病毒的增殖
动物微生物-病毒的增殖和培养
详细描述
过滤分离法适用于从大量液体中提取病毒，通常使用孔 径大小适宜的滤膜，将病毒颗粒截留在滤膜上，而将其 他杂质通过滤膜过滤掉。该方法操作简便，但需要选择 合适的滤膜孔径以获得较高纯度的病毒。
蔗糖梯度离心法
总结词
利用不同浓度的蔗糖溶液形成的密度梯度，将病毒从混合物中分离出来的方法。
详细描述
蔗糖梯度离心法是一种常用的病毒纯化技术，通过在离心管中形成连续的蔗糖浓度梯度，将不同密度的病毒颗粒 分离。病毒颗粒在离心后会停留在相应的蔗糖密度层，从而达到纯化目的。该方法能够分离出较高纯度的病毒， 但操作较为繁琐，需要精确控制蔗糖浓度和离心参数。
复制周期
复制效率
不同病毒的复制效率有很大差异，有 些病毒可以在短时间内复制出大量的 子代病毒。
病毒的复制周期包括吸附、侵入、复 制、组装和释放等阶段。每个阶段都 需要一定的时间和能量来完成。
病毒的培养条件
01
02
03
培养基
病毒需要在适当的培养基 中才能生长和繁殖，如动 物细胞、昆虫细胞或细菌 等。
侵入
总结词
病毒进入宿主细胞内部的过程。
详细描述
在吸附完成后，病毒通过不同的方式进入细胞内部，如内吞、膜融合等。这一 过程需要病毒利用其自身的酶或诱导细胞内的信号转导途径来完成，以确保病 毒基因组能够进入细胞内部并开始复制。
脱壳
总结词
病毒基因组从其蛋白质外壳中释放出来的过程。
详细描述
在病毒进入细胞后，其蛋白质外壳会被细胞内的酶分解，使得病毒的核酸基因组得以释放。这一过程 对于病毒的复制是必须的，因为只有当基因组被释放出来后，才能利用宿主细胞的合成系统来复制病 毒的基因组和蛋白质。
详细描述
动物接种法是将病毒接种于易感动物，如小 白鼠、家兔、豚鼠等，观察其发病表现和病 理变化，以研究病毒的生物学特性和致病性。 这种方法可以模拟自然感染过程，但实验动 物感染病毒后可能出现死亡或发病，需要严 格控制实验条件和动物福利。
病毒生长繁殖的方式是什么
病毒生长繁殖的方式是什么病毒的繁殖方式叫自我复制。
病毒是颗粒很小、以纳米为测量单位、结构简单、寄生性严格，以复制进行繁殖的一类非细胞型微生物。
病毒是比细菌还小、没有细胞结构、只能在细胞中增殖的微生物。
病毒生长繁殖的方式是什么病毒的增殖方式是自我复制。
病毒生长繁殖方式是自我复制，以自我复制的方式进行增殖，但病毒是非细胞结构的生物，通常利用宿主细胞里面原料、系统以及能量进行复制和蛋白质合成。
如果离开宿主细胞，病毒是没有活性的，而且也不能独立自我繁殖，只有待在特定生存环境里才会生长繁殖。
病毒和细菌都属于病原微生物吗病毒和细菌都是一种病原微生物，但是它们两个有一定区别。
从形态上说，病毒更细更小些，能够通过滤菌器滤过，细菌就不能通过滤菌器滤过。
另外细菌有细胞壁，病毒只有核酸和外边的蛋白质外鞘组成，没有细胞壁，所以它对抗生素是不敏感的，不能用抗生素来治疗病毒感染。
另外病毒复制的过程，一般都在细胞内完成，不能在细胞外完成病毒复制。
相同点是这两个病原微生物都可以引起人类感染许多不适。
病毒的分类有哪些病毒是一种个体微小，结构简单，只含一种核酸（DNA或RNA），必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的生物。
病毒是一种非细胞生命形态，它由一个核酸长链和蛋白质外壳构成，病毒没有自己的代谢机构，没有酶系统。
病毒的分类：从遗传物质分类：DNA病毒、RNA病毒、蛋白质病毒（如：朊病毒）从病毒结构分类：真病毒（简称病毒）和亚病毒（包括类病毒、拟病毒、朊病毒）从寄主类型分类：噬菌体（细菌病毒）、植物病毒（如烟草花叶病毒）、动物病毒（如禽流感病毒、天花病毒、HⅣ等）从性质来分：温和病毒（HⅣ）、烈性病毒（狂犬病毒）。
病毒的形态：⑴球状病毒；⑵杆状病毒；⑶砖形病毒；⑷冠状病毒；⑸丝状病毒；⑹链状病毒；⑺有包膜的球状病毒；⑻具有球状头部的病毒；⑼封于包含体内的昆虫病毒。
病毒的增殖
3、生物合成
包括病毒的核酸和蛋 白质的合成。一般蛋 白质的合成在胞浆内， 核酸的合成有的在胞 浆内，有的在细胞核 内进行。
4、装配与释放
病毒的子代核酸与新 合成的衣壳蛋白，在 细胞浆或细胞核内装 配成核衣壳，进而成 熟为新的病毒子。病 毒的释放主要有两种 方式：一是靠宿主细 胞裂解，二是通过出 芽的方式释放。
即吸附、穿入与脱壳、生物合成以及装配
病毒与易感细胞接触 时，通过静电吸引和 细胞膜上的特异性受 体而吸附于细胞表面， 如新城疫病毒的吸附 就是依靠囊膜上的血 凝素纤突与易感细胞 的糖蛋白受体结合。
2、穿入与脱壳
病毒吸附于细胞表面 后，可通过多种方式 进入细胞。无囊膜的 病毒主要通过吞饮作 用进入细胞有的直接 穿入细胞内。有囊膜 的病毒通过囊膜与细 胞膜融合，脱去囊膜， 核衣壳进入细胞内， 也可通过吞饮作用进 入细胞。
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病毒的增殖
病毒没有完整的酶系统,不能单独进行物质 代谢,必须在活的宿主细胞内才能增殖。
一、病毒的增殖方式 病毒的增殖方式为复制。病毒的复制就是
利用宿主细胞内的原料、能量、酶与场所， 来合成病毒的核酸和蛋白质，然后装配成 熟并释放到细胞外的过程。
病毒的增殖
二、病毒复制过程 病毒的复制过程基本分为四个连续的阶段，
病毒的增殖（自我复制）
病毒缺乏增殖所需要的酶系统，只能在活的宿主细胞内增殖（⾃我复制）。
绝⼤多数病毒复制过程可分为下列六步：吸附、侵⼊、脱壳、⽣物合成、组装和释放。
吸附 吸附是决定感染成功与否的关键环节。
病毒吸附于敏感细胞需要病毒表⾯特异性的吸附蛋⽩与细胞表⾯受体相互作⽤。
病毒吸附蛋⽩（virus attachment protein， VAP）⼀般由⾐壳蛋⽩或包膜上的糖蛋⽩突起充当。
细胞表⾯受体（也称为病毒受体，virus receptor）则为有效结合病毒粒⼦的细胞表⾯结构，⼤多数噬菌体的病毒受体为细菌细胞壁上的磷壁酸分⼦、脂多糖分⼦以及糖蛋⽩复合物，有的则位于菌⽑、鞭⽑或荚膜上。
⼤部分动物病毒的病毒受体为镶嵌在细胞膜脂质双分⼦层中的糖蛋⽩，也有的是糖脂或唾液酸寡糖苷。
植物病毒迄今尚未发现有特异性细胞受体，其进⼊植物细胞的机制是通过伤⼝或媒介传播。
病毒的细胞受体具有种系和组织特异性，决定了病毒的宿主谱。
不同种属的病毒其细胞受体不同，有的甚⾄同种不同型的病毒以及同型不同株的病毒受体也不相同；另⼀⽅⾯，有些不同种属的病毒却有相同的细胞受体，其吸附和感染可对其它病毒的感染产⽣⼲扰。
VAP与病毒受体的结合需要⼀定的温度条件，以促进与酶反应相类似的化学反应。
在0-37℃内温度越⾼病毒吸附效率也越⾼。
病毒吸附细胞的过程可在⼏分钟到⼏⼗分钟的时间内完成。
侵⼊ 病毒通过以下不同的⽅式进⼊宿主细胞：注射式侵⼊、细胞内吞、膜融合以及其它特殊的侵⼊⽅式。
注射式侵⼊是有尾噬菌体通常的侵⼊⽅式。
通过尾部收缩将⾐壳内的DNA基因组注⼊宿主细胞内。
细胞内吞是动物病毒的常见侵⼊⽅式。
经细胞膜内陷形成吞噬泡，使病毒粒⼦进⼊细胞质中。
膜融合是有包膜病毒侵⼊过程中，病毒包膜与细胞膜融合的⼀种侵⼊⽅式。
直接侵⼊⼤致可分为⼏种类型。
1）部分病毒粒⼦直接侵⼊宿主细胞，其机理不明；2）病毒与细胞膜表⾯受体结合后，由细胞表⾯的酶类帮助病毒粒体释放核酸进⼊细胞质中，病毒⾐壳仍然留在细胞膜外，将病毒侵⼊和脱壳融为⼀体。
名词解释病毒的增殖
名词解释病毒的增殖病毒的增殖，是指病毒在寄主细胞内繁殖和增加数量的过程。
病毒是一类非细胞生物，无法自主生长和繁殖，需要寄生在寄主细胞内完成其生命周期。
病毒的增殖过程是一个复杂而精密的机制，涉及到多个环节和调控因子。
病毒入侵寄主细胞后，首先要进入细胞内部。
病毒通常通过与细胞膜相互结合或利用细胞内的胞吞作用等方式进入细胞内。
一旦病毒成功进入细胞内，它会释放出自己的核酸（DNA或RNA）和一些必要的蛋白质，以便进行复制和转录。
这些病毒蛋白质和核酸将开始调控细胞内的机制，以促使自身的表达和复制。
在病毒增殖的过程中，病毒核酸的复制起着关键作用。
通过病毒自身编码的酶或利用细胞内的酶，病毒核酸得以实现复制。
病毒的DNA或RNA在细胞内得到复制后，将形成更多的病毒基因组，为进一步的繁殖提供基础。
随着病毒复制过程的进行，病毒基因组和蛋白质逐渐积累。
病毒蛋白质具有特定的功能，如帮助病毒组装、促进病毒颗粒的形成以及干扰宿主细胞的正常功能。
这些蛋白质在病毒增殖过程中扮演着重要的角色，它们能够与细胞内的分子相互作用，从而实现病毒的繁殖和扩散。
一旦病毒完成了其内部的复制、转录和翻译等过程，它将开始组装成完整的病毒颗粒。
这个过程涉及到病毒蛋白质的自组装以及与病毒基因组的结合。
细胞内的胞吞或胞吐过程可以帮助病毒颗粒离开寄主细胞，并以不同的方式传播到其他细胞或宿主体内。
病毒的增殖是一个快速而高度有序的过程，它必须严密地控制每个环节的时机和数量，以保证病毒能够高效地繁殖。
在病毒增殖过程中，许多调控机制参与其中，包括细胞因子、信号转导通路以及病毒自身编码的蛋白质等。
这些因子相互作用，形成一个复杂的网络，以保证病毒的复制和繁殖在适当的时间和条件下进行。
病毒增殖不仅对于病毒本身具有重要意义，也对宿主细胞和宿主体具有重要影响。
病毒增殖过程中，病毒会耗尽宿主细胞的资源，并破坏宿主细胞内部的正常机制。
一些病毒还能够抑制宿主的免疫系统，使得宿主更容易受到感染和疾病的侵袭。
微生物学 病毒 病毒的增殖与干扰现象
病毒的增殖与干扰现象
病毒在活细胞内以复制的方式增殖。从病毒体侵入 细胞到子代病毒体生成释放，为一个复制周期
• 顿挫感染 (abortive infection) ：病毒进入机体细胞， 若细胞不能为病毒提供增殖所需要的酶、能量及必 要的成分，则病毒不能合成本身成分；或虽合成部 分或全部病毒成分，但不能装配和释放，这样的病 毒感染称为顿挫感染。
• 缺陷病毒：病毒基因组不完整或基因位点发生改变， 而不能进行正常增殖所产生的子代病毒称为缺陷病 毒。
干扰现象
• 当两种病毒感染同一细胞时，可发生一种病毒抑制 另一种病毒增殖的现象，称为病毒的干扰现象。
❖ 了解病毒干扰现象可指导疫苗的合理使用，如 减毒活疫苗诱生干扰素，能阻止毒力较强的病 毒感染。
病毒的增殖
病毒的增殖1.同学们大家好，欢迎来到微生物检验技术微课堂，本次课我们学习病毒的增殖。
2.病毒的增殖又称为病毒的复制，是指病毒在宿主细胞中繁殖的过程，由于病毒的结构非常简单，缺乏能够独立代谢的酶系统，所以它只能够借助宿主细胞的代谢系统来进行增殖。
那么病毒的增殖是在病毒的核酸进入宿主细胞后，生物活性才能够启动，病毒以自身的基因为模板，借助宿主的细胞器和酶系统，并由宿主细胞来提供原料、能量等等，然后再按照一定的程序复制出病毒的基因组，同时转录，翻译出相应的病毒蛋白，最终装配释放出子代病毒。
3.我们把这个过程可以人为的分为吸附，穿入、脱壳、生物合成和装配释放五个相互联系的阶段。
我们把这个过程称为复制周期。
4.接下来我们来详细了解病毒增殖的过程，病毒增殖的第一步是对易感细胞的吸附，病毒通过它表面结构当中的吸附蛋白与宿主易感细胞表面的特异性的受体进行结合，这种结合是不可逆的，但有高度的特异性，所以这种病毒和宿主细胞结合的特异性，就决定了病毒宿主的范围和组织的噬性，我们把它称之为病毒组织选择性。
比如说人类免疫缺陷病毒HIV它会通过包膜表面的刺突蛋白gp 120与受体的CD4分子进行一个特异性的结合，因此HIV它只会感染带有CD4分子的T细胞，我们知道CD4分子主要是表达在CD4T淋巴细胞表面，所以HIV它主要攻击的对象就是CD4阳性的T淋巴细胞，这时候病毒就完成了增殖的吸附过程。
5.病毒增殖的第二步就是穿入过程，病毒与细胞表面结合吸附于易感细胞后就开始了穿入过程，穿入的方式随着病毒种类的不同而会不同，一般来说无包膜的病毒通过细胞膜内陷以包饮的方式将衣壳吞入，而有包膜的病毒则通过包膜与宿主细胞膜融合以后再进入到细胞内，当然还有一些病毒可以直接穿透细胞膜而进入宿主细胞内。
6.病毒增值的第三步就是脱壳过程，病毒必须要在穿入细胞以后先脱去蛋白衣壳，再将核酸游离释放出来以后才能够发挥作用，脱壳的过程包括去除包膜、衣壳蛋白和基质蛋白，大多数的病毒在穿入的过程中，一边脱衣壳，一边释放病毒核酸，只有少数的病毒在进入宿主细胞以后再进行脱壳。
病毒学教学材料病毒的增殖
病毒的增殖病毒的增殖是病毒侵入寄主细胞后，利用宿主细胞的成分和生物合成机构，以病毒核酸为模版来合成病毒本身成份，并装配成新的子代病毒子的过程。
这一过程不同于细胞性生物的繁殖（二分裂或有丝裂等），故称为增殖成复制，而有别于繁殖。
对于病毒增殖过程和生物合成的研究，不仅关系到病毒病的防治，而且涉及生命起源和肿瘤学等重大理论和实践课题。
有关生命本质及其起源的研究，必须从非细胞形态的生命物质开始。
在这方面，病毒是最理想的模型。
例如，在有适当的前体和酶的存在条件下，提纯的病毒RNA或DNA甚至可在试管内增殖。
同样，病毒RNA可在试管内于细菌的核蛋白体上译制病毒蛋白质。
病毒核酸和病毒蛋白质也可在试管内装配成为完整的病毒子等。
又有人认为，病毒可有以“附加基因”的方式，结合入细胞遗传物质，成为生物进化的原因。
肿瘤，就其本质来讲，是细胞基因突变的结果。
病毒至少是肿瘤病因中的一个重要因素。
目前发现的脊椎动物肿瘤病毒已经超过30种，而有致肿瘤特性的病毒约有150多种。
最近证明，RNA致瘤病毒可借反录酶的作用，在细胞内复制出含有病毒信息的DNA，结合入细胞DNA，改变细胞的遗传性，干扰细胞的正常生命活动而导致细胞恶性变。
最近发现“缺损病毒”，没有完整的病毒子构造，可能只有核酸的片段残留在细胞中，与细胞染色体结合而逐代传递，成为细胞恶性变的原因。
病毒性疾病的化学预防和化学治疗，已被证明是完全可能的，实践中也已取得初步成果。
目前发现的一些不见于正常细胞而为病毒增殖所必需的核酸合成酶和其他蛋白质，为病毒病的的化学防治提供了进一步的可能性。
而对病毒生物合成各环节的深入了解，则为选择适当药物，切断病毒增殖周期，阻碍病毒增殖而达到防治目的，创建现实的基础。
第一节病毒的增殖场——细胞病毒由于缺乏自身增殖所需的完整酶系统，增殖时必须依靠宿主细胞合成核酸和蛋白质，甚至直接利用宿主细胞的某些成分，这就决定了病毒在细胞内专性寄生的特性。
活细胞是病毒增殖的唯一场所，也是病毒生物合成所需的能量和材料的主要供应者。
第二节植物病毒的复制与增殖
（三）、土壤中的介体：土壤本身并传 毒，主要是土壤中的线虫或真菌传播病 毒。
1.线虫传毒：已经知道5个属38个种的 线虫传播植物病毒或其不同株系。线虫 传病毒集中在蠕传病毒属(Nepovirus)和 烟草脆裂病毒(Tobravirus)。
2.真菌传毒：介体真菌和所传病毒主要 有两类：
(1)、壶菌目的油壶菌可传12种病毒， 如烟草坏死病毒(TNV)、莴苣巨脉病毒 (LBVV)、黄瓜坏死病毒(CNV)。
此外, 还将34个植物类病毒归属于2个科、 7个属, 5个植物卫星病毒和30个植物卫 星核酸归属于亚病毒类的1个组和4个亚 组。
根据最新的病毒分类系统可将植物病毒划 分为5个大类群。
（二）、昆虫介体
1.蚜虫 在蚜虫介体中，大约有200种蚜虫可 传播160多种植物病毒，有的蚜虫只传播2~3 种病毒，有的可以传播40~50种病毒(如蚕豆 蚜和马铃薯蚜)，桃蚜甚至可以传播100种以 上病毒。在这160多种植物病毒中，有的只有 一种蚜虫传播，有的可由多种蚜虫传播，黄 瓜花叶病毒甚至可由75种蚜虫传播。
3.双链RNA( double strand RNA,
dsRNA) 病毒：
因其核酸为互补的RNA而得名。其中的 负链RNA转录出正链RNA, 才能作为 mRNA的翻译蛋白。呼肠孤病毒科 (Reoviridae)和分体病毒科(Partitiviridae) 四个属的病毒为此种核酸类型。重要的 植物呼肠孤病毒为水稻矮缩病毒(RDV) 和玉米粗缩病毒(MRDV)。该科病毒粒 体为直径50nm的多面体, 双链核酸分成 10~12段包在同一粒体中。
循回型相互关系中又根据病毒是否在介体内 增殖而分为增殖型和非增殖型。
B.非循回型：病毒不在介体内循回的相 互关系称为非循回型。
微生物课件13.病毒的增殖1
Baltimore Classification & Viral Replication
遗传物质传递中心法则
DNA
RNA
Protein
双链DNA（dsDNA）病毒的复制
or
腺病毒、HBV、疱疹病毒
dsDNA
Late transcription
dsDNA
mRNA
Early transcription mRNA
巨细胞病毒包涵体
研究病毒增殖的意义
➢ 研究病毒与宿主细胞的相互关系 ➢ 了解病毒性疾病的发病机理 ➢ 了解增殖过程，从而寻找有效抗病毒药物，阻
断病毒复制 ➢ 目前大多抗病毒药物作用于复制增殖过程如
HBV 核苷类似药物、抗HCV、HIV蛋白酶抑制 剂 ➢ 出现顿挫感染时难以有效检测到病毒，对诊断 不利
--感染后期
对 数
--大量感染性病毒颗粒
生 长
--包括装配\释放
期
细胞死亡(cell death)
吸附与黏附 穿入与脱壳 生物合成 装配与释放
每个被感染细胞释放 出病毒颗粒数量
病毒的复制周期
病毒的复制周期——吸附与黏附
• 吸附 (adsorption) ： 病毒与细胞的非特异性接触 静电结合 可逆
思考题
1. 描述dsDNA、+RNA和逆转录病毒的复制周期。 2. 病毒在细胞内增殖的后果。 3. 名词：病毒复制、复制中间体、CPE，包涵体
(inclusion body)、类病毒、一步生长曲线 4. 举例说明病毒感染为何有组织细胞类型特异性？ 5. 列举下列疾病的病毒中英文名：麻疹、腮腺炎、
艾滋病、小儿麻痹症、流感、SARS、带状疱疹、 手足口病、风疹、天花等。
第三章病毒的增殖
噬菌体的一步生长曲线
（噬 菌 斑 数）
吸附期
潜伏期
裂解期
噬菌体复制（繁殖） 的三个阶段： 1、吸附期
游离的噬菌体吸附到宿主细胞
2、潜伏期
从噬菌体吸附到细胞到释放 出新噬菌体的最短时期
3、裂解期
随着菌体不断破裂，新噬菌体 数目增加，直到最高值
（一）、一步生长曲线（one step growth curve）
隐蔽期病毒在细胞内存在的动力学曲线呈线性函数，而非指数关系， 从而证明子代病毒颗粒是由新合成的病毒基因组与蛋白质经装配成 熟，而不是通过双分裂方式产生的。
（一）、一步生长曲线（one step growth curve）
是研究病毒复制的一个经典试验，最初是为研究噬菌体的复 制而建立，以后推广到动物病毒和植物病毒复制研究中。
吸附
侵入
脱壳
早期：病毒特异性酶的合成 病毒核酸复制 病毒结构蛋白质合成 病毒大分子合成
装配
成熟 释放
（二）、一步生长曲线（one step growth curve）
1939年，Max Delbruck & Emory Ellis：
该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学 的建立，Max Delbruck因此荣获1969年Nobel Prize 1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清 3、将上述混合物大量稀释 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价 5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标， 绘制出病毒特征性的繁殖曲线
隐蔽期（eclipse period）
不同病毒的隐蔽期长短不同 例如，DNA动物病毒的隐蔽期为5～20min， RNA动物病毒为2～10 h。
病毒的增殖
病毒的增殖病毒的增殖一般包括吸附、侵入、生物合成、子代病毒的装配和释放这五个阶段。
但不同种类的病毒，在某一细节上会有所不同。
吸附它是指病毒以其特殊结构与宿主细胞表面的特异性受体发生特异性结合的过程。
如大肠杆菌T系列噬菌体靠尾丝尖端附着在大肠杆菌的细胞壁上(图5-3)。
一些有囊膜的动物病毒则靠刺突吸附在宿主细胞表面的特异性受体上。
侵入它是指病毒或病毒的一部分进入宿主细胞的过程。
不同种类的病毒，侵入方式有所不同。
如T4噬菌体先用溶菌酶在宿主细胞壁上“钻”出一个小孔，然后将核酸注入到细胞内部，蛋白质外壳则留在外面。
多数病毒通过类似胞饮或吞噬的方式，使整个病毒进入细胞内部。
植物病毒往往通过昆虫的口器或从植物体上的伤口进入植物体内。
连同衣壳或囊膜一起进入细胞内部的病毒，还要在水解酶等的作用下，脱去衣壳或囊膜。
生物合成病毒释放出核酸以后，原有的形态消失，称为隐蔽期。
在隐蔽期内，病毒在宿主细胞内活跃地进行生物合成，包括病毒核酸的复制和蛋白质的合成。
由于病毒所含的核酸类型不同，其生物合成的过程也不完全相同。
下面以含DNA的痘病毒为例说明。
痘病毒带有依赖DNA的RNA多聚酶。
当病毒进入隐蔽期后，在自身的RNA多聚酶的催化下，首先合成早期的mRNA，由它翻译成早期的蛋白质。
早期蛋白质主要是病毒复制所需要的酶以及抑制宿主细胞正常代谢的调节蛋白质。
在这些酶的催化下，以亲代DNA为模板，复制出子代病毒的DNA。
在DNA开始转录以后合成的mRNA，称晚期的mRNA，再由晚期的mRNA翻译成晚期的蛋白质。
晚期的蛋白质主要是构成病毒衣壳的结构蛋白质。
装配病毒核酸和蛋白质的生物合成是分别进行的，因而必须将它们装配在一起才能成为成熟的病毒。
结构简单的病毒，其各个组分是自发地装配在一起的。
结构复杂的病毒往往需要在非结构蛋白质的指导下进行装配。
释放无囊膜的病毒靠裂解宿主细胞的方式，一起释放出来。
有囊膜的病毒，以类似出芽的方式，逐个从宿主细胞中释放出来。
第三章：病毒的增殖
一,吸
附
病毒与细胞表面特异性受体发生碰 撞 , 病毒附着于细胞受体而引起的 病毒感染的第一阶段. 病毒感染的第一阶段.
病毒吸附分两步进行: 病毒吸附分两步进行: 可逆吸附 : 病毒与细胞以静电引力相结合 , 可逆吸附: 病毒与细胞以静电引力相结合, 是一种非特异性的吸附. 是一种非特异性的吸附. 与细胞和病毒的浓度成正比 ; 也与溶液中的 与细胞和病毒的浓度成正比; Ca2+,Mg2+, 和 Na+ 等离子有关 ( 促进或抑 等离子有关( 制作用) 制作用 ) ; 单纯的稀释或冲洗以及应用抗病 毒血清或高浓度的盐类和一定的pH环境都可 毒血清或高浓度的盐类和一定的 环境都可 使病毒重新解脱.解脱的病毒具备感染性. 使病毒重新解脱.解脱的病毒具备感染性.
五,装配和释放
1.装配:新合成的病毒核酸和病毒蛋白在感染 .
细胞内组装成完整的病毒颗粒的过程. 细胞内组装成完整的病毒颗粒的过程. 无囊膜病毒壳体与核酸结合形成的核衣壳 即为成熟的病毒; 即为成熟的病毒;囊膜病毒需要在核衣壳外加上 包膜. 包膜. 病毒的装配效率很低, 往往只有不到50% 病毒的装配效率很低 , 往往只有不到 的子代病毒成份能组装成完整的病毒粒子. 的子代病毒成份能组装成完整的病毒粒子.
4,痘病毒:较为特殊 ,痘病毒:
外层囊膜在胞膜或吞饮泡膜上被融合 外层囊膜在胞膜或吞饮泡膜上被融合, 在胞膜或吞饮泡膜上被融合 病毒核心进入胞浆内, 病毒核心进入胞浆内 , 核心借助自身衣壳 上的依赖DNA的RNA聚合酶合成 的 聚合酶合成mRNA, 上的依赖 聚合酶合成 , 进一步译制出一些早期蛋白质, 进一步译制出一些早期蛋白质 , 这些蛋白 脱壳酶, 质中有脱壳酶 质中有 脱壳酶 , 该酶反过来帮助病毒核心 进一步脱壳. 进一步脱壳.
第03章 病毒的增殖
第三章病毒的增殖一、细胞——病毒的增殖场所二、病毒的增殖过程三、病毒的不全增殖和缺损病毒四、亚病毒五、病毒和病毒成分的细胞外增殖主要参考文献研究病毒的增殖过程和生物合成，不仅关系到病毒病的防治，而且对于揭示许多生命现象的本质乃至生命的起源等具有重要意义。
因为有关生命本质及其起源的研究，必须从非细胞形态的生命物质开始。
对病毒结构及其生物合成各环节的深入了解，是对病毒性疾病进行化学防治的基础。
切断病毒增殖周期的任何一个环节，均可阻碍病毒增殖而达到防治目的；另外，已发现的一些不见于正常细胞而为病毒增殖所必需的核酸合成酶和其他蛋白质，为病毒病的化学防治提供了可能性。
一、细胞—病毒的增殖场所病毒缺乏自身增殖所需的完整酶系统，增殖时必须依靠宿主细胞合成核酸和蛋白质，甚至直接利用宿主细胞的某些成分，这就决定了病毒在细胞内专性寄生的特性。
活细胞是病毒增殖的唯一场所，也是病毒生物合成所需的能量和材料的主要供应者。
因此，了解动物细胞的超微结构及其功能，特别是其中对病毒增殖具有重要意义的结构，是认识病毒增殖过程和规律的必要前提。
但有关细胞的超微结构及其功能，在细胞生物学书籍中有十分详细的介绍，这里不再赘述。
二、病毒的增殖过程动物病毒的增殖过程大致可以分为：吸附与侵入、脱壳、病毒成分的合成以及装配与释放等4个主要阶段。
1.吸附和侵入病毒吸附分两步进行，即可逆的非特异性吸附和不可逆的特异性吸附。
首先，非特异性吸附即病毒与细胞以静电引力相结合。
这种吸附可发生在细胞表面任何部位且易被冲洗、高浓度盐类和一定的pH环境所破坏，使病毒从吸附物上重新解脱出来。
随后是病毒的特异性吸附，即病毒蛋白(抗受体)与细胞膜上的受体特异性结合。
这种吸附是不可逆的。
细胞受体主要是胞膜上的糖蛋白。
据估计，一个宿主细胞上的特异性受体部位可达104～105个。
这里必须指出，不一定每个细胞表面都有特定病毒的特异受体。
细胞有无特定病毒的受体，直接影响是否对该病毒具有易感性。
病毒—病毒的增殖
病毒的复制周期
以培养时间为横坐标,以噬菌斑数为纵坐 标,绘制成的曲线为一步生长曲线。
可分以下阶段： 潜伏期 裂解期 稳定期
噬菌斑: 概念：将少量噬菌体与大量敏感菌混合培养在
营养琼脂中，在平板表面布满宿主细胞的 菌苔上,可以用肉眼看到一个个透明的不长 菌的小圆斑，称为噬菌斑。(每个噬菌斑一 般是由一个噬菌体粒子形成的。) 应用: 噬菌斑可用于检出、分离、纯化噬菌体 和进行噬菌体的计数。
噬菌体繁殖
1.噬菌体复制 概念
2.噬菌体增殖 过程
④装配： DNA分子的缩合——通过衣壳包裹DNA而形成头部——尾
丝及尾部的其它部件独立装配完成——头部与尾部相结合——最 后装上尾丝，至此，一个个成熟的形状、大小相同的噬菌体装配完 成。
噬菌体繁殖
1.噬菌体复制 概念
2.噬菌体增殖 过程
⑤释放： ▪裂解：多以裂解细胞的方式释放。 ▪分泌：噬菌体穿出细胞，细胞并不裂解。 通常情况下，一个噬菌体通过上述五个过程能合 成100——300个噬菌体。烈性噬菌体的这种生 长繁殖方式也称为一步生长
噬菌体繁殖
1.噬菌体复制 概念
2.噬菌体增殖 过程
根据噬菌体与宿主的关系： 烈性噬菌体：指感染宿主细胞后，能够使宿 主细胞裂解的噬菌体. 温和噬菌体（或溶源性噬菌体）：噬菌体感 染细胞后，将其核酸整合（附着）到宿主的 核DNA上，并且可以随宿主DNA的复制而 进行同步复制，在一般情况下，不引起寄主 细胞裂解的噬菌体。
微生物学及操作技术
病毒的增殖
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病毒的复制周期 噬AGE
病毒的复制周期
1
• 一步生长曲线
1.一步生长曲 线
病毒感染敏感宿主细胞后，病毒核酸进入细胞，通过其复制与表达 产生子代病毒基因组和新的蛋白质，然后由这些新合成的病毒组分装配 （assembly）成子代毒粒，并以一定方式释放到细胞外。
病毒的增殖
病毒的复制周期—脱壳（3/5）
uncoating -naked vir制周期
吸 附
穿 入
脱 壳
生物合成
组装和释放
生物合成--mRNA的转录与蛋白质的合成 ①合成过程： 模板核酸 转录 mRNA 翻译 蛋白质(酶及衣壳)
②特点：
宿主细胞为病毒复制提供生物合成的场所(细 胞器等)、原料(氨基酸/核苷酸等)、能量及酶系 统等必备条件。
+RNA
-RNA
（结构蛋白；RNA聚合酶）
翻译 病毒蛋白
RNA聚合酶 +RNA
子代病毒
-RNA
• dsRNA全部为新合成的，并非半保留 复制
⑥ 逆转录病毒（HIV）
举例
➢ 人类嗜T细胞病毒（Human-Lymphotropic Virus，HTLV） ➢ 人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus ， HIV）
病毒的增殖
基本概念
➢ 病毒在活细胞内，以病毒基因为模板，利用宿主 细胞的原料、能量和场所，在酶的作用下，分别 合成病毒基因及蛋白质，再组装成完整的病毒颗 粒，这种方式称为自我复制（self replication)。
➢ 从病毒进入宿主细胞开始，经过基因组复制和病 毒蛋白合成，至释放出子代病毒的全过程，称为 一个复制周期（replication cycle）。病毒的复 制周期主要包括吸附、穿入、脱壳、生物合成、 装配与释放五个连续步骤。
② +/-ssDNA病毒（+ssDNA--细小病毒 ; ） -ssDNA--猪圆环病毒
ssDNA DNA聚合酶
±dsDNA复制中间型
复 制
蛋白质 翻译 mRNA 转录 子代ssDNA
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说教材 说学情 说目标 说教学策略 说教学过程
2015级专科 学生
知识基础
经验基础
说教材 说学情 说目标 说教学策略 说教学过程
情感目标
能力目标
知识目标
1、概述病毒 复制周期。
2、异常增殖 与干扰现象。
运用相关
知识解答为什 么在得流感时 不能接种疫苗？
认同现行的疫 苗接种方法。
教学重点：
1、病毒的复制周期 2、干扰现象。
活病毒与活病毒 灭活病毒与活病毒 同种、同型病毒之间 不同种、不同型之间
干扰现象机制
• 产生了干扰素(interferon IFN) • 第一种病毒破坏了宿主细胞表面受体或改变
了宿主细胞的代谢途径
意义：
指导预防接种 指导临床治疗：干扰素的使用
逆转录病毒
区域：DNA病毒 核内（除痘病毒）
RNA病毒 胞质（除流感病毒及逆转录病毒）
复制周期—— 双链DNA病毒生物合成
半保留复制
核酸游离
步骤
mRNA转录
早期蛋白质合成
‘‘‘早期蛋白（功能蛋白） ‘子‘代病‘毒DNA复制 ‘‘
晚期mRNA转录
子代DNA合成 晚期蛋白质合成
晚期蛋白（结构蛋白）
组装与释放
二、病毒增殖的异常现象
缺陷病毒
因病毒基因组不完整或基因发生改变，而不能 进行正常增殖所产生的子代病毒。又称为缺陷 干扰颗粒
辅助病毒
可以辅助缺陷病毒完成正常增殖的病毒。
缺陷病毒+ 辅助病毒——正常复制
腺病毒伴随病毒
腺病毒
二、病毒增殖的异常现象
干扰现象
两种病毒感染同一种细胞，常发生一种病毒抑 制另一种病毒复制的现象，称干扰现象。 类型：
教学难点：
病毒的生物合成
说教材 说学情 说目标 说教学手段 说教学过程
具体教学手段：
1、自制的多媒体课件直观教学 2、实物投影仪展示 3、黑板板书展示
说教材 说学情 说目标 说教学手段 说教学过程
以甲流为背
景，引入新 课
复习人体的
第一、第二 防线
强化抗原、
抗体的概 念
类比法构建 特异性免疫 三大阶段的 框架
组装成熟 DNA病毒在核内 RNA病毒在浆内
不同方式 释放
病毒从细胞内释放方式
溶细胞型—细胞裂解（无包膜病毒） 稳定型—以出芽方式释放（包膜病毒）
病毒的复制周期
吸附、穿入 脱壳
生物合成
组装、成熟与释放 溶细胞型
稳定型
二、病毒增殖的异常现象
顿挫感染： 病毒进入宿主细胞后，如细胞不能为病毒
增殖提供所需要的酶、能量及必要的成分， 则病毒在细胞中不能合成本身的成分，称为 顿挫感染。
师生共建体 液免疫过程 概念图
课堂小结， 联系升华
提炼特异
性免疫特 点
比较法强化
体液免疫与 细胞免疫
学生自主构
建细胞免疫 过程概念图
第二节 病毒的增殖
病毒增殖条件 活细胞---严格寄生性 敏感细胞---选择性（亲嗜性）
第二节 病毒的增殖
病毒增殖方式 复制（ replication)---以病毒基因为 模板，在宿主细胞内经过转录、翻译、 合成、装配等程序，最终释放出子代病 毒的过程。
说教材 说学情 说目标 说教学策略 说教学过程
高教版病原生物与免疫
➢ 第1章 绪论
➢ 第2章 微生物
第一节 认识微生物 第二节 微生物的生物学性状 第三节 细菌的分布
➢ 第3章 病原微生物
➢ 6章 病原性细菌 ➢ 第7章 常见病毒 ➢ 第8章 真菌及其他微生物 ➢ 第9章 人体寄生虫
一、病毒复制周期
1.吸附与穿入 2.脱壳 3.生物合成 4.组装与释放
吸附（几分至几十分钟）
穿入
融
融合---有包膜病毒
合
胞饮---无包膜病毒
直接穿入
胞
饮
脱壳
在溶酶体酶作用下，
直 接
脱壳。
穿 入
生物合成（隐蔽期）
6大类型：双链DNA病毒
单链DNA病毒
单正链RNA病毒
单负链RNA病毒
双链RNA病毒