维生素B1(VB1)含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
药物分析维生素B1片的含量测定
差示光谱法举例
六神丸中胆红素的测定 六神丸是家庭常备良药之一，主要由
牛黄、麝香、蟾酥、雄黄、冰片、珍珠六 味药组成，具有清热解毒、消肿止痛等功 效，具易服、高效、速效等特点。
胆红素在453nm下有最大吸收，在可见光照射下易氧化成蓝色产 物，在453nm处吸收度显著降低。胆红素在日光下照射25分钟或在红 外灯下（250W）下照射3.3小时，吸收度即稳定。
有紫外吸收
标准曲线法
吸收度A
0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1
0 0
0.03, 0.641 0.025, 0.543 0.02, 0.445 0.015, 0.338 0.01, 0.227
0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 0.03 0.035 浓度C（mg/ml）
结果处理：
由回归方程算出供品的浓度，再计 算标示量%。
y=20.66x+0.0256 代入y值求x
操作注意事项：
1、先作曲线，再进行样品测定。因瓶不够。 2、曲线绘制由两组同学共同完成。 3、漏斗、滤纸、接滤液小杯（两份）干燥，防止稀释。 4、注意在同一台仪器测定，消除仪器误差。
取
样量Βιβλιοθήκη ＝50mg• 【规格】10mg • 【配伍禁忌】维生素B1在碱性溶液中易分解，与
碱性药物如碳酸氢钠、枸橼酸钠配伍，易引起变 质。
ΔA =AVB1+A背==εVB1CL+A背
246n m
266
（一）差示光谱法 原理 (difference spectrophtometry)简称ΔA法
样品1（AVB1+A背）
实验九 差示分光光度法测定维生素B1片的含量
实验九 差示分光光度法测定维生素B 1片的含量一、实验目的1．掌握差示分光光度法的基本原理。
2．熟悉标准曲线定量的操作方法.二、实验原理(一）差示分光光度法(简称△A 法)，它保留了通常的分光光度法简便、快捷、直接读数的优点，又无需事先分离，并能消除干扰.方法：取两份相等的供试液，分别制成两种不同的化学环境（如在其一中加酸或碱,改变pH 或在其一中加能与供试品发生某种化学反应的试剂），然后将它们稀释至同样浓度后，分置于样品池和参比池中,于适当波长处，测定吸光度的差值（△A ）。
应用条件：①供试品在不同的化学环境中以不同的分子形式存在,它们的吸收光谱有显著的差异；②干扰物的吸收不受测定时化学环境的影响，光谱行为不变。
定量依据:设x 、y 分别代表在两种不同的化学环境中供试品的存在形式，它们在测定波长处的吸光度以A x 、A y 表示，背景和干扰的吸收度以A Z 表示，A Z 不受测定时化学环境改变的影响。
根据吸光度加和性原则:即在供试液的一定浓度范围内△A 值与其浓度C 呈线性关系,并消除了A Z 的干扰，可用标准曲线法或对照法定量.（二)维生素B 1片的测定维生素B 1分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收，其紫外吸收随溶液pH 的变化而变化。
在pH7的磷酸盐缓冲液中具有两个吸收峰，在232~233nm 处，%11cm E =345;在266nm处，%11cm E =255。
在pH2时，最大吸收在246nm 处，%11cm E =425。
可用于维生素B 1片的差示分光光度法的测定.三、实验方法（一）测定波长的选择精密称取维生素B 1100mg ，用水溶解并稀释成100ml ，精密量取2ml 二份，分别用缓冲液（pH 7.0）和盐酸液(pH 2。
0)稀释成100ml ，以相应溶剂为空白，测定紫外吸收光谱。
再将前者放于参比池，后者放于样品池,绘制差示吸收光谱(见图11)。
差示光谱图表明在247nm处有最大差示吸收值(△A)，确定247nm为测定波长。
维生素 B1(VB1)含量检测试剂盒说明书__可见分光光度法UPLC-MS-4374
维生素B1（VB1）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4374规格:50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体35mL×1瓶4℃保存稀释液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体6mL×1瓶4℃保存试剂二液体7mL×1瓶4℃保存试剂三液体6mL×1瓶4℃保存试剂四液体15mL×1瓶4℃保存试剂五液体8mL×1瓶4℃保存标准品粉剂×1支4℃保存溶液的配制：1、提取液：内含不溶物，使用前摇匀；2、标准品：10mg维生素B1。
临用前加入1mL稀释液，配成10mg/mL（即10000µg/mL）的标准液。
产品说明：维生素B1（Vitamin B1）又称硫胺素，以辅酶形式参与糖的分解代谢，在生物体能量代谢中有重要的作用。
VB1在碱性条件下还原铁氰化钾生成亚铁氰化钾，亚铁氰化钾与Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝，测定布鲁士蓝在704nm下的特征吸收峰，即可反映VB1的含量。
技术指标：最低检出限：7.366µg/mL线性范围：7.8125-250µg/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、组织：将样本磨碎，按照质量（g）：提取液体积（mL）为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入0.6mL提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000g离心10min，取上清测定（动物组织、豆类种子等蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟或反复离心2-3次至上清无浑浊）。
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量一、实验目的1、掌握紫外分光光度法的测定原理；2、了解维生素B1片的含量测定方法；3、掌握溶液制备、仪器操作及数据处理方法。
二、实验原理维生素B1 （Thiamine）是维生素B群中十分重要的一种，对人体神经系统、消化系统、心脏以及肝脏的功能有着重要的影响。
现代医学认为缺乏维生素B1易引起多种神经系统和消化系统疾病，如多发性神经炎、骨骼肌炎、胆汁淤积等。
因此，测定维生素B1 的含量对维生素B1 的药品质量控制及医学研究具有重要的意义。
紫外分光光度法是一种比较常用的药物质量控制方法。
维生素B1 的主要吸收峰位于紫外波长区域，适合进行紫外分光光度法测定。
维生素B1 的紫外吸收峰位于约265nm处（ε=7.5×10^3～7.9×10^3L·mol^-1·cm^-1），故以此为测定波长。
按维生素B1的相对分子质量和吸光系数计算，摩尔吸光系数ε较小，因此，采用长程比对测定法可以有效地提高测定的精度和准确性。
三、实验步骤(一) 试样的制备称取维生素B1片约0.15g（准确称量），将其放在25mL量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液溶解，摇均并用0.1mol/L盐酸溶液定容至刻度。
(二) 光度计的操作开启UV-2550型紫外分光光度计的电源，按照使用说明将紫外探测器调至265nm，并进行光谱校验。
进入光度计工作界面，将石英比色皿放入样品室，调节光程，读取空白吸光度。
取紫外分光光度计检测轨道上的纯水作为空白，用0.1mol/L盐酸溶液调整到约pH1.5。
(三) 具体测定操作1、测定工作会进行自动计算，记录吸光度A1。
2、再取一组相同体积的样品溶液，重复第1步操作，记录吸光度A2。
3、若A1、A2之间差异大于0.1，则须重采样求数值，并重复第1、2步操作。
4、根据空白吸光度及上述测定步骤所得的吸光度，计算维生素B1 的含量。
四、实验结果及分析按照上述实验操作，测得A1=0.83，A2=0.85，需进行差异校正，先计算中和点pH：Kb=1.20×10^-6pKb=5.92pH=pKb-log([B]+[BH+])[OH-]=[B][OH-]^2/(C-B)=Kb代入数值得[B]=0.026 mol/LpOH=pKa+log([BH+]/[B])pH=14-pOH从而可得pH=1.5+4.72=6.22校正值：K=（εdA/dl）/X式中X系维生素B1 的摩尔质量，则需要通过水合物计算出来，其分子量为328.81。
维生素b1含量测定计算公式
维生素B1含量（mg/100g）= （吸光度差 × 稀释倍数）/（摩尔吸光系数 × 透射率）
其中： - 吸光度差：在测量前后，样品溶液的吸光度差值。 - 稀释倍数：如果对样品进行稀释，则需要考虑稀释倍数。 - 摩尔吸光系数：维生素B1的摩尔吸光系数，一般为4,700（L·mol^(-1)·cm^(-1)）。 - 透射率：测量时所得到的样品溶液的透射率，一般以小数形式表示。
维生素b1含量测定计算公式
请注意，这个公式是针对光度法测定维生素B1含量的一个一般公式，具体的实验操作和 计算可能会因不同的测定方法和仪器而有所不同。因此，在进行维生素B1含量测定时，建议 参考所使用的具体测定方法和仪器的操作手册，以确保准确性和一致性。
维生素B1的测定
微生物测定法
总结词
微生物测定法是一种基于微生物生长代谢的维生素B1测定方法，通过观察特定 微生物在含有或不含有维生素B1的培养基中生长情况，来计算维生素B1的含 量。
详细描述
微生物测定法具有操作简便、准确度高和特异性好等优点，适用于食品、饲料 和生物样品中维生素B1的测定。该方法需要使用特定的微生物和培养基，并需 要严格控制实验条件。
红外光谱法测定维生素B
总结词
红外光谱法是一种非破坏性、无损、无污染的测定方法，能够提供样品的分子结构和组成信息，适用 于维生素B1的定性分析。
详细描述
维生素B1分子中的特定化学键在红外光区有特征吸收峰，通过测量样品的红外光谱图，可以确定维生 素B1的存在。该方法具有较高的专一性和准确性，但需要较复杂的仪器设备和操作技术。
微生物测定法测定维生素B
总结词
微生物测定法是一种基于微生物生长代谢与维生素B1关系的测定方法，适用于食品和 生物样品中维生素B1的测定。
详细描述
某些微生物的生长代谢需要维生素B1作为辅酶或生长因子，通过培养这些微生物并测 量其生长曲线或代谢产物，可以推算出样品中维生素B1的含量。该方法具有较高的灵
维生素B1的测定
目录
• 引言 • 维生素B1的检测技术 • 维生素B1的测定方法 • 实验操作与注意事项
01
引言
维生素B1的简介
维生素B1，也被称为抗脚气病 维生素，是一种水溶性维生素， 在人体内起着至关重要的作用。
它是由一个嘧啶环和一个噻唑 环通过亚甲基桥连接而成的， 属于一种含氨基的醇类物质。
。
紫外可见光谱法测定维生素B
总结词
紫外可见光谱法是一种简单、快速、准 确的测定方法，适用于维生素B1的定量 分析。
维生素B1的测定
维生素B1的测定(一)原理硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素，在紫外线照耀下发出荧光。
没有其他物质干扰时，此荧光相对强度与噻嘧色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。
如试样中含杂质过多，应用经过离子交换剂使硫胺素与杂质分别岳的溶液测定。
(二)仪器与主要试剂荧光分光光度计；电热恒温培养箱；Maizel—Gerson反应瓶9～1所示；淀粉酶和蛋白酶；0．1mol／L，0．3mol／L盐酸；2mol／L乙酸钠溶液；氯化钾溶液(250g／L)；酸性氯化钾溶液(250g／L)(8．5mL浓盐酸用25％氯化钾溶液稀释至1000mL)；1％铁氰化钾溶液(10g／L)(1g铁氰化钾溶于水中稀释至100mL，放于棕色瓶内保存)；碱性铁氰化钾溶液(取4mL 10g／L铁氰化钾溶液，用150g／L氢氧化钠溶液稀释至60mL。
用时现配，避光用法)。
活性人造浮石：称200g 40～60目人造浮石，以10倍于其容积的热乙酸溶液搅洗两次，每次10min；再用5倍于其容积的250g／L热氯化钾溶液搅洗15min；然后再用稀乙酸溶液搅洗10min；最后用热蒸馏水洗至没有氯离子，于蒸馏水中保存。
硫胺素标准储备溶液(0．1g／mL)：精确称取100mg经氯化钙干燥24h的硫胺素，溶于0.0lmol/L盐酸中，并稀释至1000mL。
于冰箱中避光保存。
用时用0.01mol／L盐酸逐级稀释为0.1μg／mL的硫胺素标准用法液。
溴甲酚绿溶液(0．4g／L)：称取0.1g溴甲酚绿，置于小研钵中，加入1.4mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液研磨片刻，再加入少许水继续研磨至彻低溶解，用水稀释至250mL。
(三)测定试样采集后用匀浆机打成匀浆于低温冰箱中冷冻保存，用时将其解冻后混匀用法。
干燥试样要将其尽量粉碎后备用。
精确称取一定量试样(估量其硫胺素养量约为10～30μg，普通称取2～10g试样)，置于l00mL三角瓶中，加入50mL0.1mol／L或0.3mol／L盐酸使其溶解，放人高压锅中加热水解，121℃30rain，凉后取出。
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量前言维生素B1又称盐酸硫胺或抗神经炎素, 化学名为４-甲基-３-［（２-甲基-４-氨基-５-嘧啶基）甲基］-５-（２-羟基乙基）噻唑鎓盐酸盐。
为白色结晶或结晶性粉末。
在酸性溶液中很稳定, 在碱性溶液中易被氧化和受热破坏。
遇光和热效价下降，故应置于遮光、凉处保存, 且不宜久贮, 具有维持正常糖代谢的作用，在临床上常用于防治缺乏维生素B1所致的脚气病，也用于神经炎、消化不良等症的辅助治疗[1] 。
近年来测定维生素B1片含量的方法较多，如高效液相法[2] 、荧光分光光度法[3] 、毛细管电泳电化学法[4] 、氧瓶燃烧电位滴定法[5] 等。
这些方法操作麻烦、实验时间较长。
紫外分光光度法仪器较便宜，普及度高且操作较简便，此外，维生素B1是由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵类化合物，噻唑环上季铵及嘧啶环上氨基，为两个碱性基团，可与酸成盐[6] 。
维生素B1分子中具有共轭双键结构，在紫外区有吸收峰，故本次选用紫外分光光度法测定维生素B1含量，根据朗伯-比尔定律，利用紫外吸收光谱来进行定量分析，方法准确、简便、重复性好。
1. 仪器与试药1.1仪器紫外分光光度仪，分析天平，25mL棕色容量瓶，移液管。
1.2 试药维生素B1片；维生素B1生化试剂BR；0.1mol·L -1 HCl（自制）2．实验方法与结果2.1 样品预处理取维生素B1片20片（标示量为10.0mg），总重为1.23921g，其平均质量为61.96mg，充分研磨并混匀，称取3份样品置于25mL棕色容量瓶中，3份样品质量各为10.53mg、10.28mg、10.27mg，加0.1mol·L -1 HCl定容至25mL备用。
2.2对照品溶液配制维生素B1对照溶液：在分析天平上精密称取维生素B1 10.90mg置于25mL 棕色容量瓶，加0.1mol·L -1 HCl定容至25mL，作为维生素B1对照品储备液。
紫外分光光度法测定维生素B1片含量以及方法验证
５Ｏ ０ｍｇ 、Ｈ １（－ １０ ）。试药 ：维生素Ｂｌ （ 格 １ｍ ． ０ ／ ０ ｍＬ Ｃ ９－ ０ ０ ＇ 片 规 ０ｇ １０ ，产 品批号２ １０３ ，生产 日 ０ １ ７１，华 中药业股份有 限 ０片 ０ １７４ 期２ １． ． ０ ０
４０ｍ波长处 扫描 ，即得维生素Ｂ的最大吸收峰 （ ）。 ０￣ ０ｎ 图１
取供试 品２片 ，精密称定 ，研 细 ，称取片 粉适量 （ 当于维生 ０ 约相
素Ｂ２ｍｇ ５ ），置１０ Ｌ ０ｍ 量瓶 中，加盐酸溶 液 （— １０ ）约７ ｍ ，振 ９ ００ ０Ｌ
摇 １ｍｎ ５ ｉ使维生素Ｂ溶解 ，再加盐酸溶 液 （— １０ ）稀 释至刻度 ，摇 。 ９ ００
匀 ，用干燥 滤纸滤过 ，精密量取 续滤液５ ，置 另一 １０ 量瓶 中， ｍＬ ｏｍＬ
约６ｍｇ １ ，取相 当于２ｍｇ ５ 维生素Ｂ的片粉约０ ５。表 １ 。 ．ｇ １ 为处方 。
３ 测定条件选择 ． ２ 最大 吸收波长的确定 ：精密称 取维生素Ｂ对照 品２ｍｇ ５ ，用溶剂盐
５０ 移 液 管 、 电子 天平 （ Ｐ １ Ｓ ．ｍＬ Ｂ ２ ０ 编号 ：１ ９ ７ １ ） 、漏 斗 、维 ９ ９ ８ ３
【］ 梅 武轩 ， ３ 曾常春 ． 提 取物 对大 鼠乙酸 胃溃 疡愈合 质量 的影 响 乳香 ［ ． 中西医结 合 消化杂 志 ， ０ ， （） ４３． Ｊ 中国 】 ２ ４１ ４： —７ ０ ２ ３
４ ・买验 研 究 ・ ５ ６
加盐 酸溶液 （— １０ ）稀释至 刻度 ，摇匀 ，的供试 品溶液 ；取维生 ９ ００ 素Ｂ对照 品适量 ，用盐酸溶液 （— １０ ）稀 释制成 １． ，ｍＬ 。 ９ ００ ２ ｐ ／ 的对照 ５ｇ 品溶 液 。照分 光光度法 （ｈＰ ００ Ｃ ．２ １年版第 二部 附录ＩＡ） ，在２ ６ｍ Ｙ ４ｎ 处分 别测定供试 品溶 液和对照 品溶 液的吸光度 ，用百 分吸光度和对 照
药物分析实验维生素B1平均片重及含量测定（紫外分光光度法）
药物分析实验维⽣素B1平均⽚重及含量测定（紫外分光光度法）维⽣素BI平均⽚重及含量测定⼀、实验⽬的1、掌握紫外可见风光光度法操作⽅法；2、了解紫外可见风光光度法操作原理；3、掌握⽤紫外可见风光光度法测定药物含量；4、掌握⽚剂⽚重质量标准。
⼆、实验原理1、紫外可见分光光度法是利⽤物质的分⼦或离⼦对某⼀波长范围的光的吸收作⽤，对物质进⾏定性分析、定量分析及结构分析, 所依据的光谱是分⼦或离⼦吸收⼊射光中特定波长的光⽽产⽣的吸收光谱。
2、分类：按所吸收光的波长区域不同：分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。
3、紫外-可见分光光度法的特点：（1) 其仪器设备和操作都⽐较简单，费⽤少，分析速度快;（与其它光谱分析⽅法相⽐）（2）灵敏度⾼;（3）选择性好;（4）精密度和准确度较⾼;（5）⽤途⼴泛。
4、物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利⽤被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。
通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。
在吸收曲线中，通常选⽤最⼤吸收波长λmax进⾏物质含量的测定。
三、实验仪器与试剂：仪器规格数量药品称量勺20个维⽣素B1⽚20⽚容量瓶100ml 40个盐酸100ml容量瓶1000ml 10个维⽣素B1注射液10⽀移液管10ml 30个紫外分光光度计10台⽐⾊⽫10套容量瓶200ml 20个烧杯250ml 20个洗瓶10个胶头滴管20个玻璃棒20个分析天平20个硬度仪1台超声波清洗仪2台铁架台10个铁架圈10个滤纸1盒洗⽿球10个四、实验步骤（⼀）重量差异照下述⽅法检查，应符合规定。
检查法取维⽣素B1⽚20⽚，精密称定总重量，求得平均⽚重后，再分别精密称定每⽚的重量，每⽚重量与平均⽚重⽐较（凡⽆含量测定的⽚剂或有标⽰⽚重的中药⽚剂，每⽚重量应与标⽰⽚重⽐较），按表中的规定，超出重量差异限度的不得多于2⽚，并不得有1⽚超出限度1倍。
紫外分光光度法测定维生素B片的含量
紫外分光光度法测定维生素B1片的含量维生素B1及其制剂及其制剂常采用的方法有非水滴定法，紫外分光光度法和硫色素荧光法。
中国药典用非水溶液滴定法测定原料药，片剂和注射剂采用紫外分光光度法，USP采用硫色素荧光法。
采用非水溶液滴定法可能受到氢卤酸盐的干扰，对操作人员要求较高，采用硫色素滴定法不受氧化破坏产物的干扰，测定准确但操作繁琐，且荧光测定受干扰因素较多，本实验采用紫外分光光度法进行含量测定。
1实验装置及试剂1.1 仪器 BS210S型天平，UV751GD型紫外/可见分光光度计。
1.2 实验材料维生素B1片（来源：成都第一制药，规格：1--00片*10mg，批号：061204），维生素B1标准品（分析纯），维生素B1对照品（200ug/ml，2.0mg/ml），维生素B1标准溶液（0.250mg/ml），空白辅料，盐酸溶液（9→1000）。
2 实验方法处方分析：组成处方量(g) 比例(%)10 16.39维生素B1淀粉20 32.78糊精30 49.18硬脂酸镁 1.0 1.639生产1000片根据处方量分析，维生素B1含16.39%，辅料含83.61%。
平均片重约61mg，取相当于25mg维生素B1的片粉约0.15g。
1、测定方法：取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15min使维生素B1溶解，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm 的波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS.HCl的吸收系数（1%E）为421计算，即得。
1cm2、方法验证2.1.线性和范围精密称取维生素B1对照品约25mg，置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B1250μg/ml的对照溶液。
维生素B1检验操作规程
4、操作方法
4．1 称取供试品 取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒）。分取约1g或该药品项下所规定的重量，置与供试品同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中（供试品平铺厚度不可超5mm，如为疏松物质量，厚度不可超赤10mm），精密称定。干燥失重在1.0%以下的品种可只做一份，1.0%以上的品种应做平行试验两份。
硝酸盐取本品1.0g，加水溶解使成100ml，取1.0ml，加水4.0ml与10%氯化钠溶液0.5ml，摇匀，精密加入稀靛胭脂试液〔取靛胭脂试液，加等量的水稀释，临用前，量取本液1.0ml，用水稀释至50ml，照分光光度法（《中国药典》2000年版二部附录 A），在610nm的波长处测定，吸收度应为0.3～0.4〕1ml，摇匀，沿管壁缓缓滴加硫酸5.0ml，立即缓缓振摇1分钟，放置10分钟，与标准硝酸钾溶液（精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸钾81.5mg，置于50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，每1ml相当于50µg的NO3）0.50ml，用同一方法制成对照液比较，不得更浅（0.25%）。
【检查】酸度取本品0.50g，加水20ml溶解后，依法测定（2000年版中国药典二部附录 H），PH值应为2.8～3.3。
溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色，如显色，与对照液（取比色用重铬酸钾液0.1ml，加水适量使成10ml）比较，不得更深。
硫酸盐取本品2.0g，依法检查（《中国药典》2000年版二部附录 B），与标准硫酸钾溶液2.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.01%）。
5．4 减压干燥箱（器）开盖时，因箱（器）内压呼小于外部，必须先将活塞旋开，使干燥的空气进入才能开盖。但活塞应注意缓缓旋开，以免造成气流，吹散供试品。
vb1设计说明书
设计说明书—年产1000t维生素B1工厂工艺设计姓名：?? ??学号：????????/院系：生物与农业工程学院日期：2013-9-19课程：系统设计摘要：维生素B1又称硫胺素或抗神经炎素。
由嘧啶环和噻唑环结合而成的一种B族维生素。
维生素B1在种子的外皮和胚芽中，如米糠和麸皮中含量很丰富，在酵母菌中含量也极丰富。
瘦肉、白菜和芹菜中含量也较丰富。
而目前维生素B1的工业化生产仍采用化工方法。
本设计是采用酵母菌培养的发酵生产。
并采用有氧发酵，应用搅拌式补料分批发酵的方式。
培养结束后首分离过滤获得酵母浓缩液。
酵母细胞的破碎应用匀浆破碎法，对破碎得到的悬液再次过滤得含有维生素B1的溶液。
接着用色谱柱将维生素B1提取。
最后结晶干燥制成成品。
利用生物发酵方法生产的维生素与化学方法合成的相比无毒、更安全，更加适合作药用。
关键词：维生素B1.设备选型.车间平面布置.物料衡算.工厂总平面设计目录第一章绪论 (3)1.1 前言 (3)1.2 维生素b1的应用 (3)1.3 维生素B1的生产方法 (4)第二章维生素B1的工艺设计 (4)2.1 原料的预处理 (4)2.2 主要工艺 (5)第三章工艺计算 (6)3.1 生产指标 (6)3.2 反应方程式 (6)3.3 物料衡算 (6)第四章设备选型与车间平面设计 (7)4.1 设备选型 (7)4.2 车间平面设计 (7)第五章工厂总平面设计 (9)5.1 工厂选址 (9)5.2 总平面设计 (10)5.3 设计评估 (12)第七章总结 (12)参考文献 (13)第一章绪论1.1 前言维生素B1又称硫胺素或抗神经炎素。
由嘧啶环和噻唑环结合而成的一种B族维生素。
为白色结晶或结晶性粉末；有微弱的特臭，味苦，有引湿性，露置在空气中，易吸收水分。
在碱性溶液中容易分解变质。
酸碱度在3.5时可耐100℃高温，酸碱大于5时易失效。
遇光和热效价下降。
故应置于遮光，凉处保存，不宜久贮。
在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液中不稳定，易被氧化和受热破坏。
维生素B1片剂的含量测定.ppt
原料名称 维生素 B1 盐酸溶液 磷酸盐缓冲液 维生素 B1 片
规格 AR pH = 2.0 pH = 7.0 普通市售
用量 100 mg 适量 适量 20 片
三 原理
1.结构与性质
C12H17ClN4OS . HCl 337
白色结晶或结晶性粉末；溶于水，微溶于乙醇、氯仿，有微 弱的特臭，味苦，有引湿性，在碱性溶液中容易分解变质。
维生素B1Leabharlann 剂的含量测定课程：药品检验技术
一 实验目的
1.掌握差示分光光度法消除可能存在干扰的原理； 2.熟悉差示分光光度法的基本测定方法； 3.了解维生素B1的结构与性质； 4.熟悉维生素B1的检测原理及操作方法。
二 仪器与试药
1.仪器 移液管，容量瓶100 mL（15个），50 mL（1个），紫外光谱仪，研钵。 2.试药
四 操作方法
1. 标准贮备液的配制 精密称取维生素B1约100mg，置100mL量瓶中，用水溶解并稀释
至刻度，摇匀，作为贮备液（1mg/ mL）。
四 操作方法
2. 测定波长的选择 精密量取维生素B1贮备液2.0mL二份，分别置于两个100mL容量瓶中，一份
用磷酸盐缓冲液（pH7.0）稀释至刻度，摇匀，得溶液Ⅰ；另一份用盐酸液（ pH=2.0）稀释至刻度（浓度为0.002％），摇匀，得溶液 Ⅱ。分别以相应溶剂 为空白，在220nm~ 280nm范围内测定各自的紫外吸收光谱。再将溶液Ⅰ放于 参比池，溶液Ⅱ放于样品池，在同样光谱范围内测定差示吸收光谱（见图1）。在 差示光谱图上寻找有最大差示吸收值（ΔA）的波长，即为测定波长（247nm） 。
四 操作方法
3. 标准曲线的绘制 精密量取维生素B1贮备液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL各二份，分别置
维生素B1片得含量的测定123(精)
维生素B 1的含量的测定123一、实验目的：1. 掌握吸光系数法测定药物含量的方法。
2. 熟悉紫外—可见分光光度计的原理和操作。
二、实验步骤和内容：①取本品10片，精密称取，研细；②将样品置于50ml 的量瓶中，加盐酸溶液（9—1000）约70ml ，振摇15分钟，使维生素B1溶解；③加盐酸溶液（9—1000）稀释至刻度，摇匀；④用干燥滤纸滤过。
精密量取续滤液3ml, 置于另一50ml 量瓶中，⑤在加盐酸溶液（9—1000）稀释至刻度，摇匀；⑥照紫外—可见光光度法，在246nm 波长处测定吸光度，按C 12H 17ClN 4S·HCl 的吸收系数（E 1%1cm 为421计算，即得。
三、实验原理：维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香环，具有紫外吸收。
因此可在其最大的吸收波长处测定吸光度，进行含量测定。
四、实验数据的记录和处理：测得的吸光度A=0.309；百分吸光系数E 1%1cm =421;供试品的初浓配置的体积（ml ）=50ml;稀释倍数D=50/3含量计算：标示量%=[(A/E1%1cm ×1/100×V ×D]/10×100%=6.12%五、实验注意事项：1. 开启电源，使仪器预热20分钟。
2. 开启前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上，以免影响仪器自检。
3. 维生素B1的紫外吸收峰随溶液的PH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的PH 值。
六、实验思考：1. 单色光不纯对于测得的吸收曲线有何影响？答：偏离朗伯比尔定律的正比的直线。
单色光不纯，吸光度下降，摩尔吸光系数变小，灵敏度下降。
这时测得的吸收曲线线性关系(比尔定律）不变，斜率减小。
维生素B1的质量分析
COMPANY LOGO
3
ppt课件完整
COMPANY LOGO
维生素B1的结构式为
H3C N N
NH2 S
C N+ H2
. CH2CH2OH Cl HCl CH3
4
ppt课件完整
COMPANY LOGO
实验仪器与试剂
仪器： 10ml的滴定管、锥形瓶、紫外分光光度仪
试剂： 鉄氰化钾、冰醋酸、高氯酸滴定液、喹哪啶红－
在一定波长下可产生紫外吸收，测定一定 浓度溶液的吸收度即可计算含量。
18
ppt课件完整
COMPANY LOGO
b.方法 ①取供试品20片，精密称定，研细，精密称取细粉
适量（相当于维生素B125mg），置100ml量瓶； ②加入盐酸溶液(9→1000) 约70ml，振摇溶解后，
用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过；取续滤液备用;
药物分析实验
COMPANY LOGO
维生素B1及维生素B1片的质量 分析
1
ppt课件完整
1
实验目的
2
实验仪器与试剂
3
实验内容
4
实验注意事项
5
讨论与思考题
2
COMPANY LOGO
ppt课件完整
实验目的
1.了解维生素B1的相关性质。 2.掌握维生素B1含量的两种测定方法： 非水滴定法 紫外分光光度法
2、为什么维生素B1原料药用非水滴定法测定， 而维生素B1片可以采用紫外分光光度法测定？
22
ppt课件完整
感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络， 如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！
15
ppt课件完整
COMPANY LOGO
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
维生素B1（VB1）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC4190
规格:50T/48S
产品简介：
维生素B1（Vitamin B1）又称硫胺素，以辅酶形式参与糖的分解代谢，在生物体能量代谢中有重要的作用。
VB1在碱性条件下还原铁氰化钾生成亚铁氰化钾，亚铁氰化钾与Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝，测定布鲁士蓝在704nm下的特征吸收峰，即可反映VB1的含量。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP管、冰和蒸馏水。
产品内容：
提取液：液体35mL×1瓶，4℃保存；
稀释液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体7mL×1瓶，4℃避光保存；
试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存；
试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；
试剂五：液体8mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1支，10mg维生素B1，4℃避光保存。
临用前加入1mL稀释液，配成10mg/mL（即10000µg/mL）的标准液。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
第1页，共3页
组织：将样品磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入0.6mL 提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000g离心10min，取上清测定（动物组织、豆类种子等蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟或反复离心2-3次至上清无浑浊）细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入0.6mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；加蒸馏水0.4mL，混匀后于25℃，13000g离心10min，取上清测定。
液体：直接检测。
二、测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至704nm，蒸馏水调零。
2、将10mg/mL（10000µg/mL）标准液用稀释液稀释为125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9、2μg/mL
的标准溶液备用。
3、操作表：在1.5mLEP管中进行下列操作。
测定管标准管空白管样品（µL）100--
稀释液（µL）--100
标准品溶液（µL）-100-试剂一（µL）808080
试剂二（µL）100100100
充分混匀，80℃水浴反应30min。
试剂三（µL）808080
试剂四（µL）220220220
试剂五（µL）120120120
蒸馏水（µL）300300300
充分混匀，测定704nm处吸光值A，计算△A=A测定管-A空白管，△A标准=A标准管-A空白管。
空白管只需做一次。
维生素B1含量计算
1、标准曲线的绘制：
第2页，共3页
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的△A标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将△A带入方程得x（μg/mL）。
2、维生素B1含量的计算：
（1）按蛋白浓度计算
VB1（μg/mg prot）=x×V样总÷（Cpr×V样总）=x÷Cpr
（2）按样本质量计算
VB1（μg/g鲜重）=x×V样总÷W=x÷W
（3）按照细胞数量计算
VB1（μg/104cell）=x×V样总÷（细胞数量（万个）=x÷（细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
VB1（μg/mL）=x
V样总：样本总体积，1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g。
注意事项
1、A大于0.8时，建议将样品用提取液稀释后再进行测定，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2、蛋白浓度较高的样品，比如动物组织，豆类种子等建议将样本稀释20倍或40倍后再测定并在计算公式
中乘以稀释倍数。
3、显色完成后立即进行测定，若显色完成后有沉淀产生，将其摇匀后测定。
4、标准曲线线性范围为0.5-125μg/mL。
第3页，共3页。