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第十一章 毒理学实验方法讲解

第十一章  毒理学实验方法讲解


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染毒方法:
(1)静式染毒法 (2)动式染毒法

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静式染毒法
静式染毒是将实验动物放在一定体积的密闭容器 (染毒柜)内,加入一定量的受试样品,并使其 挥发,造成试验需要的受试样品浓度的空气,一 次吸入性染毒2h。

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(3)剂量和分组
实验动物随机分为4~5个剂量组。若使用水、植 物油、凡士林、羊毛脂外的赋形剂,则需设赋形 剂对照组。豚鼠或大鼠每一剂量组(单性别)不 少于5只;家兔每一剂量组(单性别)不少于4只。
各剂量组间要有适当的组距,可按等比或等差级 设置剂量,以使各剂量组实验动物产生的毒性反 应和死亡率呈现剂量-反应(效应)关系。
试验基本原则:
以经口灌胃法给予各试验组动物不同剂量 的受试样品,每组用一个剂量,染毒剂量 的选择可通过预试验确定。染毒后观察动 物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡 的动物要进行尸检,试验结束时仍存活的 动物要处死并进行大体解剖。本方法主要 适用于啮齿类动物的研究,但也可用于非 啮齿类动物的研究。
(5)所用染毒浓度和动物分组,每组所用动物性别、数 量及体重范围;
(6)计算LC50的方法; (7)染毒后动物中毒表现及出现时间和恢复情况、死亡
时间、大体解剖所见;
(8)列表报告结果(建议的表格形式见附录1-D),计 算的LC50及其95%可信区间;
(9)结论。


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3、急性经口毒性试验
适用范围:
本方法规定了动物急性经口毒性试验 的基本原则、技术和要求。
本方法适用于评价化学品的急性毒性 作用。

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《毒理学实验基础》课件

《毒理学实验基础》课件

通过统计图表(如柱状图、折线图、散点 图等)直观地展示实验数据和分析结果。
05
毒理学实验的应用与展望
毒理学实验在药物研发中的应用
药物安全性评价
毒理学实验是药物研发过程中评 估药物安全性的重要手段,通过 动物实验观察药物对机体的毒性 作用,为新药上市提供安全性依
据。
药物作用机制研究
毒理学实验可以帮助研究药物的 作用机制,了解药物在体内的代 谢、转化和毒性作用机制,为新
生态风险评估
毒理学实验可以帮助评估人类活 动对生态环境的潜在风险,预测 污染物对生物多样性和生态平衡 的影响,为环境保护和可持续发 展提供支持。
环境修复与治理
毒理学实验可以用于环境修复与 治理过程中,研究生物修复技术 的有效性,评估治理措施对环境 的影响,提高环境治理的效果。
毒理学实验的发展趋势与展望
实验动物的选择
实验动物种类
01
选择适合的实验动物种类,如小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等,以
满足实验需求。
实验动物品系
02
根据实验目的和要求,选择不同品系的实验动物,以确保实验
结果的准确性和可靠性。
实验动物年龄与性别
03
根据实验目的和要求,选择不同年龄和性别的实验动物,以确
保实验结果的准确性和可靠性。
染毒方法与途径
盲法原则
实验过程中应保持盲态,避免主观偏见对实 验结果的影响。
实验数据的收集与整理
数据记录
准确、完整地记录实验数据,包括实验对象的基本信息、实验条件、观察指标等。
数据整理
对实验数据进行分类、排序、筛选等处理,使其更易于分析和解释。
数据核对
对实验数据进行核对,确保数据的准确性和完整性。
数据保密

毒理学实验设计ppt课件

毒理学实验设计ppt课件
6
3.随机原则
为了减少个体差异这种非处理因素的干拢, 应于实验前将实验动物依统计学原则进行 随机分组,以此达到尽可能降低非处理因 素的混杂效应,从而提高每组动物间均衡 性的目的。 (1)随机分组方法: ①随机数字表法; ②计算机软件(如SPSS、SAS、Excel等)方法 。
(2)例子:将32只动物按体重每4只组成一个区组, 随机分配到4种处理中,共组成8个区组。
10
Log[Dose]
3.确定毒作用的靶器官
4.确定损害的可逆性
5.其它 毒作用的敏感检测指标和生物学标志 毒作用机制研究 受试物的毒物动力学和代谢研究 中毒的解救措施
11
三、毒理学动物实验设计内容 1. 实验动物选择: 2. 实验动物分组与剂量选择、实验期限:
12
Biological Response
毒理学动物实验设计
外推
1
一、毒理学毒性评价试验的原则
毒理学实验通常是毒性评价或安全性评价试验, 通常由权威机构规定评价程序。 在描述毒理学的试验中,有三个基本的原则:
1.外来化学物在实验动物产生的作用,可以 外推于人
基本假设为: ①人是最敏感的动物物种; ②人和实验动物的生物学过程包括化学物的 代谢,与体重(或体表面积)相关。
17
通常实验记录的项目和内容为: (1)实验名称、实验日期、实验者; (2)受试对象:动物种类、品系、编号、体重、 性别、健康状况、饲料、离体器官名称等; (3)实验药物或试剂:名称、来源(生产厂)、 剂型、批号、规格、含量、浓度、给药体积、给 药剂量、给药时间、给药间隔、疗程等; (4)实验仪器:主要仪器名称、生产厂、型号、 规格等;
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Compute II=Uniform(1).

毒理学实验基础PPT课件

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适当重复、盲法观察等。 结果统计分析:方法选择,可用不同方法处理.
毒理学实验结果评价
• 结果评价需要解决的问题
– 是否具有统计学意义 统计学意义和生物学意 – 是否具有生物学意义 义的相关p131表6-6 – 是否具有毒理学意义
具有统计学意义是判断生物学意义的必要条件之一; 判断生物学意义时要:(1)纵向比较:剂量-反应关系;
• 阳性对照:剂量反应的直线部分 • 重复:可疑结果要重复,但非简单重复
七、实验动物染毒和处置
• 尽可能模拟人接触毒物的方式 • 不同途径的吸收速率为:静注>吸入
> 肌注> 腹腔注射> 皮下注射> 经 口> 皮内注射> 其他
实验动物染毒和处置
一、染毒
• 经口染毒:(1)喂饲、(2)灌胃、(3) 吞咽胶囊;
(四)、个体选择
• 性别:初次试验雌雄同用;存在差异分开统 计;选敏感性别。
• 年龄和体重:动物年龄依实验类型选择,取 成年期数据。体重可作为判断年龄的指标。
• 生理状态:避免激素影响,雌雄分开饲养; 繁殖实验、致畸试验适时合笼交配。
• 健康状况:用健康动物,提前观察确认。
(五)实验动物管理
• 动物管理:动物的接受、适应、饲养、鉴 别和记录(动物来源、处理、其它资料).
• refinement优化:必须 使用动物时,减少非人道 程序的影响
四、实验动物的选择
实验动物:指经人工培育,对其携带微 生物实行控制,遗传背景明确,来源 清楚,可用于科学研究的动物。
(一)物种选择
基本原则: • 对外源化学物的毒性反应及代谢特点
与常人规类实接验近选的择物两种个(物很种难,满分足属):; • 自然寿命不太•长啮的齿物类种; • 易于饲养和实•非验啮操齿作类的物种; 1. 经济并易于获得的物种。

毒理学实验基本技术与方法.ppt

毒理学实验基本技术与方法.ppt
18 2021年3月22日星期一6时41分42秒
(二)动物实验设计的主要方法
1.配对设计:将受试动物按一定条件配成对子,再随机分配每 对中的两个受试动物到不同的处理组。 2.随机区组设计:将受试动物按一定的特征划分为若干配伍组 或区组,再将机每一配伍组中的各受试动物随机分配到不同的 处理组。 3.完全随机设计:将受试动物随机地分配不同的处理组。 4.拉丁方设计:按拉丁方阵型将受试动物随机的分配到各个处 理组(涉及多个因素,且各个因素无交互作用、水平数相等)。
7 2021年3月22日星期一6时41分41秒
3 .动物实验的局限性
➢种属外推的不确定性 ➢高剂量向低剂量外推的不确定性 ➢样本量到大样本外推的不确定性 ➢无法观察主观指标
8 2021年3月22日星期一6时41分41秒
二、 动物实验的职业道德-3R原则
实验动物在人类认识生命、预防与治疗疾病的医学发展
5
6
7
8 9 10 11 12
随机数字 07 81 63 77 86 82 74 64 40 42 23 71
除3余数
1
0
02
2
1
2
01
0
2
2
组别
A C CB B A B CA C B B
随机数字表
以3除各随机数字,若余数为1,即该鼠归A组;余数为2,归人B组;余数 为0,归人C组。随机分组结果如下:
4 2021年3月22日星期一6时41分41秒
一、动物实验的目的、要求、局限性
实验动物(Laboratory animals)是专门培育供实验用的动物,主 要指作为医学、药学、生物学、兽医学等的科研、教学、医 疗、鉴定、诊断、生物制品制造等需要为目的而驯养、繁殖、 育成的动物。

环境毒理学实验课件

环境毒理学实验课件
环境毒理学实验ppt课件
介绍环境毒理学实验的ppt课件,包括定义和必要性。
引言
环境毒理学是研究环境中化学物质对生物体的毒性效应和作用机制的科学。进行环境毒理学实验可以评 估和预测化学物质对环境和生命的风险。
实验内容
实验目的
明确实验的目标和研究问题,为后续实验过程提供指导。
实验设计合理设计实验方案,包括实验组来自对照组的设置,实验条件的确定等。
结论
实验结论
总结实验结果,得出对于化学物质的毒性评估 和环境保护的建议。
对环境毒理学实验的思考
思考实验中的方法和技术是否可以改进,提出 对未来研究的建议和展望。
参考文献
1 相关期刊论文
2 专业书籍
查阅最新的相关研究论文,理解当前领域 的最新进展。
借鉴专业书籍中的理论知识和实验方法, 提升实验设计的专业性。
实验步骤
按照实验设计,执行实验步骤,记录实验操作和观察结果。
实验步骤
1. 搜集研究信息 2. 设计实验方案 3. 采集样品和处理 4. 实验操作记录 5. 数据分析和结果讨论
结果分析
实验结果分析
对实验结果进行统计分析和解读,探讨化学物 质对生物体的毒性效应。
结果图表展示
使用图表和图像直观地展示实验结果,提供数 据支持和可视化效果。

毒理学 ppt课件

毒理学  ppt课件
有阈: 系统毒性、致畸→安全限值 无阈: 致癌、致突变→实际安全剂量(VSD)
ppt课件
26
毒性参数和安全限值的剂量轴


──┼───┼─┼─┼─────┼─┼─┼───┼──┼─┼──┼→
安全限值 NOAEL 阈 LOAEL NOAEL 阈 LOAEL MTD MLD LD50 LD100
或VSD └────┘
毒理学
ppt课件
1
毒理学(toxicology)
从生物医学角度研究化学物质对生物机体的损 害作用及其机制的科学。
任何一种化学物在一定条件下都可能是对机体 产生任有害作用。
药物毒理学·卫生毒理学 研究范围:
化学物质→物理因素、物理因素等
ppt课件
2
精品资料
• 你怎么称呼老师? • 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你
○已知人致癌物都对某种实验动物具有致癌性。 实验动物致癌物是否都对人有致癌性,还不清 楚,但此已作为动物致癌试验的基础。
○一般认为,如果某一化学物对几个物种实验动 物的毒性是相同的,则人的反应也可能是相似 的。
ppt课件
35
高剂量暴露
实验动物必须暴露于高剂量,这是发 现对人潜在危害的必需的和可靠的方法。 毒性试验的设计并不是为了证明化学品 的安全性,而是为了表征化学品可能产 生的毒作用。
ppt课件
5
外源化学物(xenobiotics)是在人 类生活的外界环境中存在、可能 与机体接触并进入机体,在体内 呈现一定的生物学作用的一些化 学物质。内源化学物,是指机体 内原已存在的和代谢过程中所形 成的产物或中间产物。
ppt课件
6
卫生毒理学(Health Toxicology) 与共卫生工作有直接联系的各个 毒理学分支的基础和总称。包括 环境毒理学、工业毒理学、食品 毒理学、农药毒理学、放射毒理 学等。

神经毒理学基本知识与实验方法PPT课件

神经毒理学基本知识与实验方法PPT课件

2021
10
神经毒物
▪ 神经毒物 神经毒物可泛指引起机体神经系统功能或结 构损伤的外源性的物理、化学或生物因素。 外源性的化学物引起的神经毒性是损伤机体 神经系统的主要因素,污染环境后会持续存 在于我们的生产和生活环境中
▪ 现有神经毒物分类
2021
11
现有神经毒物分类
▪ 按理化性质、用途
▪ 按毒作用靶器官
1. 金属类
1. 神经细胞毒物
2. 溶剂类
2. 神经髓鞘毒物
3. 气体类
3. 神经轴索毒物
4. 农药类
4. 神经递质毒物
5. 药物
6. 天然毒素
请参考:
/Archive_view.asp?boardID=33&ID=5517
/Archive_view.asp?boardID=33&ID=5521
2021
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溶剂类
▪ 脂肪族烃类:烷烃、烯烃、炔烃、汽油。
▪ 脂肪族环烃类:松节油、环丙烷、环丁烷、 正己烷。
▪ 卤化物:四氯化碳、氯仿、氯丁二烯、三氯 苯、氯乙烯、三氯乙烯、四氯乙烯、二氯二 氟甲烷、三氯氟甲烷、氯丹、氯苯、对-二氯 苯、氯甲烷、1,2-二氯乙烷、多氯联苯、三 碘甲烷。
2021
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• Ependyma cells that line the brain's system of ventricles, spaces that hold the fluid that bathes the brain.
• Microglia - cells that are activated by injury, infection, or degeneration to produce inflammation, remove dead tissue, and help fight infections.

细胞毒理学实验ppt课件

细胞毒理学实验ppt课件
细胞存活率-台酚蓝染色 4
(五) 细胞毒理学实验
克隆形成检测试验
5
(五) 细胞毒理学实验
细胞增殖测定-BrdU染色 6
(五) 细胞毒理学实验
细胞代谢活力-MTT测定
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(五) 细胞毒理学实验
细胞代谢活力测定
8
(五) 细胞毒理学实验
第二节:细胞形态学研究
普通显微镜观察
电子显微镜观测技术
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(五) 细胞毒理学实验
普通显微镜观察
电子显微镜观测
10
(五) 细胞毒理学实验
第三节:细胞凋亡的检测
形态学观察方法
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(五) 细胞毒理学实验
第三节:细胞凋亡的检测
流式细胞仪检测细胞凋亡
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(五) 细胞毒理学实验
TUNEL检测细胞凋亡
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(五) 细胞毒理学实验
第四节:流式细胞仪分析技术
流式细胞仪的检测原理 14
(五) 细胞毒理学实验
细胞毒理学实验
1
(五) 细胞毒理学实验
细胞毒性的检测 细胞形态学研究 细胞凋亡的检测 流式细胞仪分析技术 免疫细胞化学 激光共聚焦显微镜和荧光标记技术
2
(五) 细胞毒理学实验
第一节:细胞毒性的检测
一、细胞存活率测定 二、细胞增殖测定 三、细胞代谢活力测定 四、体外细胞毒性试验的选择依据
3
(五) 细胞毒理学实验
流式细胞仪分析技术
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(五) 细胞毒理学实验
第五节:免疫细胞化学
免疫细胞化学
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药物毒理学实验演示课件

药物毒理学实验演示课件
评价一个药物的毒性指标:安全剂量(safety dose)、最小中 毒剂量(minimal toxic dose)、最大耐受剂量(MTD)、半数致死 量(LD50)、治疗指数(TI=LD50/ED50)、安全范围(MS=LD1/ED99或 LD5/ED95)
急性毒性试验 是指一次或24小时内多次染毒的试验,是毒性研究的 第一步。要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。通常为小鼠或大鼠采用经 口、吸入或经皮染毒途径。急性毒性试验主要测定半数致死量(浓度), 观察急性中毒表现,
特殊毒性试验 包括致畸、致癌、致突变作用以及生殖毒性试验。 (1)致突变实验包括微生物回复突变试验、哺乳动物培养细胞染色体畸变试验 和整体试验(常选用微核试验)。 作用于生殖系统的药物, 需进行动物显性致 死试验。 (2) 致癌实验: 短期致癌实验和长期致癌实验。 (3) 致畸胎试验:于孕鼠或孕兔胚胎的器官形成期给药,观察对子代的影响。
三、实验材料
1、动物:成年健康家兔。家兔休重2kg左右,与给受试物24 小时将动物背部脊柱两侧毛脱掉,脱毛面积约为体表面积10 %(家兔每侧各约50cm2)。
2、受试物:膏剂、液体或粉末。粉末需用适宜赋形剂(如 羊毛脂、凡士林等)混匀,本实验采用10%双氧水溶液。
四、实验方法
1、实验操作:在家兔背部受试物区和对照区(脱毛后),一 次将受试物1ml均匀涂布受试物区,将生理盐水涂布于空白对 照区,再以医用纱布及胶布进行包扎固定,开始计时。在给 药后30分钟取下包扎,用温水洗净皮肤上的残留受试物,观 察受试区皮肤的变化,有无红斑、水肿等现象。
也叫卫星核,是真核类生物细胞中的一种异常结 构,是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。
微核是在细胞的有丝分裂后期染色体有规律地进 入子细胞形成细胞核时,仍然留在细胞质中的染色 单体或染色体的无着丝粒片断或环。最后单独形成 一个或几个规则的次核,存在于细胞质中,由于比 核小得多故称微核。

毒理学实验基础ppt课件

毒理学实验基础ppt课件
毒理学实验基 础
前 言
• 毒理学:研究外源化学物与机体有害的交互作用 • 毒理学是一门实验科学,其研究的主要手段是动 物实验。 • 体内实验:是以实验动物为模型,通过外源化学 物对实验动物的毒性反应,向人外推,以评估对 人的危害及危险性 • 体外实验:主要用于筛选和预测急性毒性和机制 研究
主要内容
3.安死术
尿液采集-----代谢笼、膀胱穿刺术
胆汁采集-----插胆管
粪便采集----代谢笼采集
2.麻醉
麻醉过程的注意事项
在麻醉过程中,必须确定麻醉深度;对麻醉动物多个系统(如:心率、 脉搏、血压、心电图、体温、呼吸频率等)仔细监测,并作出针对不同情况 作出相应措施。
常用的麻醉药物
短效:乙醚 中效:赛拉嗪+氯胺酮 长效:戊巴比妥钠
中剂量组
高剂量组
低、中、高剂量组的剂量一般按等比计算,剂量间距一般为2或 10
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未处理对照组 (空白对照组)
阴性(溶剂) 对照组
阳性对照组
历史性对照
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实验动物染毒和处置
实验动物染毒 • 在毒性实验中染毒途径的选择,应尽可能模拟人 在接触该受试物的方式。
• 常用的染毒途径有:经口、经呼吸道、经皮及注
实验动物 和人对外 源化学物 的反应敏 感性不同, 甚至存在 质的差别
存在高 剂量向 低剂量 外推的 不确定 性
存在小 数量实 验动物 到大量 人群外 推的不 确定性
实验动物 对外源化 学物的反 应单一
Page 5
毒理学毒性评价试验的基本目的
受试物毒作用的表现 和性质
剂量---反应(效应) 研究
实验动物物种的选择 基本原则: 1.对受试物在代谢、生物化学和毒理学特征与 人最接近的物种 2.选择自然寿命不太长的物种

《环境毒理学实验》课件

《环境毒理学实验》课件

环境毒理学实验在化学品安全性评价中的作用
毒性测试
对化学物质进行急性、亚慢性及慢性毒性测试,评估其对生物体 的危害程度。
致癌性研究
通过环境毒理学实验研究化学物质的致癌性,为化学品的风险评估 提供依据。
生殖与发育毒性研究
探究化学物质对生殖和发育过程的影响,保障人类后代的健康。
环境毒理学实验的发展趋势与展望
跨学科融合
环境毒理学实验将与生物学、化学、 医学等学科深度融合,拓展研究领域 和应用范围。
新型实验技术应用
借助基因组学、蛋白质组学、代谢组 学等新型实验技术,提高环境毒理学 实验的精准度和可靠性。
绿色化学与可持续发展
环境毒理学实验将更加关注绿色化学 和可持续发展,推动化学品的安全生 产和合理应用。
国际合作与交流
《环境毒理学实验》ppt 课件
目 录
• 环境毒理学概述 • 环境毒理学实验方法 • 环境毒理学实验设计 • 环境毒理学实验结果分析 • 环境毒理学实验的应用与展望
01
环境毒理学概述
环境毒理学的定义与特点
总结词
环境毒理学是一门研究环境污染物对生物体,特别是人类和动物的毒性作用的学科。它具有跨学科性、预防性和 实验性的特点。
Байду номын сангаас
致癌性实验
总结词
确定化学物质是否具有致癌作用
详细描述
致癌性实验是通过长期给予实验动物一定剂量的化学物质, 观察其是否引发肿瘤的发生和发展,以评估化学物质的致癌 风险。
03
环境毒理学实验设计
实验动物选择
实验动物种类
01
选择与人类生理、代谢和疾病特征相似的动物种类,如小鼠、
大鼠、豚鼠、仓鼠等。
实验动物品系
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30、风俗可以造就法律,也可以废除 法律。 ——塞·约翰逊
毒理学实验ppt讲解
谢谢!
51、 天 下 之 事 常成 于困约 ,而败 于奢靡 。——陆 游 52、 生 命 不 等 于是呼 吸,生 命是活 动。——卢 梭

26、我们像鹰一样,生来就是自由的 ,但是 为了生 存,我 们不得 不为自 己编织 一个笼 子,然 后把自 己关在 里面。 ——博 莱索

27、法律如果不讲道理,即使延续时 间再长 ,也还 是没有 制约力 的。— —爱·科 克

28、好法律是由坏风俗创造出来的。 ——马 克罗维 乌斯

29、在一切能够接受法律支配的人类 的状态 中,哪 里没有 法律, 那里就 没有自 由。— —洛克
53、 伟 大 的 事 业,需 要决心 ,能力 ,组织 和责任 感。 ——易 卜 生 54、 唯 书 籍 不 朽。——乔 特
55、 为 中 华 之 崛起而 读书。 ——周 恩来
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