核酸提取试剂盒介绍26页PPT
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核酸提取试剂盒ppt正式完整版
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革兰氏阳性细菌主要包含细菌中的厚壁菌门(Firmicutes)（低G+C革兰氏阳性细菌）和放线菌门(Actinobacteria)（高G+C革兰氏阳性细
菌）。
DNA提取方法
磁珠法：生物磁珠是一种新型的功能化固体载体，其表面包被有活性基团，可以与多 种生物活性物质发生偶联，兼具有液体的流动性和固体磁性材料等特点，在外磁场的 作用下可以定向移动和集中，当撤去外磁场后，稍加振荡或抽吸又可均匀分散于液体 中，从而使固液相的分离变的十分快捷方便，通过简单的洗脱可以得到纯度很高的靶 向物质。
➢核酸提取试剂盒
DNA提取试剂盒 RNA提取试剂盒
DNA提取方法
➢DNA提取方法
种子用粉碎机打成粉末状使用，样品为种子时，裂解时间为30min。
磁取珠10法µlD病N毒A（进1D行.碱N0A裂. /R解NA法）：提碱取裂试剂解盒法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的。 如快果速是 质干粒材DN料2A，.提煮适取沸当试法延剂：长盒裂煮解沸时时间将；样品中的DNA通过核酸裂解液的作用释放出来，离心沉淀后将杂质去
蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将
DNA 钠盐沉淀出来。
DNA提取方法
4.苯酚抽提法： 苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液 时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋 白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含 DNA 的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物 质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 。
核酸提取和注意事项ppt课件
使酚容易去除。
基因组DNA提取——CTAB法
• CTAB提取缓冲液的改进配方
组份 终浓度
Tris-HCl （pH 8.0）
EDTA （pH 8.0）
NaCl
CTAB
PVP40 β-巯基乙醇
100 mM
20 mM
0.4 M
3% (W/V)
5% (W/V)
2%（V/V） 使用前加入
PVP（聚乙烯吡咯烷酮）是酚的络合物，能与多酚形成一种 不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同 时它也能和多糖结合，有效去除多糖。
一．核酸简介 二．基因组DNA提取 三．质粒DNA提取 四．真核细胞总RNA提取
基因组DNA提取的几种常用方法： CTAB法 SDS法 其他方法
基因组DNA提取——CTAB法
CTAB法原理（植物DNA提取经典方法）
➢ CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide， 十六烷基三甲基溴化铵），是一种阳离子去污剂， 可溶解细胞膜，并与核酸形成复合物。
总RNA提取——样本准备
植物/动物组织样本：
新鲜取材或组织离体后液氮速冻，存于液氮或-80℃。 为避免反复冻融，需小份分装（50~100 mg/份）。
细胞样本：
新鲜收集待用或加入TRIzol后 -80℃冻存细胞沉淀。
血液样本：
新鲜血液分离出淋巴细胞，待用或加入TRIzol后 -80℃ 冻存细胞沉淀。
真核细胞总RNA提取——实验步骤
293细胞样品为例
收集细胞
上层溶液
裂解变性
异丙醇沉淀
干燥溶解
RNA溶液
抽提
离心洗涤
RNA提取常见问题
RNA降解 DNA残留 OD260 /OD280 比值偏低 电泳带型异常
基因组DNA提取——CTAB法
• CTAB提取缓冲液的改进配方
组份 终浓度
Tris-HCl （pH 8.0）
EDTA （pH 8.0）
NaCl
CTAB
PVP40 β-巯基乙醇
100 mM
20 mM
0.4 M
3% (W/V)
5% (W/V)
2%（V/V） 使用前加入
PVP（聚乙烯吡咯烷酮）是酚的络合物，能与多酚形成一种 不溶的络合物质，有效去除多酚，减少DNA中酚的污染；同 时它也能和多糖结合，有效去除多糖。
一．核酸简介 二．基因组DNA提取 三．质粒DNA提取 四．真核细胞总RNA提取
基因组DNA提取的几种常用方法： CTAB法 SDS法 其他方法
基因组DNA提取——CTAB法
CTAB法原理（植物DNA提取经典方法）
➢ CTAB（hexadecyltrimethylammonium bromide， 十六烷基三甲基溴化铵），是一种阳离子去污剂， 可溶解细胞膜，并与核酸形成复合物。
总RNA提取——样本准备
植物/动物组织样本：
新鲜取材或组织离体后液氮速冻，存于液氮或-80℃。 为避免反复冻融，需小份分装（50~100 mg/份）。
细胞样本：
新鲜收集待用或加入TRIzol后 -80℃冻存细胞沉淀。
血液样本：
新鲜血液分离出淋巴细胞，待用或加入TRIzol后 -80℃ 冻存细胞沉淀。
真核细胞总RNA提取——实验步骤
293细胞样品为例
收集细胞
上层溶液
裂解变性
异丙醇沉淀
干燥溶解
RNA溶液
抽提
离心洗涤
RNA提取常见问题
RNA降解 DNA残留 OD260 /OD280 比值偏低 电泳带型异常
莫纳（武汉）生物科技核酸提取试剂盒说明书
Version 1.0核酸提取试剂磁珠法病毒核酸提取试剂盒操作手册货号：MI30301S（50次/盒） MI30301M（100次/盒）MI35301S（32次/盒） MI35301M（96次/盒）莫纳（武汉）生物科技有限公司400-928-3698核酸提取试剂说明书【产品名称】通用名称：核酸提取试剂商品名称：磁珠法病毒核酸提取试剂盒【包装规格及适配仪器】预封装：32次/盒、96次/盒（适配Auto-Ex 32全自动核酸提取仪）非预封装：50次/盒、100次/盒（手工提取和其他自动核酸提取仪）【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。
其处理后的产物用于临床体外检测使用。
【样本要求】拭子、组织匀浆液、血浆、血清、细胞培养上清液或各种病毒保存液等。
【检验原理】独特分离作用的磁珠和优化的试剂配方保证磁珠在一定条件下与核酸高效结合，而当条件改变时，磁珠释放吸附的核酸，能够达到快速分离纯化核酸的目的。
【主要组成成分】序号组分预封装非预封装列位32次/盒96次/盒50次/盒100次/盒1裂解液VPL第2、8列600μL/孔600μL/孔30 mL60 mL2洗涤液VPA第3、9列700μL/孔700μL/孔18 mL36 mL3磁珠MB1第4、10列30μL/孔30μL/孔2*1 mL3*1 mL475%乙醇700μL/孔700μL/孔// 575%乙醇第5、11列700μL/孔700μL/孔6无核酸酶水第6、12列100μL/孔100μL/孔 5 mL10 mL 组件数量96孔预封装板/2*16T6*16T/8连磁棒套2*2T6*2T【储存条件及有效期】室温（15~25℃）保存，非预封装试剂盒中磁珠MB1建议于2~8℃保存。
试剂盒有效期12个月。
【检验方法】方法一：自动法1. 试剂板准备1）预封装板：取出深孔板，颠倒数次使磁珠重悬，孔板离心机500 rpm离心1 min，使试剂及磁珠集中在孔板底部，使用前小心撕去铝箔封口膜，避免液体溅出。
核酸的提取ppt课件
• 三、操作步骤 • 1、1.5ml菌液（每组两管）4 ℃ 12000rpm离心 30sec，弃去上清，倒置试管于吸水纸上吸干。 • 2、每管加入400µl裂解液，用移液枪枪头反复抽 吸辅助裂解，37 ℃水浴30min。 • 3、每管加入132µl的5M NaCl溶液，颠倒试管， 充分混匀后，13000rpm离心15min。用粗口的枪 头（用剪刀剪去1ml枪头的尖端）小心取出上清液 转倒两支新的eppendorf管中。 • 4、加入等体积的饱和苯酚/氯仿，充分混匀后， 12000rpm离心3min，离心后的水层如混浊则说 明仍含有蛋白质，则需将上清液转入新的试管， 重复上述步骤直到水层透明，水层和酚层之间不 再白色沉淀物为止（约2次）。
DNA提取方法很多，实验采用酚抽 提法。其基本原理是超低温粉碎， 通过蛋白酶K和SDS消化，破碎细胞， 再用酚/氯仿去除蛋白质。
SDS
Proteinase K 酚/氯仿
1）防止和抑制内源 Dnase对DNA的降解； 只需加入一定浓度的 螯合剂如EDTA，因 为几乎所有Dnase 都 需要Mg2+或Mn2+为 辅助因子。
• 5、将上层清液转入新的eppendorf管，加等体积 的氯仿，混匀后13000rpm离心3min，除去苯酚。 • 6、小心吸出上清液转入新的eppendorf管，用预 冷的两倍体积的无水乙醇沉淀，放置－20℃冰箱 30min，然后13000rpm离心15min，可见白色丝 状沉淀物。 • 7、小心吸出液体，弃上清液，用预冷的400µl 70 ％乙醇洗涤2次，室温干燥后，用50µlTE （含 20µg/ml的Rnase）溶解DNA，－20℃冰箱放置 备用。
5.核酸提取的一般过程
I.材料准备 破碎细胞 II.破碎细胞或包膜－内容物释放
核酸提取原理及方法课件
利用机器学习和深度学习算法，优化提取参数和流程， 提高提取效率。
新技术与新方法的探索
纳米材料在核酸提取中的应用
利用纳米材料的特性和功能，开发新型核酸提取方法 。
微流控技术在核酸提取中的应用
通过微流控芯片技术，实现核酸的快速、高效提取。
THANKS
感谢观看
核酸完整性的检测
琼脂糖凝胶电泳
通过观察DNA在电场中的迁移行为，判断DNA的完整性。
脉冲场凝胶电泳
利用不同的脉冲电场来分离不同大小和结构的DNA片段，以 评估核酸的完整性和大小分布。
核酸纯度的检测
紫外光谱分析
通过测量核酸在260nm和280nm紫外光下的吸光度，判断核酸中蛋白质、酚 和其他杂质的含量。
基因组测序
通过对基因组进行测序，可以深入了 解基因的结构和功能，为疾病诊断、 药物研发和生物进化研究提供重要信 息。
基因表达分析
通过比较不同组织或条件下的基因表 达谱，可以研究基因在生命活动中的 作用，以及基因与疾病的关系。
分子生物学研究
分子克隆
利用核酸提取技术，可以获得目的基因的克隆，为进一步研究基因的功能和表达调控机制提供基础。
吸附法
原理
利用吸附剂（如硅藻土、氧化铝 等）对DNA的吸附作用，将
DNA从细胞或组织中分离出来。
步骤
细胞裂解→加入吸附剂→搅拌→ 洗涤→解吸附→DNA。
注意事项
操作过程中要控制好吸附剂的用 量和洗涤次数，同时要保证解吸
附时的温度和pH值。
其他提取方法
酶法
利用酶（如蛋白酶、核酸酶等）将细 胞或组织中的DNA或RNA释放出来 ，再进行提取。
高效液相色谱
利用色谱柱将核酸中的杂质与核酸分离，并通过检测器检测纯度。
新技术与新方法的探索
纳米材料在核酸提取中的应用
利用纳米材料的特性和功能，开发新型核酸提取方法 。
微流控技术在核酸提取中的应用
通过微流控芯片技术，实现核酸的快速、高效提取。
THANKS
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核酸完整性的检测
琼脂糖凝胶电泳
通过观察DNA在电场中的迁移行为，判断DNA的完整性。
脉冲场凝胶电泳
利用不同的脉冲电场来分离不同大小和结构的DNA片段，以 评估核酸的完整性和大小分布。
核酸纯度的检测
紫外光谱分析
通过测量核酸在260nm和280nm紫外光下的吸光度，判断核酸中蛋白质、酚 和其他杂质的含量。
基因组测序
通过对基因组进行测序，可以深入了 解基因的结构和功能，为疾病诊断、 药物研发和生物进化研究提供重要信 息。
基因表达分析
通过比较不同组织或条件下的基因表 达谱，可以研究基因在生命活动中的 作用，以及基因与疾病的关系。
分子生物学研究
分子克隆
利用核酸提取技术，可以获得目的基因的克隆，为进一步研究基因的功能和表达调控机制提供基础。
吸附法
原理
利用吸附剂（如硅藻土、氧化铝 等）对DNA的吸附作用，将
DNA从细胞或组织中分离出来。
步骤
细胞裂解→加入吸附剂→搅拌→ 洗涤→解吸附→DNA。
注意事项
操作过程中要控制好吸附剂的用 量和洗涤次数，同时要保证解吸
附时的温度和pH值。
其他提取方法
酶法
利用酶（如蛋白酶、核酸酶等）将细 胞或组织中的DNA或RNA释放出来 ，再进行提取。
高效液相色谱
利用色谱柱将核酸中的杂质与核酸分离，并通过检测器检测纯度。
磁珠法核酸提取新篇章PPT课件
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优点
1. 生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可高效核酸提取，满足微量生物样 本核酸提取的要求。
2.不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂，安全无毒，绿色环保。 3.生物磁珠能够通过仪器进行自动化操作，满足数据库建设对大批量样本提
取的需要，减少人为因素 4.用时少，操作简单，适用于大多数生物检材。 5.全自动核酸提取最大限度地减少了操作人员与检测的接触，可有效保护实
全血试剂盒
临床疾病诊断：人类的很多疾病和基因密切相关，白血病、地中海贫血、 肾衰竭等都能用基因技术进行分型检测，再寻找合适的供体进行移植 治疗；叶酸代谢能力基因检测；DNA亲子鉴定；胎儿性别检测
动物疾病检测：布鲁菌病（brucellosis，布病），也称波状热，是布鲁 菌引起的急性或慢性传染病，人畜共患病。
验操作人员。
第20页/共22页
第21页/共22页
感谢您的观看！
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第4页/共22页
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离心柱法提取DNA
集液管 纯化柱
硅胶滤膜
第6页/共22页
磁珠法提取DNA
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裂解
使核酸 游离出 来
结合
加入磁珠， 使核酸与 其结合
洗涤
洗去残 留杂质
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洗脱
将核酸从 磁珠中分 离出到溶 液
纯化
分离磁 珠，得 到高纯 度核酸 溶液
比较（以全血为例）
2
氨基磁珠 经活化以后，可以偶 联上抗体，作为免疫 磁珠使用。
此产品主要应用于核 酸提取
免疫检测、免疫诊断
3
羧基磁珠 经活化后，可以偶联 上抗体，作为免疫磁 珠使用。
免疫检测、免疫诊断
优点
1. 生物磁珠具有小尺寸效应和表面效应，可高效核酸提取，满足微量生物样 本核酸提取的要求。
2.不使用酚、氯仿、异戊醇等有毒试剂，安全无毒，绿色环保。 3.生物磁珠能够通过仪器进行自动化操作，满足数据库建设对大批量样本提
取的需要，减少人为因素 4.用时少，操作简单，适用于大多数生物检材。 5.全自动核酸提取最大限度地减少了操作人员与检测的接触，可有效保护实
全血试剂盒
临床疾病诊断：人类的很多疾病和基因密切相关，白血病、地中海贫血、 肾衰竭等都能用基因技术进行分型检测，再寻找合适的供体进行移植 治疗；叶酸代谢能力基因检测；DNA亲子鉴定；胎儿性别检测
动物疾病检测：布鲁菌病（brucellosis，布病），也称波状热，是布鲁 菌引起的急性或慢性传染病，人畜共患病。
验操作人员。
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离心柱法提取DNA
集液管 纯化柱
硅胶滤膜
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磁珠法提取DNA
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裂解
使核酸 游离出 来
结合
加入磁珠， 使核酸与 其结合
洗涤
洗去残 留杂质
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洗脱
将核酸从 磁珠中分 离出到溶 液
纯化
分离磁 珠，得 到高纯 度核酸 溶液
比较（以全血为例）
2
氨基磁珠 经活化以后，可以偶 联上抗体，作为免疫 磁珠使用。
此产品主要应用于核 酸提取
免疫检测、免疫诊断
3
羧基磁珠 经活化后，可以偶联 上抗体，作为免疫磁 珠使用。
免疫检测、免疫诊断
核酸提取原理及方法课件
选择提取方法
根据提取方法选择合适的试剂和材料，如缓冲液、裂解液、硅胶膜、磁珠等。
确定试剂和材料
根据所选的提取方法和试剂材料，设计具体的操作流程，包括样本处理、裂解、吸附、洗脱等步骤。
设计操作流程
实验过程中需注意生物安全问题，如使用含有病毒或细菌的样本时，应采取相应的防护措施。
生物安全
实验室安全
操作安全
对记录的数据进行处理，如计算核酸浓度和纯度等。
根据实验目的对数据进行进一步分析，如基因组学和表达谱分析等。
将分析结果以图表或表格的形式展示出来，以便更好地呈现数据变化和规律。
THANKS
感谢您的观看。
03
CHAPTER
核酸纯化方法
步骤
将DNA样品与凝胶介质混合，置于电泳槽中，施加电场。DNA分子在电场作用下通过凝胶介质，迁移至不同位置，根据其大小分离。
原理
凝胶电泳利用DNA分子在电场中的迁移率差异进行分离。不同大小的DNA分子通过凝胶介质时受到的阻力不同，迁移率随之改变，从而实现分离。
应用
凝胶电泳纯化适用于小量DNA分子的分离和纯化，如PCR产物、克隆DNA等。
在临床诊断中，核酸提取也是检测病毒、细菌等病原体感染的重要步骤。
02
CHAPTER
核酸提取方法
酚/氯仿提取法是一种常用的核酸提取方法，利用酚和氯仿对DNA和蛋白质的溶解度不同，将DNA从蛋白质和其他杂质中分离出来。
原理
将细胞裂解液加入酚/氯仿混合液，剧烈振荡后离心，水相和有机相即刻分离，水相中包含DNA。
应用
离子交换色谱纯化适用于大量DNA分子的分离和纯化，如基因组DNA、质粒DNA等。
04
CHAPTER
核酸定量方法
根据提取方法选择合适的试剂和材料，如缓冲液、裂解液、硅胶膜、磁珠等。
确定试剂和材料
根据所选的提取方法和试剂材料，设计具体的操作流程，包括样本处理、裂解、吸附、洗脱等步骤。
设计操作流程
实验过程中需注意生物安全问题，如使用含有病毒或细菌的样本时，应采取相应的防护措施。
生物安全
实验室安全
操作安全
对记录的数据进行处理，如计算核酸浓度和纯度等。
根据实验目的对数据进行进一步分析，如基因组学和表达谱分析等。
将分析结果以图表或表格的形式展示出来，以便更好地呈现数据变化和规律。
THANKS
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03
CHAPTER
核酸纯化方法
步骤
将DNA样品与凝胶介质混合，置于电泳槽中，施加电场。DNA分子在电场作用下通过凝胶介质，迁移至不同位置，根据其大小分离。
原理
凝胶电泳利用DNA分子在电场中的迁移率差异进行分离。不同大小的DNA分子通过凝胶介质时受到的阻力不同，迁移率随之改变，从而实现分离。
应用
凝胶电泳纯化适用于小量DNA分子的分离和纯化，如PCR产物、克隆DNA等。
在临床诊断中，核酸提取也是检测病毒、细菌等病原体感染的重要步骤。
02
CHAPTER
核酸提取方法
酚/氯仿提取法是一种常用的核酸提取方法，利用酚和氯仿对DNA和蛋白质的溶解度不同，将DNA从蛋白质和其他杂质中分离出来。
原理
将细胞裂解液加入酚/氯仿混合液，剧烈振荡后离心，水相和有机相即刻分离，水相中包含DNA。
应用
离子交换色谱纯化适用于大量DNA分子的分离和纯化，如基因组DNA、质粒DNA等。
04
CHAPTER
核酸定量方法
[课件]EASYSPIN 细菌RNA快速提取提取试剂盒(原平皓)PPT
![[课件]EASYSPIN 细菌RNA快速提取提取试剂盒(原平皓)PPT](https://img.taocdn.com/s3/m/8e2a1869c850ad02de8041ab.png)
二、操作步骤
1．前面按照正常步骤操作，在加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。 2．向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1，12,000 rpm 离心30-60 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。 3．向吸附柱RA 中央加入80μl 的DNase I 工作液，室温放置15 分钟。 4． 向吸附柱RA 中加入350 μl 去蛋白液RW1， 12,000 rpm 离心3060 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。 5．接漂洗液RW步骤等后续步骤。
logologologowwwthemegallerycom三dnase柱上消化一般说来任何总rna提取试剂在提取过程中均无法完全避免dna的微量残留本公司的easyspin系列rna提取产品采取了独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜在大多数rtpcr扩增过程中极其微量的dna残留一般电泳eb染色紫外灯下观察不可见影响不是很大如果要进行严格的mrna表达量分析如荧光定量pcr需要尽可能完全去除dna时可以购买各种商品化的rnasefreednase直接在离心吸附柱子ra上面消化dna然后纯净rna可以洗脱下来直接使用
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二、EASYSPIN细菌RNA快速提 取试剂盒
原理：独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细 胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离 序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一 系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细 胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。 产品特点： 吸附量差异极小，可重复性好。不需要使用有毒的苯酚, 氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达 1.9～2.0，基本无DNA残留。
核酸分离提取技术46页PPT
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❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
核酸分离提取技术
16ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
核酸提取和鉴定PPT讲稿
纯化：使核酸与其它杂质彻底分离，如 蛋白质、盐等
总原则：①应保证核酸一级结构的完整性；
②排除其它分子的污染。
鉴定：浓度、纯度、分子量、测序 （技术：分光光度技术、凝胶电泳技术等）
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（一）样品预处理（获取分散细胞） 1、植物样品
新鲜组织先用无菌生理盐水洗； 干药材除去霉点，无菌水浸洗；
14）加入50μl DEPC处理水溶解（可以根据管底的白色沉淀判断RNA量的
多少加DEPC处理水）
15）-80℃冰箱保存。
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组织匀浆
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（二）mRNA的提取
从总RNA中分离mRNA， 用Oligo（dT）层析柱。 mRNA含polyA，在高盐浓度条件
化铵），是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，并与核酸形成复 合物。
➢ 该复合物在高盐溶液中（>0.7mol/L NaCl）是可溶的，通过有机
溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸 分离出来。
注：CTAB溶液在低于15℃ 时会形成沉淀析出，因此在将其加入冰冷的 植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃。
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（二）提取用具预处理
1、DNA提取用具的处理
要求无菌；试剂、器材高压干燥等进行无DNA酶 处理。
2、RNA提取用具的处理
要求无菌，防止二次污染。
RNA易被RNase水解，RNase无处不在且耐高温
，提取条件要求严格。
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（3）培养细胞： 离心，弃细胞培养液；
总原则：①应保证核酸一级结构的完整性；
②排除其它分子的污染。
鉴定：浓度、纯度、分子量、测序 （技术：分光光度技术、凝胶电泳技术等）
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（一）样品预处理（获取分散细胞） 1、植物样品
新鲜组织先用无菌生理盐水洗； 干药材除去霉点，无菌水浸洗；
14）加入50μl DEPC处理水溶解（可以根据管底的白色沉淀判断RNA量的
多少加DEPC处理水）
15）-80℃冰箱保存。
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组织匀浆
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（二）mRNA的提取
从总RNA中分离mRNA， 用Oligo（dT）层析柱。 mRNA含polyA，在高盐浓度条件
化铵），是一种阳离子去污剂，可溶解细胞膜，并与核酸形成复 合物。
➢ 该复合物在高盐溶液中（>0.7mol/L NaCl）是可溶的，通过有机
溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸 分离出来。
注：CTAB溶液在低于15℃ 时会形成沉淀析出，因此在将其加入冰冷的 植物材料之前必须预热，且离心时温度不要低于15℃。
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（二）提取用具预处理
1、DNA提取用具的处理
要求无菌；试剂、器材高压干燥等进行无DNA酶 处理。
2、RNA提取用具的处理
要求无菌，防止二次污染。
RNA易被RNase水解，RNase无处不在且耐高温
，提取条件要求严格。
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（3）培养细胞： 离心，弃细胞培养液；
实验一核酸的提取ppt课件
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
如何创造一个无RNase的环境 ？
RNA分离的关键因素是： ➢ 尽量减少RNA酶的污染！ ➢极力避免外源RNase的污染：主要来源于
开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状 结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA， 蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
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而RNA酶，不但分布广泛、极易污染样品， 而且耐高温、耐酸、耐碱，不易失活，所以生 物降解是RNA提取过程中的主要危害因素。
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二、真核细胞染色体DNA的制备
1. 真核细胞的破碎 （1）物理方式:超声波法、匀浆法、液氮
破碎法、Al2O3粉研磨法等。这些物理操作均可 导致DNA链的断裂。
（2）为了获得大分子量的DNA，一般采用 蛋白酶K和去污剂温和处理法。
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朗司核酸提取仪配套磁珠法核酸提取试剂盒演示演示教学
磁珠法核酸提取试剂盒的原理
• 磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸 附反应。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动 化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散，从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。
• 磁 珠 法中的细胞裂解液是一种蛋白变性剂，可使动植物的细胞裂解，并使与DNA结合的蛋白质变性， DNA游离释放，磁珠可以特异地吸附DNA，通过洗涤，去除DNA以外的蛋白质、多糖等杂质，再用洗 脱液解离吸附在磁珠上的DNA，得到纯度和浓度均很高的DNA，可用于PCR模板、基因工程等。
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磁珠法核酸提取试剂盒适用范围
• 磁珠法 核 酸 提取试剂盒是纳米技术、分子生物学技术、生物医学技术和法医学技术的综合高科技产品 。可广泛应用于分子生物学中的基因组研究、分子进化研究、医学中遗传病的研究、突变基因的检测 、肿瘤的筛查、HPV等的检测、HLA分型、移植配型等、法医学生物样本血斑、精斑、头发、烟蒂等 现场证物的检测、和司法上的亲子鉴定、血缘关系的鉴定等提供证据、考古学、大中小学的生物试验 等许多领域。
Hale Waihona Puke 朗司磁珠法核酸提取试剂盒产品编号 MD -1001 MD -1002 MD -1003 MD -1004 MD -1005 MD -1006 MD -1007 MD -1008 MD -1009 MD -1010
产品名称 磁珠法细菌DNA提取试剂盒 磁珠法全血DNA提取试剂盒 磁珠法口腔拭子基因组DNA提取试剂盒 磁珠法植物基因组DNA提取试剂盒 磁珠法病毒DNA&RNA提取试剂盒
QIAGEN 核酸提取仪 ppt课件
2Байду номын сангаас21/3/26
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QIAGEN 核酸提取仪
BioRobot 3000可选功能
REAL,QQ,PCR,QPT,DTS,DyeEx Qiaamp DNA Blood 48 NTA Series:
Ni-NTA Superflow 96 Purification Ni-NTA Magnetic Beads Immunoassay Ni-NTA Magnetic Beads Interaction Assay Ni-NTA Magnetic Beads
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QIAGEN 核酸提取仪
2021/3/26
满足分子诊断所需核酸标准的、自动纯化操作过程
满意的得率和可信的结果
自动的样品跟踪和过程控制系统（条形码扫描）
可同时进行96样品，且有很好的可重复性
一次性枪头可安全处理有传染性的样品
配套的高质量试剂
简单易学的软件操作系统
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QIAGEN 核酸提取仪 ppt课件
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High capacity robotic arm system for storage and handling of microlplates
The BioRobot Twister II robotic arm allows integration of external instruments with BioRobot 8000 workstations and provides fast plate handling and transfer of labware for molecular biology applications. It can be integrated with a wide variety of instruments, including the BioRobot 8000 and BioRobot RapidPlate workstations,
通用型核酸快速提取试剂盒说明书
通用型核酸快速提取试剂盒说明书简介：本试剂盒采用异硫氰酸胍及表面活性剂联合裂解细胞技术，添加独特的病毒凝集剂，不需要进行酚氯仿抽提，可从细胞培养物、血浆、血清、分泌液、腹水、拭子等的样本中快速提取痕量的病毒或细胞的核酸（DNA和RNA）。
有效去除酶抑制剂，提取的核酸可用于PCR、RT-PCR、定量PCR、杂交等各种分子生物学实验，对于临床基因诊断尤其适用。
特点：1、经济实惠，使用耗材少，DNA和RNA都能提取；2、快速，不需要进行酚氯仿抽提，有效去除各种酶抑制物，方便后续实验操作；3、提取效率高，痕量病毒或细胞仍能有效提取到核酸。
试剂盒组成（50次）：1、抽提A液（1瓶，10ml）2、抽提B液（1瓶，12.5ml）3、抽提C液（1瓶，10ml）4、样本稀释液（1支，1ml）储存及有效期：-20℃储存，开封后可放置于4℃，有效期两年。
操作步骤（以血清、分泌液和腹水为例）：1、取待抽提的血清50μl置于微型离心管中，加入200μl抽提A液，颠倒数次充分混匀；（混匀后室温放置5分钟可达到最佳效果）2、加入250μl抽提B液，颠倒数次充分混匀（混匀后室温放置10min可达最佳效果），13000rpm离心10min，倒去上清；3、加入200μl抽提C液，颠倒数次混匀，13000rpm离心5min，吸弃上清（尽量去掉上清）；4、室温放置或50℃加热5min晾干，加入25μl样本稀释液混悬沉淀物，短暂离心使液体落于管底部，上清液即为提取得到的核酸。
注：对于分泌物或棉拭子，先用适量无菌生理盐水把拭子上的分泌物洗入离心管中，或者把拭子泡在无菌生理盐水中，捻动使分泌物分散于液体中，然后高速离心5min后，去除大部分上清，余下的样本即应用上述步骤抽提核酸。
注意事项：1、如果抽提的是病毒RNA，最好即提即用，保存请置于-80℃。
2、抽提A液及抽提B液可根据所用的提取物的量等倍加大用量。
3、抽提A液低温保存会有絮状物析出或凝结是正常现象，使用前置于50℃使融化，颠倒混匀，不影响使用。