人教版生物选修一3.2月季的花药培养 课件
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【人教版】高中生物选修一：3.2《月季的花药培养》ppt课件
▪ (2)培养前的低温预处理很有必要，处理一般 在4～10℃下保持10～20d。
▪ 温馨提示：①接种月季花药的选择时期是5月 份初花期，花蕾完全未开放时，此时花药处 于单核期，花瓣未松动，菌少、易消毒，易 诱导成功。
▪ ②对花药进行低温预处理时，注意温度、时 间要恰当，温度过高、过低，时间过长、过 短，都会影响诱导结果，一般选择4～10℃， 预处理10～20d。
条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时，一是 容注易从意受伤不部要位产损生愈伤伤组花织药，原因是 __________愈_伤_组_织_或_胚_状_体_____________；二是 要彻底除去花丝，原因是花丝不利于 _____7_～_10____________的形成。
▪ (2)接种花药：剥取的花药要立即接种到培养 基上。每个培养瓶接种________个花药。
▪ (4)鉴定和筛选：通过愈伤组织形成的植株， 常常会出现____________的变化，因而需要 鉴定和筛选。
▪ 1．花粉发育时期的单核期细胞具有哪些特征？
▪ 2．为什么选择合适的花粉发育时期是提高诱 导成功率的重要因素？
▪ 1．细胞含有浓厚的原生质，核位于细胞的中 央；随着细胞不断长大，细胞核由中央移向 细胞一侧并分裂成一个生殖细胞核和一个花 粉管细胞核，进而形成两个细胞——营养细胞 和生殖细胞。
▪ [答案] B
▪ 花粉的形成过程和培养过程进行的细胞分裂 依次为( )
▪ A．减数分裂、有丝分裂
▪ B．有丝分裂、减数分裂
▪ C．有丝分裂、有丝分裂 ▪ D．减数分裂和有丝分裂、有丝分裂
▪ [答案] D ▪ [解析] 形成花粉的最初的母细胞为小孢子母
细胞，小孢子母细胞经过一次减数分裂形成4 个小孢子，每个小孢子再经过一次有丝分裂
▪ 温馨提示：①接种月季花药的选择时期是5月 份初花期，花蕾完全未开放时，此时花药处 于单核期，花瓣未松动，菌少、易消毒，易 诱导成功。
▪ ②对花药进行低温预处理时，注意温度、时 间要恰当，温度过高、过低，时间过长、过 短，都会影响诱导结果，一般选择4～10℃， 预处理10～20d。
条件下除去花萼、花瓣。剥取花药时，一是 容注易从意受伤不部要位产损生愈伤伤组花织药，原因是 __________愈_伤_组_织_或_胚_状_体_____________；二是 要彻底除去花丝，原因是花丝不利于 _____7_～_10____________的形成。
▪ (2)接种花药：剥取的花药要立即接种到培养 基上。每个培养瓶接种________个花药。
▪ (4)鉴定和筛选：通过愈伤组织形成的植株， 常常会出现____________的变化，因而需要 鉴定和筛选。
▪ 1．花粉发育时期的单核期细胞具有哪些特征？
▪ 2．为什么选择合适的花粉发育时期是提高诱 导成功率的重要因素？
▪ 1．细胞含有浓厚的原生质，核位于细胞的中 央；随着细胞不断长大，细胞核由中央移向 细胞一侧并分裂成一个生殖细胞核和一个花 粉管细胞核，进而形成两个细胞——营养细胞 和生殖细胞。
▪ [答案] B
▪ 花粉的形成过程和培养过程进行的细胞分裂 依次为( )
▪ A．减数分裂、有丝分裂
▪ B．有丝分裂、减数分裂
▪ C．有丝分裂、有丝分裂 ▪ D．减数分裂和有丝分裂、有丝分裂
▪ [答案] D ▪ [解析] 形成花粉的最初的母细胞为小孢子母
细胞，小孢子母细胞经过一次减数分裂形成4 个小孢子，每个小孢子再经过一次有丝分裂
高中生物 3.2 月季的花药培养精品课件 新人教版选修1
课堂互动探究
热点考向示例
随堂达标检测
教科书问题解答
1．花粉鉴定的两种方法 (1)最常用的方法——醋酸洋红法。
花药(载玻片上)→质量分数为1%的醋酸洋红→用镊柄将花药捣 碎，盖上盖玻片→镜检 (2)某些植物的花粉细胞核不易着色—采用焙花青-铬矾法：
花药(在卡诺氏固定液中固定20 min)→取出，置于载玻片上→ 焙花青—铬矾溶液染色→盖上盖玻片→镜检(花粉细胞核染成蓝 黑色)
焙花青－铬矾法
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热点考向示例
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教科书问题解答
2．消毒
常用消毒液为 体，积消分毒数时为间70分%别的为酒精和质和量分数为0.1。%
3．接氯种化和汞培溶养液
30 s 2～4 min
(1)接种要求：在无菌条件下除去
、
和
药立即接种到培养基上。
萼片 花瓣 花丝
(2)培养条件：温度在
左右，幼小植株形成后需要
A．花期后期时的花药比前期更容易产生花粉植株 B．月季的花药培养一般选择在月季盛开期 C．选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素 D．选择单核期以前的花药接种，培养成功率提高 解析 花粉植株的获取中选择合适的花粉发育时期是提高诱 导成功率的重要因素，花药培养需选择花蕾期的花粉发育至 单核期进行培养，过早或过晚都不易培养成功。 答案 C
随堂达标检测
教科书问题解答
3．影响花药培养的因素 (1)材料的选择 ①不同种类植物的诱导成功率不同。
②同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 ③合适的花粉发育时期：花期早期时的花药最佳。 ④最合适的选择时期：单核居中期或单核靠边期。 a．不选择单核期以前花药的原因：质地幼嫩，极易破碎。 b．不选择单核期以后花药的原因：花瓣已有些松动，给材料 的消毒带来困难。
人教版高中生物选修一专题三课题2《月季的花药培养》课件(共17张PPT)
生殖细胞将再进行一次有丝分裂，形成两个精子
（二）产生花粉植株的两种途径
花药中 脱分化 ① 的花粉
分化
胚状体
丛芽
②
花药中 的花粉
脱分化
再分化
愈伤组织
丛芽
诱导
体 变细 为胞与胚合（子胚发状育体成）的：胚在非组常织相培似养的移过结程构栽中，，发某育些过细程胞亦在与形合生态子根上胚转类
似
原因：培养基中的激素种类及浓度配比
合适的花粉发育期（单核居中期与靠边期 之间）
2、培养基的组成
（ MS培养基+不同比例的植物生长调节激素）
实验操作
尝试从雄蕊上剥离花药
注意：剥离花药时，要尽量不损伤 花药， 同时还要彻底去除花丝。
（一）材料选取
1、从花药看：月季的初花期 从花粉看：单核期 从花蕾看：完全未开放的
2、通过镜检来确定是否处于适宜的发育期。 方法：醋酸洋红法(将染色体染成红色)
胚状体发育途径 烟草花药培养
部分花药通过胚状体途径形成小植株
愈伤组织发育途径 水稻花药培养
接种在平板上的水稻花药
部分花药产生愈伤组织
愈伤组织转接种到再生培养基
愈伤组织分化形成再生植株
(三)、影响花药培养的主要因素
1、材料的选择
不同植物的诱导成功率不同. 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有 直接的影响. （一般选月季的初花期）
雌蕊
花药
花丝 柱头 花柱 子房
一、基础知识
（一）被子植物的花粉发育
1 雄蕊
花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉
2 花粉的概念:由花粉母细胞经过减数分裂形成
的单倍体的生殖细胞.
被子植物花粉的发育过程
高中生物同步课件：3.2_月季的花药培养(2)(人教版高二选修1)
②醋酸洋红的配置
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加 入1g洋红，再加热回流8h，冷却至50℃，过 滤即可。
高中生物必修一课件
③染色操作 将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋 酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显 微镜下检查。 3、焙花青—铬钒法
①卡诺氏固定液的配制方法
将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比 例混匀
高中生物必修一课件
练习1.
答：F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为 Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法， 将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米 （aasusu）进行测交，可以选择出基因型为 AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较 繁琐，耗时也较长，需要至少三年的选种和 育种时间。如果利用花药培养的技术，在F1 代产生的花粉中就可能有Asu的组合，再将 花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到 紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方 法可以大大缩短育种周期。
高中生物必修一课件
4、鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现染 色体倍性的变化（主要原因是营养 细胞核和生殖细胞核融合造成的）。
高中生物必修一课件
5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
植物组织培养技术与花药培养技术的相同 之处是：培养基配制方法、无菌技术及接 种操作等基本相同。 两者的不同之处在于：花药培养的选材非 常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花 药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要 及时更换培养基；花药培养对培养基配方 的要求更为严格。这些都使花药培养的难 度大为增加。
④其它时期选择的缺点
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易 破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动， 又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核 Nhomakorabea的花药。
将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加 入1g洋红，再加热回流8h，冷却至50℃，过 滤即可。
高中生物必修一课件
③染色操作 将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋 酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显 微镜下检查。 3、焙花青—铬钒法
①卡诺氏固定液的配制方法
将无水酒精与冰醋酸按体积比为3：1的比 例混匀
高中生物必修一课件
练习1.
答：F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为 Aasusu或AAsusu。如果运用常规育种方法， 将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米 （aasusu）进行测交，可以选择出基因型为 AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较 繁琐，耗时也较长，需要至少三年的选种和 育种时间。如果利用花药培养的技术，在F1 代产生的花粉中就可能有Asu的组合，再将 花粉植株进行染色体加倍，就可以直接得到 紫色甜玉米的纯合体（AAsusu）。这种方 法可以大大缩短育种周期。
高中生物必修一课件
4、鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组 织形成的花粉植株，常常会出现染 色体倍性的变化（主要原因是营养 细胞核和生殖细胞核融合造成的）。
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5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点：
植物组织培养技术与花药培养技术的相同 之处是：培养基配制方法、无菌技术及接 种操作等基本相同。 两者的不同之处在于：花药培养的选材非 常重要，需事先摸索时期适宜的花蕾；花 药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要 及时更换培养基；花药培养对培养基配方 的要求更为严格。这些都使花药培养的难 度大为增加。
④其它时期选择的缺点
选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易 破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动， 又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核 Nhomakorabea的花药。
人教版高中生物选修(一) 3.2月季的花药培养 课件 (12) (共27张PPT)
基础知识：
（一）、被子植物的花粉发育
（二）、产生花粉植株的两条途径
（三）、影响花药培养的因素
核心要点突破
要点一、 被子植物的花粉发育
被子植物的花的结构是怎样的？ 观察下图，和减数分裂比较，你能指出对应 的时期吗？又有何特点？
花丝 雄蕊：
花药：囊状结构，内有很多花粉粒 花粉发育场所为被子植物雄蕊的花药中。被子植物 的雄蕊通常包含花丝、花药两部分。花药为囊状结 构，内部含有许多花粉。 1．花粉的概念：由花粉母细胞经过减数分裂形成 的单倍体的生殖细胞。 2．发育过程 (1)四分体时期： 4个单倍体细胞连在一起。 (2)单核期： 细胞含有浓厚的原生质，该期又可分 为单核居中期和单核靠边期两个时期。 细胞中含有生殖细胞核和花粉管细胞 3．双核期： 核，它们分别形成一个营养细胞和一个生殖细胞， 其中的生殖细胞形成两个精子。
为什么花瓣松动会给材料 的消毒带来困难？
花瓣松动后，微生物就可 能侵入到花药，给材料的消毒 带来困难。
2、培养基的组成
小麦中为N6培养基 马铃薯、月季中为MS培养基 油菜中为B5培养基 MS N6培养基是目前普遍使用的培养基。它有较高的无机盐浓度， 培养基特别 适合于禾谷类植物的花药和花 对保证组织生长所需的矿质营养和加速愈伤组织的生长十分有 粉培养，在国内外得到广泛应用。 由于无机 利。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存、消毒等过程中， 即使有些成分略有出入，也不致影响离子间的平衡。 MS固体 盐的数量比较低，更适合木本植 物的组织培 培养基可用来诱导愈伤组织，或用于胚、茎段、茎尖及花药培 养。 养，它的液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显成功。这
课题2
月季的花药培养
课标领航
1．说出被子植物花粉发育的过程及花药培 养产生花粉植株的两种途径。 2．说出影响花药培养的因素。 3．学习花药培养的基本技术。 4．尝试用月季或其他植物的花药进行培养。
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1、选材是否恰当
选材是否成功是花药培养成功的关键。应学 会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。
2、无菌技术是否过关
如果出现了污染现象，说明某些操作步骤， 如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。
3、接种是否成功
如果接种的花药长出愈伤组织或释放出 胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适 时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一 步分化成再生植株。
C 培养条件
培养温度通常保持在25℃左右，光照因作物 种类不同而异。在花粉培养的早期，黑暗或弱光 条件可能更有利于花粉分裂的启动。
D 接种密度
思考
为什么花瓣松动会给材料的消毒 带来困难？
答：花瓣松动后，微生物就可能侵 入到花药，给材料的消毒带来困难。
二、 实验操作
（一）材料的选取 （二）材料的消毒 （三）接种和培养
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个 花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开 裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培 养基上，否则这些植株将很难分开。
4、鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花 粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要 原因是营养核和生殖核融合造成的）
三、 结果分析与评价
花药培养在育种工作上的意义
花药培养使花粉粒发育为单倍体植株。 经过人工诱导使单倍体植株细胞内染色体数目 加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。 获得的纯合植株自交后代不发生性状分离。 单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种 的培育开辟了新途径。
专题3 植物的组织培养技术
课题2 月季的花药培养
大多数被子植物的花药是由4个花粉囊（少数 植物为2个）组成，分为左、右两半，中间由药隔 相连。
当花粉囊的壁组织逐步发育分化时，会形成 大量的花粉母细胞（小孢子过减数分裂而形成，因
此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。
➢ 被子植物花粉的发育要经历：
四分体时期、单核期和双核期等阶段。
1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花 药时，首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的 单倍体植株。
说明生殖细胞和体细胞一样，在离体条件 下也具有发育成完整植株的潜能。
自20世纪60年代以来，世界上已有250多种高 等植物的花药培养获得成功。
我国已经培育成功近50种植物的花粉再生 植株，如小麦、玉米、大豆、甘蔗、橡胶等。
取出花药后立即将其接种于培养基上，通常每 瓶接种花药7-10个。
3、培养
①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要 光照。幼小植株形成后才需要光照。
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药 开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养 基上，以便进一步分化出再生植株
大自然为我们创造了千姿百态的植物，许 多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。
牡丹
月季
花的结构：花梗(花柄)、花萼、花托、花冠、 雌蕊和雄蕊
花药是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄 蕊产生花粉的主要部分。
花药
什么是花药培养呢？
花药培养
采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段 的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基 上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分 化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈 伤组织分化成完整的植株的技术。
（一） 材料的选取
1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否 处于适宜的发育期。 2. 最常用的方法：醋酸洋红法、焙花青—铬矾法。
某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花 青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
（二）材料的消毒
花蕾
70％的酒精浸 泡30s
无菌水 清洗
吸干表面水分
无菌水清洗3-5次
0.1％的氯化汞溶液 2-4 min
（三）接种和培养
灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花 瓣，并立即将花药接种到培养基上。
1、剥取花药
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药
注意： ①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药 不利于愈伤组织或胚状体的形成 2、接种
资料
胚状体：
又称体细胞胚，这种体细胞在形态 上能够转变为与合子发育成的胚非常相 似的结构，而且他的发育过程也与合子 胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整， 就像一颗种子。
3、影响花药培养的因素
花粉植株诱导成功的关键因素：
适宜的材料 培养基的组成
I. 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉 植株。一般，月季的花药培养时间选在五月 初到五月中旬，即月季的初花期。
A 亲本植株的生长条件
通常从生长旺盛的植株上取早期现蕾的 花药或花粉进行培养，较易形成花粉植株； 取蕾前，供体植株的栽培条件的好坏也影响 花粉植株的诱导率。
B 材料的低温预处理
有报道称低温（如4℃）预处理一定时间（如 48 h）可以明显促进胚状体的形成，有的经短期 高温（30 ~ 40℃）处理也能够促进胚状体的形成， 但是不同作物对所需的最适处理温度和时间要求 不同。
教学目标
1.说出被子植物花粉发育的过程 2.说出花药培养产生花粉植株的两种途径 3.说出影响花药培养的因素，学习花药培养的基 本技术。
课题内容： （一） 基础知识 （二） 实验操作 （三） 结果与分析
一、 基础知识
1、被子植物的花粉发育
➢花粉：
雄蕊
花丝 花药
雄蕊
囊状结构，内有很多花粉粒
① 花粉囊
II. 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功 率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞 核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成 功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发 育时期为单核靠边期
III.为了挑选到单核 期的花药，通常 选择完全未开放 的花蕾。
盛开的或略微开放的花都不 易选做实验材料
月季
其他影响因素：
1减4有
个个 小花生生花 孢子粉粒管细殖细胞殖细粉管 母胞核胞细 细核胞
胞（
营
2个精子
单核靠边期 单核居中期
1个小孢子
养
细
胞
小孢子四
）
分体时期 单核期
双核期
2、产生花粉植株的两种途径
花粉 脱分化 胚状体 分化 丛芽 诱导 生根
花粉 脱分化 愈伤组织 再分化
移栽
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决 于培养基中激素的种类及其浓度配比。
课堂小结
被子植 花粉 花粉囊
物的花
花粉粒
粉发育
小孢子四分体时期
月 基础
发育过程 单核期
季 知识 花粉植株 愈伤组织 双核期
的
产生途径 胚状体 材料的选择
花 药
影响因素
主要因素 其他因素
培养基的组成
培
材料的选取
养
实验操作
材料的消毒 接种和培养
鉴定和筛选
结果分析与评价
选材是否成功是花药培养成功的关键。应学 会通过显微镜观察处于适宜发育期的花粉。
2、无菌技术是否过关
如果出现了污染现象，说明某些操作步骤， 如培养基灭菌、花蕾消毒或接种等有问题。
3、接种是否成功
如果接种的花药长出愈伤组织或释放出 胚状体，花药培养的第一步就成功了。要适 时转换培养基，以便愈伤组织或胚状体进一 步分化成再生植株。
C 培养条件
培养温度通常保持在25℃左右，光照因作物 种类不同而异。在花粉培养的早期，黑暗或弱光 条件可能更有利于花粉分裂的启动。
D 接种密度
思考
为什么花瓣松动会给材料的消毒 带来困难？
答：花瓣松动后，微生物就可能侵 入到花药，给材料的消毒带来困难。
二、 实验操作
（一）材料的选取 （二）材料的消毒 （三）接种和培养
③注意：如果花药开裂释放出胚状体，则一个 花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开 裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培 养基上，否则这些植株将很难分开。
4、鉴定和筛选
在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花 粉植株，常常会出现染色体倍性的变化（主要 原因是营养核和生殖核融合造成的）
三、 结果分析与评价
花药培养在育种工作上的意义
花药培养使花粉粒发育为单倍体植株。 经过人工诱导使单倍体植株细胞内染色体数目 加倍，重新恢复到正常植株的染色体数目。 获得的纯合植株自交后代不发生性状分离。 单倍体育种不仅缩短了育种周期，也为新品种 的培育开辟了新途径。
专题3 植物的组织培养技术
课题2 月季的花药培养
大多数被子植物的花药是由4个花粉囊（少数 植物为2个）组成，分为左、右两半，中间由药隔 相连。
当花粉囊的壁组织逐步发育分化时，会形成 大量的花粉母细胞（小孢子过减数分裂而形成，因
此，花粉粒是单倍体的生殖细胞。
➢ 被子植物花粉的发育要经历：
四分体时期、单核期和双核期等阶段。
1964年，印度科学家在培养毛叶曼陀罗的花 药时，首次获得了由花药中的花粉粒发育而来的 单倍体植株。
说明生殖细胞和体细胞一样，在离体条件 下也具有发育成完整植株的潜能。
自20世纪60年代以来，世界上已有250多种高 等植物的花药培养获得成功。
我国已经培育成功近50种植物的花粉再生 植株，如小麦、玉米、大豆、甘蔗、橡胶等。
取出花药后立即将其接种于培养基上，通常每 瓶接种花药7-10个。
3、培养
①培养条件：温度控制在25℃左右，不需要 光照。幼小植株形成后才需要光照。
②培养：一般经过20-30天培养后，会发现花药 开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体 长出愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养 基上，以便进一步分化出再生植株
大自然为我们创造了千姿百态的植物，许 多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。
牡丹
月季
花的结构：花梗(花柄)、花萼、花托、花冠、 雌蕊和雄蕊
花药是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄 蕊产生花粉的主要部分。
花药
什么是花药培养呢？
花药培养
采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段 的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基 上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分 化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈 伤组织分化成完整的植株的技术。
（一） 材料的选取
1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否 处于适宜的发育期。 2. 最常用的方法：醋酸洋红法、焙花青—铬矾法。
某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花 青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。
（二）材料的消毒
花蕾
70％的酒精浸 泡30s
无菌水 清洗
吸干表面水分
无菌水清洗3-5次
0.1％的氯化汞溶液 2-4 min
（三）接种和培养
灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花 瓣，并立即将花药接种到培养基上。
1、剥取花药
在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药
注意： ①勿损伤花药，以免诱导出非花粉愈伤组织 ②要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药 不利于愈伤组织或胚状体的形成 2、接种
资料
胚状体：
又称体细胞胚，这种体细胞在形态 上能够转变为与合子发育成的胚非常相 似的结构，而且他的发育过程也与合子 胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整， 就像一颗种子。
3、影响花药培养的因素
花粉植株诱导成功的关键因素：
适宜的材料 培养基的组成
I. 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉 植株。一般，月季的花药培养时间选在五月 初到五月中旬，即月季的初花期。
A 亲本植株的生长条件
通常从生长旺盛的植株上取早期现蕾的 花药或花粉进行培养，较易形成花粉植株； 取蕾前，供体植株的栽培条件的好坏也影响 花粉植株的诱导率。
B 材料的低温预处理
有报道称低温（如4℃）预处理一定时间（如 48 h）可以明显促进胚状体的形成，有的经短期 高温（30 ~ 40℃）处理也能够促进胚状体的形成， 但是不同作物对所需的最适处理温度和时间要求 不同。
教学目标
1.说出被子植物花粉发育的过程 2.说出花药培养产生花粉植株的两种途径 3.说出影响花药培养的因素，学习花药培养的基 本技术。
课题内容： （一） 基础知识 （二） 实验操作 （三） 结果与分析
一、 基础知识
1、被子植物的花粉发育
➢花粉：
雄蕊
花丝 花药
雄蕊
囊状结构，内有很多花粉粒
① 花粉囊
II. 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功 率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞 核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成 功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发 育时期为单核靠边期
III.为了挑选到单核 期的花药，通常 选择完全未开放 的花蕾。
盛开的或略微开放的花都不 易选做实验材料
月季
其他影响因素：
1减4有
个个 小花生生花 孢子粉粒管细殖细胞殖细粉管 母胞核胞细 细核胞
胞（
营
2个精子
单核靠边期 单核居中期
1个小孢子
养
细
胞
小孢子四
）
分体时期 单核期
双核期
2、产生花粉植株的两种途径
花粉 脱分化 胚状体 分化 丛芽 诱导 生根
花粉 脱分化 愈伤组织 再分化
移栽
两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决 于培养基中激素的种类及其浓度配比。
课堂小结
被子植 花粉 花粉囊
物的花
花粉粒
粉发育
小孢子四分体时期
月 基础
发育过程 单核期
季 知识 花粉植株 愈伤组织 双核期
的
产生途径 胚状体 材料的选择
花 药
影响因素
主要因素 其他因素
培养基的组成
培
材料的选取
养
实验操作
材料的消毒 接种和培养
鉴定和筛选
结果分析与评价