谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求sainuopu
γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒（GCANA底物法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。
1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。
1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：浅黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于1.2。
2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.005。
2.4 分析灵敏度测定活性为50U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.011。
2.5 线性范围在（10，500）U/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。
在（50，500）U/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果(10，50]U/L时线性绝对偏差不大于±5 U/L。
2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。
2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。
2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。
2.9 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。
谷胱甘肽s转移酶分类
谷胱甘肽s转移酶分类
谷胱甘肽S转移酶（glutathione S-transferase，GST）是一类广泛存在于生物体内的酶，它在细胞内起着重要的生物学作用。
GST根据氨基酸序列的相似性和功能特点，可被分为多个类别，主要包括以下几类：
1. α-类GST，包括GSTA1、GSTA2、GSTA3和GSTA4等亚型，主要在肝脏、肾脏和肠道中表达，参与对抗毒素和药物代谢。
2. μ-类GST，包括GSTM1、GSTM2、GSTM3和GSTM4等亚型，主要在肝脏中表达，参与对抗癌症药物和致癌物质的代谢。
3. π-类GST，包括GSTP1和GSTP2等亚型，广泛分布在多种组织中，参与对抗毒素和药物的代谢，对抗氧化应激和细胞凋亡等生物学过程。
4. θ-类GST，包括GSTT1和GSTT2等亚型，主要在肝脏和肾脏中表达，参与对抗毒素和药物的代谢。
5. ω-类GST，包括GSTO1和GSTO2等亚型，主要在肝脏、肠
道和肾脏中表达，参与对抗氧化应激和神经退行性疾病的发生。
除了上述主要的GST类别外，还有一些其他类别的GST，它们在细胞内扮演着重要的角色，如参与对抗氧化应激、解毒和药物代谢等生物学过程。
总的来说，GST的分类是根据其氨基酸序列的相似性和功能特点进行的，不同类别的GST在细胞内具有不同的生物学功能和代谢途径。
碧云天谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)产品编号 产品名称包装 S0056谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)100次产品简介：谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)(Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit with NADPH)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPx)活性的试剂盒。
绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中心组成部分。
细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。
本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
本试剂盒的使用灵活方便，样品用量和检测时间的范围宽，样品用量可以根据样品中GPx 的活力在0.1-50微升之间调整，检测时间可以根据样品中GPx 的活力在5-30分钟内进行调整。
本试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0058)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。
谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内的过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。
细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。
谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。
在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。
谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。
但以过氧化氢为底物进行检测会受同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的影响，因为过氧化氢酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB法)说明书
谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)产品简介：谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法) (Glutathione Reductase Assay Kit with DTNB)是一种简单易行的通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase, GR)活性的试剂盒。
谷胱甘肽还原酶在许多组织中都有分布，可以维持细胞内充足的还原型谷胱甘肽(GSH)水平。
GSH 可以清除自由基和一些有机过氧化物，或作为谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物来清除一些过氧化物。
谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH)，而GSH 可以和生色底物DTNB 反应产生黄色的TNB 和GSSG ，并可以通过测定A 412来检测TNB 的生成量。
适当设置应体系，前后两个反应合并起来后，GSSG/GSH 过量而GR 相对不足时，该反应体系中谷胱甘肽还原酶就成为整个反应体系的限速因素，此时黄色的TNB 生成量和谷胱甘肽还原酶的活性呈线性正相关。
从而通过测定A 412就可以计算出谷胱甘肽还原酶的活性水平。
本试剂盒的具体反应原理如下：两个反应相合并：本试剂盒检测肝脏样品的检测效果如图1所示。
图中可见，对于肝脏样品可以检测到比较强的谷胱甘肽还原酶的活性并且有很好的剂量效应。
图1. 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)用于肝脏裂解样品的实测效果图。
本试剂盒可以检测组织匀浆液上清、细胞裂解液上清等生物样品中的谷胱甘肽还原酶的活性。
一个试剂盒共可以进行100次检测。
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :****************** 技术咨询: ***************** 网址: 碧云天网站 微信公众号保存条件：-20ºC保存，一年有效。
GST Bind 纯化试剂盒 产品说明书
BugBuster Master Mix（货号71456）是将BugBuster蛋白抽提试剂，Benzonase核酸酶和rLysozyme™ 溶菌酶溶液按最优化配比混合好的一种非常方便使用的蛋白抽提试剂，有助于在最优化条件下获得可溶 活性蛋白。这种预混形式的试剂减少了稀释试剂、计算各种试剂使用量和分别添加的麻烦。100ml和 500ml包装分别足够用于20g和100g细胞沉淀的可溶蛋白抽提。
GST•Bind™ 缓冲液试剂盒
GST•Bind缓冲液试剂盒包括了从GST•Bind树脂和GST•Mag™磁性琼脂糖树脂纯化目的蛋白所需的结 合，冲洗和洗脱所需的缓冲液。试剂盒所含成分足够用于10个2.5ml柱的纯化。具体包括： • 2×100ml 10×GST Bind/Wash Buffer （43mM Na2HPO4，14.7mM KH2PO4，1.37M NaCl，27mM KCl，pH7.3） • 40ml 10×Glutathione Reconstitution Buffer (500mM Tris-HCl，pH8.0) • 1g Glutathione，Reduced，Free Acid
机械破碎法
可溶组分 这部分操作用于分离大肠杆菌可溶组分中的蛋白。用去离子水稀释试剂盒中的10×浓缩液制备1X GST Bind/Wash Buffer。 1. 10,000g离心5分钟收集细胞。倾去上清，尽量控干细胞沉淀。每100ml培养液的细胞用4ml冰冷的1X GST Bind/Wash Buffer重悬。可以加入终浓度为0.1%的NP-40或其它非离子去污剂以减少非特异性结 合。可以用Dounce匀浆器，搅拌器或超声波仪打散细胞沉淀。 2. 在冰浴或盐冰浴中超声波处理样本。根据厂家说明操作，避免长时间超声处理。如果样本已经不再粘 稠即可停止超声。如果DNA没有剪切好会因样品粘稠而堵住柱子。大的细胞块可以在1×GST Bind/Wash buffer中用弗氏压榨法处理。 或者：在细胞糊中加入终浓度为45–60KU/g细胞糊的溶菌酶溶液，吸打混合。30℃孵育15分钟。再进行 超声。将裂解液10,000g离心20分钟。用0.45um膜（滤器）过滤上清。
纯泰GST(GSH)亲和层析介质使用说明书
z 聚苯乙烯层析柱
1) 将层析柱固定在铁架台或层析架上，封闭层析 柱下端出口，向柱内充入纯水，排开层析柱内 空气，先将垫片完全浸没于水面下方，在保持 水平的状态下，小心推向底部，避免垫片下方 滞留气泡。
2) 打开层析柱下端出口，排出柱中纯水；在液面 低至距垫片1~1.5cm高度时封闭下端出口，用移 液枪按需要量吸取介质，或用玻璃棒紧靠柱子 内壁引流，将介质加入到层析柱中；静置30min， 让介质自然沉降。
每次层析前，为达到最佳纯化效果，需对介质 进行再生，步骤如下：
1) 2倍介质体积高pH缓冲液（0.1M Tris-HCl, 0.5M
NaCl, pH8.5）和低pH缓 冲液（0.1M sodium acetate, 0.5M NaCl, pH4.5）交替洗脱三次。 2) 10倍介质体积缓冲液A平衡介质。 7. SDS-PAGE检测：
三、 适用范围
分离谷胱甘肽S-转移酶（GST）融合蛋白、其 它谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用的 蛋白。
四、 操作说明
1. 缓冲液配制
z 缓冲液A（平衡缓冲液）：10mM Na2HPO4， 1.8mM KH2PO4，140mM NaCl，2.7mM KCl， 调节pH值至 8.0。
z 缓冲液 B（洗脱缓冲液）：10mM Glutathione
-1-
1) 用10倍介质体积缓冲液A过柱，平衡介质； 2) 上样； 3) 用5~10倍介质体积缓冲液A过柱，洗去层析柱
中剩余上样液并重新平衡介质； 4) 用5~10倍介质体积缓冲液B洗脱，收集洗脱液； 5) 用5~10倍介质体积缓冲液A重新平衡介质。 注：纯化过程流速不宜过快，对于1ml介质，流速 保持在0.5ml/min为宜。 5. 介质清洗
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB 比色法)说明书
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒自备材料：1、匀浆器或研钵、离心管或小试管、低温离心机、水浴锅2、蒸馏水、PBS或生理盐水、70%乙醇3、分光光度计、比色皿操作步骤(仅供参考)：1、配制GSSG标准储存液：取12.5mgGSSG标准加入2mlddH2O，溶解并混匀，即为GSSG 标准储存液(10mM)。
一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
2、配制GSH清除剂工作液：在1mlGSH清除剂中加入9ml70%乙醇，溶解并混匀，即为GSH 清除剂工作液。
3、配制NADPH工作液：在33.2mgNADPH中加入4mlddH2O，即成NADPH工作液，一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
4、配制DTNB储存液：在79.2mgDTNB中加入16mlDMSO，溶解并混匀，即为DTNB储存液(12.5mM)。
一部分立即使用，其余适当分装后-20℃保存。
5、配制GR工作液：按GR：GSSGassaybuffer=1:49的比例混合，即为GR工作液。
-20℃保存，1个月有效。
注意：试剂(I)量较少，使用前应先4℃离心后再使用。
6、配制标准品：把GSSG标准储存液(10mM)用蛋白清除试剂稀释成50μM标准溶液，然后依次稀释成25、12.5、6.25、3.125μMGSSH标准溶液，取空白、3.125、6.25、12.5、25、50μMGSSG标准溶液6个点作标准曲线。
注意：由于GSSG标准在蛋白清除试剂中不太稳定，用蛋白清除试剂配制的GSSG溶液必须新鲜配制后使用，不可冻存后再使用。
7、准备样品：①红细胞或血浆样品：取新鲜血液，600r/min离心10min，沉淀为红细胞，上清为血浆。
对于红细胞，用PBS洗涤两次，取约50μl红细胞沉淀或血浆，加入50μl蛋白清除试剂，充分Vortex振匀。
4℃或冰浴放置10min，4℃10000r/min离心10min，取上清，用于GSSG测定，样品需暂时4℃保存备用，不立即测定的样品可以-70℃保存，但不宜超过10天。
普洛麦格GSH GSSG-Glo TM Assay 说明书
中 文 说 明 书适用产品目录号：V6611和V66122020 版 CTM344原英文技术手册TM344GSH/GSSG-Glo TMAssay普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：800 810 8133(座机拨打)，400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱：*************************TM3442020制作1GSH/GSSG-Glo™ Assay所有技术文献的英文原版均可在/ protocols 获得。
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如果您在使用该试剂盒时有任何问题，请与Promega 北京技术服务部联系。
电子邮箱：*************************1. 产品描述 (2)2. 产品组分和储存条件 (3)3. 进行GSH/GSSG-Glo™ Assay (5)3.A 一般注意事项 (5)3.B. 试剂制备 (6)3.C. 推荐对照 (10)3.D. 哺乳动物贴壁细胞中GSSG和总谷胱甘肽的检测步骤 (11)3.E. 悬浮液培养细胞中GSSG和总谷胱甘肽的检测步骤 (12)4. 数据分析 (13)5. 附录 (15)5.A.缓冲液和溶液的成分 (15)5.B.培养板布局 (15)5.C.参考文献 (16)5.D.样品数据 (17)5.E.疑难解答 (18)5.F.相关产品 (19)6. 内容变更总结 (21)普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址：北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话：************网址：技术支持电话：800 810 8133(座机拨打)，400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱：*************************TM3442020制作21. 产品描述作为一种含有三种氨基酸的肽（γ-谷氨酰-半胱氨酰甘氨酸），谷胱甘肽是一种广泛存在于真核细胞中的抗氧化剂（1-3）。
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求科美
γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）的活性。
1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分：双甘肽125mmol/L 试剂2主要组分：L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺14mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。
2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。
2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度值，应不大于0.7。
2.3.2试剂空白吸光度变化率：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.005。
2.4分析灵敏度测试50U/L的γ-谷氨酰基转移酶时，吸光度变化率应不小于0.01。
2.5准确度测定国家标准物质GBW（E）090283，相对偏差应不超过15%。
2.6精密度2.6.1重复性重复测试（50±5）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（50±5）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。
2.7线性范围GGT试剂盒在（10，450）U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；在(10，50］U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；在(50，450)U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。
2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。
在GGT试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。
gst谷胱甘肽转移酶蛋白质结构
gst谷胱甘肽转移酶蛋白质结构下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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谷胱甘肽还原酶(GR)活性检测试剂盒说明书 微量法
北京索莱宝科技有限公司谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1165规格：100T/96S产品内容：试剂一：液体120mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加入2.0mL蒸馏水，混匀。
产品说明：GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，GR是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一（通常昆虫中GR被TrxR取代）。
GR催化NADPH还原GSSG生成GSH，有助于维持体内GSH/GSSG比值。
GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用，此外GR还参与抗坏血酸－谷胱甘肽循环途径。
GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH，同时NADPH脱氢生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，相反NADP+在该波长无吸收峰；通过测定340nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率，从而计算GR活性。
自备仪器和用品：低温离心机、水浴锅、移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）和蒸馏水操作步骤：一、粗酶液提取：称约0.1g组织，加入1.0mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm4℃离心10min，取上清液，待测。
二、GR测定操作：1.分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2.试剂一置于25℃（普通物质）或者37℃（哺乳动物）中预热30min以上。
3.空白管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL试剂二，20μL试剂三，170μL试剂一，于340nm 测定10s和190s吸光度，记为A空1和A空2。
第1页共3页4.测定管：取微量石英比色皿或96孔板，加入10μL试剂二，20μL试剂三，20μL上清液，150μL试剂一，于340nm测定10s和190s吸光度，记为A测1和A测2。
GST(谷胱甘肽转硫酶)测定
GST（谷胱甘肽转硫酶）测定原理：GST（谷胱甘肽转硫酶）测定具有催化还原性谷胱甘肽GSH与2，4 二硝基苯CDNB 结合的能力，其结合产物的光吸收峰值波长为340nm,通过测定340nm处吸光度上升速率，即可计算出GST的活力单位。
反应式为：C6H3(NO2)2Cl+GSH→C6H3(NO2)2SG+H++Cl-实验仪器：分光光度计实验试剂：1）0.1mol/l 磷酸盐缓冲液PH 6.5（配制见p331）2) 10m mol/l 还原型谷胱甘肽(GSH)：用前临时配制，15.35mg GSH 溶于少量磷酸盐缓冲液，定容于5.0ml3) 1.25 mmol/l CDNB(1-氯-2，4-二硝基苯)：称取25.35mg，溶于5.0ml无水乙醇，加磷酸盐缓冲液定容至100ml，室温下可用一周实验步骤：取样品，精确称量后（约取0.05g）,加1.5mlPBS冰上研磨，离心，收集上清酶活测定反应体系（参照孟师兄）试剂总反应（ml）非酶反应(ml)GSH(10m mol/l) 0.05 0.05CDNB(1.25 mmol/l) 0.4 0.4PBS(0.1mol/l) 0.45 0.55样品液0.1 ------混匀后测定0，1，2，3，4，5min处340nm的吸光值(初步估计要做6个样，每个样做3个平行。
药品消耗大概：GSH 1.8ml, CDNB 24.4ml PBS 18ml)GST蛋白浓度测定（1）标准曲线绘制试管：0 1 2 3 4 5 61mg/ml标准蛋白溶液：0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 双蒸水; 0.1 0.09 0.08 0.07 0.06 0.05 0.04向各管分别加入3ml的考马斯亮蓝，测OD595（595nm为GST染色后的特征吸收峰）结果计算：1) 计算酶反应的A340值：为总反应测定所得的（A340）总与非酶反应的（A340）非之差，即（A340）酶=（A340）总—（A340）非2）根据不同时间测定的（A340）酶，计算酶促反应每分钟的平均变化值△（A340）/min 3) 样品中酶的比活力按下式计算：GST(U/mg)=△A/minⅹ(106 V总/(ε d V样))= △A/minⅹ（106/(9.6ⅹ103ⅹ1)）ⅹ(3/0.1)= △A/minⅹ3125ε:产物在340nm处摩尔吸光系数为9.6ⅹ103M-1cm-1106:摩尔分子换算成非摩尔分子d:比色皿光径（cm）V总：测定总体积（ml）V样：所用样品体积（ml）以下因素可导致误差：1 CDNB在水中溶解度较低，在测定体系中仅达到亚饱和水平2 随时间的延长，逐渐失去良好的线性关系Notes：DTNB溶解度很小，PH对溶解非常重要。
人谷胱甘肽S转移酶GSTs酶联免疫分析
人谷胱甘肽S转移酶（GSTs）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T30 mІU/L -1200 mІU/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中谷胱甘肽S转移酶（GSTs）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽S转移酶（GSTs）水平。
用纯化的人谷胱甘肽S转移酶（GSTs）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入谷胱甘肽S转移酶（GSTs）)，再与HRP标记的谷胱甘肽S转移酶（GSTs）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽S 转移酶（GSTs）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人谷胱甘肽S转移酶（GSTs）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
索莱宝氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒说明书
第 1 页，共 3 页氧化型谷胱甘肽（GSSG ）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC1180规格：50T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体50 mL×1瓶4℃保存试剂二液体170 μL×1支4℃保存试剂三液体60 mL×1瓶4℃保存试剂四液体8 mL×1瓶4℃保存试剂五粉剂×1瓶4℃保存试剂六液体40 μL×1瓶4℃保存标准品粉剂10 mg×1支4℃保存溶液的配制：1、试剂二：有毒易挥发试剂，涉及该试剂的步骤建议在通风橱内操作。
2、试剂五：临用前加入8 mL 蒸馏水，溶解后-20℃分装保存；3、试剂六：液体置于试剂瓶内EP 管中。
临用前根据样本量将试剂六、蒸馏水按1:20（V:V ）的比例配制备用，现用现配；4、标准品：用1 mL 蒸馏水溶解，浓度为10 mg/mL ，4℃保存。
产品说明：氧化型谷胱甘肽（GSSG ）是谷胱甘肽（GSH ）的氧化形式，又称为二硫代谷胱甘肽，是两分子的谷胱甘肽氧化而成。
GSSG 会被谷胱甘肽还原酶还原成GSH ，因此机体中大多数是以还原型形式存在。
测定细胞内GSH 和GSSG 含量以及GSH/GSSG 比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
本试剂盒利用谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid ，DTNB ）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长412nm 处具有最大光吸收的特点，通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽还原酶将GSSG 还原为GSH ，借此测定氧化型谷胱甘肽的含量。
技术指标：最低检出限：1.369 μg/mL线性范围：1.5625-50 μg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
GST蛋白纯化试剂盒说明书及操作指南
GST蛋白纯化试剂盒说明书及操作指南GST蛋白纯化试剂盒是一种常用的实验工具，用于从细胞裂解液中高效纯化谷胱甘肽S转移酶（GST）标签融合蛋白。
下面将详细介绍试剂盒的组成、使用步骤以及注意事项，以帮助用户顺利进行GST蛋白纯化实验。
一、试剂盒组成蛋白纯化试剂盒由以下几个主要组分组成：1、离心管：提供用于样品处理和离心过程的离心管。
2、细胞裂解缓冲液：含有适量的洗脱缓冲液和辅助物质，在细胞裂解过程中保护目标蛋白的完整性。
3、离心管悬浮粉末：用于牢固固定GST亲和树脂。
4、清洗缓冲液：用于去除非特异性结合物质，保证目标蛋白的纯度。
5、洗脱缓冲液：用于洗脱目标蛋白，使其从GST亲和树脂上解离。
二、操作步骤以下是使用GST蛋白纯化试剂盒进行GST蛋白纯化的基本步骤：1、细胞裂解：将经过表达的GST标签融合蛋白的细胞用细胞裂解缓冲液裂解，并加入适量的离心管悬浮粉末。
轻轻摇晃或旋转离心管，使粉末均匀分布。
2、离心：将裂解液转移至离心管中，并以适当的速度离心使GST亲和树脂沉淀到离心管底部。
3、除去上清：谨慎倒出上清液，避免破坏沉积的GST亲和树脂。
4、清洗：加入适量的清洗缓冲液，轻轻摇晃离心管，使清洗缓冲液与GST 亲和树脂充分接触，去除非特异性结合物质。
重复此步骤两次以确保清洗。
5、洗脱：加入适量的洗脱缓冲液，轻轻摇晃或旋转离心管，使目标蛋白从GST亲和树脂上洗脱。
6、收集洗脱液：将洗脱液收集于新的离心管中，这样就得到了纯化的GST 标签融合蛋白。
三、注意事项在使用蛋白纯化试剂盒过程中，请注意以下几点：1、严格按照说明书中的步骤进行操作，避免操作失误导致结果不准确。
2、所有悬浮粉末和缓冲液应按照说明书中的要求储存，并避免暴露在高温、阳光直射或湿度过高的环境中。
3、使用前请检查试剂盒是否有损坏或过期，如有问题请勿使用。
4、操作过程中请佩戴适当的实验防护设备，避免对自己和他人造成伤害。
准确使用GST蛋白纯化试剂盒可以高效地纯化目标蛋白，为科研工作者提供了一个有效的实验工具。
谷胱甘肽 S-转移酶(GST)活性检测试剂盒说明书__ 紫外分光光度法UPLC-MS-4496
谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4496规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体50mL×1瓶4℃保存试剂二液体45mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1瓶4℃保存溶液配制：试剂三：临用前加5mL蒸馏水溶解。
产品说明：谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。
GST是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。
因此，GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。
此外，因为GST具有GSH-Px活性，亦称为non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。
注意，GST催化的反应减少GSH含量，但是不增加GSSG含量。
GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm波长处吸光度上升速率，即可计算出GST活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外-可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、研钵/匀浆器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
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谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
货号：BC0350
规格：50T/48S
产品内容：
试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体45mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。
临用前加5mL蒸馏水溶解。
产品说明：
谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。
GST是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。
因此，GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。
此外，因为GST具有GSH-Px活性，亦称为non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。
注意，GST催化的反应减少GSH含量，但是不增加GSSG含量。
GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm波长处吸光度上升速率，即可计算出GST活性。
自备仪器和用品：
紫外-可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL石英比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
1.组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂
一）进行冰浴匀浆。
8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
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2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入
1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清等液体：直接测定。
二、测定：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到340nm，用蒸馏水调零。
2.试剂二、试剂三放在25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）保温。
3.空白管：取1mL石英比色皿，加入100μL试剂一，900μL试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后于340nm 测定10s吸光度记A1，37℃水浴5min后，快速取出测定吸光度记A2。
4.测定管：取1mL石英比色皿，加入100μL上清液，900μL试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后于340nm 测定10s吸光度记A3，37℃水浴5min后，快速取出测定吸光度记A4。
三、GST活性计算：
（1）按蛋白浓度计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫克蛋白每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/mg prot）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷（ε×d）×106×V反总÷(Cpr×V样)÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每克样品每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活性单位。
GST（U/g鲜重）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷(ε×d)×106×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷W
（3）按细胞数量计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每104个细胞每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
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GST（U/104cell）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷（ε×d）×106×V反总÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T =0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]÷细胞数量
（4）按液体体积计算
活性单位定义：在25℃或者37℃中，每毫升液体每分钟催化1μmol CDNB与GSH结合为一个酶活单位。
GST（U/mL）=[(A4－A3)－(A2-A1)]÷（ε×d）×106×V反总÷V样÷T
=0.23×[(A4－A3)－(A2-A1)]
ε：产物摩尔消光系数，9.6×103L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；
106：1mol=1×106μmol；
V反总：反应体系总体积，1100μL=0.0011L；
Cpr：上清液蛋白质浓度（mg/mL），需要另外测定；
V样：加入反应体系中上清液体积，100μL=0.1mL；
T：反应时间，5min；W：样品鲜重，g；
V样总：试剂一体积，1mL。
注意事项：
1.样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力；
2.细胞中GST活性测定时，细胞数目须在300万-500万之间，细胞中GST的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞；
3.测定前先用1～2个样做预实验，如5min内反应不成线性，须对样品用蒸馏水稀释，计算结果乘以稀释倍数；
4.若样品测定吸光度大于1，建议对样品用蒸馏水稀释，计算时结果乘以稀释倍数；
5.测定反映的温度对测定结果有影响，请控制在25℃或者37℃（哺乳动物）。
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