临床微生物学肺炎链球菌检验PPT课件
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微生物链球菌ppt演示课件
.
9
第二节 链球菌属
• 链球菌抗原构造模式图
荚膜
蛋白质Ag 多糖Ag
肽聚糖 .
核蛋白Ag
10
第二节 链球菌属
•抵抗力
抵抗力不高 不耐热，55℃灭活 对常用消毒剂及抗 生素敏感
.
11
第二节 链球菌属
二、致病性
致病物质
1、细菌胞壁成分
（是细菌侵入机体并在体内定居的首要条件）
①黏附素：包括脂磷壁酸(LTA)、F蛋白
β-溶血
.
4
甲链
丙链 乙链
.
5
第二节 链球菌属
2、根据抗原结构不同分类
根据C多糖抗原不同分20群（其中致病菌株多 属于A群）
各群之间，又按蛋白质抗原不同，分若干 型。如A群—— 分M、T、R…等约150个型
B群——分 4型 C群——分13型
.
6
第二节 链球菌属
A群链球菌
• 一、生物学性状
• 形态与染色 G+ 球菌，链状排列 无鞭毛、芽胞 培养早期可有荚膜。
.
41
.
27
油镜 ×1000
.
28
肺炎链球菌
Gram’s染色镜检图
.
29
扫描电镜
.
30
电镜
.
31
• 培养特征– 营养要求高，血平板上生长
菌落周围α-溶血，与甲链相似
肺炎球菌与甲型链球菌区别--胆汁溶菌
试验、菌落中间下陷（自溶）
.
32
脐样凹陷 . 18-24h
33
胆汁溶解试验
.
34
致病物质
第三节 肺炎链球菌
抗体（ASO）
抗体在体内存在数月至1年
临床微生物学检验：链球菌属
26
肺炎链球菌脐窝状菌落（培养48h后）
27
肺炎链球菌粘液样菌落 28
3.生化反应
• 分解葡萄糖，产酸不产气。 • 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别
甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。 • 触酶（-），与葡萄球菌不同。
•肺炎链球菌： 分解葡萄糖、乳糖和菊糖，胆汁可溶菌， Optochin敏感，触酶（-）
45
小结
• 链球菌属细菌种类多，其中某些菌种为毒力强的 致病菌。分类较为复杂，临床分离株仍以传统的 血平板上溶血现象、菌落特点和Lancefield抗原 血清分型，结合生化反应进行鉴定。
• 肺炎链球菌：革兰阳性双球菌，有荚膜，脐窝样 菌落、OP（+）、胆汁溶菌（+）
• A群链球菌：镜下特点、菌落特点、杆菌肽、血清 试验
42
链球菌微生物检验程序
涂片染色 G+球菌，触酶（-）
43
五、药敏试验药物选择
β溶血链球菌 肺炎链球菌 草绿色链球菌
药敏时药物选择不同
首选青霉素和氨苄西林
44
预防分娩妇女B群链球菌感染：
①推荐使用青霉素和氨苄西林。 ②低危险性青霉素过敏者，推荐头孢唑林。 ③高危险性青霉素过敏者推荐克林霉素或红霉素
41
血清学检查
抗O试验（ASO test）： 链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生
相应抗体ASO(血清），加入SLO乳胶试剂，SLO 抗体(ASO)与乳胶试剂(吸附有SLO)反应，产生 凝集，为阳性；无凝集，为阴性。
–原理：中和试验，用SLO检测血清中的ASO –方法：间接凝集 –结果：效价大于400单位 –意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断
16
急性肾小球肾炎的临床表现：水肿、 血尿、蛋白尿等。
肺炎链球菌脐窝状菌落（培养48h后）
27
肺炎链球菌粘液样菌落 28
3.生化反应
• 分解葡萄糖，产酸不产气。 • 一般不分解菊糖，不被胆汁溶解（鉴别
甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。 • 触酶（-），与葡萄球菌不同。
•肺炎链球菌： 分解葡萄糖、乳糖和菊糖，胆汁可溶菌， Optochin敏感，触酶（-）
45
小结
• 链球菌属细菌种类多，其中某些菌种为毒力强的 致病菌。分类较为复杂，临床分离株仍以传统的 血平板上溶血现象、菌落特点和Lancefield抗原 血清分型，结合生化反应进行鉴定。
• 肺炎链球菌：革兰阳性双球菌，有荚膜，脐窝样 菌落、OP（+）、胆汁溶菌（+）
• A群链球菌：镜下特点、菌落特点、杆菌肽、血清 试验
42
链球菌微生物检验程序
涂片染色 G+球菌，触酶（-）
43
五、药敏试验药物选择
β溶血链球菌 肺炎链球菌 草绿色链球菌
药敏时药物选择不同
首选青霉素和氨苄西林
44
预防分娩妇女B群链球菌感染：
①推荐使用青霉素和氨苄西林。 ②低危险性青霉素过敏者，推荐头孢唑林。 ③高危险性青霉素过敏者推荐克林霉素或红霉素
41
血清学检查
抗O试验（ASO test）： 链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生
相应抗体ASO(血清），加入SLO乳胶试剂，SLO 抗体(ASO)与乳胶试剂(吸附有SLO)反应，产生 凝集，为阳性；无凝集，为阴性。
–原理：中和试验，用SLO检测血清中的ASO –方法：间接凝集 –结果：效价大于400单位 –意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断
16
急性肾小球肾炎的临床表现：水肿、 血尿、蛋白尿等。
医学检验微生物ppt课件完整版x
个人防护措施及注意事项说明
实验服与护目镜
进入实验室需穿着实验服，佩戴合适的护目镜， 防止试剂飞溅或粉尘刺激。
手套与口罩
根据实验需要选择合适的手套和口罩，避免皮肤 接触有害试剂或吸入有害气体。
实验操作规范
规范实验操作，避免产生气溶胶或飞溅物，减少 交叉污染的风险。
实验废弃物处理及环保要求讲解
废弃物分类处理
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目录
• 微生物学基础 • 医学微生物学概述 • 常见病原微生物介绍 • 微生物检验技术与方法 • 临床标本中常见病原微生物检测实例分析 • 实验室安全与防护措施
01 微生物学基础
微生物定义与分类
微生物定义
微生物是一类形体微小、结构简单、 必须借助光学显微镜或电子显微镜 才能看到的微小生物。
微生物生长与繁殖
01
微生物营养
微生物从外界环境中摄取和利用营养物质的过程称为营养。微生物营养
类型有光能自养型、光能异养型、化能自养型和化能异养型四类。
02 03
微生物生长
微生物在适宜的环境条件下，通过摄取营养物质、合成细胞物质、增加 细胞数量的过程称为生长。生长曲线可分为迟缓期、对数期、稳定期和 衰亡期四个时期。
通过对微生物基因组进行测序和 分析，了解其基因组成和功能， 为微生物的鉴定和分型提供准确
依据。
基因芯片技术
将大量特异性基因探针固定在芯 片上，通过与待测微生物DNA杂
交来鉴定其种类和型别。
宏基因组学技术
通过对环境中所有微生物的基因 组进行高通量测序和分析，了解 微生物群落的组成和功能，为环 境微生物检测和生态学研究提供
尿液标本中常见病原微生物检测实例分析
尿常规检查
临床微生物标本处理及操作流程PPT
鉴定&药敏
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛；重新采集清 洁标本
1-2种机会致病菌（查阅凝固酶阴性葡萄球菌的以上相同注释
多种肠道细菌或混杂的皮肤菌丛； 重新采集清洁标本.
进行鉴定和药敏，若数量< 104CFU/ml， 仍然对可能的致病菌进行操作
若为腐生葡萄球菌， 则处理与其他致病菌相同； 其他的凝固酶阴性葡萄球菌则视为污 染
1.
在孕期35～37周时的普查培养
a. b. c. d. 阴道和直肠拭子 肉汤过夜增菌 接种于血平板上 再孵育过夜和鉴定可疑菌落
2. 3.
任何有GBS菌尿的患者需要在分娩期做好预 防 分娩时快速检测敏感性不够
男性生殖道标本送检
男性的生殖道致病菌与女性绝大部分一致； 尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起； 可能并发于生殖器溃疡；
血培养 Blood Culture
严格无菌操作
soap
脑脊液
CEREBROSPINAL FLUID
无菌操作，腰椎穿刺采样
最少1 mL，最好>5 mL
打入3个小管中，以第二根小管送检培养 分枝杆菌培养标本需要2 mL以上，置于4℃保存 即时送检 绝对不能冷藏！
如何看待CSF的培养结果？
上呼吸道标本
Upper Respiratory Tract Specimens
下呼吸道标本
Lower Respiratory Tract Specimens
下呼吸道感染
Lower Respiratory Tract Infections
急性支气管炎
社区获得性肺炎 院内获得性肺炎 免疫妥协患者肺炎
吸入性肺炎标本革兰氏染色的典型形式，培养只 会培养出正常菌群，所以革兰氏染色是用于诊断 的方法。 成双革兰氏阳性球菌，短链=肺炎链球菌 革兰氏阳性菌成群排列=金黄色葡萄球菌 革兰氏阴性球杆菌（小）=流感嗜血杆菌 革兰氏阴性杆菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他 肠道菌 革兰氏阴性双球菌=卡他莫拉菌 可能是肺结核，抗酸杆菌不能被革兰氏染色所染 色。
球菌的培养和鉴定实验课件
复习思考题
1. 致病性球菌的鉴定流程？ 2. 葡萄球菌属和链球菌属的细菌染色和形态
区别？
临床微生物学教研室
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
临床微生物学教研室
临床微生物学和微生物检验 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
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临床微生物学和微生物检验 文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
实验三 球菌的培养和鉴定III
教 员： 顾 江 单 位： 临床微生物学教研室 E-mail: jianggu2012@
实验内容三 生化反应鉴定
1.触酶试验 【原理】 H2O2 过氧化氢酶 H2O + O2 【操作】取洁净玻片一张，滴加3％ H202一滴，以接种环分别
取待检细菌培养物少许，在H202中磨匀，立即观察结果
【结果】阳性为半分种内产生大量气泡。葡萄球菌为阳性，链 球菌为阴性。
【意义】 触酶试验可区分葡萄球菌和链球菌。
甲型链球菌为阴性。
【意义】
胆汁溶菌试验可用以区分甲型链球菌和
肺炎链球菌
临床微生物学教研室
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实验内容三 生化反应鉴定
【注意事项】
▪ 无菌操作 ▪ 挑取细菌培养平板上的单个菌落进行生化鉴定。
临床微生物学教研室
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❖掌握：
1.葡萄球菌属、链球菌属的检验程序 2.葡萄球菌属、链球菌属的分离培养与鉴定方法
1. 致病性球菌的鉴定流程？ 2. 葡萄球菌属和链球菌属的细菌染色和形态
区别？
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实验三 球菌的培养和鉴定III
教 员： 顾 江 单 位： 临床微生物学教研室 E-mail: jianggu2012@
实验内容三 生化反应鉴定
1.触酶试验 【原理】 H2O2 过氧化氢酶 H2O + O2 【操作】取洁净玻片一张，滴加3％ H202一滴，以接种环分别
取待检细菌培养物少许，在H202中磨匀，立即观察结果
【结果】阳性为半分种内产生大量气泡。葡萄球菌为阳性，链 球菌为阴性。
【意义】 触酶试验可区分葡萄球菌和链球菌。
甲型链球菌为阴性。
【意义】
胆汁溶菌试验可用以区分甲型链球菌和
肺炎链球菌
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实验内容三 生化反应鉴定
【注意事项】
▪ 无菌操作 ▪ 挑取细菌培养平板上的单个菌落进行生化鉴定。
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❖掌握：
1.葡萄球菌属、链球菌属的检验程序 2.葡萄球菌属、链球菌属的分离培养与鉴定方法
临床微生物学下呼吸道感染细菌学检验操作规范_【PPT课件】
2006.4
呼吸道感染细菌学检验操作规范
15
2.一般细菌培养
❖ （1）一般细菌培养应同时划区接种： 1）血平板 适用于分离肺炎链球菌和其他细菌。 2）加抗生素的巧克力平板 适用于分离嗜血杆菌。 3）麦康凯/中国兰平板 适用于分离革兰阴性杆菌。
（2）分离培养 血平板和巧克力平板需置5%CO2环 境，麦康凯平板/中国兰平板，35℃孵育。
2006.4
呼吸道感染细菌学检验操作规范
10
❖ 4. 标本涂片白细胞和鳞状上皮细胞计 数：白细胞数＜10/低倍镜和鳞状上皮细 胞数＞25/低倍镜，表示该标本已污染正 常菌群，建议重送标本。
5. 标本容器必须符合规定，溢漏、无 盖者拒收。
6. 送检时间超过2h拒收。 7. 同时同部位或同一天两份相同检测 的标本（应与申请医师协商处理）。
2006.4
呼吸道感染细菌学检验操作规范
2
❖ 社区获得性肺炎常见的病原菌有肺炎链 球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、 卡他莫拉菌、肺炎克雷伯菌、军团菌、 肺炎支原体及肺炎衣原体等。医院获得 性肺炎常见的病原菌有铜绿假单胞菌、 大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、克雷伯菌、 鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和假丝 酵母菌等。
❖ 遇有不合格标本，应及时与临床联系，报告 不合格标本拒收的具体理由。下呼吸道标本 验收与拒收见下。
1. 呼吸道有大量的正常菌群存在，咽试子、 咳痰、吸出的分泌物厌氧菌培养无意义。
2. 申请单填写应完整。标本标识必须唯一， 并与申请单相符，未标采集时间、部位或检 验
呼吸道感染细菌学检验操作规范
14
（三）分离培养
❖ 1．痰标本培养前处理 不含或含粘液很少的 合格标本，可直接接种，遇有含大量粘液的 标本，应加入等量的液化剂（如pH7.6的 10g/L胰酶溶液等），放置35℃待充分液化 再行接种。亦可加液化剂后用旋转混匀器搅 拌混匀，3000r/min离心10min弃上清液，取 沉淀物接种培养基。
链球菌属ppt课件
对氧的需要分类分为：
需氧、厌氧和兼性厌氧链球菌
一、A群（化脓性）链球菌（S. pyogenes）
二、肺炎链球菌（S. pneumoniae）
一、A群（化脓性）链球菌（S. pyogenes）
本属细菌的代表种，致病性强， 对人致病的链球菌有90%属此种。
（一）生物学性状
1. 形态与染色
球形或椭圆形， G＋， 链状排列（长短与种类及生长环境有关）， 无芽胞，无鞭毛， 有菌毛，早期形成透明质酸的荚膜
方法：间接凝集
结果：效价大于400单位 意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断
（四）防治原则
积极治疗儿童链球菌感染，防止 发生急性肾炎和风湿热。
抗生素首选青霉素：用长效青霉 素预防链球菌感染，对减少肾小球肾 炎及风湿热的发生有一定效果。
二、肺炎链球菌（S. pneumoniae）
在自然界广泛分布，常寄居于正常 人的鼻咽腔中，形成带菌状态，在机体 抵抗力下降时引起疾病。主要引起大叶 性肺炎，约占细菌性肺炎的80%。
(2) M蛋白（M protein） 是 A群链球菌的主要致病因子，含 M蛋白的 链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与某 些超敏反应疾病有关。 (3) 肽聚糖 A群链球菌的肽聚糖具有致热、溶解血小板、 提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。
2）外毒素
(1) 致热外毒素（pyrogenic exotoxin） 是人类猩红热的主要毒性物质。致热外毒素抗 原性强，具有超抗原作用，对兔有致热性和致死性。 (2) 链球菌溶素（streptolysin）
(1) 粘附素 ① 脂磷壁酸（lipoteichoic acid, LTA）与生物 膜有高度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼
吸道黏膜等表面的主要侵袭因素。
【课件】DNA是主要的遗传物质 第1课时 肺炎链球菌的转化实验课件-高一下人教版(2019)必修2
4、下列关于艾弗里肺炎链球菌体外转化实验的叙述，错误的是（ B ） A.该实验是在英国微生物学家格里菲思的实验基础上进行的 B.该实验运用了同位素标记法 C.实验过程中，通过观察菌落的特征来判断是否发生转化 D.该实验证明肺炎链球菌的遗传物质是DNA
含有R
+
型细菌
的培养 基
混合
只长R型细菌
S型细 菌的细 胞提取 物
艾弗里等人进一步分析了细胞 提取物的理化特性，发现这些 特性都与DNA的极为相似，于是 得出结论： DNA才是使R型细菌产生稳定遗 传变化的物质。
课堂小结
体内转化实验和体外转化实验的区别
项目 培养细菌
体内转化实验 在小鼠体内
体外转化实验 体外培养基
一、对遗传物质的早期推测
20世纪30年代
认识到DNA是由许 多脱氧核苷酸聚合 而成的生物大分子
但是
对DNA的结构没 有清晰的了解
主导地位
蛋白质是遗 传物质
组成DNA的脱氧核苷酸有4种；每种脱氧核苷酸都有特定的碱基。
二、肺炎链球菌的转化实验
观点：遗传物
质是蛋白质
美.艾弗里
英.格里菲思
二、肺炎链球菌的转化实验
R型细菌
+
S型细
菌的细
混合
胞提取 物
S型细菌
去除S型细菌的细胞提取物 中的蛋白质，其他物质都有
②加蛋白酶后R型菌还是被转化 说明什么问题？ 说明转化因子不是蛋白质
③同样加RNA酶、酯酶什么作用？
去除S型细菌的细胞提取物 中的RNA或脂肪等物质
2、艾弗里的肺炎链球菌体外转化实验
蛋白酶（或RNA酶、酯酶）
第3章 基因的本质
第1节 DNA是主要的遗传物质
含有R
+
型细菌
的培养 基
混合
只长R型细菌
S型细 菌的细 胞提取 物
艾弗里等人进一步分析了细胞 提取物的理化特性，发现这些 特性都与DNA的极为相似，于是 得出结论： DNA才是使R型细菌产生稳定遗 传变化的物质。
课堂小结
体内转化实验和体外转化实验的区别
项目 培养细菌
体内转化实验 在小鼠体内
体外转化实验 体外培养基
一、对遗传物质的早期推测
20世纪30年代
认识到DNA是由许 多脱氧核苷酸聚合 而成的生物大分子
但是
对DNA的结构没 有清晰的了解
主导地位
蛋白质是遗 传物质
组成DNA的脱氧核苷酸有4种；每种脱氧核苷酸都有特定的碱基。
二、肺炎链球菌的转化实验
观点：遗传物
质是蛋白质
美.艾弗里
英.格里菲思
二、肺炎链球菌的转化实验
R型细菌
+
S型细
菌的细
混合
胞提取 物
S型细菌
去除S型细菌的细胞提取物 中的蛋白质，其他物质都有
②加蛋白酶后R型菌还是被转化 说明什么问题？ 说明转化因子不是蛋白质
③同样加RNA酶、酯酶什么作用？
去除S型细菌的细胞提取物 中的RNA或脂肪等物质
2、艾弗里的肺炎链球菌体外转化实验
蛋白酶（或RNA酶、酯酶）
第3章 基因的本质
第1节 DNA是主要的遗传物质
临床常见标本的微生物检验ppt课件
• 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108 ～ 109/ml。
• 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。
（一）采集指征
• 凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。
同时采集2~3套（不同部位）血培养标本。（即 双瓶双臂同时采集血培养标本。）
婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位） 血培养标本。
为什么要求多次采血？
• （1）菌血症有“持续性”和“暂时性”之分，多次采血可 提高阳性检出率，减少漏检； 两瓶或以上血培养以上血培养结果阳性，细菌鉴定结果相 同，判断为感染菌，作药敏并报告临床。 送检两瓶或以上血培养，仅1瓶结果为阳性，且为潜在的污 染菌（如表皮葡萄球菌、微球菌、气球菌、棒状杆菌等）， 一般作为污染菌。 出现多种细菌在排除污染可能后，可考 虑“复数菌”败血症的诊断。 仅送检1瓶血培养，且培养出上述潜在的污染菌。则其临床 意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值。
经支气管镜抽吸法（支气管肺泡灌洗液、防污染样本毛刷等）
• 直接从肺部感染病灶采集高浓度的病原菌，较为安全，但不能避免咽喉部正 常菌群污染。
•
经人工气道吸引分泌物（导管吸痰、防污染灌洗等）
• 较为采用，但人工气道常有致病菌或定值菌存在，建议采集前先做细胞血筛 查。
•
经气管穿刺吸引物
• 采集到的下呼吸道标本不受上呼吸道污染，常用于厌氧菌培养，但患者不易 接受。
中，剧烈振荡5-10s，然后用接种环将沉淀于管底 的脓痰小片沾出，再放另一个无菌试管中，将同 样的方法反复2次。
• 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在 唾液严重污染现象。
（一）采集指征
• 凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性、粘稠或血性， 并伴有胸痛、气急，肺部闻及湿罗音，外周白细 胞总数及中性粒细胞比例明显增高，X线检查提 示肺部有炎性浸润或胸腔积液，甚至出现感染性 休克和呼吸衰竭等患者，应采集痰液或下呼吸道 标本。
同时采集2~3套（不同部位）血培养标本。（即 双瓶双臂同时采集血培养标本。）
婴幼儿患者，推荐同时采集2次（不同部位） 血培养标本。
为什么要求多次采血？
• （1）菌血症有“持续性”和“暂时性”之分，多次采血可 提高阳性检出率，减少漏检； 两瓶或以上血培养以上血培养结果阳性，细菌鉴定结果相 同，判断为感染菌，作药敏并报告临床。 送检两瓶或以上血培养，仅1瓶结果为阳性，且为潜在的污 染菌（如表皮葡萄球菌、微球菌、气球菌、棒状杆菌等）， 一般作为污染菌。 出现多种细菌在排除污染可能后，可考 虑“复数菌”败血症的诊断。 仅送检1瓶血培养，且培养出上述潜在的污染菌。则其临床 意义不能确定，需与临床医生讨论其可能的临床价值。
经支气管镜抽吸法（支气管肺泡灌洗液、防污染样本毛刷等）
• 直接从肺部感染病灶采集高浓度的病原菌，较为安全，但不能避免咽喉部正 常菌群污染。
•
经人工气道吸引分泌物（导管吸痰、防污染灌洗等）
• 较为采用，但人工气道常有致病菌或定值菌存在，建议采集前先做细胞血筛 查。
•
经气管穿刺吸引物
• 采集到的下呼吸道标本不受上呼吸道污染，常用于厌氧菌培养，但患者不易 接受。
中，剧烈振荡5-10s，然后用接种环将沉淀于管底 的脓痰小片沾出，再放另一个无菌试管中，将同 样的方法反复2次。
细菌性肺炎ppt课件
36右中叶肺炎正位片右中叶肺炎正位片x线检查37右中叶肺炎右侧位片右中叶肺炎右侧位片39肺炎球菌性大叶肺炎f20高热40诊断诊断42常见肺炎的鉴别诊断常见肺炎的鉴别诊断病原体临床特点x线特点治疗肺炎链球菌寒热肺实变征铁锈色痰大片致密阴影支气管充气征青霉素空洞脓胸头孢霉素万古霉素肺炎克雷白杆寒热全身衰弱砖红色胶肺实变多发小空洞叶间隙下坠头孢三代喹诺酮类43军团菌高热肌痛相对缓脉进展快喹诺酮类阿奇霉素支原体小流行发热肌痛头痛红霉素阿奇霉素喹诺酮类念珠菌冷热白色拉丝痰氟康唑非典病毒发热呼吸窘迫大片浸润肺间质纤维化44克雷白杆菌肺炎part45肺炎克雷白杆菌肺46病因病因47病理病理48临床表现临床表现49临床表现临床表现50影像学表现影像学表现增强扫描常呈边缘强化中央有灶性坏死51实验室检查实验室检查52诊断诊断53治疗治疗54右上肺脓肿55克雷伯杆菌肺炎克雷伯杆菌肺炎男45岁
18
• 2.细菌学检查 • 痰或胸水涂片检查，培养致病菌及抗生素敏感试
验．连续2、3次为同一细菌生长，致病菌的可能 性大，仅一次阳性或多次为不同细菌生长，则可 靠性差。细菌浓度≥107cfa/ml为致病菌，105～ 107cfa/ml为可疑，<105cfa/ml多为污染菌。 • 3.血液检查 • 白细胞计数及中性粒细胞一般均增高，可有核左 移，年老体弱或严重病例白细胞计数可不增高。
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57
微信病例
• 病史：女性，50 岁，伴有发热、咳嗽。
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60
61
• 诊断：克雷伯杆菌肺炎
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军团菌肺炎
05
part
63
概述
• 军团菌病(legionella pneumonia)是由军 团菌引起的一种以肺炎为主要表现的全身 性疾病。
18
• 2.细菌学检查 • 痰或胸水涂片检查，培养致病菌及抗生素敏感试
验．连续2、3次为同一细菌生长，致病菌的可能 性大，仅一次阳性或多次为不同细菌生长，则可 靠性差。细菌浓度≥107cfa/ml为致病菌，105～ 107cfa/ml为可疑，<105cfa/ml多为污染菌。 • 3.血液检查 • 白细胞计数及中性粒细胞一般均增高，可有核左 移，年老体弱或严重病例白细胞计数可不增高。
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微信病例
• 病史：女性，50 岁，伴有发热、咳嗽。
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• 诊断：克雷伯杆菌肺炎
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军团菌肺炎
05
part
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概述
• 军团菌病(legionella pneumonia)是由军 团菌引起的一种以肺炎为主要表现的全身 性疾病。
肺炎链球菌的微生物学检验方法与原理
肺炎链球菌的微生物学检验方法与原理肺炎链球菌（Setrt Pococcuspneumoinae）简称肺炎球菌，是1881年首次由巴斯德及G.M.Stembegr分别在法国和美国分离出来。
肺炎球菌菌体似矛头，呈短链状排列或成双排列的球菌，革兰氏阳性，绝大多数兼性厌氧，偶有专性厌氧，肺炎链球菌的主要致病物质是肺炎球菌溶血素和荚膜。
近年来，越来越多的国家和地区出现耐药性肺炎链球菌菌株的报道，严重威胁着肺链感染的临床治疗，已成为一个呛待解决的健康问题。
1、药敏试验1.1微量稀释法该法是美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的肺炎链球菌药敏试验的参考方法。
该法主要使用经过离子校正的M-H肉汤+2%～5%的溶血马血作为培养基的，然后将抗生素稀释后加人培养基中。
将在羊血平板上的菌落制备菌液，以0.5浊度分装微量板。
在35℃普通条件下培养24h后，人工判断结果。
具体MIC见NCCLS的判定标准。
1.2纸片扩散法NCCLS推荐使用的纸片法药敏试验，主要使用羊血平板，以0.5浊度的菌液接种平板。
对于临床分离株的药敏试验，CO2是必备的环境。
平板应于35℃条件下在5%的CO2中培养24h后进行测量，从正面量取。
抑菌环的大小和质控标准详见NCCLS的规定。
纸片扩散法的优点是简单方便，对非β-内酞胺药物的重复性、准确性均较高，但是在应用于青霉素和头抱类抗生素时准确性明显降低。
2、肺炎链球菌的耐药性检验目前有很多实验室在对血液、脑脊液等体液分离得到的肺炎链球菌耐药性测定时，只检测青霉素的耐药性。
事实证明，多重耐药和对三代头抱耐药的肺炎链球菌越来越多，因此，NCCLS已经明确要求，从脑膜炎者分离出来的肺炎链球菌必须做青霉素、头孢曲松或者头孢他啶的MIC，另外还应检测对万古霉素的耐药性。
对于中枢神经系统以外分离而来的肺链球菌，则首先应该选用苯唑西林来检测其是否对β-内酰胺类药物耐药。
若抑菌环>200mm，证明其对青霉素和β-内酞胺类药物敏感物耐药性；若抑菌环<19mm，则须进一步检测其对青霉素、头孢曲松或头孢他啶的耐药性。
肺炎链球菌PPT课件
• 药敏试验显示对头孢噻肟/头孢曲松的MIC值很高（≥4μg/mL）
10
Pneumococcal Infections, Red Book.; 2006: 525-537
肺炎球菌疾病的抗生素治疗推荐
——美国儿科学会(2)
其他需要住院治疗的侵袭性肺炎球菌疾病
– 对严重感染患儿，初始抗生素选择应考虑针对青霉素/ 头孢噻肟/头孢曲松不敏感细菌
率低2
婴幼儿气道狭小，粘膜柔嫩，侵入性检查易加重缺
氧和呼吸困难2
通常在取标本前已经使用抗生素，影响肺炎球菌微
生物学诊断的准确性
1 何权瀛.
中国医刊 2000;35(1):5-6
8
2 张海荣等. 护理实践与研究 2007;4(9):76
儿童肺炎球菌疾病的临床表现
3
欧洲41项CAP病因学荟萃分析
年龄>50岁、免疫功能损害 肺炎链球菌、单核细胞增多性李 斯特菌、革兰阴性杆菌
医院获得性脑膜炎 金葡菌、克雷伯菌属、肠杆菌属、 不动杆菌属、铜绿假单胞菌
细菌性脑膜炎临床表现的共性
各种细菌导致的脑膜炎临床表现大致相同，可归纳为感染中毒症状、颅内压
增高症、脑膜刺激症和颅神经损害症
临床症状的区别主要在于患儿的年龄，年长儿与成人表现相似，婴幼儿症状
生的最主要因素，而不适当的选用抗菌药、剂量不足、疗程不足、药品 质量低劣等同样可导致并加速耐药性的产生
14
汪复、张婴元主编. 实用抗感染治疗学, 2004版
近期抗生素使用增加 耐药肺炎球菌携带和感染的风险
一般隐匿或不典型
各症状在脑膜炎病人中的发生比例
症状 发生比例
头痛 颈项强直 发热 神志改变 局部神经缺陷 皮疹 昏迷 惊厥
肺炎(完整版)ppt课件
3、咳嗽、咳铁锈色痰、剧烈胸痛，咳嗽及 深呼吸时加重。
4、大范围肺实变时，可出现气急、紫绀； 严重者出现感染性休克。
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10
临床表现
5、全身体征：急性病容、呼吸频数、鼻
翼扇动、颜面潮红、发绀、口周疱疹。
肺部体征：早期仅有呼吸音增粗；实
变期患侧语颤增强，叩诊呈浊音，可闻及
支气管呼吸音及湿罗音；消散期：可闻及
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31
实验室及辅助检查
血常规：WBC、NC正常或稍高，ESR↑， 痰咽拭子培养可分离病原菌。
血清学检查：2周后，冷凝集试验>1:32 抗体测定(IgM)>1:100。
X线：多种形态片状浸润影，节段性分布 ，下肺多见，有的从肺门附近向外伸展， 经3～4W后自行消散。
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32
肺泡壁与间隔：中性粒细胞、单核细胞及浆
细胞浸润。
肺泡内：渗出。
肺炎支原体→间质性肺炎或支气管肺炎
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临床表现
症状：
全身症状：发热、乏力、头痛、食欲不振等 呼吸道症状：咽痛、咳嗽、少痰、偶有胸痛 肺外表现：皮疹、耳痛、颈淋巴结肿大 儿童：中耳炎、鼓膜炎
体征：肺部体征不明显，少数：湿罗音。
病理变化：
化脓坏死→肺脓肿，炎症消退慢，细支 气管阻塞→气囊肿，肺炎症→胸膜、心包、 脑膜。
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临床表现
症状：
起病急骤，寒战、高热、胸痛、咳 嗽、多量脓血痰、气促，严重者早期 可出现周围循环衰竭。
体征：
肺部可闻及中、细湿罗音；合并脓 胸时有相应体征。血源性应注意肺外 病灶
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2、体征：重病容、呼吸急促、发绀、
4、大范围肺实变时，可出现气急、紫绀； 严重者出现感染性休克。
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临床表现
5、全身体征：急性病容、呼吸频数、鼻
翼扇动、颜面潮红、发绀、口周疱疹。
肺部体征：早期仅有呼吸音增粗；实
变期患侧语颤增强，叩诊呈浊音，可闻及
支气管呼吸音及湿罗音；消散期：可闻及
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实验室及辅助检查
血常规：WBC、NC正常或稍高，ESR↑， 痰咽拭子培养可分离病原菌。
血清学检查：2周后，冷凝集试验>1:32 抗体测定(IgM)>1:100。
X线：多种形态片状浸润影，节段性分布 ，下肺多见，有的从肺门附近向外伸展， 经3～4W后自行消散。
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肺泡壁与间隔：中性粒细胞、单核细胞及浆
细胞浸润。
肺泡内：渗出。
肺炎支原体→间质性肺炎或支气管肺炎
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临床表现
症状：
全身症状：发热、乏力、头痛、食欲不振等 呼吸道症状：咽痛、咳嗽、少痰、偶有胸痛 肺外表现：皮疹、耳痛、颈淋巴结肿大 儿童：中耳炎、鼓膜炎
体征：肺部体征不明显，少数：湿罗音。
病理变化：
化脓坏死→肺脓肿，炎症消退慢，细支 气管阻塞→气囊肿，肺炎症→胸膜、心包、 脑膜。
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临床表现
症状：
起病急骤，寒战、高热、胸痛、咳 嗽、多量脓血痰、气促，严重者早期 可出现周围循环衰竭。
体征：
肺部可闻及中、细湿罗音；合并脓 胸时有相应体征。血源性应注意肺外 病灶
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2、体征：重病容、呼吸急促、发绀、
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2. 所致疾病
存在于正常人上呼吸道。 仅在人体抵抗力下降时才引起疾
病。如大叶性肺炎，支气管炎等。
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三、微生物学检验
(一) 标本采集 痰、脓液、血液等。
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(二) 检验方法及鉴定
1. 直接涂片 革兰氏色染色，荚膜染色
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2. 分离培养。 ① 胆汁溶菌试验。 ② 菊糖发酵。 ③ Optochin试验。
即脑膜炎奈瑟菌， 是流行性脑脊髓膜炎的病原体
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（一）、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点
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1．形态结构
G-，肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞
内 无芽胞、无鞭毛，具有荚膜、菌毛。
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2．培养特性
营养要求高，必须在含有血清或多种氨 基酸、无机盐的培养基上生长良好。
初次分离，须5-10%CO2才能生长发育 菌落：凸起，光滑、圆形，灰白色，半透
明
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3.生化反应
氧化酶试验：阳性 触酶：阳性 只分解葡萄糖 ，不分解麦芽糖 易自溶
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4．抵抗力特点
抵抗力弱， 在干燥环境中仅能存活1-2h，湿热55
℃ 5min,100 ℃立即死亡。室温下存 活1-2d。 对消毒剂极敏感
1．标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者，可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状，抽取脑脊液
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2．检验方法
①直接涂片检查 脑脊液或瘀斑渗出液，干燥固定后 革兰染色，若发现G-双球菌，呈肾形 成对，可初报
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②分离培养鉴定 过氧化酶试验：阳性 触酶试验：阴性 血清凝集试验：阳性
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二、淋球菌 即淋病奈瑟菌， 为淋病的病原体，人是唯 一天然宿主和传染源
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（一）、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3. 生化反应 4．抵抗力特点
40
1．形态结构
G-，球形或肾形，成对排列 有荚膜，无芽胞和鞭毛
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2．培养特性
营养要求高，30-37 ℃生长，须在含有血 液或血清的培养基上培养，常用血液、巧 克力等培养基
6
3．生化反应
可分解多种糖类，产酸不产气。 胆汁溶解试验阳性：加入胆汁或10%
去氧胆酸钠，37℃.，5-10min，激活 本菌的自溶酶，出现溶菌现象。
7
8
Optochin敏感试验阳性：单个菌落涂于血 平板上，用optochin纸片贴于接种区中央， 35℃需氧培养过夜，抑菌圈 >18mm。
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（二）、致病性与免疫性 1．致病物质 2．所致疾病 3. 免疫性
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1．致病物质 菌毛，外膜蛋白等
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2．所致疾病 侵犯人类泌尿生殖系统 引起淋病(首位性病)
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3. 免疫性
与草绿色链球菌鉴别
20
3. 小鼠毒力试验 有毒力的菌株，接种后12-36h， 死亡。
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第四节
奈瑟菌属 （neisseria）
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为一群G-双球菌，严格寄生菌， 人是自然宿主
主要致病菌是脑膜炎球菌 ( merningococcus) 和 淋 病 球 菌 (gonorrhoeae)
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一、脑膜炎球菌
可分9个血清群，对人致病的主 要试A群
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5．抵抗力特点
对寒冷、光、热力，干燥等十分敏感。 室温3h，60 ℃ 5min死亡。
采集标本：注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。
31
12、对脑膜炎奈瑟氏菌的标本采送， 哪一种是错误的？
A、 低温 B、 保温 C、 防干燥 D、 快速
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4．抗原结构
荚膜多糖抗原：多糖抗原，型特异性，共85型，
Ⅰ~Ⅲ型引起大叶性肺炎。 菌体种属特异性抗原：多糖抗原，存在于细胞
壁，称C多糖。在钙离子存在时,C多糖可与正常 人血清中称为C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)
的β球蛋白结合，发生沉半透明，灰褐色，圆形，湿润 光滑露滴样菌落。
易自溶。
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巧克力平板，蓝灰色，半透明，光滑 湿润的菌落。
卵黄双抗（EPV）平板：为无色，光 滑湿润的菌落。
血清肉汤：呈微混浊。
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3.生化反应
分解葡萄糖、麦芽糖 硝酸盐还原反应阴性，不分解尿素 氧化酶试验阳性
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4.抗原结构
较弱，加热56℃ ，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗 力较强。
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6. 变异性
荚膜变异：有荚的光滑（S）型菌 有毒力，失去荚膜的粗糙（R）型 毒力减低或消失。
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20、把小鼠随机分成两组，进行肺炎球菌荚膜 形成试验，分别将两株细菌接种于不同组动物 腹腔（每组接种一株细菌）。12小时后杀死小 鼠解剖，取腹腔作荚膜染色试验。结果有一组 只有少量细菌，且未见荚膜主要原因是什么？
3
1.形态结构
G+，呈矛尖状，成双排列，标 本或液体培养中成链状。
有荚膜，无鞭毛，不形成芽胞。
4
5
2.培养特性
营养要求较高，含血液或血清的培养 基中生长。
兼性厌氧，C02 5-10%生长最好。 溶血性——菌落周围有草绿色溶血环。 液体培养基中培养24h，呈均匀混浊，
后期因产生自溶而变得澄清
A、 动物对细菌不敏感
B、 染色试剂不合
标准 C、 细菌毒力发生了变异
D、 采标本时间过早
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二、致病性 1．致病物质 2．所致疾病
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1. 致病物质
荚膜：肺炎球菌的致病力，主要是 荚膜的抗吞噬作用。
溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶 解人和动物的红细胞，高浓度对动 物有坏死及致死作用。
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致病性球菌
葡萄球菌属 金黄色葡萄球菌
表皮葡萄球菌
链球菌属 链球菌
肺炎链球菌
奈瑟菌属 脑膜炎奈瑟菌
淋病奈瑟菌
1
肺炎链球菌 (S.pneumoniae)
属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人 类上呼吸道，多数不致病。
2
一、生物学性状
1．形态结构 2．培养特性 3．生化反应 4．抗原结构 5．抵抗力特点 6. 变异性
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（二）、致病性与免疫性
1．致病物质 2．所致疾病 3. 免疫性
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1. 致病物质：内毒素、荚膜，菌毛 2. 所致疾病：寄生在正常人鼻咽部， 存在易患人群，与患者补体介导的杀 菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现 为流脑症状
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3. 免疫性：病原可产生群特异性
抗体，但不持久。
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(三) 微生物学检验