高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果
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高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果
透明蓝色无
加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下
加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1
加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2
班氏试剂与斐林试剂比较:
首先,两者的配方不一样。斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。而班氏试剂的配方为:400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。
其次,两者在反应原理上略有差别。利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。
两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反
应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。
可溶性还原糖的鉴定:
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基,醛基具有还原性,可与弱氧化剂反应。与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。
利用斐林试剂:斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,醛基则被氧化为羧基。可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖,不能鉴定可溶性的非还原性糖。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。
利用班氏试剂:班氏试剂由A液(硫酸铜溶液),B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。将A溶液倾注人B液中,边加边搅,如有沉淀可过滤。实验原理与斐林试剂相似,所不同的是班氏试剂可长期使用。
利用银氨溶液:银氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水,至最初产生的沉淀恰好溶解为止,这时得到的溶液就是银
氨溶液。银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银),这是一种弱氧化剂,能把醛基氧化成羧基,同时Ag+被还原成金属银。还原生成的银附着在试管壁上,形成银镜。可见,银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。鉴定的结果是出现银镜。
用班氏试剂鉴定可溶性还原糖,比用斐林试剂更简便。
步骤
在试管中加入1mL班氏试剂,加热到沸腾,如不变色,则可使用。
再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液,摇匀。
加热上述混合液到沸腾,并持续2min~3min。
观察试管内混合液颜色是否发生变化,是否有沉淀物产生,并按表5提示作出判断记录。
混合液现象—记录符号含糖量
混合液呈蓝色或蓝灰色-0.02g/100mL
出现浅黄绿色沉淀+(0.1~0.5g)/100mL
注意事项:
班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10:1。
如是糖尿病人,检验前两三天最好停止服药。
实验中常用器材和药品的使用
NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货,每天更新哟!)
Ca(OH)2:鉴定CO2
CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性
NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂
酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH
NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基
酒精:用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)
蔗糖:配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
苔黑酚乙醇溶液:用于RNA的鉴定
斐林试剂(甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)
双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色)
碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色)
龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色
改良苯酚品红染液:检测染色体,红色
健那绿B:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色
重铬酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色
吲哚酚试剂:用于维生素C的鉴定
伊红美蓝:鉴定有无大肠杆菌的存在
亚甲基蓝:用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)
pH试纸:检验物质的酸碱性,如乳酸
卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定
解离液(5%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成):有丝分裂中根尖的分离与固定
93号汽油;
9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;
汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。
20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O2
无土营养液:用于植物无土栽培
结晶紫:用于自生固氮菌的分离
秋水仙素(C22H25O6N):用于单倍体育种,作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。
看看网友们都有什么想法
网友1
是来鉴定还原糖的,硫酸铜和氢氧化钠的混合物,斐林试剂应