇等. 氧化硅介孔泡沫材料固定木瓜蛋白酶的研究[J]. 无机材料学报, 2009, 24(4):702-706.[17] 林音, 方润, 程贤甦. 木质素衍生物对三种蛋白酶的吸附研究[J]. 生物质化学工程, 2009, 43(2): 6-10.[18] 蔡晓雯, 韩陆奇, 江千雍. 嫩肉粉(番木瓜蛋白酶)的研究[J]. 肉类研究, 2005 (10): 42-44.[19] 雷昌贵, 孟宇竹, 席会平. 氯化钙、磷酸盐、木瓜蛋白酶对牛肉MFI及剪切力的影响[J]. 肉类工业,2009, 2: 23-25.[20] B.M. Naveena, S.K. Mendiratta, A.S.R. Anjaneyulu. Anjaneyulu. Tenderizationof bu alo meat using plantproteases from Cucumis trigonus Roxb (Kachri) andZingibero cinale roscoe (Ginger rhizome)[J]. MeatScience, 2004, 68: 363-369.[21] 杨燊, 邓尚贵, 秦小明. 低值鱼蛋白多肽-钙螯合物的制备和抗氧化、抗菌活性研究[J]. 食品科学,2008, 29(1): 202-206.[22] 沈悦. 番木瓜蛋白酶研究与应用综述[J]. 科技信息,2008, 11: 313-314.[23] 熊琼超, 徐德昌. 番木瓜蛋白酶的应用进展[J]. 中国甜菜糖业, 2008, (1): 43-45.[24] 方富永, 苗艳丽, 宋文东. 波纹巴非蛤肉复合酶水解工艺及功能口服液的研制[J]. 食品科学, 2009, (18):412-415.。