高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果

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斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比

斐林试剂和本尼迪特试剂检测效果对比高中生物学的“检测生物组织中的糖类”是一个经典且重要的实验。

2019版人教版教材中,所用检测试剂为斐林试剂。

2019版浙科版教材中则使用本尼迪特试剂(也称为班氏试剂)。

斐林试剂是由0.1 g/mL NaOH和0.05 g/mL CuSO4配制而成。

其中O.1 g/mL NaOH 溶液称为斐林试剂甲液,0.05 g/mL CuSO4称为斐林试剂乙液。

本尼迪特试剂的配制方法为l将4.3 g硫酸铜(CuS04·5H:0)溶解在50 mL水中,加热使之溶解,冷却后加水至40 mL;另将43 g柠檬酸钠和25 g无水碳酸钠溶解于150 mL水中,加热使之溶解。

冷却后将上述2份溶液混合,用水稀释至250 mL,当溶液不澄清时可过滤。

本尼迪特试剂常被认为是斐林试剂的改良试剂,避免了斐林试剂必须现配现用的缺点,可长期保存。

斐林试剂在储存上具有缺点,而人教版仍选择其作为检测试剂是否存在其他原因?斐林试剂在检测速度和灵敏度等是否具有优势?1、研究背景斐林试剂和本尼迪特试剂反应原理具有一定共性:都是利用Cu(OH)2,与还原性糖的醛基在加热条件下反应,生成砖红色的Cu2O 沉淀以检测还原性糖的存在。

但二者产生cu(OH)2的方式存在差别。

斐林试剂的甲液与乙液直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2再与还原性糖反应产生砖红色沉淀。

而本尼迪特试剂中Cu(OH)2的产生过程是:柠檬酸钠和碳酸钠均是强碱弱酸盐,在水中水解产生OH一,与CuSO4溶液混合时,生成的Cu(OH)2与还原性糖反应生成砖红色沉淀。

从原理分析,斐林试剂甲液与乙液强烈反应产生Cu(OH)2,(OH)2很容易沉淀,浓度相对较高。

因此,可推测其检测还原性糖的灵敏度较高。

而本尼迪特试剂利用柠檬酸钠和碳酸钠水解产生OH一,与CuSO4混合后产生的Cu(OH)2。

因为水解产生的OH一数量较少,产生的Cu(OH)2浓度也相对较低。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂试剂甲:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。

试剂乙:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

(贮于带橡皮塞的瓶中)※临用时试剂甲与试剂乙等量混合※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。

它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀因此,斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。

2、双缩脲试剂取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。

取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。

瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

※双缩脲试剂使用时,先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,与蛋白质发生紫色反应,因此,双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同:(1)溶液浓度不同斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml。

(2)使用原理不同斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。

用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂的配制、用途及用法1、斐林试剂——用于可溶性糖的鉴定配制:试剂甲:取10g氢氧化钠放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂甲。

试剂乙:取5g硫酸铜放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

使用:用时临时配制,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,现配现用。

2、班氏试剂——用于可溶性糖的鉴定配制:称取86.5g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠溶于400 mL水中。

另称8.65g 硫酸铜溶于50mL热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中,边加边搅拌,搅匀后补足水量至500mL。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

3、双缩脲试剂——用于蛋白质的鉴定配制:A液:取10g氢氧化钠放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。

B液:取1g硫酸铜放入容量瓶(或有刻度的烧杯)中,加水至100mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01g/mL的硫酸铜溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

使用:用时先加A液2mL摇匀后,再滴入3~4滴B液,摇匀观察。

4、苏丹Ⅲ试剂——用于脂肪的鉴定配制:将0.1g苏丹Ⅲ干粉溶于100mL体积分数为95%的酒精中,加热使其充分溶解,成为饱和乙醇溶液,过滤后倒进试剂瓶密封保存备用,可保存数月。

5、苏丹Ⅳ试剂——用于脂肪的鉴定配制:将0.1g苏丹Ⅳ干粉溶于50mL丙酮中,再加入体积分数为70%的酒精50mL,充分混合后即可使用。

6、二苯胺试剂——用于DNA的鉴定A液:将1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存。

1.2实验2--检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质

1.2实验2--检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质

检测生物组织中的化合物
(1)还原糖的检测和观察(葡萄糖、果糖、麦芽糖) 常用材料:苹果和梨
试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/ml的NaOH 乙液:0.05g/ml的CuSO4) 注意事项:
①还原糖有 葡萄糖,果糖,麦芽糖 ② 甲乙液必须等量混合均匀后再加
入样液中,现配现用
③必须 用水浴加热
颜色变化:
察鉴定,但可溶性还原糖鉴定要水浴加热,脂肪鉴定要洗去 浮色后制片再用显微镜观察,蛋白质鉴定要先加双缩脲试剂A 液(质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液),后加B液(质量浓 度为0.01g/ml的CuSO4溶液)。
(2)脂肪的鉴定 常用材料:花生子叶或向日葵种子 试剂:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液 注意事项:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰 有的地方模糊。
②酒精的作用是:洗去浮色 ③需使用显微镜观察 ④ 使用不同的染色剂染色时间不同 颜色变化: 橘黄色(用苏丹Ⅲ染色)或红色(用苏丹Ⅳ染色)
(3)蛋白质的鉴定 常用材料: 鸡蛋清,黄豆组织样液,牛奶 试剂: 双缩脲试剂( A液:0.1g/ml的NaOH
B液: 0.01g/ml的CuSO4 )
注意事项: ①先加 A液1ml ,再加 B液4滴 ② 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比
颜色变化:变成紫色
(4)淀粉的检测和观察 常用材料:马铃薯 试剂:碘液 颜色变化:变蓝
思考:斐林试剂与双缩脲试剂在使用方法的区别
①斐林试剂需要等量混合、现配现用,同 时需要水浴加热
实验2 检测生物组织中的还原糖、
脂肪和蛋白质
蛋白质 脂肪
还原糖 淀粉
试剂
成分
实验现象
常用材料
双缩脲 苏丹Ⅲ
A: 0.1g/mL NaOH B: 0.01g/mL CuSO4

高中生物实验所有染色剂与其性质详解(完整版)

高中生物实验所有染色剂与其性质详解(完整版)

1斐林试剂检测可溶性还原糖原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察.应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪.3 双缩脲试剂检测蛋白质原理:蛋白质+双缩脲试剂→紫色注意:双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温(不需要加热). 应用:鉴定某些消化液中含有蛋白质;用于劣质奶粉的鉴定.4 碘液检测淀粉原理:淀粉+碘液→蓝色注意:这里的碘是单质碘,而不是离子碘.应用:检测食品中营养成分是否含有淀粉5 DNA的染色与鉴定染色原理:DNA+甲基绿→绿色应用:可以显示DNA在细胞中的分布.鉴定原理:DNA+二苯胺→蓝色应用:用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.6 吡罗红使RNA呈现红色原理:RNA+吡罗红→红色应用:可以显示RNA在细胞中的分布.注意:在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.7 台盼蓝使死细胞染成蓝色原理:正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.应用:区分活细胞和死细胞;检测细胞膜的完整性.8 线粒体的染色原理:健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.应用:可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.9 酒精的检测原理:橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色.应用:探究酵母菌细胞呼吸的方式;制作果酒时检验是否产生了酒精;检查司机是否酒后驾驶.10 CO2的检测原理:CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿在变黄.应用:根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.11 染色体(或染色质)的染色原理:染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液)染成深色.应用:用高倍镜观察细胞的有丝分裂.12 吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应原理:吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.应用:可用于检测食品营养成分中是否含有维生素 C.13 亚硝酸盐的检测出现玫瑰红原理:在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.应用:将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.14 脲酶的检测原理:细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH升高,从而使酚红指示剂变红.应用:在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.15 伊红美蓝检测大肠杆菌原理:在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色.应用:用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.16 刚果红检测纤维素分解菌原理:刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.应用:筛选纤维素分解菌.补充(有部分重复):1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml 2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等.还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀.如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等.2、班氏尿糖定性试剂配制:称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠.柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐).使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用.3、双缩脲试剂配制:A液:质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml B液:质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应.也可用于鉴定多肽.4、苏丹Ⅲ配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色).5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1). 作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来.能杀死细胞固定.6、质量浓度为0.01g/ml的或0.02g/ml龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察.7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用.经此处理细胞仍具活性.8、质量浓度为0.1mg/ml的亚甲基蓝溶液配制:将亚甲基蓝溶于蒸馏水中配制而成作用:(1)用于观察根对矿质元素离子的交换吸附观察;(2)用于检测水中细菌情况,根据亚甲基蓝褪色情况,判断水质被细菌污染情况. 是活体染色剂.9、丙酮是有机溶剂,在叶绿体中色素提取时,用于溶解叶绿体中的色素.可用酒精替代,不过提取色素时将绿叶放入酒精中隔水加热10、层析液配制:由20份石油醚(在60~900C下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成.是一种脂溶性很强的有机溶剂,叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同:溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢.代用品:93号汽油、四氯化碳11、SiO2、CaCO3加入少许SiO2是为了研磨得充分;加入少许CaCO3是为了防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏.12、碘液配制:取2gKI ,溶解在5ml蒸馏水中,再加1gI,待溶解后用蒸馏水稀释至300ml.溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里.作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物.13、二苯胺配制:称取1.5g二苯胺,溶于100mL冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸,用棕色瓶保存.临用前,在10mL的上述溶液中再加入0.1mL体积分数为0.2%的乙醛溶液.作用:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色.14、NaOH:用于吸收CO2(验证光合作用需要CO2)或改变溶液的pH,15、Ca(OH)2:鉴定CO2(验证呼吸作用产生CO2).16、NaHCO3:提供CO2等.。

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法1、斐林试剂 试剂A:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。

试剂B:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。

(贮于带橡皮塞的瓶中)于带橡皮塞的瓶中) ※临用时试剂A与试剂B等量混合等量混合2、双缩脲试剂 试剂A:10%氢氧化钠 试剂硫酸铜试剂B:1%硫酸铜3、苏丹Ⅲ试剂 0.1克苏丹Ⅲ溶于20毫升95%酒精中,因脂肪可溶于酒精中,因此染色脂肪不分钟。

得超过10分钟。

4、二苯胺试剂: 将1克二苯胺溶液于100ML冰醋酸中,再加2.75毫升浓硫酸(置冰箱中可保个月,使用前在室温下摇匀)。

存根6个月,使用前在室温下摇匀)。

5、苔黑酚——乙醇溶液(用于RNA的鉴定)的鉴定) 溶解6克苔黑酚于是100毫升95%乙醇中,(可在冰箱中保存1个月)个月)6、班氏试剂: 溶85克柠檬酸钠及50克无水碳酸钠于400毫升水中。

另溶8.5克硫酸铜于500毫升热水中。

将硫酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸钠——碳酸钠溶液中,边加边搅拌。

此混合液可长期使用。

如有沉淀可过滤, 此混合液可长期使用。

7、茜红染料 将0.1克茜红溶于100ML蒸馏水中蒸馏水中8、酵母亮甲酚蓝 将10ML水放入烧杯中,滴加足够的1%亮甲酚蓝水溶液亮甲酚蓝水溶液 至深蓝色为止。

将1/4茶匙干酵母溶于此水中。

搅拌并煮沸,用前冷却。

9、醋酸洋红染液 冰醋酸45ML+55ML蒸馏水+0.5克洋红克洋红 先将洋红溶于蒸馏水中,再加入冰醋酸充分摇匀后,加热煮沸10分钟,待冷却后,即可使用。

却后,即可使用。

10、有丝分裂细胞解离液 38%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成解离液。

的比例配成解离液。

11、有丝分裂细胞染液 医用紫药水和蒸馏水按1:16的比例混合配成染色液。

的比例混合 配成染色液。

的鉴定)12、吲哚酚试剂(用于VC的鉴定) 将0.1克吲哚酚粉未溶于是100ML水中。

水中。

(用于细胞有丝分裂根尖的固定)13、卡诺氏固定液(用于细胞有丝分裂根尖的固定) 酒精:冰醋酸=3:1(体积比)(体积比)14、20%肝脏研磨液 1份肝脏4份水。

高中生物-染色剂

高中生物-染色剂

高中生物染色剂1、斐林试剂配制:1)甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml2)乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml临用时将甲、乙液等量混合作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。

还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀。

如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。

2、班氏尿糖定性试剂配制:称取17.4克无水硫酸铜(CuSO4)溶解于100毫升热蒸馏水中,冷却后,稀释到150毫升。

称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2CO3)100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升。

把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。

用细口瓶贮存备用(为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠。

柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐)。

使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用。

3、双缩脲试剂配制:A液:质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100mlB液:质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml使用时,先加A液,后加B液作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。

也可用于鉴定多肽。

4、苏丹Ⅲ :配制:取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液(1:1)作用:用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来。

能杀死细胞固定。

6、质量浓度为0.01g/mL的或0.02g/mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)配制:是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成作用:使细胞核内的染色体着色,便于观察。

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液作用:观察成熟植物细胞质分离时用。

高中生物常见试剂及变色反应汇总

高中生物常见试剂及变色反应汇总

高中生物常见试剂及变色反应汇总1、斐林试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.05g/mlCuSO4(乙液)。

用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。

2、班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。

用于尿糖的测定。

3、双缩脲试剂:成分:0.1g/mlNaOH(甲液)和0.01g/mlCuSO4(乙液)。

用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。

如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。

4、苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。

用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅲ染成红色)。

5、二苯胺:用于鉴定DNA。

DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。

6、甲基绿:用于鉴定DNA。

DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。

吡罗红:检测RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。

8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。

9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。

“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。

洗去卡诺氏液8%盐酸:(1)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合11、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

班氏法实验报告(3篇)

班氏法实验报告(3篇)

第1篇实验目的:1. 学习并掌握班氏法测定葡萄糖含量的原理和方法。

2. 了解班氏试剂的配制和保存方法。

3. 培养实验操作技能,提高分析能力。

实验原理:班氏法是一种常用的比色法,用于测定葡萄糖含量。

该法基于葡萄糖在碱性条件下与铜离子反应生成红色的氧化亚铜沉淀,通过比色测定沉淀物的颜色深浅,从而计算出葡萄糖的含量。

实验仪器与试剂:1. 仪器:分析天平、滴定管、移液管、锥形瓶、烧杯、试管、酒精灯、温度计、比色计等。

2. 试剂:班氏试剂、葡萄糖标准溶液、硫酸铜溶液、氢氧化钠溶液、盐酸、蒸馏水等。

实验步骤:1. 班氏试剂的配制:- 称取1.5g硫酸铜,加入50mL蒸馏水溶解;- 称取0.1g氢氧化钠,加入50mL蒸馏水溶解;- 将硫酸铜溶液和氢氧化钠溶液混合,充分搅拌;- 将混合液煮沸5分钟,冷却后备用。

2. 葡萄糖标准溶液的配制:- 称取1.0g葡萄糖,加入100mL蒸馏水溶解;- 将溶液转移至1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度;- 配制浓度为0.1mg/mL的葡萄糖标准溶液。

3. 样品处理:- 称取适量样品,加入少量蒸馏水溶解;- 将溶液转移至100mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度。

4. 测定:- 取5mL葡萄糖标准溶液和5mL样品溶液分别置于锥形瓶中;- 加入5mL班氏试剂,充分混合;- 将锥形瓶置于水浴中,加热至沸腾,保持5分钟;- 冷却至室温,用比色计测定溶液的吸光度。

5. 计算:- 根据标准曲线或标准方法,计算样品中葡萄糖的含量。

实验结果:1. 标准曲线:以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。

2. 样品测定:根据标准曲线,计算样品中葡萄糖的含量。

实验讨论:1. 实验过程中,班氏试剂的配制和保存对实验结果有较大影响,应严格按照操作规程进行。

2. 样品处理过程中,应避免样品污染,保证实验结果的准确性。

3. 实验过程中,应注意控制水浴温度,避免加热过度导致实验结果偏差。

结论:通过本次实验,掌握了班氏法测定葡萄糖含量的原理和方法,提高了实验操作技能和分析能力。

班氏试剂

班氏试剂

班氏试剂(Benedict's Reagent)简介:班氏试剂(Benedict's Reagent)又称本氏液、本尼迪克特试剂、本尼迪克试剂、本尼迪克试液或本尼迪特试剂,是一种浅蓝色化学试剂。

其命名来自于一位美国化学家斯坦利•本尼迪克。

班氏试剂在配制过程中,当把硫酸铜溶液倒入由柠檬酸钠和无水碳酸钠配制的溶液中时,硫酸铜与碳酸钠和柠檬酸钠相遇,能产生出一种可溶性的又能离解出Cu2+的可溶性络盐,即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成,做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。

当利用班氏试剂测定还原性糖时,还原性糖在这种碱性溶液中能将Cu2+还原为Cu+,Cu+再与OH-合成黄色的CuOH,加热后CuOH即变成砖红色的氧化亚铜(Cu2O)沉淀。

Leagene Benedict's Reagent主要由碳酸钠、柠檬酸钠、硫酸铜配等组成,来检测还原性糖,包括除蔗糖之外基本上所有的单糖和双糖,常用于尿糖的鉴定。

该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

组成:TC0001 StorageBenedict's Reagent100ml RT使用说明书1份操作步骤(仅供参考):1、在试管中加入1ml Benedict's Reagent,加热到沸腾,如不变色,则可使用。

2、在试管中滴入新鲜澄清的尿液,充分摇匀。

3、加热上述混合液到沸腾,冷却后观察结果。

4、观察试管内混合液颜色是否发生变化,是否有沉淀物产生,并按下表提示作出判断:沸水浴加热后的现象葡萄糖含量(g/dL)透明蓝色无加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下加热后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5~1加热即再现土黄色沉淀中量,约1~2加热时很快出现多量砖红色沉淀大量,约2以上注意事项:1、班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10:1。

2、如是糖尿病人,检验前两三天最好停止服药。

3、本试剂仅用于科研用途,不宜用于临床检测。

斐林试剂与班氏试剂

斐林试剂与班氏试剂

斐林试剂与班氏试剂高中生物教材(实验修订本)的有关实验中用到了斐林试剂和班氏试剂,二者都可用于鉴定可溶性还原糖,但两种试剂的配制、反应原理及使用方法均有所不同,教材只介绍了斐林试剂的配制和使用方法,对班氏试剂的配制和反应原理没做任何解释。

班氏试剂是如何配制的?与斐林试剂的配制、反应原理有何不同?学生对此有较多疑问,现解释如下。

1.斐林试剂的配制、使用方法及反应原理斐林试剂由甲液(0.1g/mlNaOH)和乙液(0.05g/mlCuSO4)组成,用于鉴定可溶性还原糖,使用时将等量的甲、乙液混合均匀,取适量加入待测液,此时溶液呈蓝色。

沸水浴加热2min左右,即可观察到有砖红色沉淀生成,说明待测液中有可溶性还原糖。

甲、乙液混合时,生成了Cu(OH)2,而新制的Cu(OH)2在还原性糖的作用下,被还原为CuO砖红色沉淀。

实验过程中,必须先把甲、乙液等量混合均匀,使Cu(OH)2充分生成。

如果先后或者分别把NaOH和CuSO4溶液加入到含有还原性糖的组织提取液中,其中的有机酸会与NaOH迅速反应,使反应物中没有Cu(OH)2或者Cu(OH)2量不足,从而使还原性糖与Cu(OH)2的反应不能进行或现象不明显,影响还原性糖的鉴定。

2.班氏试剂的配制、使用方法及反应原理班氏试剂一般用于尿糖的测定,有时也用于其他实验中可溶性还原糖的鉴定。

配制方法:取柠檬酸钠86.5g和无水碳酸钠50g放入1000ml锥形瓶中,加水350ml,加热至溶解。

另取100ml锥形瓶加入硫酸铜8.65g,加水约50ml,加热溶解。

待二者冷却至室温,将硫酸铜溶液慢慢倒入前液,随时搅匀,并补足水量至500ml。

使用时,取1ml班氏试剂加入试管,加入糖尿病患者的尿液0.1ml,混匀后沸水浴加热,可观察到溶液开始为蓝色,后来出现黄绿色、土黄色或砖红色沉淀,分别反映出患者尿液中糖含量的多少,结果见下表。

沸水浴加热后的现象葡萄糖含量(g/dL)透明蓝色无加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下加热1min后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5~1加热约10~15s即再现土黄色沉淀中量,约1~2加热时很快出现多量砖红色沉淀大量,约2以上班氏试剂在配制过程中,当把硫酸铜溶液倒入由柠檬酸钠和无水硫酸钠配制的溶液中时,硫酸铜与硫酸钠和柠檬酸钠相遇,能产生出一种可溶性的又能离解出Cu2+的可溶性络盐,即柠檬酸钠此时能防止氢氧化铜沉淀的形成,做了一种亲水性掩蔽络合物形成剂。

班氏法测尿糖实验报告

班氏法测尿糖实验报告

班氏法测尿糖实验报告
[目的]掌握尿葡萄糖班氏定性的方法。

[原理]葡萄糖含有醛基,
在高热、碱性溶液中,能将试剂中蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜,出现红色氧化亚铜沉淀。

操作]
1.鉴定试剂
2.加尿液
3.加热煮沸
4.断结甲[注意事项)
1.尿液应新鲜,久置尿液因细菌繁殖消耗葡萄糖,可使结果偏低或造成假阴性。

糖尿病患者宜检测空腹或餐后2h的尿液标本。

2.试剂与尿液的比例控制在10:1。

3.尿液中含大量铵盐时可预先加碱煮沸数分钟将氨除去后再进行试验。

4.蛋白含量较高时也影响铜盐沉淀,可用加热乙酸法除去。

5.链霉素、维生素C、水合氯醛、葡萄糖醛酸化合物等还原性药物可呈假阴性反应;大黄、黄连、黄芩等可致假阳性反应。

6.煮沸时应不断摇动试管以防爆沸喷出,试管口应朝向无人处,以免操作中不慎伤人。

此煮沸过程也可在沸水浴中进行,放置5min。

7.冷却后观察结果。

大量尿酸盐存在时,其煮沸后也可呈浑浊并带绿色,但久置后并不变黄色而呈灰蓝色。

8. Benidict法灵敏度为8.33mmol/L.。

探究02 斐林试剂和班氏试剂-2023-2024学年高一生物教材疑点难点问题权威解读(人教版201

探究02 斐林试剂和班氏试剂-2023-2024学年高一生物教材疑点难点问题权威解读(人教版201

红色沉淀的逐渐变化,反应较快时, 直接观察到红色沉淀。
柠檬酸钠作为络合剂,由碳酸钠提供 碱性。CuSO4与柠檬酸钠溶液和Na2CO3 溶液混合时生成柠檬酸络铜离子,柠 檬酸络铜离子与葡萄糖中的醛基反应 生成砖红色沉淀。
醛糖含游离的醛基,具有很好的还原性。碱性溶液中的重金属 离子如是一种弱氧化剂,能使醛糖(还原剂)的醛基氧化为羧 基,产物称为醛糖酸,金属离子自身被还原。
新教材•人教版•必修一
补充说明 2.1 斐林试剂和班氏试剂
一.斐林试剂和班氏试剂
一.斐林试剂和班氏试剂 1.试剂配制方法
斐林试剂甲液: 0.1g/mLNaOH
斐林试剂乙液: 0.05g/mLCuSO4
使用时:甲液和乙液等量混合均匀后再注入 (高中认为是新制的氢氧化铜)
一.斐林试剂和班氏试剂 1.试剂配制方法 (1)斐林试剂
一.斐林试剂和班氏试剂 3.反应原理
必出指出:斐林试剂反应和班氏试剂反应虽然被用作还原糖的 检验,但不能给出定量的醛糖酸产物,因为所用的碱性条件会 引起糖碳架的断裂和分解。
一.斐林试剂和班氏试剂 3.反应原理
许多酮糖也是还原糖,例如果糖,因为它在碱性溶液中能够异化为醛糖
Ba(OH)2
单糖在碱催化下的酮-烯醇互变异构
试剂中的酒石酸钾钠或柠檬酸用作螯合剂,与Cu2+络合以防止 形成Cu(OH)2而使Cu2+沉淀。
一.斐林试剂和班氏试剂
3.反应原理
(1)斐林试剂
(2)班氏试剂
其本质是铜离子和酒石酸形成 的配合物——酒石酸合铜(高 中认为是新制的氢氧化铜)。
在与醛糖共热(高中人教版生物必 修一中为60℃水浴加热)时, 蓝色 消失,析出红色的氧化亚铜沉淀。 在氧化亚铜析出过程中, 反应液的 颜色可能经过由蓝色→绿色→黄色→

班氏法测定尿糖实验报告

班氏法测定尿糖实验报告

一、实验目的1. 掌握班氏法测定尿糖的基本原理和操作步骤。

2. 学会使用班氏试剂检测尿液中的葡萄糖含量。

3. 了解尿糖检测在临床医学中的应用价值。

二、实验原理班氏法是一种经典的尿糖定性试验方法。

该方法的原理是:葡萄糖含有醛基,在高热、碱性溶液中,能将试剂中的蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜,出现红色氧化亚铜沉淀。

通过观察沉淀的颜色深浅,可以判断尿液中的葡萄糖含量。

三、实验材料1. 班氏试剂2. 尿液样本3. 试管4. 热源5. 移液器四、实验步骤1. 鉴定试剂:取少量班氏试剂于试管中,加入尿液样本,混合均匀,加热煮沸。

若溶液颜色变为红色,则说明班氏试剂有效。

2. 加样:取1ml尿液样本于试管中,加入1ml班氏试剂,混合均匀。

3. 加热:将试管放入热源中,加热煮沸1-2分钟。

4. 观察:煮沸后,取出试管,待其冷却至室温。

观察溶液颜色变化,若出现红色沉淀,则说明尿液中含有葡萄糖。

五、实验结果与分析1. 正常尿液:在实验中,正常尿液样本加热煮沸后,溶液颜色变为红色,但无红色沉淀出现。

这表明正常尿液中的葡萄糖含量较低,不足以使班氏试剂发生颜色变化。

2. 糖尿病尿液:在实验中,糖尿病尿液样本加热煮沸后,溶液颜色变为红色,并出现红色沉淀。

这表明糖尿病尿液中含有较高浓度的葡萄糖,使班氏试剂发生颜色变化和沉淀。

六、实验讨论1. 班氏法的优点:班氏法是一种简单、快速、经济的尿糖定性试验方法。

该方法的操作步骤简单,易于掌握。

同时,班氏试剂可长期保存,不必现配现用。

2. 班氏法的不足:班氏法对葡萄糖的检测灵敏度较低,且易受其他还原糖的干扰。

此外,班氏法的结果判断主要依靠肉眼观察,主观性较强。

3. 改进措施:为了提高班氏法的检测灵敏度,可以采用以下措施:(1)提高班氏试剂的浓度;(2)使用更高灵敏度的检测仪器;(3)结合其他尿糖检测方法,如葡萄糖氧化酶法等。

七、实验结论通过本次实验,我们掌握了班氏法测定尿糖的基本原理和操作步骤。

班氏定性实验报告(3篇)

班氏定性实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握班氏法测定尿糖的原理和方法。

2. 通过实验操作,验证尿液中是否含有葡萄糖。

3. 熟悉实验操作步骤和注意事项。

二、实验原理班氏法是一种常用的尿糖定性检测方法。

其原理是:葡萄糖含有醛基,在高热、碱性溶液中,能将试剂中的蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜,出现红色氧化亚铜沉淀。

当尿液中的葡萄糖含量达到一定水平时,就会产生明显的红色沉淀,从而判断尿液中含有葡萄糖。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 尿液样品- 班氏试剂- 碱性溶液- 烧杯- 滴管- 研钵- 酒精灯- 试管2. 实验仪器:- 电子天平- 移液器- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 准备班氏试剂:取适量的班氏试剂放入烧杯中,加入等量的碱性溶液,搅拌均匀。

2. 取尿液样品:用移液器取适量尿液样品,放入试管中。

3. 加入班氏试剂:用滴管将班氏试剂滴加至尿液样品中,使尿液样品与班氏试剂充分混合。

4. 加热反应:将混合好的尿液样品放入恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态约2分钟。

5. 观察结果:加热结束后,取出试管,静置冷却。

观察尿液样品是否出现红色沉淀。

五、实验结果与分析1. 实验结果:- 若尿液样品中出现红色沉淀,则说明尿液中含有葡萄糖。

- 若尿液样品中没有出现红色沉淀,则说明尿液中含有葡萄糖的可能性较小。

2. 结果分析:- 本实验中,尿液样品在加热后出现了红色沉淀,说明尿液中含有葡萄糖。

- 这可能与尿液样品的来源、采集时间等因素有关。

六、实验讨论1. 实验过程中,应注意操作规范,避免污染试剂和仪器。

2. 在加热反应过程中,应确保尿液样品充分沸腾,以便使葡萄糖充分反应。

3. 实验结果可能受到尿液样品浓度、采集时间等因素的影响。

4. 对于尿液样品中葡萄糖含量的判断,可结合临床诊断和医生建议进行综合分析。

七、实验总结通过本次实验,我们掌握了班氏法测定尿糖的原理和方法。

实验结果表明,尿液中含有葡萄糖,为临床诊断提供了一定的依据。

高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果

高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果

高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果透明蓝色无加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2班氏试剂与斐林试剂比较:首先,两者的配方不一样。

斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。

其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。

而班氏试剂的配方为:400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。

其次,两者在反应原理上略有差别。

利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。

而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。

两种试剂的保存方式不同。

斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。

可溶性还原糖的鉴定:生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基,醛基具有还原性,可与弱氧化剂反应。

与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。

班氏实验实验报告

班氏实验实验报告

一、实验模块:生物化学二、实验标题:班氏试剂检测还原糖实验三、实验目的1. 学习班氏试剂检测还原糖的原理和方法。

2. 掌握实验操作步骤,提高实验技能。

3. 了解还原糖在生物体内的作用及意义。

四、实验原理班氏试剂是一种常用的还原糖检测试剂,其原理是:在碱性条件下,还原糖与班氏试剂中的铜离子发生反应,还原成亚铜离子,形成红色沉淀。

本实验通过观察沉淀的颜色深浅,来判断样品中还原糖的含量。

五、实验步骤1. 准备实验材料:班氏试剂、葡萄糖标准溶液、蒸馏水、试管、试管架、移液管、烧杯、滴定管等。

2. 配制班氏试剂:取班氏试剂原液1毫升,加入10毫升蒸馏水,混匀。

3. 准备待测样品:取待测样品适量,加入蒸馏水稀释至一定浓度。

4. 实验分组:将待测样品分为若干组,每组加入相同量的班氏试剂。

5. 观察沉淀:将试管放入水浴锅中,加热至沸腾,观察沉淀颜色变化。

6. 记录实验结果:记录每组沉淀的颜色深浅,并计算还原糖含量。

六、实验环境实验在生物化学实验室进行,实验过程中需注意安全操作。

七、实验过程1. 按照实验步骤配制班氏试剂,混匀。

2. 取待测样品适量,加入蒸馏水稀释至一定浓度。

3. 将待测样品分为若干组,每组加入相同量的班氏试剂。

4. 将试管放入水浴锅中,加热至沸腾,观察沉淀颜色变化。

5. 记录每组沉淀的颜色深浅,并计算还原糖含量。

八、实验结果与分析1. 实验结果:根据实验观察,各组沉淀颜色由浅到深,说明还原糖含量逐渐增加。

2. 结果分析:实验结果表明,班氏试剂检测还原糖的方法可行,沉淀颜色与还原糖含量呈正相关。

九、实验结论1. 班氏试剂可以用于检测还原糖,实验结果准确可靠。

2. 通过观察沉淀颜色深浅,可以判断样品中还原糖的含量。

3. 还原糖在生物体内具有重要作用,如能量供应、细胞通讯等。

十、后记本实验通过班氏试剂检测还原糖,掌握了实验操作步骤和原理,提高了实验技能。

在实验过程中,注意安全操作,确保实验顺利进行。

实验结果与分析表明,班氏试剂检测还原糖的方法可行,为后续研究提供了有力支持。

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高中生物实验:班氏试剂的配制与鉴定结果
透明蓝色无
加热时无变化,仅冷却后有少量沉淀微量,约0.5以下
加热1分钟后即出现少量黄绿色沉淀少量,约0.5-1
加热10-15秒后即出现土黄色沉淀中量,约1-2
班氏试剂与斐林试剂比较:
首先,两者的配方不一样。

斐林试剂主要由质量浓度为0.1g·mL-1的NaOH溶液和质量浓度为0.05g·mL-1的CuSO4溶液配制而成。

其中0.1g·mL-1的NaOH溶液称为斐林试剂甲,0.05g·mL-1的CuSO4溶液称为斐林试剂乙。

而班氏试剂的配方为:400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠;50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜,制成CuO4溶液;把CuSO4溶液倒入柠檬酸钠?Na2CO3溶液中,边加边搅,如产生沉淀可滤去。

其次,两者在反应原理上略有差别。

利用斐林试剂鉴定时,斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。

而班氏试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的:柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐,在水中它们均可水解产生OH-,与柠檬酸钠?Na2CO3溶液和CuSO4溶液混合时,Cu2+和OH-结合,生成Cu(OH)2,Cu(OH)2与葡萄糖中的醛基反应产生砖红色沉淀。

两种试剂的保存方式不同。

斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈反
应产生Cu(OH)2,Cu(OH)2很容易沉淀析出,因此斐林试剂一般为现用现配;而班氏试剂的配方中,柠檬酸钠?Na2CO3为一对缓冲物质,产生的OH-数量有限,与CuSO4溶液混合后产生的Cu(OH)2浓度相对较低,不易析出,因此该试剂可长期保存。

可溶性还原糖的鉴定:
生物组织中普遍存在的可溶性糖种类较多,常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。

葡萄糖、果糖和麦芽糖的分子内含有醛基,醛基具有还原性,可与弱氧化剂反应。

与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在。

利用斐林试剂:斐林试剂由质量浓度为0.1g/mL的Na0H溶液和质量浓度为0.05g/mLL的CuS04溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。

Cu(OH)2在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,醛基则被氧化为羧基。

可见用斐林试剂只能鉴定还原性糖,不能鉴定可溶性的非还原性糖。

用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。

利用班氏试剂:班氏试剂由A液(硫酸铜溶液),B液(柠檬酸钠和碳酸溶液)配制而成。

将A溶液倾注人B液中,边加边搅,如有沉淀可过滤。

实验原理与斐林试剂相似,所不同的是班氏试剂可长期使用。

利用银氨溶液:银氨溶液是在2%的AgNO3溶液中逐滴滴人2%的稀氨水,至最初产生的沉淀恰好溶解为止,这时得到的溶液就是银
氨溶液。

银氨溶液中含有Ag(NH3)20H(氢氧化二氨合银),这是一种弱氧化剂,能把醛基氧化成羧基,同时Ag+被还原成金属银。

还原生成的银附着在试管壁上,形成银镜。

可见,银镜反应也可用于鉴定可溶性还原糖。

鉴定的结果是出现银镜。

用班氏试剂鉴定可溶性还原糖,比用斐林试剂更简便。

步骤
在试管中加入1mL班氏试剂,加热到沸腾,如不变色,则可使用。

再在试管中滴人2滴新鲜澄清的尿液,摇匀。

加热上述混合液到沸腾,并持续2min~3min。

观察试管内混合液颜色是否发生变化,是否有沉淀物产生,并按表5提示作出判断记录。

混合液现象—记录符号含糖量
混合液呈蓝色或蓝灰色-0.02g/100mL
出现浅黄绿色沉淀+(0.1~0.5g)/100mL
注意事项:
班氏试剂和尿液混合液的体积比例应为10:1。

如是糖尿病人,检验前两三天最好停止服药。

实验中常用器材和药品的使用
NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH(马上点标题下“高中生物”关注可获得更多知识干货,每天更新哟!)
Ca(OH)2:鉴定CO2
CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性
NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂
酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH
NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)
琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基
酒精:用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)
蔗糖:配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原
苔黑酚乙醇溶液:用于RNA的鉴定
斐林试剂(甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)
双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色)
碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色)
龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色
改良苯酚品红染液:检测染色体,红色
健那绿B:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色
重铬酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色
吲哚酚试剂:用于维生素C的鉴定
伊红美蓝:鉴定有无大肠杆菌的存在
亚甲基蓝:用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)
pH试纸:检验物质的酸碱性,如乳酸
卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定
解离液(5%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成):有丝分裂中根尖的分离与固定
93号汽油;
9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;
汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O2
无土营养液:用于植物无土栽培
结晶紫:用于自生固氮菌的分离
秋水仙素(C22H25O6N):用于单倍体育种,作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。

是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。

它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。

看看网友们都有什么想法
网友1
是来鉴定还原糖的,硫酸铜和氢氧化钠的混合物,斐林试剂应
现配现用
网友2
1斐林试剂检测可溶性还原糖
原理:还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀
注意:斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热。

应用:检验和检测某糖是否为还原糖;不同生物组织中含糖量高低的测定;在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎。

2苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪
原理:苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色;苏丹Ⅳ+脂肪→红色
注意:脂肪的鉴定需要用显微镜观察。

应用:检测食品中营养成分是否含有脂肪。

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