桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定

的生理作用[3]。

黄连素是一种重要的生物碱，是我国应用很久的中药。

可从黄连、黄柏、三颗针等植物中提取，具有显著的抑菌作用。

黄连素在临床中一直作为非处方药用于治疗腹泻。

肠易激综合征临床特点主要是腹痛、腹胀、排便习惯和性状改变，一般持久性存在，间歇发作，患者常有常运动功能紊乱和肠道菌群失调。

本研究治疗原则主要从松弛平滑肌、扩充肠容积性、促进肠动力角度出发进行治疗。

本研究通过马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征，观察其疗效，结果表明，观察组和对照组组内比较，治疗后临床症状评分均明显低于治疗前（P ＜0.05），观察组治疗前临床症状评分与对照组治疗前比较，无显著性差异（P ＞0.05）；观察组治疗后临床症状评分低于对照组治疗后（P ＜0.05）。

提示马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征对于改善患者的临床症状明显。

另外本研究还发现，观察组治疗总有效率明显高于对照组（P ＜0.05）。

因此通过本研究表明，马来酸曲美布汀、双歧杆菌联合黄连素治疗肠易激综合征具有明显疗效，值得临床推广使用。

参考文献[1] 斯锞,廖文.马来酸曲美布汀联合双歧杆菌治疗功能性肠胀气疗效观察[J].四川医学,2009,30(1):19-21.[2] 吴泽生.马来酸曲美布汀联合酪酸菌制剂治疗肠易激综合征的疗效分析[J].华北煤炭医学院学报,2006,8(3):339-340.[3] 姚凡保,马海生,廖浩峰.双歧杆菌治疗感染后肠易激综合征58例疗效观察[J].华夏医学,2009,22(1):77-78.桃仁来源于蔷薇科Prunus 属植物，桃[Prunus persica （L.）Batsch.]或山桃[Prunus daridiana （Carr.）Franch.]的干燥成熟种子。

收载于《中国药典》[1]，均含苦杏仁甙（amygdalin ）及苦杏仁酶（emulsin ）等物质[1]。

苦杏仁甙含量测定在药典采用间接测定氢氰酸容量法[2]，而桃仁在药典无含量测定项。

苦杏仁甙的测定方法还有分光光度法[3]、HPLC 法[4]等。

本实验系统与已报道的HPLC 系统相比，有效地提高了苦杏仁甙的分离度，相关性好，可用于桃仁的质量控制。

1 材料实验所用桃仁为市售品，经中药室鉴定，桃仁为山桃的干燥成熟种子。

岛津LC-10A 高效液相色谱仪，SPD-10A 检测器，C-R6A 数据处理机，甲醇为色谱纯，其他均为分析纯。

苦杏仁甙对照品采用中国药品生物制品检定所产品，批号820-20002，供含量测定用。

2 方法和结果2.1 色谱条件色谱柱Irregular HC 18（4.6mm ×250mm ，10μm ），检测波长210nm ，室温，流动相磷酸盐缓冲液（pH=5.0）∶甲醇（800∶200），流速1mL/min 。

2.2 标准曲线精密称取苦杏仁甙对照品12.50mg 置25mL 量瓶中加ω（甲醇）=0.5溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，分别吸取此溶液0.25、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00mL 置l 0mL 量瓶中，用ω（甲醇）=0.5的溶液稀释至刻度，以20 μL 定量阀进样，测定峰面积A ，以A 减C 求得回归方程为Y=1.11×103X-1.31×103，r = 0.9999，结果表明浓度为12.5~250.0μg/mL 成良好的线性关系。

2.3 精密度和稳定性实验广州奇星药业有限公司（510310）桃仁中苦杏仁甙的HPLC含量测定赵 耀【摘要】目的 探讨用HPLC 法定量测定桃仁中苦杏仁甙的含量。

方法 IrregularHC 18 (4.6mm ×250mm ，10μm)，流动相为磷酸盐缓冲液（pH=5.0）-甲醇（800∶200）。

结果 苦杏仁甙在0.25~5μg 成线性，r =0.9999，平均回收率100.7%，RSD=1.3%。

结论 本方法分离效果好，重现性高，操作简单，可用于质量标准制定。

【关键词】桃仁；苦杏仁甙；高效液相色谱法中图分类号：R927.2 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2009）17-0084-022.3.1 将同一对照品溶液连续进样5次计算峰面积的RSD 为0.2%。

2.3.2 同一样品溶液，在室温条件下，间隔一定时间，在0、2、4、8、12、24、48h 分别测定苦杏仁甙的含量，RSD 为0.5 %，表明样品在48h 内稳定。

2.4 加样回收率试验精密称取已知含量为2.24%的供试品0.2g ，分别加入对照品1~2mg ，按供试液方法制备，测定，计算回收率，结果平均值为100.7%，RSD 为1.3%（表1）。

表1 苦杏仁甙的回收率测定结果（n=5）取样量(g)样品含量(mg)加入量(mg)测定量(mg)回收率(%)0.2139 4.79 1.52 6.33101.30.2106 4.72 2.10 6.8199.50.2033 4.55 1.73 6.2698.80.2100 4.70 1.21 5.94102.50.22214.981.656.65101.22.5 供试品溶液的制备与测定将供试品粉碎成粗粉，分别精密称取0.2g ，置索氏提取器中，用乙醚提取2h ，弃去乙醚，再用甲醇提取6h ，提取液转移到50mL 量瓶中，用ω（甲醇）= 0.5的溶液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。

取0.05mg/mL 的苦杏仁甙对照品溶液，分别进样20μL ，记录峰面积值，用外标法计算，结果见表2，色谱图见图1。

3 讨 论3.1 试验中如样品直接用甲醇超声提取，所得色谱杂质峰较多，干扰苦杏仁甙的测定，改用乙醚脱脂，甲醇回流提取后，杂质峰对苦杏仁甙无干扰。

3.2 实验中流动相的缓冲溶液选用磷酸钠盐配制，色谱图噪音较大，干扰峰较多，选用钾盐测定效果较好[2]。

3.3 实验系统具有色谱分高度高，干扰少，易重复等优点、可直接测定苦杏仁甙的含量，较测定其水解产物更科学准确，更有利于药材的质量控制[3]。

3.4 用ω（甲醇）=0.5的溶液定容时，溶液可产生轻微混浊，进样时滤除即可。

参考文献[1] 中国药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2000:160.表2 生桃仁中苦杏仁甙的含量测定结果（n=5）样品号生桃仁(%)RSD(%)1 3.14 1.82 2.26 2.13 3.48 1.84 3.24 1.853.211.3图1 桃仁（A ）与对照品（B）的色谱图[2] 易骏.3种不同产地桃仁中苦杏仁含量测定[J].时珍国医国药,2000,11(7):597-598.[3] 李琴韵.HPLC 法测定乳宁冲剂中苦杏仁甙的含量[J].中成药,1998,20(9):12-14.神经性耳聋是耳鼻喉科常见病之一，多伴有耳鸣等，影响工作和学习。

目前西医多采用营养神经类、扩张血管类、溶栓类药物治疗，均不能有效地控制本病，经过多年临床实践，用河南省中医院协定处方制剂聪耳丸治疗本病取得明显效果。

聪耳丸具有补肾益精，活血通络，聪耳熄鸣的功效，适用于神经性耳聋、耳鸣肾经亏损型耳聋，在应用中尚未发现不良反应，现报道如下。

1 处方与制备1.1 处方生地黄120g 、熟地黄120g 、生山药45g 、茯苓60g 、牡丹皮45g 、山萸肉60g 、泽泻36g 、五味子75g 、磁石75g 、酸枣仁60g 、黄精90g 、葛根45g 、石菖蒲45g 、贞子45g 、丹参45g 、全虫36g 、丝瓜络90g 、甘草18g 。

1.2 制备以上18味，生地黄、熟地黄、生山药、茯苓、牡丹皮、山芋肉、磁石、石菖蒲、全虫粉碎成细粉，过筛，混合后备用。

取泽泻、五味子、酸枣仁、黄精、葛根、女贞子、丹参、丝瓜络、甘草等10味药材加8倍量水浸泡1h 后煎煮2次，每次1h ，滤过，合并煎液，减压浓缩至相对密度1.45左右的清膏。

将细粉与清膏混匀后，制成直径为5mm 丸，干燥。

2 质量控制2.1 性状本品为棕褐色水丸，味微甜。

2.2 鉴别2.2.1 显微鉴别河南省中医院（450011）聪耳丸的制备及对神经性耳聋的临床观察赵 旭【关键词】聪耳丸；神经性耳聋；临床观察中图分类号：R28 文献标识码：B 文章编号：1671-8194（2009）17-0085-02取本品置显微镜下观察，淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24~40µm ，脐点短缝状或人字状。

不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色，直径4~6µm 。

草酸钙簇晶存在于无色薄璧细胞中，有时排列成行。

果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周璧连珠状增厚。

2.2.2 牡丹皮的鉴别取本品2g ，加乙醚20mL ，密塞，振摇10min ，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮2mL 使溶解，作为供试品溶液。

另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1mL 含5mg 的溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法（中华人民共和国药典[1]2005年版 一部附录ⅥB ）试验，吸取上述两种溶液各10µL ，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3∶1）为展开剂，展开，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。

2.3 检查应符合丸剂（中华人民共和国药典[1]2005年版 一部附录ZA ）项下规定。

2.4 稳定性考察将包装好的聪耳丸于室温下放置，分别在0、30、60、90、120d 时取出进行外观、性状鉴别及微生物限度检查，结果符合规定。

3 临床资料3.1 一般资料。