应重视实验室检查中抗凝剂的使用

应重视实验室检查中抗凝剂的使用

作者：佚名文章来源：互联网点击数：413 更新时间：2009-8-10 转载

李艳包安裕

武汉大学人民医院检验科430060

编者案：

随着医学检验技术的不断进步，对分析前标本的要求也越来越高。在采集容器中预置抗凝剂或促凝剂等添加剂成为标本处理的重要手段，而所用添加剂的种类及配比浓度直接影响检验结果的可靠性和准确性。我国卫生部于二OO二年发布了《WS/T 224真空采血管及其添加剂》和《WS/T 225临床化学检验血液标本的收集与处理》两个卫生行业标准，旨在指导和规范医疗机构的分析前标本处理。而本文更是结合国内国际的相关标准，对临床实验室使用抗凝剂的状况进行了分析，我们认为对国内同行正确选择与使用抗凝剂具有借鉴意义，因此特转载此文以供参考。

【摘要】抗凝剂的使用是实验室全面质量管理的重要内容之一。是否使用抗凝剂、使用何种抗凝剂关系到实验室检查结果的准确性。本文概述了不同抗凝剂的使用范围、对测定结果的影响，提出了抗

凝剂使用应注意的问题和解决方法。

【关键词】抗凝剂；实验室技术和方法；全面质量管理

医学实验室检查是疾病诊治过程中的一个重要环节，其目的是通过对各种离体成分的检测为临床医生提供全面、准确的机体状态信息。血液检验又是实验室检查的重要方面。如何正确恰当地选用血液标本类别（血清、血浆或全血），如何准确规范地使用抗凝剂是实验室全面质量管理的重要内容之一，其目的是使待测的离体血液成分尽可能接近在体状态，从而更准确地反映机体信息。因此，抗凝剂的使用关系到实验室检查结果的真实性与有效性。

过去曾首选血清来测定血液中某成分的细胞外浓度，现在则首选血浆用于部分实验室检查。2002年WHO文件[1]《实验室检查中抗凝剂的使用》强调，使用抗凝剂能避免血液中待测成分的改变，血浆中的成分比血清能更好地反映患者的病理状态。当前的实验室检查中，对抗凝剂的使用主要存在两方面的问题，一是项目的检测，把血清与血浆的检测结果视为等同；二是忽视了不同抗凝剂对某些项目导致的检测结果差异。笔者综合WHO的相关文件以及实验室检查中使用抗凝剂的有关报道，提供新的观念和使用原则，旨在为实验室工作人员恰当选用抗凝剂、报告准确的检测结果提供参考。

一、血清、血浆与全血的定义

血清、血浆与全血都是实验室检查可选用的血液标本类型，但是它

们之间存在显著的差异，不容忽视。血清是凝血完成后血液未经稀释的细胞外成分[1]。血清是血液自然凝固后1-2h，血凝块发生回缩析出的淡黄色透明液体[2]。血浆是血液加抗凝剂后离心所得的无细胞上清液。血浆的化学成分中，水分占90%～92%，蛋白质占6.5％-8.5％，低分子物质如代谢产物、某些激素等占2％。而全血是来自静脉、动脉或毛细血管的血样，和体内状态相比，全血中的细胞与细胞外成分的浓度与特性保持相对不变。体外抗凝剂使全血成分在一定时间内保持相对稳定。

血清与血浆的区别在于前者缺乏纤维蛋白原和少量参与血凝的其他血浆蛋白质，但是又增添了少量血凝时由血小板释放出来的物质[2]。血管被刺破后血小板和凝血因子被激活，凝血过程在不含凝血剂的采血管中继续进行，必须加入体外抗凝剂才能阻止血液凝固，使用血浆可使待测成分接近在体状态。因此，实验室检查中使用抗凝剂显得十分重要。

二、血清、血浆与全血的适用范围

血清、血浆与全血之间的差异主要是由凝血过程产生的，这决定了3种血液标本在实验室检查中不同的适用范围。WHO文件[1] 《实验室检查中抗凝剂的使用》列举了血标本317项指标，将血标本分为推荐、可用、限制性使用和不宜使用4类。推荐使用血浆56项，其中肝素抗凝血浆13项，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血浆17项，柠檬酸盐抗凝血浆26项；推荐使用全血47项，其中肝素抗凝全血

7项，EDTA抗凝全血37项，柠檬酸盐抗凝全血3项；推荐使用血清的项目仅有8项；尚有204项血清或血浆均可使用。

1.血清：WHO文件《实验室检查中抗凝剂的使用》中推荐使用血清检测的项目有：血清蛋白电泳、脂蛋白电泳、甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、类风湿因子、曲菌抗原抗体、IgD和IgE。除以上推荐项目外，该文件指出尚有204个项目可用血清或血浆样本检测，其差异无统计学意义和临床意义，其中包括了大部分生化指标。病原微生物抗体检测都是使用血清标本的，如肝炎病毒抗体、百日咳杆菌抗体、衣原体抗体、巨细胞病毒抗体、登革热病毒抗体、EB病毒抗体、腮腺炎病毒抗体等。另外，一般将血清用于感染性疾病的血清学诊断，有些实验技术必须用血清才行，如补体结合实验、细菌凝集实验。

2.血浆：血液凝固是一个复杂的过程，涉及多方面的改变。凝血反应消耗了凝血因子，同时血小板又释放出一些物质，这些成分都留在血清中并继续发生变化，如凝血酶原变成凝血酶，并随血清存放时间逐渐减少以至消失。因此，涉及凝血和抗凝的指标如凝血因子、凝血酶原时间，活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、抗凝血酶Ⅲ、D-二聚体、纤维蛋白单体不能选择血清标本检测，必须选用柠檬酸钠抗凝血浆（柠檬酸盐：血液＝1：9）进行检测[3]。值得关注的是：很多可以使用血清的指标都可以用血浆来替代，因为人和动物体内并不存在血清，血液中所有的非细胞成分都存在于血浆中，血浆检

测更接近机体真实状态。

3.全血：测定血液中的细胞成分则必须使用抗凝全血标本，如红细胞计数、白细胞分类计数、血小板计数、Hb测定、ESR分析等。实验室检查中选择抗凝全血的范围比较确定，适宜使用肝素抗凝全血测定的项目有：碳酸氢盐、血气分析、钙离子、HLA-ABC分型、镁离子；适宜使用EDTA抗凝全血测定的项目有：载脂蛋白E基因分型、环孢菌素、血细胞计数、核酸分析、毛细血管葡萄糖、Hb、核酸PCR 扩增；适宜使用柠檬酸抗凝全血测定的项目有：血小板功能、ESR。

三、抗凝剂对实验室检查的影响

（一）使用抗凝剂的优缺点

抗凝剂是抑制全血和/或血浆凝集的添加剂，它保证血样中待测成分在进行分析前无明显改变。抗凝作用通过螯合钙离子（如EDTA、柠檬酸盐）或抑制凝血酶活性（如肝素、水蛭素）完成。实验室检查中使用抗凝血浆有诸多优点：

（1）省时：采血后直接离心就能得到血浆样品，而血清则需要等待至少30 min的凝血时间；

（2）产量高：从相同量的全血中能分离出的血浆量比能分离出的血清量多出15%～20%，对于婴幼儿多项检测很有意义；

（3）避免了凝血导致的干扰；