燕麦麸中水溶性膳食纤维提取工艺优化
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2 0 0 8年7月
农业机械学报
第39卷第7期
燕麦麸中水溶性膳食纤维提取工艺优化*
刘焕云 李慧荔 赵 红
【摘要】 以燕麦麸为原料提取水溶性膳食纤维,研究了原料处理、料液比、浸提温度、浸提时间等对水溶性膳
食纤维得率的影响,通过单因素及正交试验确定较佳提取工艺为:以液料比9 mL/g,在pH值6.5、浸提65℃条件
下加入耐热a一淀粉酶,作用30 min去除淀粉,然后调pH值为9.0继续提取2 h;等电点沉淀法去蛋白,无水乙醇醇 析9 h。在该工艺条件下得到水溶性膳食纤维的得率为12.40%,纯度78.56%。
关键词:食品工艺燕麦麸水溶性膳食纤维提取
中图分类号:Ts201.1
文献标识码:A
Optimization of Extraction Process of Soluble Dietary Fibre from oat Bran
Liu Huanyun Li Huili Zhao Hong
(f砒i E∞720,竹ic苫口,2d了’地(如L砌it谚,葛i砂,S矗巧妇2五“口以g 050061,C冼主力口)
Abstract
To extract the S01uble dietary fibre from oat bran,the effects of different pretreatment methods,
the ratio of raw material to extraction Solvent, temperature and the time on the yield of Soluble dietary
detemined fibr岛 were studied respectively. The optimum extraction process was
using the single
factor and orthogonal experiments. The experimental results show that the optimum extraction process
is as f01lows:when the extraction temperature 65℃ and pH 6.5, entering a—starch enzyme into the
solvent with the ratio of extraction Solvent to raw material 9 mL;then changing pH to 9.0 for
extraction of 2 hours;isoelectric precipitating the protein, and precipitating the water—s01uble dietary
fibre with ethanol fo;9 hourS.Under this optimum extraction pmcess,the yield and purity of Soluble
dietary fibre are 12.40%and 78.56%respectively.
Key words Fbod technology, Oat bran,s01uble dietary fibre,Extraction
引言
膳食纤维按溶解性不同可分为水溶性膳食纤维 (SDF)和水不溶性膳食纤维(IDF)两类,水溶性膳食 纤维在许多方面具有比水不溶性膳食纤维更强的生 理功能,如持水性高,防便秘,降低胆固醇等[1]。
燕麦是谷物中最好的全价营养食品,加工过程 中能较好地保存外皮,其总膳食纤维含量在16%以 上,其中水溶性膳食纤维占1/3以上旧J。本文以燕 麦麸为原料,采用单因素及正交试验,对提取燕麦麸
水溶性膳食纤维的最佳工艺条件加以研究。
1材料与设备
1.1原料及试剂 燕麦麸,产于河北省张家口。耐热a.淀粉酶,北
京双旋微生物培养基制品厂。95%乙醇,乙醚,碘 液,0.1%HCl溶液,0.1%Na0H溶液等,以上试剂 均为分析纯,配制用水为二次蒸馏水。 1.2仪器与设备
LⅪ一2型离心沉淀机(上海分析仪器厂);
收稿日期:2007一09—25 *河北省科技厅科研项目(项目编号:05212803)
刘焕云 河北经贸大学生物科学与工程学院 李慧荔河北经贸大学生物科学与工程学院 赵红河北经贸大学生物科学与工程学院
副教授。05006l石家庄市 讲师 本科生
104
农业机械学报
DHS一4CT型精密酸度计(上海大谱仪器有限公 司);RE52一凡姬型旋转蒸发器(温州奥利生物医学 仪器厂);阿贝折射仪(上海浦东物理光学仪器厂); 粉碎机(温领市大德中药机械有限公司);101—4型 电热鼓风干燥箱(上海市实验仪器总厂);恒温水浴 锅(上海实验仪器厂);索氏提取器(上海第三分析仪 器厂);电子天平等。
2试验方法
2.1 sDF的提取工艺流程
燕麦麸一粉碎一脱脂一水解去淀粉一
残渣一二次提取]
十
』
热水搅拌提取一离心分离一收集上清液一去蛋白一
醇析一离心分离一干燥一粉碎一主要指标检测
2.2操作要点 2.2.1 粉碎
燕麦原料不同部位的水溶性膳食纤维含量不
同,麸皮的加工方式不同也会造成水溶性膳食纤维
含量的差别,故在试验前先将干燥燕麦麸皮置于粉
碎机中粉碎,过筛后待用。 2.2.2脱脂
原料燕麦麸中含有8.2%~12%的脂肪,会影
响水溶性膳食纤维的分子量[3】,从而影响其生理功
能。本文用乙醚对40~60目之间燕麦麸进行回流
脱脂,用脱脂后的燕麦麸作为提取原料。 2.2.3水解去淀粉及水浴提取
将脱脂后的燕麦麸以液料比9 mL/g,在65℃ 下进行水浴搅拌提取30 min,同时加入适量耐热
a一淀粉酶。去除淀粉后,调pH值为9.O继续提取一 定时间,以4 000 r/min离心分离30 min,残渣二次
提取(液料比9 mL/g),合并上清液测折光率。 2.2.4去蛋白
采用等电点沉淀法。取上清液,用体积分数为
5%的HCl调等电点至pH值为4.5,静置4 h,离心 分离蛋白沉淀。
2.2.5醇析 调上清液pH值为7.0,浓缩至5~10 mL。边
搅拌边加入4倍体积的无水乙醇,静置沉淀9 h,离 心分离沉淀。
2.2.6干燥和粉碎
对上述沉淀物进行真空干燥、粉碎即得成品。
2.3原料和成品的成分分析
淀粉含量测定,GB/T5009.9—2003[41;蛋白质
含最测定,微量凯氏定氮法[51;脂肪含量测定,索氏
抽提法[5];含水率测定,GB/T5009.3—2003[4];灰
分含量测定,GB/T5009.4—2003[41;总膳食纤维
(TDF)、水不溶性膳食纤维(IDF)和水溶性膳食纤
维(SDF)含量测定,酶一重量法AOAC991.43【6|。
2.4 sDF得率的计算
y2:石爿掣而×x100% SDF得率计算公式为 y
luu%
式中 m——SDF质量,g r,——纤维的含水率 G——燕麦麸质量,g r,——燕麦麸的含水率
2.5溶胀力测定 称取1.000 g膳食纤维粉放入量筒中,读取干
纤维粉的体积,然后加入20℃水使总体积达到 50 mL,摇匀后于20℃下放置24 h,再读取量筒中纤 维物料的体积数,最后将膨胀后的纤维物料体积减 去干纤维物料体积,计算溶胀力[7|。 2.6持水力测定
称取1.000 g膳食纤维粉放入量筒中,然后加 入20℃水,放置1 h,将纤维放在滤纸上沥干后,把 保留在滤纸上结合了水的纤维转移到一表面皿中称 量,计算持水力[7|。
3结果与讨论
3.1原料处理 将500 g粉碎后的燕麦麸置于振筛机上进行筛
分处理,振筛机上有20目(孔径为0.900 mm)、 40目(孔径为0.450 mm)、60目(孔径为0.280 mm)、 80目(孔径为0.180 mm)、100目(孔径为 0.154 mm)等各层筛。调至振动1 h。收集各层截 留燕麦麸进行称重,并对不同孔目筛选得到的燕麦 麸中水溶性膳食纤维含量进行比较(表1)。由表1 结果,考虑生产成本和效率,本文选40~60目之间 的燕麦麸作为提取SDF的原料。对此原料按
参数—— 2.3节方法进行基本成分分析,结果表明原料中淀
粉和蛋白质含量较高,分别为37.83%和20.13%。
表1 筛分粒度对燕麦麸sDF含量的影响
Tab.1 Effects of oat bran sizes on SDF content %
筛分粒度/目
<20
20~40 40~60 60~80 80~100 >100
质量比
10.4
30.2
32.1
12.5
11.2
3.6
sDF含量 6.05
11.05
12.86
10.41
6.47
6.37
3.2 sDF提取的单因素试验 3.2.1 水解去淀粉工艺条件的选择
由3.1节可知燕麦麸中含有大量的淀粉,在
第‘7期
刘焕云等:燕麦麸中水溶性膳食纤维提取工艺优化
105
SDF提取过程中去除淀粉是必需步骤,随着提取的 进行,淀粉也逐步溶出,而且部分淀粉糊化使提取液 的黏度增大而影响水溶性膳食纤维的提取效果,加 入淀粉酶可适当降低体系黏度,有助于SDF的提 取。
本试验采用先水解去淀粉,同时提取的方法。 在液料比9 mL/g的提取液中,分别加入不同量的 耐热a一淀粉酶,根据其最适条件,在65℃、pH值6.5 的条件下水解不同时间,淀粉去除效果以碘液与提 取液反应所产生的颜色变化为评判标准。由表2结 果可见,随着酶作用时间的延长与用量增大,提取液 中淀粉去除效果逐渐变好,考虑到生产成本的经济 性和缩短生产周期,加酶量以1:200为宜,作用时间
30 min。
表2淀粉酶水解淀粉的效果
e眦珊e Tab.2 EmⅪts of hydrolysis starch by
注:加酶量是指酶的质量(g)与料液总量(mL)的比例,++表示 碘液呈深蓝色,+表示呈微弱蓝色,一表示颜色没有明显变化。
3.2.2继续提取工艺条件的研究 由燕麦麸浸提出的水溶性膳食纤维溶解于水,
从而使溶液的折光率增大,而折光率的大小与溶液 中可溶性固形物的浓度成正比。因此可通过测定浸 提离心所得上清液折光率的大小来判断水溶性膳食 纤维(SDF)的含量,也即上清液折光率越大则水溶 性膳食纤维浸出率越高【8 J。
去除淀粉工艺条件确定后,对浸提温度、时间、 液料比、溶液pH值这几个影响SDF提取效果的主 要因素分别进行考察,通过测定浸提液的折光率观 察其对sDF浸出率的影响。试验结果如图1~4。 结果表明浸提温度和pH值对SDF的提取影响较大 (图2、3);当液料比超过9 mL/g时,由于溶液总体 积增加,折光率反而下降,且加水量增加将会给后续 处理带来影响(图1);浸提时间超过90 min后,折光
.370
365
.360 褂 米 355 辖 .350
345
340
45
55
65
75
85
浸提温度/℃
图2浸提温度对SDF浸出率的影响
t廿Ilpe豫t悯 Rg.2 Yidds of sDF诵th differ廿lt e)(traction
(pH值9.o、液料比9 mL/g、浸提时间90 min)
l_365
1.360
糌1.355
蠢1350
1.345
1.340
6
7
8
9
lO
ll
pH值
图3浸提pH值对sDF浸出率的影响
Fig.3 Yields of SDF with different extraction pH (液料比9 mL/g、浸提温度65℃、浸提时间90 min)
.365 .360 需 .355 絮 .350 辖 .345
.340
率增大不明显,即SDF的浸出率增加不明显(图4)。
3.3正交试验
在以上单因素试验结果的基础上,采用b(34)
正交试验表,以水溶性膳食纤维得率为评价指标,对
sDF的提取工艺条件进行优化。试验结果与分析
见表3。
表3正交试验安排与结果
Tab.3 orthogonal experiment and resul拓
Fig.1
液料比/mL·g一1
图1液料比对sDF浸出率的影响 Yields of SDF with different s01vent/oat bran rati∞ (pH值9.0、浸提温度65℃、浸提时间90 min)
106
农业机械学报
2 O 0 8年
根据极差的大小,各因素对SDF得率影响次序 为:A>B>D>C。较佳工艺条件组合为 A282C3D1,即浸提温度65℃,浸提pH值9.0,液料 比9 mL/g,浸提时间120 min。按较佳工艺条件进 行验证试验,经去蛋白、醇析、分离、干燥,SDF得率 为12.40%。
农业机械学报
第39卷第7期
燕麦麸中水溶性膳食纤维提取工艺优化*
刘焕云 李慧荔 赵 红
【摘要】 以燕麦麸为原料提取水溶性膳食纤维,研究了原料处理、料液比、浸提温度、浸提时间等对水溶性膳
食纤维得率的影响,通过单因素及正交试验确定较佳提取工艺为:以液料比9 mL/g,在pH值6.5、浸提65℃条件
下加入耐热a一淀粉酶,作用30 min去除淀粉,然后调pH值为9.0继续提取2 h;等电点沉淀法去蛋白,无水乙醇醇 析9 h。在该工艺条件下得到水溶性膳食纤维的得率为12.40%,纯度78.56%。
关键词:食品工艺燕麦麸水溶性膳食纤维提取
中图分类号:Ts201.1
文献标识码:A
Optimization of Extraction Process of Soluble Dietary Fibre from oat Bran
Liu Huanyun Li Huili Zhao Hong
(f砒i E∞720,竹ic苫口,2d了’地(如L砌it谚,葛i砂,S矗巧妇2五“口以g 050061,C冼主力口)
Abstract
To extract the S01uble dietary fibre from oat bran,the effects of different pretreatment methods,
the ratio of raw material to extraction Solvent, temperature and the time on the yield of Soluble dietary
detemined fibr岛 were studied respectively. The optimum extraction process was
using the single
factor and orthogonal experiments. The experimental results show that the optimum extraction process
is as f01lows:when the extraction temperature 65℃ and pH 6.5, entering a—starch enzyme into the
solvent with the ratio of extraction Solvent to raw material 9 mL;then changing pH to 9.0 for
extraction of 2 hours;isoelectric precipitating the protein, and precipitating the water—s01uble dietary
fibre with ethanol fo;9 hourS.Under this optimum extraction pmcess,the yield and purity of Soluble
dietary fibre are 12.40%and 78.56%respectively.
Key words Fbod technology, Oat bran,s01uble dietary fibre,Extraction
引言
膳食纤维按溶解性不同可分为水溶性膳食纤维 (SDF)和水不溶性膳食纤维(IDF)两类,水溶性膳食 纤维在许多方面具有比水不溶性膳食纤维更强的生 理功能,如持水性高,防便秘,降低胆固醇等[1]。
燕麦是谷物中最好的全价营养食品,加工过程 中能较好地保存外皮,其总膳食纤维含量在16%以 上,其中水溶性膳食纤维占1/3以上旧J。本文以燕 麦麸为原料,采用单因素及正交试验,对提取燕麦麸
水溶性膳食纤维的最佳工艺条件加以研究。
1材料与设备
1.1原料及试剂 燕麦麸,产于河北省张家口。耐热a.淀粉酶,北
京双旋微生物培养基制品厂。95%乙醇,乙醚,碘 液,0.1%HCl溶液,0.1%Na0H溶液等,以上试剂 均为分析纯,配制用水为二次蒸馏水。 1.2仪器与设备
LⅪ一2型离心沉淀机(上海分析仪器厂);
收稿日期:2007一09—25 *河北省科技厅科研项目(项目编号:05212803)
刘焕云 河北经贸大学生物科学与工程学院 李慧荔河北经贸大学生物科学与工程学院 赵红河北经贸大学生物科学与工程学院
副教授。05006l石家庄市 讲师 本科生
104
农业机械学报
DHS一4CT型精密酸度计(上海大谱仪器有限公 司);RE52一凡姬型旋转蒸发器(温州奥利生物医学 仪器厂);阿贝折射仪(上海浦东物理光学仪器厂); 粉碎机(温领市大德中药机械有限公司);101—4型 电热鼓风干燥箱(上海市实验仪器总厂);恒温水浴 锅(上海实验仪器厂);索氏提取器(上海第三分析仪 器厂);电子天平等。
2试验方法
2.1 sDF的提取工艺流程
燕麦麸一粉碎一脱脂一水解去淀粉一
残渣一二次提取]
十
』
热水搅拌提取一离心分离一收集上清液一去蛋白一
醇析一离心分离一干燥一粉碎一主要指标检测
2.2操作要点 2.2.1 粉碎
燕麦原料不同部位的水溶性膳食纤维含量不
同,麸皮的加工方式不同也会造成水溶性膳食纤维
含量的差别,故在试验前先将干燥燕麦麸皮置于粉
碎机中粉碎,过筛后待用。 2.2.2脱脂
原料燕麦麸中含有8.2%~12%的脂肪,会影
响水溶性膳食纤维的分子量[3】,从而影响其生理功
能。本文用乙醚对40~60目之间燕麦麸进行回流
脱脂,用脱脂后的燕麦麸作为提取原料。 2.2.3水解去淀粉及水浴提取
将脱脂后的燕麦麸以液料比9 mL/g,在65℃ 下进行水浴搅拌提取30 min,同时加入适量耐热
a一淀粉酶。去除淀粉后,调pH值为9.O继续提取一 定时间,以4 000 r/min离心分离30 min,残渣二次
提取(液料比9 mL/g),合并上清液测折光率。 2.2.4去蛋白
采用等电点沉淀法。取上清液,用体积分数为
5%的HCl调等电点至pH值为4.5,静置4 h,离心 分离蛋白沉淀。
2.2.5醇析 调上清液pH值为7.0,浓缩至5~10 mL。边
搅拌边加入4倍体积的无水乙醇,静置沉淀9 h,离 心分离沉淀。
2.2.6干燥和粉碎
对上述沉淀物进行真空干燥、粉碎即得成品。
2.3原料和成品的成分分析
淀粉含量测定,GB/T5009.9—2003[41;蛋白质
含最测定,微量凯氏定氮法[51;脂肪含量测定,索氏
抽提法[5];含水率测定,GB/T5009.3—2003[4];灰
分含量测定,GB/T5009.4—2003[41;总膳食纤维
(TDF)、水不溶性膳食纤维(IDF)和水溶性膳食纤
维(SDF)含量测定,酶一重量法AOAC991.43【6|。
2.4 sDF得率的计算
y2:石爿掣而×x100% SDF得率计算公式为 y
luu%
式中 m——SDF质量,g r,——纤维的含水率 G——燕麦麸质量,g r,——燕麦麸的含水率
2.5溶胀力测定 称取1.000 g膳食纤维粉放入量筒中,读取干
纤维粉的体积,然后加入20℃水使总体积达到 50 mL,摇匀后于20℃下放置24 h,再读取量筒中纤 维物料的体积数,最后将膨胀后的纤维物料体积减 去干纤维物料体积,计算溶胀力[7|。 2.6持水力测定
称取1.000 g膳食纤维粉放入量筒中,然后加 入20℃水,放置1 h,将纤维放在滤纸上沥干后,把 保留在滤纸上结合了水的纤维转移到一表面皿中称 量,计算持水力[7|。
3结果与讨论
3.1原料处理 将500 g粉碎后的燕麦麸置于振筛机上进行筛
分处理,振筛机上有20目(孔径为0.900 mm)、 40目(孔径为0.450 mm)、60目(孔径为0.280 mm)、 80目(孔径为0.180 mm)、100目(孔径为 0.154 mm)等各层筛。调至振动1 h。收集各层截 留燕麦麸进行称重,并对不同孔目筛选得到的燕麦 麸中水溶性膳食纤维含量进行比较(表1)。由表1 结果,考虑生产成本和效率,本文选40~60目之间 的燕麦麸作为提取SDF的原料。对此原料按
参数—— 2.3节方法进行基本成分分析,结果表明原料中淀
粉和蛋白质含量较高,分别为37.83%和20.13%。
表1 筛分粒度对燕麦麸sDF含量的影响
Tab.1 Effects of oat bran sizes on SDF content %
筛分粒度/目
<20
20~40 40~60 60~80 80~100 >100
质量比
10.4
30.2
32.1
12.5
11.2
3.6
sDF含量 6.05
11.05
12.86
10.41
6.47
6.37
3.2 sDF提取的单因素试验 3.2.1 水解去淀粉工艺条件的选择
由3.1节可知燕麦麸中含有大量的淀粉,在
第‘7期
刘焕云等:燕麦麸中水溶性膳食纤维提取工艺优化
105
SDF提取过程中去除淀粉是必需步骤,随着提取的 进行,淀粉也逐步溶出,而且部分淀粉糊化使提取液 的黏度增大而影响水溶性膳食纤维的提取效果,加 入淀粉酶可适当降低体系黏度,有助于SDF的提 取。
本试验采用先水解去淀粉,同时提取的方法。 在液料比9 mL/g的提取液中,分别加入不同量的 耐热a一淀粉酶,根据其最适条件,在65℃、pH值6.5 的条件下水解不同时间,淀粉去除效果以碘液与提 取液反应所产生的颜色变化为评判标准。由表2结 果可见,随着酶作用时间的延长与用量增大,提取液 中淀粉去除效果逐渐变好,考虑到生产成本的经济 性和缩短生产周期,加酶量以1:200为宜,作用时间
30 min。
表2淀粉酶水解淀粉的效果
e眦珊e Tab.2 EmⅪts of hydrolysis starch by
注:加酶量是指酶的质量(g)与料液总量(mL)的比例,++表示 碘液呈深蓝色,+表示呈微弱蓝色,一表示颜色没有明显变化。
3.2.2继续提取工艺条件的研究 由燕麦麸浸提出的水溶性膳食纤维溶解于水,
从而使溶液的折光率增大,而折光率的大小与溶液 中可溶性固形物的浓度成正比。因此可通过测定浸 提离心所得上清液折光率的大小来判断水溶性膳食 纤维(SDF)的含量,也即上清液折光率越大则水溶 性膳食纤维浸出率越高【8 J。
去除淀粉工艺条件确定后,对浸提温度、时间、 液料比、溶液pH值这几个影响SDF提取效果的主 要因素分别进行考察,通过测定浸提液的折光率观 察其对sDF浸出率的影响。试验结果如图1~4。 结果表明浸提温度和pH值对SDF的提取影响较大 (图2、3);当液料比超过9 mL/g时,由于溶液总体 积增加,折光率反而下降,且加水量增加将会给后续 处理带来影响(图1);浸提时间超过90 min后,折光
.370
365
.360 褂 米 355 辖 .350
345
340
45
55
65
75
85
浸提温度/℃
图2浸提温度对SDF浸出率的影响
t廿Ilpe豫t悯 Rg.2 Yidds of sDF诵th differ廿lt e)(traction
(pH值9.o、液料比9 mL/g、浸提时间90 min)
l_365
1.360
糌1.355
蠢1350
1.345
1.340
6
7
8
9
lO
ll
pH值
图3浸提pH值对sDF浸出率的影响
Fig.3 Yields of SDF with different extraction pH (液料比9 mL/g、浸提温度65℃、浸提时间90 min)
.365 .360 需 .355 絮 .350 辖 .345
.340
率增大不明显,即SDF的浸出率增加不明显(图4)。
3.3正交试验
在以上单因素试验结果的基础上,采用b(34)
正交试验表,以水溶性膳食纤维得率为评价指标,对
sDF的提取工艺条件进行优化。试验结果与分析
见表3。
表3正交试验安排与结果
Tab.3 orthogonal experiment and resul拓
Fig.1
液料比/mL·g一1
图1液料比对sDF浸出率的影响 Yields of SDF with different s01vent/oat bran rati∞ (pH值9.0、浸提温度65℃、浸提时间90 min)
106
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2 O 0 8年
根据极差的大小,各因素对SDF得率影响次序 为:A>B>D>C。较佳工艺条件组合为 A282C3D1,即浸提温度65℃,浸提pH值9.0,液料 比9 mL/g,浸提时间120 min。按较佳工艺条件进 行验证试验,经去蛋白、醇析、分离、干燥,SDF得率 为12.40%。