叶绿素含量的测定具体方法
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一、叶绿素的测定:乙醇提取比色法,参考陈建勋、王晓峰等方法,有改动。
将实验材料去除大主脉,在0.0001的天平上称取0.5g左右的叶片至于50ml离心管中,依次加入25ml95%的乙醇密封,在黑暗条件下室温提取24-36h,将提取液稀释一定的倍数(根据具体情况而定),随后在UV754N紫外可见分光光度计,波长665、649、470nm下分别进行比色。
根据各波长的OD 值按照李合生的方法计算叶绿素a、b 和类胡萝卜素的浓度(mg·L-1),根据求得的浓度计算出各色素含量(mg·g-1鲜重表示)。
C a=13.95D665-6.88D649
C b=24.96D649-7.32D665
C x.c=(1000D470-2.05Ca-114.8Cb)/245
色素在叶片中的含量(mg /g)=色素浓度(mg /L)×提取液总体积(m l)×稀释倍数/样品质量(g)。