第二十章 胆固醇逆向转运研究方法
高密度脂蛋白在胆固醇逆转运中作用的研究进展(全文)
高密度脂蛋白在胆固醇逆转运中作用的研究进展（全文）高密度脂蛋白（HDL）作为细胞外胆固醇的接受体、以及将胆固醇由组织转运至肝脏的载体备受关注。
观察性研究显示，高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）与动脉粥样硬化心脑血管事件呈负相关，长期以来被认为是评估机体胆固醇逆转运（RCT）效率的生化指标和抗动脉粥样硬化（AS）治疗的靶点（即所谓的“好胆固醇”），并试图通过药物（如烟酸、胆固醇酯转运蛋白抑制剂）升高HDL－C水平以降低心血管病的发病率。
然而，随着多个升HDL－C的临床试验以失败告终，学术界认识到HDL－C仅是心血管风险的评估指标，而以HDL为核心的RCT过程取决于HDL功能和RCT的效率。
HDL是一组高度异质性蛋白与脂质的复合体，与HDL颗粒结合的apoA－I、对氧磷酶1等功能蛋白及脂质成分，在HDL抗氧化、抗炎和介导的胆固醇外流等方面发挥重要作用。
而在炎症、糖尿病、急性冠脉综合征等疾病状态下，上述功能蛋白被分泌型磷脂酶A2、血清淀粉样蛋白A 等替换，使HDL处于“失功能”状态。
因此，目前的研究聚焦于评估HDL 功能以及HDL在RCT中的作用效率。
细胞内胆固醇外流与心血管事件细胞内胆固醇外流是RCT的初始步骤，尽管观察性研究发现其与AS 呈负相关，并且是冠心病的强预测因子，但研究结果并不一致。
Chicago Healthy Aging Study显示中、大颗粒HDL与细胞内胆固醇外流呈正相关；而MESA研究显示中、小颗粒HDL与颈动脉粥样硬化呈强的负相关。
尽管如此，胆固醇外流仍被作为RCT的临床干预靶点进行了临床研究。
早期的ApoA1 Milano研究显示促进ABCA1途径的细胞内胆固醇外流似乎具有抑制颈动脉斑块进展的作用，但最近更大规模CARTE研究显示，CER －001（一种人工合成的、促进ABCA1介导的细胞内胆固醇外流的前βHDL）在ACS患者经过为期9周的治疗，并没有促进冠状动脉斑块的逆转。
胆固醇代谢途径研究与相关疾病的关联分析
胆固醇代谢途径研究与相关疾病的关联分析胆固醇是一种重要的生物分子，它参与了多种生物体内的代谢过程。
胆固醇代谢途径研究的开展，有利于我们更好地了解胆固醇的生物学功能，并揭示与其相关的多种疾病的产生机理。
本文将从胆固醇生物学特性、胆固醇代谢途径、胆固醇与相关疾病的关联等角度进行阐述。
一、胆固醇生物学特性胆固醇是一种脂质类物质，它的化学结构具有典型的脂肪酸性质，即存在高度的亲疏水性。
另外，胆固醇分子中还存在一些特殊的化学基团，例如醇基、烯双键、羟基等，这些基团赋予了胆固醇一些独特的生物学功能。
从胆固醇的来源来看，人体内的胆固醇分为两种：一种是由肝脏合成的内源性胆固醇，另一种是摄入食物中的外源性胆固醇。
人体内的胆固醇主要以复合物的形式存在于血液循环中，而其释放和吸收由肝脏和肠道中一系列酶的协同作用所调控。
二、胆固醇代谢途径胆固醇代谢途径主要包括胆固醇合成、胆固醇转运、胆固醇内质网转运、胆汁酸合成和外泌体、脂蛋白代谢等方面。
1. 胆固醇合成胆固醇的合成主要在肝脏中进行。
其合成过程需要多种酶催化，包括HMG-CoA 还原酶、甾醇酰辅酶A去羧酶等，最终生成胆固醇酯并储存于肝脏内。
2. 胆固醇转运胆固醇的转运一般以脂蛋白为载体，包括低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HDL）等。
其中，LDL主要将胆固醇运到组织细胞中，而HDL则将胆固醇从组织细胞中收集并运回肝脏，促进其代谢和内泌。
3. 胆固醇内质网转运胆固醇的内质网转运主要受到Scap和SREBP的调控。
Scap是一种胆固醇结合蛋白，其结合胆固醇和Insig共同参与了SREBP 的转位和激活。
4. 胆汁酸合成和外泌体胆汁酸是肝细胞代谢胆固醇生成的重要产物，经由胆道排出体外。
在肝脏中，胆固醇转化成胆汁酸的过程包括谷氨酸胆汁酸循环、胆汁酸的生成、合成和代谢等复杂过程。
外泌体是一种小型囊泡，其内含有部分磷脂、蛋白质以及其他细胞内物质，是肿瘤等疾病快速进展的重要因素之一，而胆固醇代谢与外泌体的分泌也存在密切联系。
第二十章 胆固醇逆向转运研究方法
第二十章胆固醇逆向转运研究方法第一节胆固醇及胆固醇酯测定一、高效液相色谱分析细胞内胆固醇及胆固醇酯(一)胆固醇标准品配制称1.5g标准胆固醇溶于少许乙醇中，逐渐升温到2o°C，并把乙醇体积补满到150ml,标准胆固醇的工作浓度分别为0.129(50)、0.258(100)、0.516(200)、1.032(400)、2.064 (800)。
单位mmol/L(mg/L)。
4℃下储存备用。
(二)细胞内胆固醇及胆固醇酯的提取将每10ml细胞收集人带盖的10ml塑料管中，1500r/min、4℃离心15min、去上清，用1ml 0.9%Nacl溶液重新稀释细胞，冰浴中超声破碎细胞。
工作条件为600W,工作时间为4s，间隙时间为8s，定时次数为6次。
用Lowrry法测定蛋白含量。
在细胞溶解产物中加人等体积新鲜配制的15%醇溶性KOH(一20℃)，振荡至细胞溶解产物清亮，加人6%的三氯乙酸去蛋白，再加人等体积的正己烷：异丙醇溶液(4:1,V：V)，将混合物涡旋5min，然后1500r/min、15℃离心5min，收集上层有机相。
(三)高效液相色谱(high performa·ce liquid chromatogram,HPLC)分析采用Waters991型色谱系统，其中包括510泵、U-6K进样器、991型光电二极管矩阵监测器、TCM色谱恒温盒，采用Waters公司生产的Gen-PAK FAX柱，以异丙醇：正庚烷：乙腈(35:12:53,V：V：V)为流动相，进行非梯度洗脱，流速1ml/min，柱温保持4℃(加冰块)，紫外检测时间12min，检测波长为226nm.Gen-Pak FAX柱子在使用前用去离子水洗10min(流速0.5ml/min)以除去柱中的醇类物质。
(四)细胞内游离胆固醇及胆固醇酯定量1、游离胆固醇的定量胆固醇以峰面积定量，蛋白质用BCA法定量。
参照Pierce Chemical公司的BCA试剂盒说明书的方法进行。
胆固醇逆转运的新途径_胆固醇经肠道直接排出体外_司艳红
胆固醇逆转运的新途径： 胆固醇经肠道直接排出体外？
司艳红， 商战平， 秦树存*
（ 泰山医学院病理生理学教研室，山东 泰安 271000 ）
摘要 过多的胆固醇沉积在动脉壁对机体极为有害，可以引起动脉粥样硬化甚至心血管疾病． 而胆 固醇逆转运（ reverse cholesterol transport，RCT） 可 以 逆 转 此 过 程． 传 统 的 RCT 是 指 胆 固 醇 由 外 周 组 织转运回肝脏进行再循环或以胆汁酸的形式随粪便排出体外的过程 ，此过程受多种因子调控． 近几 年研究发现，胆固醇还可由血经过肠道直接分泌（ transintestinal cholesterol efflux，TICE） 通路随粪便 排出体外，此过程对外界刺激更敏感． RCT 已经成为防治动脉粥样硬化研究的新靶点，TICE 有可能 成为更有效的 RCT 调控通路． 关键词 胆固醇逆转运； 小肠； 动脉粥样硬化 中图分类号 R589. 2
ISSN 1007-7626 CN 11-3870 / Q
·综述·
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
胆固醇代谢途径研究论文素材
胆固醇代谢途径研究论文素材胆固醇是一种脂质类化合物，广泛存在于人体细胞中，对人体起着重要的生理功能。
然而，过高的胆固醇水平与多种心血管疾病的发生和发展密切相关。
因此，准确了解胆固醇的代谢途径对于预防和治疗这些疾病具有重要意义。
本文将围绕胆固醇代谢途径展开研究，呈现相关的素材。
1. 胆固醇的合成胆固醇的合成过程主要发生在肝脏细胞内的内质网中。
该过程涉及多个酶的参与，其中包括乙酰辅酶A羧化酶、羟甲戊二酸羧化酶等。
此外，胆固醇合成还受到胆固醇内源性调控因子的调节，例如胆固醇调节元件结合蛋白和SREBP等。
2. 胆固醇的转运胆固醇在体内的转运主要依赖于载脂蛋白的参与。
载脂蛋白B和载脂蛋白E被认为是胆固醇转运的主要参与者。
这些载脂蛋白通过与受体的结合，使胆固醇从细胞外被摄取，或者将多余的胆固醇转运至肝脏进行代谢和排泄。
3. 胆固醇的降解胆固醇的降解主要发生在肠道和肝脏中。
在肠道中，胆固醇与胆汁酸结合形成溶解的混合物，通过粪便排出体外。
在肝脏中，胆固醇可以通过胆囊排泄至肠道，也可以通过胆固醇酯化形成胆固醇酯储存在肝脏内。
4. 胆固醇代谢异常与疾病胆固醇代谢异常与多种疾病的发生相关。
例如，高胆固醇血症是导致动脉粥样硬化的主要危险因素之一。
此外，一些遗传性胆固醇代谢疾病，如家族性高胆固醇血症等，也会导致胆固醇水平异常升高，增加心血管疾病的风险。
5. 胆固醇代谢途径的药物干预针对胆固醇代谢途径，研发了许多药物用于调节胆固醇水平。
目前常用的药物包括他汀类药物、胆酸螯合剂等。
这些药物通过抑制胆固醇合成、促进胆固醇外排等机制，有效控制胆固醇水平，减少心血管疾病的发生风险。
结论胆固醇代谢途径的研究对于心血管疾病的预防和治疗具有重要意义。
从代谢途径的合成、转运、降解，到异常与疾病的关系，再到药物干预的策略，全面了解胆固醇代谢途径对于我们认识其生理功能和疾病机制有着重要的作用。
在未来的研究中，我们还需继续深入探索这一领域，以期能够更好地应用于临床实践，提高人们的健康水平。
ABCA1在胆固醇逆转运中作用的研究进展
ABCA1在胆固醇逆转运中作用的研究进展张晓菲;谭晓华;杨磊【期刊名称】《健康研究》【年(卷),期】2010(030)003【摘要】ATP结合盒转运蛋白A1(ATP-binding cassette transporterA1,ABCA1)是一种以ATP为能源进行物质转运的膜蛋白,胆固醇、磷脂等脂类物质是ABCA1的主要转运底物,胆固醇负荷、cAMP、PPAR等信号在调节ABCA1表达中有重要影响.ABCA1在胆固醇逆转运(reverse cholesterol transport,RCT)过程中与载脂蛋白结合参与高密度脂蛋白(high density lipoprotein,HDL)的形成,是RCT中的第一步也是关键的一步,也是该领域中研究的热点.【总页数】4页(P214-217)【作者】张晓菲;谭晓华;杨磊【作者单位】石河子大学,新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室,新疆,石河子,832002;杭州师范大学,医药卫生管理学院,浙江,杭州,310036;石河子大学,新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室,新疆,石河子,832002;杭州师范大学,医药卫生管理学院,浙江,杭州,310036【正文语种】中文【中图分类】R-34【相关文献】1.ABCA1和ABCG1在胆固醇逆转运中作用的研究进展 [J], 郭赟婧2.ATP结合ABCA1在动脉粥样硬化性疾病发生发展中的作用机制研究进展 [J], 邓倩; 李小雪; 方延廷; 高俊杰; 薛金贵3.清道夫B类Ⅰ型受体在胆固醇逆转运中作用及调节的研究进展 [J], 刘艾婷;吴洁4.MicroRNA在胆固醇逆转运中的调节作用 [J], 梁斌;蒋晓;边云飞;肖传实5.GDF11通过上调ABCA1表达促进小鼠体内胆固醇逆转运 [J], 汪雄;张玲;陶凌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响》
《苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响》一、引言动脉粥样硬化（AS）是一种常见的血管疾病，其发病机制复杂，与多种因素有关。
胆固醇代谢紊乱是动脉粥样硬化的重要因素之一。
近年来，天然药物的研究日益受到关注，苏木提取物作为一种具有潜在药用价值的天然产物，其对于动脉粥样硬化的治疗作用逐渐受到研究者的关注。
本文旨在研究苏木提取物对动脉粥样硬化模型大鼠胆固醇逆转运的影响，为苏木提取物的药理作用提供实验依据。
二、材料与方法1. 材料（1）苏木提取物：实验所用的苏木提取物经过合适的提取方法获得。
（2）动脉粥样硬化模型大鼠：选用合适品种和周龄的大鼠，建立动脉粥样硬化模型。
（3）实验试剂与仪器：包括生化检测试剂、离心机、酶标仪等。
2. 方法（1）动物分组与处理：将大鼠随机分为正常对照组、模型组、苏木提取物治疗组，苏木提取物治疗组根据不同剂量设亚组。
（2）建立动脉粥样硬化模型：通过饲养高脂饲料等方法建立动脉粥样硬化模型。
（3）苏木提取物干预：苏木提取物治疗组的大鼠给予苏木提取物灌胃，持续一定时间。
（4）指标检测：检测各组大鼠的血脂水平、胆固醇逆转运相关指标等。
三、实验结果1. 血脂水平变化实验结果显示，苏木提取物干预后，模型组大鼠的血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平显著降低，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平显著升高。
与模型组相比，苏木提取物治疗组的大鼠血脂水平改善更为明显。
2. 胆固醇逆转运相关指标变化苏木提取物干预后，模型组大鼠的胆固醇逆转运相关指标如ABCA1、ABCG1等基因表达水平有所提高，而苏木提取物治疗组的大鼠胆固醇逆转运相关指标的改善更为显著。
这表明苏木提取物能够促进胆固醇的逆转运过程。
3. 统计学分析数据采用SPSS软件进行统计分析，结果以均值±标准差表示。
组间比较采用t检验或方差分析。
P<0.05表示差异有统计学意义。
四、讨论本实验结果显示，苏木提取物能够显著降低动脉粥样硬化模型大鼠的血清TC、LDL-C水平，提高HDL-C水平，并促进胆固醇逆转运相关指标的改善。
名词解释 胆固醇的逆转运
名词解释胆固醇的逆转运胆固醇是我们常常听到的一个名词，它经常与健康相关联。
胆固醇是一种脂类物质，存在于我们的体内，同时也可以通过食物摄入。
但是，随着现代生活方式的变化和饮食结构的改变，许多人的胆固醇水平逐渐升高，成为威胁健康的主要因素之一。
然而，近年来的研究表明，胆固醇的逆转运在一定程度上可以降低胆固醇水平，提高人们的健康状况。
首先，我们需要了解什么是胆固醇。
胆固醇是一种脂质分子，是细胞膜的主要组成成分之一，也是一些重要激素和维生素的合成前体。
正常情况下，我们的身体可以通过自身调节维持胆固醇水平的平衡，但是过高的胆固醇水平会导致动脉硬化和心脑血管疾病的风险增加。
胆固醇的逆转运是指人体内的胆固醇从动脉壁组织回到肝脏的过程。
在正常情况下，人体通过肝脏将胆固醇转化为胆汁酸排出体外。
然而，当动脉中的胆固醇水平过高时，人体就会通过逆转运的方式将胆固醇从动脉壁运输回肝脏，以维持内环境的稳定。
胆固醇的逆转运是由一系列蛋白质参与的。
首先，一种叫做ATP结合盒转运蛋白A1（ABCA1）的蛋白质将胆固醇和磷脂结合成高密度脂蛋白（HDL）颗粒，HDL颗粒可以携带胆固醇从动脉壁带回肝脏。
同时，另一种蛋白质叫做转运蛋白G花生四烯酸1（ABCG1），它将细胞内的游离胆固醇转运到脂蛋白颗粒上。
最后，HDL颗粒上的胆固醇会被通过转运蛋白G1（SR-B1）转运至肝脏细胞内，进而转化为胆汁酸排出体外。
胆固醇的逆转运受许多因素的影响。
首先是基因因素，不同的人由于遗传基因的不同，胆固醇的逆转运能力也不同。
其次是饮食结构的影响，高脂肪饮食会使胆固醇水平升高，从而降低逆转运的效率。
此外，生活习惯也是很重要的影响因素，缺乏运动和长期的不良生活方式也会导致胆固醇的逆转运能力下降。
那么，在日常生活中，我们应该如何促进胆固醇的逆转运呢？首先，良好的饮食结构是关键。
多摄入富含纤维的食物，如水果、蔬菜、全谷类食物等，可以增加胆固醇的逆转运。
同时，减少饱和脂肪酸摄入，选择低脂肪的乳制品和瘦肉，对维持胆固醇的逆转运能力也非常有益。
胆固醇逆向转运与动脉粥样硬化的转基因动物研究进展
Ｇ） １ 、卵 磷脂 胆 固醇 酰基 转 移 酶 （ ｃｈｎ ｃｏｅｔ ｏ ａｙ １ ｉ ｉ：ｈｌｓ ｒｌ ｃｌ ｅｔ ｅ ｔ ｎｆ ，Ｃ Ｔ 、 固醇 酯转移 蛋 白 （ｈ ｌ ｔ ｏ ｅｔ ａ ｓ ｒ ｒ ｓ ｒＬ Ａ ）胆 ａ ｅ ｃ ｏ ｓ ｒｌ ｓ ｒｒｎｆ ｅｅ ｅｔ ｅ
中图分类号 ： ５３１２ Ｒ ４ ．＋ 文献标 识码 ： Ａ 文章 编号 ：１０ — ６ ８ ２ １ ） １ ０ ５ ～ ５ ０７ ９ ８ （０ ０ ０ — ０ ８ ０
肝外组织细胞内的胆固醇 ．通过血液循环转运到肝 ． 在
为它具 有潜在 的抗动脉 粥样硬 化作用 。对 Ａ Ｃ １过表达 ＢＡ 转基 因小 鼠的研究 表 明 ，增加 Ａ Ｃ 表达 可提高 血浆高 Ｂ Ａ１
腺苷结合 盒转运体 Ａ１Ｇ１ ａｅ ｏｉｈ ｓ ｉ ｉｇｃｓ ｔ ａ ｓｏ ｅ ／ １ Ａ Ｃ １ Ｇ１ 、 ／ （ｄｎｔｐ ｏ ｎ ｎ ａｓ ｔ ｔ ｎｐｒ ｒ ｒ ｂｄ ｅｅｒ ｔ Ａ１ Ｇ ， Ｂ Ａ ／ ） 卵磷脂 胆 固醇 酰基转 移 酶 （ ｃ ｈｎ ｅｏｅｔ ｏ ｃｌａｓ ｒＬ Ａ ） 胆 固醇酯转移 蛋 白（ｈ ｌ ｔｒｌ ｓ ｒｒｎｆ ｒ ｅ 。 Ｅ Ｐ 和 Ｂ类 Ｉ型 １ ｉ ｉ ：ｈｌｓ ｒｌ ｙ ｒｎｆ ， Ｃ Ｔ 、 ｅｔ ｅ ａ ｔ ｅ ｃｏ ｓ ｏ ｅｔ ａｓ ｒ ｏ ｉ Ｃ Ｔ ） ｅ ｅ ｅ ｔ ｅ ｐ ｔｎ
Ａ Ｃ 片 段 长 约 １９ｋ ， 含 ５ 外 显 子 和 ４ Ｂ Ａ１ ４ ｂ 包 ０个 ９个 内含 子 。
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５ ・ ８
ＳｕｈＣ ｉａＪｕｎｌ ｆＣ ｒｉｖｓｕａ ｉｅ ｅ， ｅｒａｙ２ １， ｏ １， ｏ ｔ ｈｎ ｒａ ｏ ａｄｏａｃｌｒ ｓａ ｓＦ ｂｕｒ ０ ０ Ｖ ｌ ６ Ｎｏ１ ｏ Ｄ ｓ
胆固醇逆向转运的研究进展及中医药干预
胆固醇逆向转运的研究进展及中医药干预何芷慧;江巍;李松【期刊名称】《中国中西医结合杂志》【年(卷),期】2013(33)11【摘要】胆固醇逆向转运（reversecholesteroltrans—port，RCT）是胆固醇从周围组织转运到肝脏进行再循环或以胆酸形式排出体外的过程，是机体清除多余胆固醇的重要生理途径。
若RCT受影响，血浆中含量过高的脂质沉积于动脉内膜则导致动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS），引发心脑血管疾病。
因此，药物干预RCT对于高脂血症及各种心脑血管病的治疗具有重要意义。
本文旨在总结RCT 药物新靶点及中药复方、中药提取物影响RCT过程的临床以及临床应用基础研究，探讨中医药干预RCT的有效性。
【总页数】5页(P1570-1574)【关键词】胆固醇逆向转运;中医药干预;致动脉粥样硬化;心脑血管疾病;药物干预;临床应用;RCT;心脑血管病【作者】何芷慧;江巍;李松【作者单位】广州中医药大学第二临床医学院;广东省中医院大学城分院心血管一科;广东省中医院芳村分院心血管科【正文语种】中文【中图分类】R589.2【相关文献】1.泡沫细胞胆固醇逆向转运机制及药物干预研究 [J], 吕湛;苟连平;陈玲;谢彬;秦俭2.lncRNAs对胆固醇逆向转运调控的研究进展 [J], 李孟奇;赵国军3.ApoE基因敲除小鼠HDL生成和胆固醇逆向转运相关基因的表达及辛伐他汀的干预作用 [J], 宋国华;刘佳;赵振美;于杨;秦树存4.小分子药物调控胆固醇逆向转运机制的研究进展 [J], 朱海波5.miRNA在胆固醇逆向转运中的作用研究进展 [J], 王鹏宇;田江天;冯玉宽;田进伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中医药干预胆固醇逆转运进行降脂的研究进展
Advances in Clinical Medicine 临床医学进展, 2023, 13(9), 15173-15180 Published Online September 2023 in Hans. https:///journal/acm https:///10.12677/acm.2023.1392122中医药干预胆固醇逆转运进行降脂的研究进展 马玉雪1，杨帅虎1，方诗剑1，杨蕊红1，牛雯颖2*1黑龙江中医药大学研究生院，黑龙江 哈尔滨2黑龙江中医药大学实验实训中心，黑龙江 哈尔滨收稿日期：2023年8月21日；录用日期：2023年9月15日；发布日期：2023年9月22日摘要 高脂血症是一种严重危害人类身体健康的代谢性疾病，当血液中脂质过多时会沉积在大中动脉内壁导致官腔狭窄形成堵塞，进而演变成动脉粥样硬化。
胆固醇逆转运可以将外周组织中多余胆固醇转运至肝脏进行降解，最终达到降脂效果。
而PPAR γ-LXR α-ABCA1通路在逆转运过程中起到了极大的作用。
研究表明从中药中提取的黄酮类、多酚类、生物碱类、多糖类、有机酸类、皂苷类等多种生物活性成分，以及多种中药可以通过胆固醇逆转运起到降脂的作用。
关键词高脂血症，动脉粥样硬化，中医药，胆固醇逆转运Research Progress on Lipid Reduction of Traditional Chinese Medicine Active Ingredients Based on Cholesterol ReversalYuxue Ma 1, Shuaihu Yang 1, Shijian Fang 1, Ruihong Yang 1, Wenying Niu 2*1Graduate School of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Harbin Heilongjiang 2Experimental Training Center of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine, Harbin Heilongjiang Received: Aug. 21st , 2023; accepted: Sep. 15th , 2023; published: Sep. 22nd , 2023AbstractHyperlipidemia is a metabolic disease that seriously endangers human health. When too much li-*通讯作者。
高密度脂蛋白与胆固醇逆转运
胆固醇逆转运过程详解
▪ 胆固醇逆转运的过程
1.胆固醇从外周细胞通过ABCA1/ABCG1转运到HDL颗粒中， 形成盘状HDL。 2.盘状HDL在血浆中被酯化酶修饰形成球状HDL，更加稳定并 能够更好地转运胆固醇。 3.球状HDL将胆固醇转运回肝脏，通过肝脏代谢和排泄，完成 胆固醇逆转运过程。
Байду номын сангаас
▪ 影响胆固醇逆转运的因素
▪ 改善高密度脂蛋白水平与心血管疾病风 险的干预措施
1.饮食、运动等生活方式干预可以提高高密度脂蛋白水平，降 低心血管疾病的风险。 2.目前已有一些药物（如CETP抑制剂）能够升高高密度脂蛋白 水平，并显示出对心血管疾病的保护作用。 3.未来仍需要更多研究以探索更有效、安全的改善高密度脂蛋 白水平的方法，以降低心血管疾病的风险。
▪ 高密度脂蛋白亚类与心血管疾病风险
1.高密度脂蛋白包含多种亚类，不同亚类在胆固醇逆转运中的效率不同，对心血管 疾病风险的影响也不同。 2.一些特定的高密度脂蛋白亚类可能更具保护作用，而其他亚类则可能无效或甚至 有害。 3.针对高密度脂蛋白亚类的研究有助于更精确地评估心血管疾病的风险，并为开发 新的治疗方法提供依据。
▪ 高密度脂蛋白与心血管疾病的风险
1.大量流行病学研究和临床试验表明，高密度脂蛋白水平升高 可以降低心血管疾病的风险。 2.高密度脂蛋白的水平是一个独立的预测心血管疾病的因素， 其预测价值独立于其他传统的心血管风险因素。 3.通过提高高密度脂蛋白水平来预防和治疗心血管疾病是当前 研究的热点之一，多种药物和治疗方法正在临床试验阶段。
▪ 身体活动
1.适度的身体活动可以提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。 2.有氧运动和力量训练都可以对高密度脂蛋白胆固醇产生积极 影响。 3.长期久坐的生活方式会导致高密度脂蛋白胆固醇水平的下降 。
荷脂细胞与胆固醇逆转运的研究进展
．
综 述 ．
荷脂 细 胞 与胆 固醇 逆转 运 的研 究 进 展
高夏 青 ， 李 艳芳
关键词 ： 泡沫细胞 ； 胆 固醇； 动 脉 粥样 硬 化 ； 巨噬 细 胞 ； 受体 ， 清 道 夫
动脉粥 样硬化 （ ａ ｔ ｈ ｅ ｒ ｏ ｓ ｃ ｌ ｅ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ ， ＡＳ ） 性 心 脑 血 管 疾 病 是
相关研究进展做一综述 。
１ 概 述
水孔道 ， 易于 胆 固 醇 由 ＨＤＬ转 运 至 细 胞 ｃ ３ ］ 。此外 ， Ｓ Ｒ － Ｂ Ｉ
还 能诱 导 细 胞 膜 上 的 游 离 胆 固醇 活 化 重 组 ， 使 其 更 容 易 经 膜 孔 扩散途径至细胞外 。
由 ＡＢ Ｃ Ａ１ 、 ＡＢ Ｃ Ｇｌ 介 导 的 游 离 胆 固 醇 流 出是 主 动 转 运
主动转运途径流 出， 其余 ３ Ｏ 经 膜孔 扩散 途 径 流 出 ］ 。 Ｓ Ｒ — ＢＩ介 导 的 细 胞 摄 取 和 排 出 胆 固 醇 属 于 易 化 扩 散 。
Ｓ Ｒ — ＢＩ是 位 于 细 胞 膜 上 的 同 源 低 聚 糖 蛋 白 ， 属 于 清 道 夫 受
导 致 人 类 死 亡 的 主 要 原 因 。 动 脉 血 管 壁 的 粥 样 斑 块 是 ＡＳ
表 达 较 多 。其 细 胞 外 区 域 能 够 识 别 并 结 合 ＨＤ Ｉ 中 载 脂 蛋
细 胞 内 胆 固醇 转 运 到 细 胞 外 ， 减 轻 粥 样 斑 块 负 荷 是 近 年 国 内
外 抗 ＡＳ研 究 的 热 点 。我 们 就 近 年 来 荷 脂 细 胞 的 形 成 、 胆 固
出、 胆 固醇 的酯 化 以 及 清 除 。狭 义 的 Ｒ Ｃ Ｔ 仅 指 胆 固 醇 从 细
同型半胱氨酸与胆固醇逆转运的研究进展
DOI ：10.11655/zgywylc2018.11.023基金项目：山西省自然科学基金（2014011040-3）作者单位：030001太原,山西医科大学第二医院心内科通信作者：高奋，Email:gao55555@·综述·同型半胱氨酸与胆固醇逆转运的研究进展代佩高奋胆固醇逆转运（RCT ）是机体将外周组织多余的胆固醇经高密度脂蛋白胆固醇（HDL ）携带、转运至肝脏合成甾体激素或代谢成胆汁酸排出体外的过程［1］。
动脉粥样硬化（AS ）是冠心病发生的病理机制，在AS 的早、晚期阶段，细胞外内皮聚集大量的未脂化的胆固醇主要以HDL 为载体通过RCT 排出体外［2］。
同型半胱氨酸（Hcy ）可以通过：①炎症反应与氧化应激；②损伤血管内皮细胞；③影响凝血功能，导致血栓形成；④促进平滑肌细胞增生；⑤影响体内脂质代谢；⑥甲基化反应等导致AS 病变。
本文章主要综述Hcy 与RCT 的相关性，及从分子水平探讨两者的相关性，报告如下。
1胆固醇逆转运（RCT ）的过程三磷酸腺苷结盒转运体（ABCA1）负责的胆固醇流出是RCT 的第一步，并且高密度脂蛋白磷脂（HDL-PL ）是衡量胆固醇流出能力的主要因子之一［3］。
RCT 的具体过程是细胞内的胆固醇通过细胞表面ATP ，ABCA1转运至贫酯载脂蛋白A1（Apo⁃1）形成新生盘状的富含游离胆固醇的高密度脂蛋白，即不成熟的小颗粒HDL （HDL3a 、HDL3b 、HDL3c ），随后在卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT ）和脂蛋白脂肪酶（CETP ）作用将不成熟的HDL 酯化成成熟的HDL 即大颗粒的HDL （HDL2a 和HDL2b ），成熟的HDL 与清道夫受体⁃B1（SR⁃B1）结合后在肝脏进一步代谢成胆汁酸排出体外，而三磷酸腺苷结盒转运体G1（ABCG1）直接将细胞内胆固醇转运至成熟HDL 进行代谢。
在胆固醇逆转运中ABCA1主要负责胆固醇的流出，而ABCG1主要将胆固醇转运至成熟的HDL 。
胆汁途径与非胆汁途径胆固醇逆向转运研究新进展
胆汁途径与非胆汁途径胆固醇逆向转运研究新进展
王甲林;唐艳艳;吴洁;唐朝克
【期刊名称】《生理科学进展》
【年(卷),期】2013(044)002
【摘要】血浆中胆固醇水平升高是引起动脉粥样硬化(AS)及冠心病的主要危险因素.胆汁途径胆固醇逆向转运(RCT)是指外周组织以及巨噬细胞内胆固醇经脂蛋白运输到肝脏,以胆汁形式分泌,并最终通过粪便排出体外的过程.大量研究显示,除胆汁途径RCT之外,还存在非胆汁途径RCT来清除体内过多胆固醇,从而维持体内胆固醇的动态平衡.本文针对不同途径RCT以及各相关转运体、脂蛋白、受体等对RCT 调节的最新进展做一综述,以期为胆石症和AS相关疾病的治疗提供新的理论依据和作用靶点.
【总页数】6页(P105-110)
【作者】王甲林;唐艳艳;吴洁;唐朝克
【作者单位】南华大学心血管疾病研究所,动脉硬化学湖南省重点实验室,生命科学研究中心,衡阳,421001
【正文语种】中文
【中图分类】R363
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普罗布考促进小鼠体内胆固醇逆转运的研究
普罗布考促进小鼠体内胆固醇逆转运的研究倪占玲;赵水平;董静;吴智宏;洪绍彩【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2007(23)11【摘要】目的检测普罗布考干预后小鼠血清脂质,血清、肝脏及粪便中3H-胆固醇占经腹腔注射3H-胆固醇总量的百分比,探讨普罗布考对小鼠体内胆固醇逆转运的影响.方法 32只C57BL/6小鼠随机分为4组,给予不同剂量普罗布考(0,0.1%,0.5%,1% W/W)添加饲料饲养4 wk后,腹腔注射经ac-LDL及3H-胆固醇处理过的RAW 264.7小鼠巨噬细胞悬液(0.5 ml/鼠,细胞数达5.0×106,放射活性达6.2×106 cpm),单笼喂养24 h后取血,酶法测定血清脂质;收集血清、肝组织、0～24 h粪便,分别用液闪计数仪测定3H-胆固醇含量(均以占注射总量百分比计);结果 0.1%普罗布考干预4 wk后总胆固醇(TC)较对照组降低34.3%,52.8%,(P＜0.01),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及甘油三酯(TG)降低20%,22%,(P＜0.05);0.5%和1%普罗布考降低TC,HDL-C 47%,55%,(P＜0.01);降低LDL-C和TG为32%,30%,(P＜0.05).腹腔注射巨噬细胞悬液24 h后血清中3H-胆固醇含量呈剂量依赖性轻度降低,而肝脏和粪便中3H-胆固醇含量呈剂量依赖性明显升高,分别为20%～48%(P＜0.05)和20%～84%(P＜0.01).结论普罗布考虽然降低HDI-C血浆水平,但是明显促进胆固醇的逆转运,加速了胆固醇经粪便的清除,利于动脉粥样硬化的防治.【总页数】4页(P1444-1447)【作者】倪占玲;赵水平;董静;吴智宏;洪绍彩【作者单位】河南省人民医院,河南,郑州,450003;中南大学湘雅二医院心内科,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院心内科,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院心内科,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院心内科,湖南,长沙,410011;中南大学湘雅二医院心内科,湖南,长沙,410011【正文语种】中文【中图分类】R-332;R344.81;R466.11;R446.13;R446.8;R543.505.3【相关文献】1.烟酸促进小鼠体内胆固醇逆转运 [J], 赵水平;董静;倪占玲;吴志鸿2.普罗布考对小鼠体内巨噬细胞胆固醇逆转运的影响及其作用机制 [J], 王丽霞;黄彦生;罗萍;倪占玲;段红艳;杨海涛;许先静3.miR-125b-5p促进分枝杆菌在宿主细胞和小鼠体内存活的研究 [J], 黄桂贤; 梁珊珊; 彭影; 沈洪波; 王菲菲; 徐军发4.Slug敲除促进γ-射线照射小鼠肠上皮细胞损伤的体内研究 [J], 李鹏; 朱庆丽; 宁亮; 焦学龙; 陈栋; 宫兴基; 贺东勇5.GDF11通过上调ABCA1表达促进小鼠体内胆固醇逆转运 [J], 汪雄;张玲;陶凌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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第二十章胆固醇逆向转运研究方法第一节胆固醇及胆固醇酯测定一、高效液相色谱分析细胞内胆固醇及胆固醇酯(一)胆固醇标准品配制称1.5g标准胆固醇溶于少许乙醇中，逐渐升温到2o°C，并把乙醇体积补满到150ml,标准胆固醇的工作浓度分别为0.129(50)、0.258(100)、0.516(200)、1.032(400)、2.064 (800)。
单位mmol/L(mg/L)。
4℃下储存备用。
(二)细胞内胆固醇及胆固醇酯的提取将每10ml细胞收集人带盖的10ml塑料管中，1500r/min、4℃离心15min、去上清，用1ml 0.9%Nacl溶液重新稀释细胞，冰浴中超声破碎细胞。
工作条件为600W,工作时间为4s，间隙时间为8s，定时次数为6次。
用Lowrry法测定蛋白含量。
在细胞溶解产物中加人等体积新鲜配制的15%醇溶性KOH(一20℃)，振荡至细胞溶解产物清亮，加人6%的三氯乙酸去蛋白，再加人等体积的正己烷：异丙醇溶液(4:1,V：V)，将混合物涡旋5min，然后1500r/min、15℃离心5min，收集上层有机相。
(三)高效液相色谱(high performa·ce liquid chromatogram,HPLC)分析采用Waters991型色谱系统，其中包括510泵、U-6K进样器、991型光电二极管矩阵监测器、TCM色谱恒温盒，采用Waters公司生产的Gen-PAK FAX柱，以异丙醇：正庚烷：乙腈(35:12:53,V：V：V)为流动相，进行非梯度洗脱，流速1ml/min，柱温保持4℃(加冰块)，紫外检测时间12min，检测波长为226nm.Gen-Pak FAX柱子在使用前用去离子水洗10min(流速0.5ml/min)以除去柱中的醇类物质。
(四)细胞内游离胆固醇及胆固醇酯定量1、游离胆固醇的定量胆固醇以峰面积定量，蛋白质用BCA法定量。
参照Pierce Chemical公司的BCA试剂盒说明书的方法进行。
按A ：B=50 ：1的比例配置显色工作液。
以牛血清蛋白(BSA)为标准，并以标准蛋白的吸光值作标准曲线。
取11支洁净的试管，分别标好1～11,1号为空白管，2～6号为标准蛋白管，7～11号为待测蛋白管。
空白管中加入1ml AB显色工作液，1ml蒸馏水，2～6号管分别按顺序加人浓度为31.25、62.5、125、250、500µg/ml的标准蛋白0.1ml，分别加入AB 显色工作液0.9ml，蒸馏水1ml，7、8、9、10、11号管为待测样品，各测定管分别加入待测蛋白0.1ml,AB显色工作液0.9ml，蒸馏水1ml，混匀，37℃水浴30min，室温放置，以蒸馏水为空白管调零，在波长562nm下，测各管的OD值。
2、胆固醇酯的定量以胆固醇酯酶(cholesterol esterase,CEase)水解，以HPLC测定总胆固醇(total cholesterol,TC)，以总胆固醇减去游离胆固醇(free cholesterol,FC)代表胆固醇酯(cholesteryl ester,CE)的量，以mg/g细胞蛋白为单位。
3、胆固醇峰鉴定(1)保留时间：通过比较标准胆固醇出峰时间与样品中各峰的出峰时间，与胆固醇标准的保留时间接近的峰即可能是胆固醇峰。
(2)外标法：首先进一针样品，记录其色谱图，接着用相同样品量与相当量胆固醇标准混合进针一次，记录其色谱图，样品中加标准胆固醇液色谱图中明显升高的峰就可能是胆固醇峰。
(3)内标法：待细胞处理结束后，弃培养基，PBS洗3次，加人细胞裂解液500µl，反复冻融3次裂解细胞，BCA法定量蛋白后，7.2%三氯乙酸沉淀蛋白，800g离心10min，取上清进行胆固醇检测，以豆甾醇为内标。
取100µl上清液加入8.9mol/L，醇溶性氢氧化钾溶液400µl，水解30min后使胆固醇酯为胆固醇。
各待测样品分别与内标混匀，用正己烷和无水乙醇抽提后，1.5mol/L三氧化铬氧化衍生30min后，真空干燥，200µl乙腈：异丙醇(80 ：20)溶解样品，进样进行高效液相色谱分析，采用C18柱，柱温4℃，流速1ml/min，检测波长250nm，胆固醇以峰面积定量，内标校准，计算值以蛋白含量校正（µg/g蛋白)。
(4)光谱分析法：把样品中各峰的光谱图形与标准胆固醇的光谱图形进行比较，与标准胆固醇光谱图形相同的就是样品中胆固醇峰。
(5) L-B(Liberman-Burchard)反应法：收集样品中各峰，并浓缩，然后用L-B 法直接显色。
具体操作如下：取10ml试管一支，往其中加人0.2ml样品、0.5ml 冰醋酸和5.0ml乙酸酐，于振荡器上剧烈振荡混匀，5min后1500g离心5min，吸取上清液4.0ml于25℃水浴5min，最后加0.2ml浓硫酸显色，在630nm处比色，测定光密度值。
注意以上几种方法常联合起来进行分析。
(五)高效液相色谱测定细胞内胆固醇及胆固醇酯的特点1、测定泡沫细胞内胆固醇和胆固醇酯的重要性泡沫细胞(foam cell) 的形成是动脉粥样硬化形成的始动步骤，研究泡沫化过程是探索动脉粥样硬化防治的一条重要途径。
泡沫细胞的形成是由于细胞内胆固醇酯的积累而引起的，而泡沫细胞的细胞学定义为细胞内胆固醇酯占总胆固醇的50%以上，因而，研究泡沫化过程的一个重要方面就是要求准确地测定胆固醇与总胆固醇的比值。
通过测定U937细胞内胆固醇酯与总胆固醇，能找到一种判断泡沫细胞与非泡沫细胞而较为精确实用的方法。
2、高效液相色谱测定的特点高效液相色谱具有适于微量分析的特点，近年来国内外很多学者基本上不采用化学显色法测定胆固醇(胆固醇酯)，而采用高效液相色谱的方法，如董军等采用高效液相色谱法分析人胎肝细胞培养基中7-酮基胆固醇。
采用高效液相色谱测血清中胆固醇及胞内胆固醇(胆固醇酯)测定要求较高。
最近，国外学者采用HPLC分析胞内胆固醇，但在细胞内有些胆固醇酯种类尚未搞清楚的情况下，没有标准品，因而，尚不能单独依靠HPLC法来对胆固醇酯进行精确定量。
因此在对U937单核细胞株泡沫化前后胞内胆固醇(酯)分析时，采用适于用核酸分离的Gen-PAX分离柱，能较为直观地看出ox-LDL处理48h的U937细胞内胆固醇酯含量明显高于对照组细胞内的胆固醇酯的含量，并且其胆固醇酯与总胆固醇的比值大于50%，符合泡沫细胞的定义(这种处理的U937细胞以通过细胞形态鉴定，油红O染色可见胞浆有许多细小的红染脂质颗粒，电镜下胞浆中可见大小不一的融合脂滴)，故可以认为处理组细胞为泡沫细胞。
采用异硫氰酸苯酯衍生法和苯甲酰氯衍生法虽能对胆固醇较好定量，但对胆固醇酯也同样不好单独定量。
采用高效液相色谱虽具有很多优点，但在操作时仍有很多值得注意的地方。
其中之一是色谱柱的选择，一般来说，三种常规柱子(分子筛、反相、离子交换)中以反相柱分辨率最高，但由于胆固醇(酯)本身疏水性较强，如采用C18填料反相柱，即使采用非极性较强的洗脱剂(如正庚烷：异丙醇：乙腈)，胆固醇根本就无法从柱子上洗下来，如再采用非极性更高的洗脱剂，则黏度太大，压力太高，造成分辨率低。
有些非极性试剂即使可以把胆固醇(酯)洗下来，但表现出是一种非特异性洗脱，故在HPLC分析胆固醇(酯)时采用疏水性较弱的柱子，Waters公司生产的Gen-PAX柱，是在以硅胶作填料的基础上，在硅醇基上接上多聚碱基的阴离子材料，这种型号的柱子填料的碱基既具有部分疏水性，又具有部分阴离子交换的性质。
另外，我们采用真空冷冻干燥的浓缩方法，进一步提高了该方法的灵敏度。
通过图20-1中“A”图与“B”图的比较，可见处理组细胞与非处理组细胞之间不但胆固醇酯与总胆固醇之比存在差异，其胆固醇酯的种类及不同胆固醇酯含量的多少都有可能存在差别。
即有些种类的胆固醇酯可能在非泡沫细胞中原来没有，而是在泡沫化过程中形成的；有些胆固醇酯种类也可能在泡沫化过程中丢失；有些则在泡沫化之前含量很少。
而在泡沫化过程中合成急剧增加；有些则在泡沫化前后无多大变化；有些则可能在泡沫化之前含量较多，而在泡沫化过程中含量较少。
如能搞清楚以上所述这些胆固醇酯的变化，无疑有利于加深我们对泡沫化过程的了解。
二、细胞内胆固醇测定其他方法(一)化学法直接皂化-硫酸铁铵比色法快速测定样品中的胆固醇：准确称取充分混匀的样品约0.20g于50ml具塞比色管中，加入2.0mol/L的K0H-乙醇溶液5.0ml，振荡混匀，置65°C水浴中皂化30min(每隔5min振摇1次)后取出，经流水冷却，加入饱和氯化钠溶液2.0ml后再加入石油醚20.0ml，旋涡混匀后离心分离，吸取上清液1.0ml于25ml具塞比色管中，再于65°C水浴中通氮气吹干，加入4.0ml 冰醋酸溶解残渣、加入2.0ml硫酸铁铵显色剂，混匀，10min后在分光光度计560nm 波长处比色测定。
按测得的吸光度在标准曲线上査得相应的胆固醇含量。
硫酸铁铵储备液：溶解4.463g硫酸铁铵于100ml 85%磷酸中。
硫酸铁铵显色剂；10ml硫酸铁铵储备液用浓硫酸稀释至100ml，将此液放置在硅胶干燥器中备用。
胆固醇标准液(1.0mg/m1)：准确称取胆固醇l00mg，溶于冰醋酸中，并稀释至100ml。
胆固醇标准使用液(0.10mg/ml)取胆固醇标准储备液10.0ml，用乙酸稀释至100ml.(二)生物法1、酶法(1)原理：以胆固醇酯酶(CEH)水解血清中的胆固醇酯(CE)，同时以胆固醇氧化酶(CHOD) 将胆固醇(chol)氧化成胆甾烯酮和过氧化氢(H2O2)的方法。
终点产物的测定有△4胆甾烯酮分光光度法及测H2O2的方法，其中应用最广的是用Trinder 显色反应系统，试剂含过氧化酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)和酚，三者合称PAP,目前，国内胆固醇试剂盒都用这种方法。
CEHCE十H2O—→chol十脂肪酸Chol十O2——→△4胆甾烯酮十H2O2PDOH2O2十4AAP十酚—→醌亚胺染料十4H2O红色醌亚胺的最大吸收波长为500nm，由于吸收峰平坦，波长470～550nm 均可用，为了减少胆红素与血红蛋白的干扰，可用520nm比色。
(2)试剂及纯度CEH (EC3.1.1.13)：来源于假单胞菌属等微生物，杂酶中葡萄糖氧化酶与尿酸酶应小于0.01%，不含过氧化氢酶，比活约100U/mg酶蛋白(25°C，chol油酸酯为底物)。
CHAD (EC1.1.3.6)：来源于诺卡菌等微生物，杂酶中葡萄糖氧化酶与尿酸酶应小于0.01%，不含过氧化氢酶，比活约45U/mg酶蛋白(37°C，chol为底物)。