中药制剂中各类化学成分分析PPT课件
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生物样品内中药制剂化学成分测定-中药分析学PPT共39页
生物样品内中药制剂化学成分测定-中药 分析学
1、合法而稳定的权力在使用得当时力会使人渐渐失去温厚善良的美 德。— —伯克
3、最大限度地行使权力总是令人反感 ；权力 不易确 定之处 始终存 在着危 险。— —塞·约翰逊 4、权力会奴化一切。——塔西佗
5、虽然权力是一头固执的熊，可是金 子可以 拉着它 的鼻子 走。— —莎士 比
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
1、合法而稳定的权力在使用得当时力会使人渐渐失去温厚善良的美 德。— —伯克
3、最大限度地行使权力总是令人反感 ；权力 不易确 定之处 始终存 在着危 险。— —塞·约翰逊 4、权力会奴化一切。——塔西佗
5、虽然权力是一头固执的熊，可是金 子可以 拉着它 的鼻子 走。— —莎士 比
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
药物分析14中药分析PPT课件
中药分析的发展趋势
01
质量控制标准与国际接轨
随着中药国际化进程的加速，中药分析的质量控制标准需要与国际接轨，
提高中药在国际市场的竞争力。
02
新型分析技术的研发与应用
随着科技的发展，新型的分析技术如纳米技术、生物传感器等在中药分
析领域的应用将逐渐增多，提高分析的灵敏度、特异性和准确性。
03
综合评价体系的建立
类型
中药不良反应的类型包括过敏反应、毒性反应、药物依赖性等。
机制
中药不良反应的发生机制可能与药物成分的免疫反应、药物对机体的直接毒性作用、药物对机体正常 生理功能的干扰等有关。
中药安全性评价的方法与程序
方法
中药安全性评价的方法包括临床观察、动物实验、体外实验等。
程序
中药安全性评价的程序一般包括药品筛选、实验设计、实验实施、数据整理与分析、撰 写报告等步骤。
中药分析将从单一成分的分析向整体质量评价转变，建立综合评价体系，
全面评价中药的质量和安全性。
02
中药成分分析
中药活性成分的分类与作用
总结词
中药活性成分的分类与作用
详细描述
中药中含有多种活性成分，如生物碱、黄酮类化合物、挥发油等，这些成分具 有不同的药理作用，如抗炎、抗肿瘤、抗氧化等，对治疗多种疾病具有显著疗 效。
气相色谱（GC）
GC适用于分析具有挥发性的中药成分，如挥发油、有机酸等，具有 分离效能高、分析速度快、灵敏度高等特点。
薄层色谱（TLC）
TLC是一种简便、快速的分离分析方法，可用于中药材和中成药的鉴 别、杂质检查以及含量测定等。
分子生物学技术在中药分析中的应用
分子生物学技术
基因工程技术
PCR技术
《中药制剂学讲义》课件
制剂成型
A
散剂
将中药粉末与适当的辅料混合，制成具有一定 形状和大小的制剂。
颗粒剂
将中药提取物或粉末与适当的辅料混合， 制成颗粒状的制剂。
ห้องสมุดไป่ตู้
B
C
片剂
将中药提取物或粉末与适当的辅料混合，压 制而成具有一定形状和大小的片状制剂。
胶囊剂
将中药提取物或粉末装入胶囊中，制成一定 规格的制剂。
D
03 中药制剂的质量控制
中药制剂学的研究和应用，有助于推动中药产业的现代 化和国际化，提高中药产业的竞争力和市场地位。
中药制剂学的历史与发展
历史回顾
中药制剂学的发展源远流长，从古代的汤剂、丸剂、散剂等传统剂型，到现代的 滴丸剂、软胶囊剂、注射剂等新型剂型，经历了漫长的历史演变。
发展趋势
随着科学技术的发展和人类健康需求的不断提高，中药制剂学将更加注重创新与 研发，实现中药制剂的个性化、精准化和智能化制备。同时，中药制剂的质量控 制和临床应用研究也将得到进一步加强，以推动中药制剂的国际化进程。
中药制剂的毒理学研究
毒理学研究内容
对中药制剂的毒理学进行研究，包括急性毒性、亚慢性毒性、慢 性毒性和致畸、致突变、致癌等特殊毒性研究。
毒理学研究方法
根据中药制剂的特点和研究目的，选择合适的毒理学研究方法，以 全面了解其毒性特征和潜在危害。
毒理学研究结果
根据毒理学研究结果，对中药制剂的安全性进行综合评价，为其临 床应用提供科学依据。
将提取液进行浓缩，提高有效成分的浓度。
02
01
精制
通过重结晶、萃取等方法进一步纯化提取物 。
04
03
浓缩与干燥
浓缩
将提取液进行蒸发，减 少体积，得到较为浓稠 的液体。
中药及其制剂分析 PPT课件
As/At≥20% RSD%≤±20% 20%>As/At≥10% RSD%≤±25% As/At<10% 峰面积比值不作要求，但必须标定tR
中药注射剂及有效部位： tR≤30 min, As/At≥20% RSD%≤±20%
20%>As/At≥10% RSD%≤±25% 10%>As/At≥5% RSD%≤±30% As/At<5% 峰面积比值不作要求，但 必须标定tR tR>30 min, As/At≥10%
3、重现性－不同实验条件、不同分析人 员对样品的测定误差的允许范围－用相似 度表示
二、指纹图谱的类型
1、按测定手段分类
中药化学成分指纹谱－采用色谱、光谱及其他 分析方法建立的用以表征中药化学成分特征的指 纹图谱。
中药生物指纹谱－利用生物技术建立的中药 DNA、中药基因组学和中药蛋白组学指纹图谱。
生物活性指纹图谱：是指中药或中药制剂作用 于某特定细胞或动物后，引起基因和蛋白的复杂 变化
中药及其制剂的含量测定
含测目标的选取原则： 1、弄清楚成分类别、有效成分和指标性成分 2、复方制剂应首选君药及贵重药建立含量测定方法 3、含有毒性药材的必须建立含测项目，应进行重点研究 4、有效成分或指标成分清楚的，应首选测定其含量 5、测定成分应尽量与中医理论、用药的功能主治相近 6、测定成分应考虑与生产工艺的关系 7、测定应归属于某单一药材，若复方中多种药材都含有 则不应选为定量指标 8、确实无法知道成分的，可测定药物的总固体量
微波辅助萃取（Microwave-assisted extraction MAE）：是利用微波产生的能量快速破碎植物 细胞而使化学成分释放进入溶剂中的一种方法。
超临界流体萃取（Supercritical fluid extraction SFE）
中药注射剂及有效部位： tR≤30 min, As/At≥20% RSD%≤±20%
20%>As/At≥10% RSD%≤±25% 10%>As/At≥5% RSD%≤±30% As/At<5% 峰面积比值不作要求，但 必须标定tR tR>30 min, As/At≥10%
3、重现性－不同实验条件、不同分析人 员对样品的测定误差的允许范围－用相似 度表示
二、指纹图谱的类型
1、按测定手段分类
中药化学成分指纹谱－采用色谱、光谱及其他 分析方法建立的用以表征中药化学成分特征的指 纹图谱。
中药生物指纹谱－利用生物技术建立的中药 DNA、中药基因组学和中药蛋白组学指纹图谱。
生物活性指纹图谱：是指中药或中药制剂作用 于某特定细胞或动物后，引起基因和蛋白的复杂 变化
中药及其制剂的含量测定
含测目标的选取原则： 1、弄清楚成分类别、有效成分和指标性成分 2、复方制剂应首选君药及贵重药建立含量测定方法 3、含有毒性药材的必须建立含测项目，应进行重点研究 4、有效成分或指标成分清楚的，应首选测定其含量 5、测定成分应尽量与中医理论、用药的功能主治相近 6、测定成分应考虑与生产工艺的关系 7、测定应归属于某单一药材，若复方中多种药材都含有 则不应选为定量指标 8、确实无法知道成分的，可测定药物的总固体量
微波辅助萃取（Microwave-assisted extraction MAE）：是利用微波产生的能量快速破碎植物 细胞而使化学成分释放进入溶剂中的一种方法。
超临界流体萃取（Supercritical fluid extraction SFE）
中药学-中药制剂中各类化学成分分析PPT教学课件
（）
(二)生物碱的色谱鉴别 1．薄层色谱法 首先用适当的溶剂提取生物碱，提取液经浓缩 后直接或经过必要的净化后，点在薄层板上，层析后喷洒生物碱显 色剂，再根据生物碱的特性，选择特异的颜色反应或荧光，并应用 纯品对照，或标准药材对照，同时须作阴性对照后确定。如用硅胶 为吸附剂时，一般应用碱性系统展开剂较多，或使生物碱的薄层分 离在碱性环境下进行。
2021/01/21测定
(一)经典化学方法 1.重量法 重量法测定中药制剂中生物碱多为测定其总生物碱的 含量。本法可用于混合总碱、未知结构或分子量相差较大的生物碱 的含量测定。缺点是挥发性生物碱不宜用此法，在蒸发提取溶剂或 加热、干燥时能分解破坏以及加碱使生物碱游离时可发生水解的生 物碱也不可用此法。本法取样量大，得到的残渣在称量的准确度内 方可应用。应用本法要求定量的将生物碱提取完全，并尽可能除去 杂质，须注意选择合适的提取溶剂。 实例 见P135 苦参片中苦参总碱的测定
(2)两相滴定法： 因边滴边使游离生物碱溶于有机溶剂中，不
致影响终点的观察。更重要的是由于游离生物碱进入有机相，明显
地增大了生物碱盐的电离常数pKa。生物碱盐在两相中的水解为
pKa(D)=pKa - log(1+PC)，即与分配系数有关。一般的测定方法是
称取生物碱盐类溶于水中(加氯化钠少许)，然后加一定量有机溶剂，
(2)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘碘化钾试剂数滴，产生棕色或褐色沉淀，
BH+ + I2-K+I- → BI2HI（棕、褐色） + K+
(3)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘化 铋钾、碘化汞钾试剂数滴，产生红棕色沉淀、类白色沉淀。
BH+ + BiI3KI → BBiI3HI（红棕色） + K+ 2B02H1/+01/2+1 HgI2KI → BHgI22HI（类白色） + K+ 第一课件网 1
(二)生物碱的色谱鉴别 1．薄层色谱法 首先用适当的溶剂提取生物碱，提取液经浓缩 后直接或经过必要的净化后，点在薄层板上，层析后喷洒生物碱显 色剂，再根据生物碱的特性，选择特异的颜色反应或荧光，并应用 纯品对照，或标准药材对照，同时须作阴性对照后确定。如用硅胶 为吸附剂时，一般应用碱性系统展开剂较多，或使生物碱的薄层分 离在碱性环境下进行。
2021/01/21测定
(一)经典化学方法 1.重量法 重量法测定中药制剂中生物碱多为测定其总生物碱的 含量。本法可用于混合总碱、未知结构或分子量相差较大的生物碱 的含量测定。缺点是挥发性生物碱不宜用此法，在蒸发提取溶剂或 加热、干燥时能分解破坏以及加碱使生物碱游离时可发生水解的生 物碱也不可用此法。本法取样量大，得到的残渣在称量的准确度内 方可应用。应用本法要求定量的将生物碱提取完全，并尽可能除去 杂质，须注意选择合适的提取溶剂。 实例 见P135 苦参片中苦参总碱的测定
(2)两相滴定法： 因边滴边使游离生物碱溶于有机溶剂中，不
致影响终点的观察。更重要的是由于游离生物碱进入有机相，明显
地增大了生物碱盐的电离常数pKa。生物碱盐在两相中的水解为
pKa(D)=pKa - log(1+PC)，即与分配系数有关。一般的测定方法是
称取生物碱盐类溶于水中(加氯化钠少许)，然后加一定量有机溶剂，
(2)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘碘化钾试剂数滴，产生棕色或褐色沉淀，
BH+ + I2-K+I- → BI2HI（棕、褐色） + K+
(3)生物碱的酸性水溶液或稀醇（小于50%）溶液中，滴加碘化 铋钾、碘化汞钾试剂数滴，产生红棕色沉淀、类白色沉淀。
BH+ + BiI3KI → BBiI3HI（红棕色） + K+ 2B02H1/+01/2+1 HgI2KI → BHgI22HI（类白色） + K+ 第一课件网 1
各类中药制剂分析-中药分析学课件
流浸膏剂和浸膏剂是用水或一定浓度的乙醇为溶媒对 药材进行提取后，蒸去部分或全部溶剂，调整至规定浓 度而制成的制剂, 流浸膏剂至少应含20%的乙醇，即使 以水为溶媒制得的流浸膏，也应加入20%～25%的乙醇， 乙醇的存在主要起防腐作用，以利于久贮。
糖浆剂和煎膏剂是用规定方法制成的含有大量蜂蜜或 蔗糖的半固体状的水溶液制剂，有时糖浆剂中还加有一 定量的防腐剂。
糖浆剂应澄清，贮存中不得发酵、酸败产生异臭和气体， 含有药材提取物的糖浆剂允许有少量轻摇易散的沉淀；
煎膏剂应无焦臭、异味，无糖的结晶析出。
（二）乙醇量
流浸膏剂中的乙醇含量与提取过程中化学成分的溶 出程度及制剂质量的稳定性有关，必须规定其含量。
（三）含糖量
糖浆剂和煎膏剂的含糖量对其质量的稳定性有影响， 含糖量过高，在贮存中容易析出糖的结晶（泛砂），含 糖量过低，则容易发酵、长霉.
(2)脆碎度
将一定量的药片放入振荡器中振荡，至规定时间取 出药片，观察有无碎片、缺角、磨毛、松片现象， 以百分数表示。
5.微生物限度标准
不含原药材粉的片剂，细菌数100个/g，霉菌、酵母 菌数100个/g；含原药材粉的片剂，细菌数10000个/g， 霉菌、酵母菌数100个/g；均不得检出大肠杆菌。
（二）酒剂与酊剂
所含杂质较少，澄明度也好，样品的前处理相对较易， 有的甚至可以直接进行分析。但对于一些成分复杂的样品， 仍需以净化分离后才能进行分析。
常用的净化方法是将酒剂或酊剂加热蒸去乙醇，然后再 用适当的有机溶剂萃取。
当被测成分为生物碱类时，可蒸去制剂中的乙醇，加碱 （氨水）碱化，再用有机溶剂萃取。
由于煎膏剂在制备过程中容易产生焦屑等异物，因此，药典规定， 必须对其进行不溶物检查。检查方法是：取供试品5g，加热水 200ml，搅拌使溶，放置3分钟后观察，不得有焦屑等异物（微量细 小纤维、颗粒不在此限）。
糖浆剂和煎膏剂是用规定方法制成的含有大量蜂蜜或 蔗糖的半固体状的水溶液制剂，有时糖浆剂中还加有一 定量的防腐剂。
糖浆剂应澄清，贮存中不得发酵、酸败产生异臭和气体， 含有药材提取物的糖浆剂允许有少量轻摇易散的沉淀；
煎膏剂应无焦臭、异味，无糖的结晶析出。
（二）乙醇量
流浸膏剂中的乙醇含量与提取过程中化学成分的溶 出程度及制剂质量的稳定性有关，必须规定其含量。
（三）含糖量
糖浆剂和煎膏剂的含糖量对其质量的稳定性有影响， 含糖量过高，在贮存中容易析出糖的结晶（泛砂），含 糖量过低，则容易发酵、长霉.
(2)脆碎度
将一定量的药片放入振荡器中振荡，至规定时间取 出药片，观察有无碎片、缺角、磨毛、松片现象， 以百分数表示。
5.微生物限度标准
不含原药材粉的片剂，细菌数100个/g，霉菌、酵母 菌数100个/g；含原药材粉的片剂，细菌数10000个/g， 霉菌、酵母菌数100个/g；均不得检出大肠杆菌。
（二）酒剂与酊剂
所含杂质较少，澄明度也好，样品的前处理相对较易， 有的甚至可以直接进行分析。但对于一些成分复杂的样品， 仍需以净化分离后才能进行分析。
常用的净化方法是将酒剂或酊剂加热蒸去乙醇，然后再 用适当的有机溶剂萃取。
当被测成分为生物碱类时，可蒸去制剂中的乙醇，加碱 （氨水）碱化，再用有机溶剂萃取。
由于煎膏剂在制备过程中容易产生焦屑等异物，因此，药典规定， 必须对其进行不溶物检查。检查方法是：取供试品5g，加热水 200ml，搅拌使溶，放置3分钟后观察，不得有焦屑等异物（微量细 小纤维、颗粒不在此限）。
中药制剂中各类化学成分分析
中药制剂中各类化学成分分析第一节生物碱类成分分析1．含生物碱的中药有三尖杉、麻黄（麻黄碱）、黄连（小檗碱）、黄柏（小檗碱）、乌头（乌头碱）、延胡索（延胡索乙素）、粉防已（粉防已碱）、颠茄（莨菪碱、东莨菪碱）、洋金花（莨菪碱、东莨菪碱）、贝母（贝母素甲、乙，贝母碱）、百部等。
2．生物碱定性鉴别：取分离提取得到的生物碱（麻黄碱）供试品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
吸取供试品溶液2ul，对照品溶液1ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨试剂（12:6:3:3:1）为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3．生物碱含量测定色谱条件：以十八烷基硅烷键合相硅胶为填充剂；以甲醇-水（50:50）为流动相；流速1.0ml/min；检测波长为254nm；柱温为室温；理论塔板数按盐酸麻黄碱计算应不低于3000. 供试品溶液的制备：取分离提取得到的麻黄碱供试品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。
第二节黄酮类成分分析1.含黄酮的常用中药有槐米（芦丁，槲皮素）、黄芩（黄芩苷）、葛根（葛根素）、陈皮（橙皮苷）、银杏叶（芦丁、槲皮素）、淫羊霍（淫羊苷霍）等。
2.黄酮的定性鉴别薄层色谱法：硅胶色谱分离弱极性化合物较好，聚酰胺色谱分离含游离酚羟基的黄酮及其苷类较为理想，而纤维素薄层适用于分离多糖苷混合物。
取分离提取得到的黄酮葛根素液1ml，加75%乙醇溶液5ml,摇匀，作为供试品溶液；另取葛根素对照品，加75%乙醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
中药制剂中各类化学成分分析PPT课件
H3C N
N
OH
N ON
H3C N ON
N N
CH3
咖啡因 （pKb14.15）
CH3
茶碱 （弱酸性）
盐酸吗啡（两性）
（3）立体结构与碱性的关系
CH3O
N N H
O
OC
OC
OCH3 OCH3
利血平（pKa 6.07）
OCH3 OCH3
OCH3
6. 紫外吸收特征
max mix A max A1 / A2 E11c%m
供试液
黄连对照药材 硅胶G 展开
盐酸小檗碱对照品
苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨
12 6
33 1
黄色荧光斑点UV365nm
为黄色荧光斑点
例 九分散
延胡索乙素
7. 旋光性 多数具有旋光性
（l） 盐酸麻黄碱、硫酸奎宁、氢溴酸山莨菪碱 （d） 盐酸伪麻黄碱、硫酸奎尼丁 （dl）硫酸阿托品
三、定性鉴别
（一）理化鉴别
生物碱
生物碱沉淀剂H+ 显 色剂 呈 色
制剂中某些干扰成分可有假阳性反应
麻黄碱不能与蛋生白物质碱、沉鞣淀质剂反应→↓
黄 连 小檗碱、药根碱、巴马丁、黄连碱 黄 柏 小檗碱、药根碱、木兰花碱 麻 黄 麻黄碱、伪麻黄碱、去甲麻黄碱、甲基麻黄碱 马钱子 马钱子碱、伪马钱子碱、番木鳖碱（士的宁）
伪番木鳖碱 制川乌 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱 延胡索 延胡索乙素、延胡索甲素、原阿片碱、黄连碱 苦 参 苦参碱、槐定碱、槐果碱、氧化苦参碱 山豆根 苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱金雀花碱 防 己 粉防己碱、防己诺林碱、轮环藤酚碱、木兰碱
例 盐酸小檗碱
Ch.P.（2010）
【性状】本品在热水中溶解，在水或乙醇中微
中药制剂分析各类成分分析课件
山柰酚、山柰素
槐米 葛根
芦丁、槲皮素
广藿香
葛根素、大豆苷、大豆苷元、7- 白果 木糖苷葛根素
商陆素、芹菜素 山奈酚、槲皮素、芦丁
枳实
橙皮苷、川陈皮素、新橙皮苷、 高良姜 5-邻-去甲基川陈皮素
高良姜素、山奈素、槲皮素
茵陈 山楂
茵陈黄酮、芫花素、槲皮素
补骨脂
槲皮素、金丝桃苷
金线草
补骨脂查耳酮、异补骨脂查 耳酮
•13
第一节 生物碱类成分分析
四、含量测定
（一）总生物碱的含量测定 （2）酸性染料比色法（例题P124） 原理： BH++ In- → BH+·In-（水相）→ BH+·In-（有机相） 关键：
❖ 酸性染料的选择：甲基橙、溴麝香草酚兰（BTB）和溴甲酚绿等； ❖ pH值的选择：与生物碱和酸性染料的性质有关。 ❖ 有机溶剂的选择：一般用氯仿、二氯甲烷 ❖ 水分的干扰及消除
其在碱性环境下展开的）才可喷洒，否则背景深、反差小，影响 测定。
药物分析学科
•中药制剂分析各类成分分析
•16
第一节 生物碱类成分分析
四、含量测定
（二）单体生物碱成分含量测定
2、HPLC(例题P128) ①以反相高效液相色谱应用较多；
②在反相高效液相色谱中，由于硅胶表面残留硅醇基的影响，使生
物碱分析易产生保留时间延长、峰形变宽、拖尾；
【目的要求】
➢掌握中药制剂中生物碱、黄酮、三萜皂苷、醌类成 分的定性、定量原理与方法。 ➢熟悉中药制剂中挥发性成分、木质素类成分的定性、 定量原理与方法。 ➢了解其他成分（有机酸类、环烯醚萜类、香豆素类、 单萜及二萜类、多糖类）的分析方法。
药物分析学科
中药制剂分析第五章中药制剂中各类化学成分的分析
3BHPO4·12WO32H2O （白色至褐色）
3BH3PO412MoO3·2H2O （白色至黄褐色,加氨水 转变为兰色）
4.呈色反应
+ 酸性染料 一定pH值 有色配合物
5.碱性 生物碱碱性强弱是中药制剂分析时供试 品溶液制备、某些分析方法建立及条件选择 的依据。
三、定性鉴别 （一）一般理化鉴别 沉淀反应是生物碱最常用的鉴别方法。 有些成分也可与试剂生成沉淀而造成假
本法测定的关键在于 介质的pH值， 酸性染料的性质， 有机溶剂的性质。
2.苦味酸盐法：
凡是在弱酸或中性溶液中能与苦味酸定量 发生沉淀的生物碱,都可按本方法测定含量。
a.是滤取生物碱-苦味酸盐沉淀，加碱使生 物碱-苦味酸盐解离，然后以有机溶剂提出生 物碱，将苦味酸的碱性水溶液进行比色，再 换成生物碱的含量。
(二)理化性质
1. 物理性质
多为结晶型固体，少数为液体
一般生物碱为白色或无色，但结构中具 有较长共轭体系，并有助色团的可显不 同颜色
旋光性与胜利活性相关，左旋体比右旋 体生理活性强
3. 沉淀反应
生物 碱的 酸性 水溶 液或 稀醇 溶液
硅钨酸 磷钨酸 磷钼酸
(BH+)4[Si(W3O10)4] (淡 黄色或灰白色)
生物碱的雷氏盐沉淀的丙酮溶液所呈现的 吸收特征，是由于分子结构中的硫代氰酸铬 铵部分，而不是结合的生物碱部分，其吸收 值与样品或溶剂无关。
硫代氰酸铬铵在丙酮中的克分子吸收 系数为106.5(单盐)或213.0(双盐)。故可 根据其吸收值A按下式直接测得样品重
W =（ A/ε）×M×V/1000
3．高效液相色谱法
在恒定的高效液相色谱条件下，各种生 物碱都具有一定的保留时间，可作为定性 鉴别的参数。一般要求取得两个色谱系统 的保留时间，或应用二级管阵列检测器作 出鉴定
3BH3PO412MoO3·2H2O （白色至黄褐色,加氨水 转变为兰色）
4.呈色反应
+ 酸性染料 一定pH值 有色配合物
5.碱性 生物碱碱性强弱是中药制剂分析时供试 品溶液制备、某些分析方法建立及条件选择 的依据。
三、定性鉴别 （一）一般理化鉴别 沉淀反应是生物碱最常用的鉴别方法。 有些成分也可与试剂生成沉淀而造成假
本法测定的关键在于 介质的pH值， 酸性染料的性质， 有机溶剂的性质。
2.苦味酸盐法：
凡是在弱酸或中性溶液中能与苦味酸定量 发生沉淀的生物碱,都可按本方法测定含量。
a.是滤取生物碱-苦味酸盐沉淀，加碱使生 物碱-苦味酸盐解离，然后以有机溶剂提出生 物碱，将苦味酸的碱性水溶液进行比色，再 换成生物碱的含量。
(二)理化性质
1. 物理性质
多为结晶型固体，少数为液体
一般生物碱为白色或无色，但结构中具 有较长共轭体系，并有助色团的可显不 同颜色
旋光性与胜利活性相关，左旋体比右旋 体生理活性强
3. 沉淀反应
生物 碱的 酸性 水溶 液或 稀醇 溶液
硅钨酸 磷钨酸 磷钼酸
(BH+)4[Si(W3O10)4] (淡 黄色或灰白色)
生物碱的雷氏盐沉淀的丙酮溶液所呈现的 吸收特征，是由于分子结构中的硫代氰酸铬 铵部分，而不是结合的生物碱部分，其吸收 值与样品或溶剂无关。
硫代氰酸铬铵在丙酮中的克分子吸收 系数为106.5(单盐)或213.0(双盐)。故可 根据其吸收值A按下式直接测得样品重
W =（ A/ε）×M×V/1000
3．高效液相色谱法
在恒定的高效液相色谱条件下，各种生 物碱都具有一定的保留时间，可作为定性 鉴别的参数。一般要求取得两个色谱系统 的保留时间，或应用二级管阵列检测器作 出鉴定
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+酸性染料（磺酸肽类）→有色配合物
• 紫外光谱特征
CHENLI
2
生物碱类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）
定性鉴别
• 沉淀反应、显色反应 多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应 麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应
马钱子散中生物碱成分的鉴别
取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时， 滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋 钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。
10
CH3
理化性质
O
• 物理性状（存在的形态，升丹参华醌性II，A 光不稳定性大）黄素
醋酐-浓硫酸反应 五氯化锑反应 三铝醋酸反应 冰醋酸-乙酰氯反应 氯仿-硫酸反应
• 金属盐类反应
+铅、钡、铜盐→沉淀 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀
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14
三萜皂甙类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（大孔树脂柱） • 沉淀法
• 液—固吸附色谱法 • 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） • 检测器
气相色谱法
CHENLI
6
§2 黄酮类成分分析
概述 理化性质
• 物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） • 溶解性
游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等
• 酸碱性 黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇
酸性：与酚羟基的数目和位置有关 7,4‘- 二羟基> 7-或4‘- 羟基> 一般酚> 5-羟基
定性鉴别
• 显色反应 盐酸-镁粉反应 金属盐类配合反应
CHENLI
9
定性鉴别
• 薄层色谱鉴别
硅胶--分离弱极性黄酮
• 展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇
聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷
• 展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等
纤维素--分离多糖苷混合物
• 展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成 总黄酮苷的含量。
总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量） ×2.51
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12
§3 三萜皂甙类成分分析
概述
COOH H O
R2O OHH 20
第六章 中药制剂中各类化学成 分分析
CHENLI
1
§1 生物碱类成分分析
概述 理化性质
• 物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） • 碱性 • 溶解性
游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂 • 沉淀反应生物碱盐—水溶性增强
沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸
• 显色反应
苦味酸盐比色法 雷氏盐比色法 异羟肟酸铁比色法 （含有酯键结构的生物碱 ）
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5
含量测定
• 单体生物碱含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱法
• 液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18） 改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试 剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液） 固定相改进（封尾技术）
理化性质 • 物理性状（存R在O 3 的形H H态甘，草表酸面活性R1O，3 吸湿6 人性参）皂甙(A型)
• 溶解性
皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等
• 紫外光谱皂特甙征—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等
大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 吸收
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理化性质
• 显色反应
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16
含量测定
• 总皂甙含量测定
重量法 比色法
• 显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸 等等
• 三萜皂甙类单体成分含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱
• 甘草酸、远志皂甙→紫外检测器 • 其他→蒸发光散射检测器（ELSD）
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O
OH O OH
O
9
概述
O
OH
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3
定性鉴别
• 薄层色谱鉴别 吸附剂：氧化铝、硅胶 展开剂：氯仿、苯等 显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等
• 气相色谱 麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定
• 液相色谱
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4
含量测定
• 总生物碱含量测定
化学分析法 分光光度法
• 直接测定 • 离子对萃取比色法
酸性染料比色法 BH十十In－→（BH十In－）→BH十·In－
定性鉴别
• 泡沫反应 • 显色反应
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15
定性鉴别
• 薄层色谱鉴别
吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土 展开剂：
• 三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水 等极性较大的体系
• 三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分
显色剂
• 三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓 硫酸-醋酸酐、碘蒸气等
CHENLI
10
含量测定
• 总黄酮含量测定
紫外分光光度法 比色法 高效液相色谱法
• 正相色谱 硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分
• 反相色谱（C18或C8） 流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水
• 检测器
CHENLI
11Βιβλιοθήκη 银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定[含量测定]色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离 度应大于1.5。
对照品溶液的制备（略）
供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约 相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重 量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸 溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过， 取滤液，即得。
碱性
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理化性质
• 显色反应 还原反应（盐酸镁粉反应）
金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、 镁盐）
• 紫外光谱特征 I带(300-400nm) →B环桂皮酰基 II带(240-285nm) →A环苯甲酰基
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黄酮类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（聚酰胺柱） • 沉淀法
• 紫外光谱特征
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生物碱类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）
定性鉴别
• 沉淀反应、显色反应 多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应 麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应
马钱子散中生物碱成分的鉴别
取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时， 滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋 钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。
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CH3
理化性质
O
• 物理性状（存在的形态，升丹参华醌性II，A 光不稳定性大）黄素
醋酐-浓硫酸反应 五氯化锑反应 三铝醋酸反应 冰醋酸-乙酰氯反应 氯仿-硫酸反应
• 金属盐类反应
+铅、钡、铜盐→沉淀 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀
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三萜皂甙类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（大孔树脂柱） • 沉淀法
• 液—固吸附色谱法 • 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） • 检测器
气相色谱法
CHENLI
6
§2 黄酮类成分分析
概述 理化性质
• 物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） • 溶解性
游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等
• 酸碱性 黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇
酸性：与酚羟基的数目和位置有关 7,4‘- 二羟基> 7-或4‘- 羟基> 一般酚> 5-羟基
定性鉴别
• 显色反应 盐酸-镁粉反应 金属盐类配合反应
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定性鉴别
• 薄层色谱鉴别
硅胶--分离弱极性黄酮
• 展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇
聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷
• 展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等
纤维素--分离多糖苷混合物
• 展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成 总黄酮苷的含量。
总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量） ×2.51
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§3 三萜皂甙类成分分析
概述
COOH H O
R2O OHH 20
第六章 中药制剂中各类化学成 分分析
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§1 生物碱类成分分析
概述 理化性质
• 物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） • 碱性 • 溶解性
游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂 • 沉淀反应生物碱盐—水溶性增强
沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸
• 显色反应
苦味酸盐比色法 雷氏盐比色法 异羟肟酸铁比色法 （含有酯键结构的生物碱 ）
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含量测定
• 单体生物碱含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱法
• 液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18） 改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试 剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液） 固定相改进（封尾技术）
理化性质 • 物理性状（存R在O 3 的形H H态甘，草表酸面活性R1O，3 吸湿6 人性参）皂甙(A型)
• 溶解性
皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等
• 紫外光谱皂特甙征—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等
大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 吸收
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理化性质
• 显色反应
CHENLI
16
含量测定
• 总皂甙含量测定
重量法 比色法
• 显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸 等等
• 三萜皂甙类单体成分含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱
• 甘草酸、远志皂甙→紫外检测器 • 其他→蒸发光散射检测器（ELSD）
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O
OH O OH
O
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概述
O
OH
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定性鉴别
• 薄层色谱鉴别 吸附剂：氧化铝、硅胶 展开剂：氯仿、苯等 显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等
• 气相色谱 麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定
• 液相色谱
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含量测定
• 总生物碱含量测定
化学分析法 分光光度法
• 直接测定 • 离子对萃取比色法
酸性染料比色法 BH十十In－→（BH十In－）→BH十·In－
定性鉴别
• 泡沫反应 • 显色反应
CHENLI
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定性鉴别
• 薄层色谱鉴别
吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土 展开剂：
• 三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水 等极性较大的体系
• 三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分
显色剂
• 三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓 硫酸-醋酸酐、碘蒸气等
CHENLI
10
含量测定
• 总黄酮含量测定
紫外分光光度法 比色法 高效液相色谱法
• 正相色谱 硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分
• 反相色谱（C18或C8） 流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水
• 检测器
CHENLI
11Βιβλιοθήκη 银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定[含量测定]色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离 度应大于1.5。
对照品溶液的制备（略）
供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约 相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重 量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸 溶液5ml，摇匀，置水浴中加热回流30分钟，迅速冷却至室温，转移至 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过， 取滤液，即得。
碱性
CHENLI
7
理化性质
• 显色反应 还原反应（盐酸镁粉反应）
金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、 镁盐）
• 紫外光谱特征 I带(300-400nm) →B环桂皮酰基 II带(240-285nm) →A环苯甲酰基
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黄酮类成分的分离
• 溶剂萃取 • 柱层析（聚酰胺柱） • 沉淀法