高压蒸汽灭菌

高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内，在一定的压力下保持15~30分钟进行灭菌。

此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌，也可用于玻璃器皿的灭菌。

将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅夹套间的水沸腾而产生蒸汽。

待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中排尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌锅内的压力，从而使沸点增高，获得高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

在相同的温度下，湿热灭菌的效果好于干热灭菌。

有三点原因：在湿热灭菌中菌体吸收水分，蛋白质容易凝固变性，蛋白质随着含水量的增加，所需凝固温度降低；湿热灭菌中蒸汽的穿透力比干燥空气大；蒸汽在被灭菌物体表面凝结，释放出大量的汽化潜热，能迅速提高灭菌物体表面的温度，从而增加灭菌效力。

实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅，其结构和工作原理是相同的。

本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅，自控式灭菌锅的使用可参考厂家说明书。

具体操作步骤如下：
1.加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角
搁架相平为宜。

切勿忘记检查水位，加水量过少，灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。

2.装料：放回内层锅，并装入待灭菌的物品。

注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影
响灭菌效果。

装有培养基的容器放置时要防止液体溢出，三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。

3.加盖：将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内，摆正锅盖，对齐螺口，
然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气，并打开排气阀。

4.排气：打开电源加热灭菌锅，将水煮沸，使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。

一般认为当排出的气流很强并有嘘声时，表明锅内的空气已排尽，沸腾后约需5分钟。

5.升压：冷空气完全排尽后，关闭排气阀，继续加热，锅内压力开始上升。

6.保压：当压力表指针达到所需压力时，控制电源，开始计时并维持压力至所需的时间。

如本实验中采用0.1Mpa，121.5℃，20分钟灭菌。

灭菌的主要因素是温度而不是压力，因此锅内的冷空气必须完全排尽后，才能关闭排气阀，维持所需压力。

7.降压：达到灭菌所需的时间后，切断电源，让灭菌锅温度自然下降，当压力表的压力降
至“0”后，方可打开排气阀，排尽余下的蒸汽，旋松螺栓，打开锅盖，取出灭菌物品，倒掉锅内剩水。

压力一定要降到“0”后，才能打开排气阀，开盖取物。

否则就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口，造成瓶口被污染，甚至灼伤操作者。

8.无菌检查：将已灭菌的培养基放入37℃恒温培养箱培养24h，检查无杂菌生长后，即可
使用。

蒸汽杀菌锅
一、特点：
蒸汽杀菌锅高温杀菌是将肉制品或其它可以高温杀菌的食品，经过真空包装后，放入杀菌锅内进行有控制的升温，保温和降温过程而达到商业无菌目的的一种工艺。

二、应用范围：
蒸汽杀菌锅主要适用于罐头（如：肉类、鱼类、蛋类、蔬菜类等罐头）及需要高温杀菌的蛋白饮料（如：马口铁罐、玻璃瓶罐头、蒸煮袋等）。

特别适合罐头类（如：火腿肠、蒸煮袋装鸡、扒鸡、纯牛奶等）。

操作说明
一般罐头食品厂对罐头作常压水煮加热杀菌处理时都采用本形式的卧式杀菌锅，本设备通过引入压缩空气可实现反压杀菌。

如冷却需在锅内进行，须用水泵打入锅顶部的喷水管（或采用水循环系统）。

在杀菌时，由于加热使罐头温度升高，罐头内压力会超过罐外（在锅内）的压力。

因此，为了避免杀菌时玻璃瓶罐内增压而跳盖，对马口铁罐两端面凸出，必须施加反压力，特别是对需要较高杀菌温度的肉类罐头更就如此。

使用反压力杀菌，即是用压缩空气通入锅内增加压力，防止罐头凸罐和跳盖，其操作情况分述如下：由于压缩空气是不良导热体，况且蒸汽本身又具有一定的压力。

因此，在杀菌时升温过程中，不放进压缩空气，而只在达到杀菌温度后处于保温时，才开放压缩空气入锅内，使锅内增加0.5 ～0.8 个大气压。

特经过杀菌后，降温冷却时，停止供应蒸汽，将冷却水压入喷水管。

由于锅内温度下降，蒸汽冷凝，而使锅内力降低采用压缩空气的压力来补偿。

在杀菌过程中，应注意最初排气，进而泄汽，使蒸汽流通。

亦可每隔15－20分钟放气一次，
促进热交换。

总之必须满足杀菌条件的规定，按一定程序进行，杀菌温度的高低，杀菌压力的大小，杀菌时间的长短和操作方法等均由罐头产品杀菌工艺做出具体规定。

• 使用、维护与保养
（1）用户应贯彻执行国家劳动总局1981年5月颁发“压力容器安全监察规程”中第五章使用与管理和有关容器安全技术规定。

（2）用户应根据本单位的生产工艺杀菌条件和本杀菌锅的技术
性能制订杀菌锅安全操作规程，并严格执行。

杀菌锅安全操作规程至少应包括：
• 杀菌锅的操作工艺指标及最高工作压力，最高工作温度。

• 杀菌锅的操作方法与程序和注意事项。

• 生产运行中应重点检查项目和部位，以及运行中可能出现的异常现象和防止措施。

• 设备停用时的封存和保养方法。

（1 ）本设备严禁超过设计压力，超过设计温度运行。

（2 ）使用杀菌锅的操作人员应经培训考试合格，应严格遵守安全操作规程和岗位责任制。

并经常保持安全附件，齐全、灵敏、可靠、发现不正常现象应及时处理。

（3 ）杀菌锅装设有安全阀、压力表、温度计等安全附件，本设备增加温度调节装置，在使用过程中应加维护与定期校验。

本设备的安全阀开启压力等于设计压力，应经常保持灵敏、可靠，应防止随意调整。

压力表精度不低于2.5级，无铅封压力表不得使用。

其准确度至少应每检验一次，压力表指示失灵，刻度不清，表盘破裂，泄压后指针不回零位，铅封损坏等情况，均应立即更换。

温度计应进行定期检验，使用前应以标准温度计校验正，以后每年核正一次，凡水银柱断裂和与标准温度相差超过0.5 ℃则应送修或更换。

（4 ）杀菌锅应定期检查，每年至少进行一次外部检查，每三年至少进行一次内部检查，每六年至少进行一次全面检验，检验前的准备工作和检验项目，均按“规程”和有关规定进行，检验报告存档备案。

（5 ）在使用过程中应经常对斜面自锁楔块、滚轮、锅耳、转环法兰等滑动与滚动接触部位涂抹滑脂和机油，以保证磨擦面处于润滑状态。

（6 ）锅身法兰面上的密封圈因老化，缺损和磨损过大时，应及时更换，以便保证密封，防止泄漏。

（7 ）设备停用时，应将杀菌锅和锅盖的内外表面清洗干净、吹干。

外露加工表面刷以防锈油；安全检测控制仪表予以罩封保护。