2020年(生物科技行业)第二章细胞生物学实验技术
【生物科技公司】第二章细胞生物学实验技术
（生物科技行业）第二章细胞生物学实验技术第二章细胞生物学研究方法第一节显微技术显微镜是观察细胞的主要工具。
根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。
前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。
—、光学显微镜（一）、普通光学显微镜普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图2-1）。
图2-1尼康E-600显微镜显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数，还与显微镜的分辨力（resolution）有关，分辨力是指显微镜（或人的眼睛距目标25cm处）能分辨物体最小间隔的能力，分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率，用公式表示为：R=0.61λ/N．A．N．A．＝ｎsinα/2式中：n=介质折射率；α=镜口角（标本对物镜镜口的张角），N.A.=镜口率（numericaperture）。
镜口角总是要小于180?，所以sina/2的最大值必然小于1。
表2-1及中介质的折射率制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。
对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。
普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。
（二）、荧光显微镜图2-2尼康E800荧光DIC显微镜细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜（图2-2，3，4）就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。
图2-3落射式照明原理荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上（图2-3）；2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；3.有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目。
细胞生物学实验技术一 ppt课件
• 分化现象减弱 • 形态功能趋于单一化 • 一定时间后死亡或者转化获得不死性
细胞生物学实验技术一
• 体外培养的细胞仍具有研究的意义
– 许多性状仍与体内相同
• 如体外培养的心肌细胞仍可博动，
– 细胞在培养中的表现，存在相应基因关闭／ 开启引起的现象，在培养的细胞中某些特定 功能的丧失，可为该基因的表达与调控提供 线索。
细胞生物学实验技术一
• 成纤维细胞型
– 梭型或不规则三角形，生长时呈放射状。 – 除真正的成纤维细胞外，凡由中胚层间充质起源的组织，
如心肌、平滑肌、成骨细胞、血管内皮等常呈本型状态。 – 凡培养中形态与成纤维类似时皆可称为成纤维细胞。
细胞生物学实验技术一
细胞生物学实验技术一
– 上皮型细胞： • 扁平不规则多角形，彼此紧密相连。生长时呈膜状移动， 细胞很少单独行动。 • 起源于内、外胚层的细胞如皮肤表皮及其衍生物、消化 管上皮、肝胰、肺泡上皮等皆成上皮型形态。
细胞生物学实验技术一
细胞生物学实验技术一
组织块接种：牛胎儿成纤维细胞
细胞生物学实验技术一
• 传代期：
– 原代培养细胞一经传代后便改称做细胞系 （Cell Line）。此期的持续时间最长。
– 在培养条件较好情况下，细胞增殖旺盛，并 能维持二倍体核型。
– 为保持二倍体细胞性质，细胞应在原代培养 期或传代后早期冻存。
• 特点
– 细胞群是异质的（Heterogeneous） – 细胞克隆形成率（Cloning Efficiency）低，即细胞独立生
存性差。 – 由于原代培养细胞和体内细胞性状相似性大，是检测药物很
细胞生物学实验报告
细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师：xxx所在学校：xxx中学目的要求：1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具：新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。
方法步骤方法与步骤要点注意事项（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。
2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。
3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。
要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。
4用毛笔蘸出较薄的一片，制成临时切片。
叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。
刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。
为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得较薄的一片用来观察。
（二）观察叶片的结构1．用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。
2．观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。
仔细观察上、下表皮细胞的`区别（三）观察叶片的下表皮1．用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。
2．用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。
注意观察气孔的结构。
（四）画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。
画图时，要真实、实事求是。
讨论与交流1．保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？2．从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。
2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。
二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。
细胞生物学实验技术
细胞生物学实验技术细胞生物学实验技术是现代生命科学研究中的关键环节，它为研究人员提供了深入了解细胞结构、功能和相互作用的途径。
本文将重点介绍一些常见的细胞生物学实验技术，包括细胞培养、染色技术、分离技术和显微镜观察等。
一、细胞培养技术细胞培养是一项基础性技术，它可以将细胞从体内取出并在适当的培养基中进行增殖和维持。
细胞培养的首要任务是提供适当的培养基，其中含有必需的营养物质、生长因子和适当的温度、湿度和气体条件。
细胞培养技术广泛应用于细胞生物学实验、组织工程、药物研发等领域。
二、染色技术染色技术是细胞生物学实验中常用的方法之一，它使研究者能够对细胞内各种结构和分子进行可视化观察。
常用的染色方法包括荧光染色、酶标染色和核酸染色等。
荧光染色利用荧光标记的抗体或染料，可使特定的细胞结构或分子在显微镜下发出荧光信号，从而观察其位置和表达水平。
酶标染色则通过酶与底物的反应，使细胞或组织显示出颜色等信号。
核酸染色则利用特定染料与细胞核酸结合，以观察DNA或RNA的分布情况。
三、分离技术分离技术在细胞生物学实验中具有重要作用，它可以将不同类型的细胞或细胞组分进行分离和纯化。
常用的分离技术包括细胞离心、流式细胞术和免疫磁珠分离等。
细胞离心是通过离心机将混合细胞悬液分离成上清液和沉淀，从而获得纯化的特定类型细胞。
流式细胞术则通过流式细胞仪测量细胞的大小、形态和表面标记物，从而实现对细胞的高通量分离和分析。
免疫磁珠分离则利用特定抗体结合在磁珠表面，以实现对需要纯化的细胞或细胞组分的选择性捕获。
四、显微镜观察显微镜观察是细胞生物学实验的重要手段，它使研究者能够观察到细胞内不同的结构和过程。
传统光学显微镜可实现对细胞形态和部分细胞器的观察，但其分辨率有限。
近年来，随着超分辨显微镜技术的发展，研究者们能够突破传统光学显微镜的分辨率极限，实现对亚细胞结构和分子过程的观察。
总结细胞生物学实验技术在现代生命科学研究中发挥着至关重要的作用。
细胞生物学实验技术
细胞生物学实验技术细胞生物学作为生物学的一个重要分支，研究的是生命最基本的单元——细胞。
在现代科研和医学领域中，细胞生物学实验技术扮演着至关重要的角色。
本文将介绍几种常见的细胞生物学实验技术，以及它们在科学研究和实践中的应用。
一、细胞培养技术细胞培养技术是细胞生物学研究的基础，也是许多实验的起点。
通过细胞培养技术，科研人员可以将细胞在体外进行培养，以便进行各种实验。
细胞培养技术的关键是培养基的配制和培养条件的控制，包括温度、湿度、CO2浓度等。
现代细胞培养技术已经非常成熟，可以培养多种细胞系，广泛应用于细胞生物学研究、药物筛选和临床诊断等领域。
二、细胞转染技术细胞转染技术是将外源DNA、RNA或蛋白等物质导入到细胞内的技术。
通过细胞转染技术，科研人员可以研究基因的功能、蛋白的表达以及疾病的发生机制。
常见的细胞转染方法包括化学法、电穿孔法、基因枪法等。
细胞转染技术在基因工程、基因治疗和干细胞研究等领域有着广泛的应用。
三、细胞分选技术细胞分选技术是将不同类型的细胞或不同状态的细胞进行分离和分选的技术。
通过细胞分选技术，科研人员可以获得纯化的细胞群，用于后续的实验和分析。
常见的细胞分选方法包括流式细胞术、磁性珠法、荧光显微镜法等。
细胞分选技术在免疫学、干细胞研究和癌症诊断等领域有着重要的应用。
四、细胞成像技术细胞成像技术是利用显微镜等设备对细胞进行观察和成像的技术。
通过细胞成像技术，科研人员可以了解细胞的结构、功能以及动态变化。
现代的细胞成像技术包括荧光显微镜、共聚焦显微镜、原子力显微镜等。
细胞成像技术在细胞生物学、神经科学和药物研究等领域有着广泛的应用。
五、细胞分子生物学技术细胞分子生物学技术是研究细胞内分子基因组的技术。
通过细胞分子生物学技术，科研人员可以研究细胞的DNA、RNA、蛋白等分子水平的信息。
常见的细胞分子生物学技术包括PCR扩增、基因克隆、蛋白质组学等。
细胞分子生物学技术在基因表达调控、基因组编辑和疾病诊断等方面有着重要的应用。
2020年(生物科技行业)武汉大学考研真题细胞生物学
（生物科技行业）武汉大学考研真题细胞生物学武汉大学生命科学学院考研真题2001年细胞生物学壹。
名词解释2.5*101.apoptosisbody2.receptormediatedendocytosismina4.nucleasehype rsensitivesite5.gapjunction6.Hayflicklimitation7.Kinetochore8.molecularchaperones9.leaderpeptide10.dedifferentiation二。
简答题5*81.冰冻断裂术将溶酶体膜撕裂出PS，ES，PF，EF四个面，请绘壹简图标明。
2.医生对心脏已经停止跳动的病人采取电击抢救，请说明其心肌细胞是如何同步启搏的。
3.为什么凋亡细胞的核DNA电泳图谱呈梯状分布带。
而病理坏死细胞却呈弥散状连续分布？4.将某动物细胞的体细胞核移植到另壹去核的体细胞之中，然后其余实验步骤完全按照动物克隆的方式，问能否培育出壹头克隆动物来？为什么？5.切取病毒感染马铃薯植株的顶芽进行组织培养，这是大量繁育无毒苗的成功技术。
试述其去除病毒的原因。
6.有人认为既然已经有放大几十万倍的电镜，能够不用光镜了，请反驳这种观点的错误。
7.出生6个月之内的婴儿可由母乳获得抗病的抗体，试述这些抗体是如何由母亲血液转移到婴儿血液中的。
8.1999年报道，我国科学家成功实现将离体的B型血液改造成O型，请解释其原理。
三。
问答题（前俩题10，最后壹题15）1.概述Cyclin和CDK在细胞周期调控的工作机制及其在各期引起的下游事件。
2.试述在细胞质中合成的线粒体内膜蛋白及叶绿体类囊体膜蛋白是如何运送到位和装配的。
3.综述细胞外被中糖蛋白在细胞内合成，组装和运输的全过程及其对于细胞的主要生理功能。
2002年细胞生物学以下内容需要回复才能见到壹。
名词解释2.5*101.nucleosome2.contactinhibition3.T elomerase4.exocytosis5.gapjunction6.Kinetochore7.heterochromatin8.channelprotein9.dyneinarm10.molecularswitches二。
细胞生物学实验报告(3篇)
细胞生物学实验报告（3篇）细胞生物学实验报告（精选3篇）细胞生物学实验报告篇1一、实验目的：1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。
2.了解细胞凋亡的生物学意义3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法二、实验原理：1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。
它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤：细胞中过氧化物酶的显示1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。
5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）6、清水冲洗，番红复染2min。
7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100_）细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min4、PBS缓冲液洗2次5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液7、普通光学显微镜下观察。
吖啶橙染色:1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
细胞生物学实验方法与技术
细胞生物学实验方法与技术1.细胞培养：细胞培养是细胞生物学研究中最基本的实验技术之一、它通过将细胞放入培养基中，在特定的环境条件下进行体外培养。
通过细胞培养，可以获得大量的细胞进行进一步的实验研究。
2.免疫荧光染色：免疫荧光染色是一种常用的细胞实验方法，通过此方法可以检测特定蛋白质或分子在细胞中的分布和定位。
该技术利用特异性的抗体与目标分子结合，并用荧光染料标记抗体，从而利用荧光显微镜观察染色结果。
3. 免疫印迹法（Western Blot）：免疫印迹法是一种用于检测特定蛋白质的定量和分析的方法。
该方法通过将细胞或组织中的蛋白质经过电泳分离，并转移到膜上，然后用特异性的抗体与目标蛋白质结合，最后通过酵素反应或荧光信号检测目标蛋白质的存在和表达水平。
4.转染技术：转染技术是将外源的DNA或RNA导入到目标细胞中的一种常用方法。
常见的转染技术包括植入病毒载体、使用质粒转染剂、电穿孔和化学转染等。
通过转染技术，可以实现基因过表达、基因沉默等实验研究。
5.索引技术：索引技术是一种分析和比较细胞中基因表达的实验方法。
通过索引技术，可以快速筛选出在不同生理状态下表达差异显著的基因，并进一步研究这些基因的功能和调控机制。
常见的索引技术包括差异显著性分析、基因芯片、RNA测序等。
6.荧光显微镜技术：荧光显微镜技术是一种使用荧光染料观察细胞结构和功能的方法。
荧光显微镜可以通过选择不同的染料和光源，实现对细胞核、细胞器等结构的观察。
此外，还可以利用特定的荧光探针，实现对细胞内的信号分子、离子和代谢产物的监测。
7.流式细胞术：流式细胞术是一种通过检测细胞的光学和物理特性，实现对单个细胞的定量分析和分选的方法。
该技术可以实现细胞表面标记物的检测、细胞周期分析、细胞凋亡检测等。
特别是流式细胞术结合细胞分类仪，可以实现高通量的细胞分析。
综上所述，细胞生物学实验方法与技术为研究细胞的结构、功能和特性提供了重要的工具。
随着科技的不断发展，细胞生物学实验方法与技术也在不断更新与创新，为我们更好地理解细胞的生命活动提供了强大的支持。
细胞生物学技术与实验方法
细胞生物学技术与实验方法细胞生物学技术与实验方法是研究和应用于细胞的科学技术和实验方法的总称。
通过这些技术和方法，科研人员可以深入了解细胞的结构、功能和代谢，揭示细胞的生理、病理过程以及相关疾病的机制，更好地应用于生物医学研究和药物开发领域。
本文将重点介绍一些常用的细胞生物学技术和实验方法，并进行简单的介绍和说明。
1. 细胞培养技术细胞培养技术是在人工环境中保持和繁殖细胞的方法。
细胞培养是细胞生物学研究的基础，可以通过建立细胞系来进行体外实验。
细胞培养技术的主要步骤包括细胞分离、细胞培养基的配制、细胞培养器的选择和细胞培养条件的控制等。
2. 蛋白质分离与纯化技术蛋白质是细胞中最重要的功能分子之一，从细胞中提取和纯化蛋白质对于研究蛋白质的结构、功能和相互作用至关重要。
蛋白质分离与纯化技术可以通过离心、电泳、层析、电泳转印等方法来分离和纯化目标蛋白质。
3. 免疫学技术免疫学技术是研究细胞和分子免疫学的重要手段。
包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、免疫组化、流式细胞术、免疫沉淀等技术。
通过这些技术，可以检测和分析细胞表面标记物、细胞因子的表达和分泌以及分析免疫相关的细胞相互作用等。
4. 分子生物学技术分子生物学技术是研究细胞和生命分子水平的重要工具。
包括基因克隆、DNA测序、聚合酶链反应（PCR）、蛋白质组学技术、基因组学技术等。
这些技术可以用来研究细胞的基因表达、转录调控、基因突变和DNA修复等。
5. 显微镜技术显微镜技术可以观察和研究细胞的结构和功能。
常见的显微镜技术包括光学显微镜、荧光显微镜、透射电子显微镜等。
通过显微镜技术，可以观察细胞的形态、亚细胞器的位置和运动，以及研究细胞内各种细胞器和分子的分布和相互作用。
总结：细胞生物学技术与实验方法在现代生物医学研究中起到了至关重要的作用。
通过这些技术和方法，科研人员可以研究和探索细胞的微观世界，深入了解细胞的结构、功能和代谢过程。
这些技术不仅可以增加我们对人体健康和疾病的认识，还为新药研发提供了重要的参考和依据。
细胞生物学实验技术51页PPT
谢谢！
21、要知道对好事的称颂过于夸大，也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
细胞生物学实验技术
6、纪律是自由的第一条件。——黑格 尔 7、纪律是集体的面貌，集体的声音， 集体的 动作， 集体的 表情， 集体的 信念。 ——马 卡连柯
8、我们现在必须完全保持党的纪律， 否则一 切都会 陷入污 泥中。 ——马 克思 9、学校没有纪律便如磨坊没有水。— —夸美 纽斯
10、一个人应该：活泼而守纪律，天 真而不 幼稚， 勇敢而 鲁莽， 倔强而 有原则 ，热情 而不冲 动，乐 观而不 盲目。 ——马 克思
细胞生物学实验方法与技术
第二节细胞生物学实验方法与技术细胞生物学是生命科学中的重要分支，它以生命基本单位细胞为研究对象，应用近代物理、化学和实验生物学方法，从显微、亚显微和分子水平来揭示细胞生命活动及规律，其中包括细胞的生长、发育、分裂、分化、遗传、变异（包括癌变）、兴奋、运动、代谢、衰老与死亡等基本生命现象，并且利用与调控细胞的行为活动，已达到为生产实践尤其为医药卫生事业服务。
当前细胞生物学与医药保健事业联系的较为紧密的热点问题主要有以下几种：1）真核细胞基因结构及其表达调控；2）细胞膜、膜系、受体与信号传递研究；3）细胞生长、分化、衰老、癌变、死亡，尤其是程序性细胞死亡的研究；4) 细胞工程，包括基因工程及体细胞核移植的研究。
一、细胞培养常用方法1、细胞原代培养（primay culture）又称初代培养，即直接从机体取下细胞、组织、或器官、让他们在体外维持与生长。
原代细胞的特点是细胞或组织刚离开机体，他们的生物状态尚未发生很大的改变，一定程度上可反映他们在体内的状态，表现出来源组织或细胞的特性，因此用于药物实验尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等研究是极好工具。
常用的原代培养方法有组织快培养法及消化培养法。
前者方法简单，细胞也较易生长，尤其是培养心肌有时能观察到心肌组织块的搏动。
细胞从组织块外长并铺满培养皿或培养瓶后即可进行传代。
2、细胞的传代培养当细胞生长至单层汇合时，便需要进行分离培养否则会因无繁殖空间、营养耗竭而影响生长，甚至整片细胞脱离基质悬浮起来直至死亡。
为此当细胞达到一定密度时必须传代或再次培养，目的是借此繁殖更多的细胞，另一方面是防止细胞的退化死亡。
二、器官培养方法器官培养（organ culture）是指用特殊的装置使器官、器官原基或它们的一部分在体外存活，幷保持其原有的结构和功能。
器官培养可模拟体内的三维结构，用于观察组织间的相互反应、组织与细胞的分化以及外界因子包括药物对组织细胞的作用。
xu《细胞生物学实验》教案
《细胞生物学实验》教案一、实验目的1. 理解细胞生物学的基本概念和原理。
2. 掌握细胞生物学实验的基本方法和技能。
3. 培养观察、分析和解决问题的能力。
二、实验原理1. 细胞的结构和功能：细胞膜、细胞质、细胞核等。
2. 细胞培养技术：细胞培养基的制备、细胞的分离和培养等。
3. 细胞观察技术：显微镜观察、细胞染色等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：细胞培养基、细胞悬液、染色剂等。
2. 实验仪器：显微镜、细胞培养箱、离心机等。
四、实验步骤1. 细胞培养：准备细胞培养基，将细胞悬液加入培养基中，放入细胞培养箱中培养。
2. 细胞染色：将染色剂加入细胞培养基中，观察细胞染色后的形态和结构。
3. 显微镜观察：使用显微镜观察细胞的形态和结构，记录观察结果。
4. 数据分析：分析实验结果，探讨细胞生物学相关问题。
五、实验报告要求1. 实验目的：简要描述本实验的目的。
2. 实验原理：简要介绍实验原理和相关概念。
3. 实验材料与仪器：列出实验中使用的材料和仪器。
4. 实验步骤：详细描述实验步骤和操作过程。
5. 实验结果：描述实验观察结果，附上显微镜照片。
6. 数据分析：对实验结果进行分析，探讨相关问题。
7. 结论：总结实验结果，回答实验问题。
8. 参考文献：列出实验中引用的参考文献。
六、实验一：细胞膜的渗透性实验1. 实验目的：通过观察红墨水对细胞膜的渗透作用，了解细胞膜的选择性通透性。
2. 实验原理：细胞膜具有选择性通透性，可以控制物质的进出。
红墨水中的染料分子会通过细胞膜进入细胞内部，导致细胞颜色变化。
3. 实验材料与仪器：红墨水、生理盐水、细胞膜模型、显微镜等。
4. 实验步骤：a. 准备细胞膜模型，模拟细胞膜的结构。
b. 将细胞膜模型放入含有生理盐水的容器中，观察细胞膜的初始状态。
c. 将红墨水滴在细胞膜模型上，观察红墨水通过细胞膜的渗透过程。
d. 使用显微镜观察细胞膜模型在不间点的颜色变化。
5. 实验报告要求：描述实验目的和原理。
《细胞生物学实验》课件
05
结论与讨论
实验结论
01 02
实验结论总结
通过本次实验，我们成功地观察到了细胞分裂的各个阶段，验证了细胞 周期的存在和细胞分裂的机制。实验结果与预期一致，进一步证实了细 胞生物学理论的正确性。
实验结果的意义
本实验结果对于深入理解细胞分裂和增殖的机制具有重要意义，为后续 的细胞生物学研究和应用提供了有力支持。
《细胞生物学实验》 ppt课件
目录
CONTENTS
• 实验概述 • 实验材料 • 实验操作 • 实验结果 • 结论与讨论
01
实验概述
实验目的
掌握细胞培养技术
通过本实验，学生将熟悉并掌握细胞培养的基本技术和方法，了 解细胞在体外生长和繁殖的条件和要求。
理解细胞形态与功能的关系
通过观察不同类型细胞的形态和生长特点，学生将进一步理解细胞 形态与其功能之间的关系。
培养实践操作能力
本实验将提供实际操作的机会，培养学生的实验技能和动手能力， 提高其解决实际问题的能力。
实验原理
细胞培养的生物学基础
细胞生长与增殖的过程
介绍细胞培养的基本概念、发展历程 和应用领域，为学生提供相关的生物 学基础知识。
解释细胞在体外生长和增殖的过程， 包括细胞周期、分裂方式、接触抑制 等基本概念。
03
实验结论的应用
实验结论可应用于教学、科研和实际生产中，有助于提高人们对细胞生
物学领域的认识和理解。
结果分析
数据分析方法
在实验过程中，我们采用了显微 观察、图像处理和统计分析等多 种方法，确保实验结果的准确性
和可靠性。
实验误差分析
在实验过程中，可能存在一些误 差，如观察角度、显微镜倍数等 因素可能影响实验结果。我们通 过多次重复实验和交叉验证等方
上海市考研生物学复习资料细胞生物学实验技术讲解
上海市考研生物学复习资料细胞生物学实验技术讲解细胞生物学实验技术在现代生物学研究中起着重要作用。
为了帮助考研生更好地理解和掌握相关知识，本文将对上海市考研生物学复习资料中的细胞生物学实验技术进行讲解。
一、放射性同位素示踪技术放射性同位素示踪技术是一种使用放射性同位素标记生物分子，以便跟踪其在细胞中的运动、转化和相互作用的方法。
通过测定同位素的放射性衰变，可以确定标记物质的位置和数量。
这种技术在生物学研究中被广泛应用，例如对DNA、RNA和蛋白质的合成、降解和转录等过程进行追踪研究。
二、光学显微镜技术光学显微镜技术是利用可见光对生物样本进行观察和分析的一种常用技术。
通过调节显微镜的镜头和光源，可以放大样本并观察细胞的结构和功能。
这种技术广泛应用于细胞观察、细胞分离和细胞培养等实验中。
同时，还可以结合荧光标记技术和配体受体结合技术，实现对细胞特定结构和分子表达的定位和观察。
三、电子显微镜技术电子显微镜技术是在高真空条件下利用电子束对样本进行成像的一种高分辨率显微镜技术。
与光学显微镜不同，电子显微镜可以实现对细胞超微结构的观察，从而揭示更为细小、更为精细的细胞内部结构和细胞器的功能。
电子显微镜技术在细胞生物学、分子生物学和遗传学等领域中具有重要地位。
四、蛋白质分离与检测技术蛋白质分离与检测技术是研究蛋白质结构和功能的重要手段之一。
其中包括凝胶电泳、液相色谱、质谱等多种方法。
凝胶电泳是一种将蛋白质按照其大小和电荷的差异进行分离的方法，常用于分离和鉴定蛋白质混合物。
液相色谱和质谱则可以进一步对蛋白质进行分离和鉴定。
五、基因克隆技术基因克隆技术是通过DNA分子的复制和重组，以获得特定基因的方法。
通过基因克隆技术，可以获得大量目的基因，帮助研究人员研究基因的结构和功能。
在细胞生物学中，基因克隆技术被广泛应用于基因定位、基因表达和蛋白质功能研究等方面。
细胞生物学实验技术是生物学研究中不可或缺的工具，它们为我们研究细胞的结构和功能提供了重要手段。
2020年(生物科技行业)第二章细胞生物学研究方法
（生物科技行业）第二章细胞生物学研究方法第二章细胞生物学研究方法(theresearchmethodinthecellbiology)教学目的1、了解主要工具和常用方法，侧重掌握基本原理和基本应用；2、认识工具和方法和学科发展的相关性。
教学内容本章从以下5个方面介绍了细胞生物学的研究方法:1．显微成像技术2．细胞化学技术3．细胞分选技术4．细胞工程技术5．分离技术6．分子生物学方法计划学时及安排本章计划3学时。
教学重点和难点生命科学是实验科学，它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的。
许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用。
因此,方法上的突破,对于理论和应用上的发展具有巨大的推动作用，这是学习本章应确立的基本思想。
1．显微成像包括直接成像和间接成像。
显微技术是细胞生物学最基本的研究技术,包括光学显微技术和电子显微技术。
在光学显微技术中要掌握几种常用显微镜成像的基本原理,包括普通双筒显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、倒置显微镜。
电子显微镜是研究亚显微结构的主要工具,透射和扫描电镜的是俩类主要的电子显微镜,对其基本结构、工作原理和样品制备方法则是学习的重点。
2．细胞化学技术介绍了酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术、细胞分选技术,其中流式细胞分选技术是细胞生物学和现代生物技术中的重要技术,应重点掌握。
3．细胞工程技术是细胞生物学和遗传学的交叉领域，主要利用细胞生物学的原理和方法，结合工程学的技术手段，按照人们预先的设计，有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。
包括体外大量培养和繁殖细胞，或获得细胞产品、或利用细胞体本身。
主要内容包括：细胞融合、细胞生物反应器、染色体转移、细胞器移植、基因转移、细胞及组织培养。
4．分离技术是壹大类技术的总称，包括细胞组分的分离和生物大分子的分离,应掌握各种分离技术的原理和用途。
本章对分子生物学方法作了简要介绍,为今后的学习奠定基础。
简言之，本章教学重点是仪器方法的基本原理和基本应用；教学难点是电镜制样及分子杂交技术。
细胞生物实验技术和细胞的物质基础课件
光学显微镜技术
• 普通光学显微镜 • 荧光显微镜 • 相差显微镜 • 激光扫描共焦显微镜
普通光学显微镜
• HE染色：苏木精—染核—蓝；伊红—染 质—红
荧光显微镜
• 常用荧光染料：
• 吖啶橙：DNA--绿色；
•
RNA--红色
• DAPI ：DNA—兰色
如：清蛋白、组蛋白等 • 结合蛋白质：由蛋白质和其它化合物结合而成。 如：糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、色蛋白、 磷蛋白
• 按分子形状 • 球状蛋白质：分子呈球状或椭球状， • 多数蛋白为球状蛋白。如：酶蛋 • 白、激素蛋白、抗体蛋白等 • 纤维状蛋白：分子呈长纤维状。多属 • 结构蛋白，起支持作用。如：角 • 蛋白、胶原蛋白等
• 在荧光显微镜的基础上加上激光扫描装置， 以单色激光为光源，使样品被激发出荧光， 通过计算机图像处理，从而得到微细结构 的荧光图像
电子显微镜技术
• 透射电镜 • 扫描电镜 • 分析电镜 • 超高压电镜 • 电子枪发射电子作为电镜的照明光源 • 样品：超薄切片、冷冻制样、负染色、真
空渡膜、冷冻蚀刻
• 教材:医学生物实验学（自编）
• 参考书: • 医学生物学，杨抚华，四川科学技术出版
社,第五版 • 医学生物学,傅松滨,人民卫生出版社,第六版
• 教材内容 • 学习方法
• 1.预习-听课-复习 • 2.归纳总结，记笔记，理解性记忆
第一章 细胞生物学实验技术
一、显微镜技术
显微镜与分辨率
• 分辨率，即极限分辨率，也即两点间的最 小距离
核酸的观察
• 甲基绿染液可特异对DNA进行着色。
• 哌洛宁染液可特异对RNA进行着色。
1细胞生物学实验技术
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第一章 显微镜技术
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普通显微镜的构造及使用方法 相差显微镜的构造及使用方法 荧光显微镜的构造及使用方法 激光扫描共聚焦显微镜的构造
及使用方法 透射电子显微镜与超薄切片技
术 扫描电子显微镜与样品制备
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显微镜分类：
➢ 光学 显微镜：
可把物体放大1500倍，分辨的最小 极限为0.2μm。
Robert Hooke （1636～1702）， 1665年，他在《显 微图谱》中第一次 使用“细胞”一词。
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Hooke使用的显微镜 Hooke观察到的软木结构
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第二阶段
从19世纪30年代到20世纪初期，细胞学说形成后，开始了在显微水 平研究细胞的结构与功能。形态学、胚胎学和染色体知识的积累， 使人们认识了细胞在生命活动中的重要作用。 • 1893年Hertwig的专著《细胞与组织》（Die Zelle und die Gewebe） 出版，标志着细胞学的诞生。 • 1896年哥伦比亚大学Wilson编著的《细胞发育与遗传》（The Cell in Development and Heredity）、1920年墨尔本大学Agar编著的《细胞 学》（Cytology ）都是这一领域最早的教科书。
物镜的焦距（F1）短，目镜的焦距（F2） 略长。物体AB位于物镜的2倍焦距和1倍焦距 之间，所以在物镜的像方形成一个倒立的放大 的实像A’B’；A’B’位于目镜的1倍焦距以内， 经目镜放大为虚像A’’B’’，A’’B’’位于人眼的明 视距离内。A’’B’’的视角比眼睛直接看AB时视 角大得多，所以用显微镜可以看清微小的东西， 但人眼通过目镜所看到的是被放大了2次的倒 立的像。
1细胞生物学实验技术
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• 绿色滤光片
在环状光阑下面置绿色滤光片于光路中，它可吸收红色和蓝色光， 使波长范围小的单色光线进行照明，并有吸热作用，能使相差观察获 得良好的效果。一般选用中心波长546nm的绿色滤光镜，滤光镜插入 后对比度就提高。
• 合轴调整望远镜
为使环状光阑的中心与物镜的光轴完全在一直线上，必须拔出目镜， 装上特别的低倍望远镜，使相板的暗环与环状光阑的明环重合对齐， 才能发挥相差显微镜的效能。
• 双层油镜瓶
• 擦镜纸
（2）设备：普通光学显微镜
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四、实验操作
1、低倍镜子的使用方法：
• 取镜和放置 • 对光 • 放置标本片 • 调节焦距
看不到物象的可能原因： • 物镜未对正通光孔，对正后再观察； • 标本未放到视野内，移动标本至通
光孔中央； • 调节器转动太快，超过焦点，应重
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第一章 显微镜技术
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普通显微镜的构造及使用方法 相差显微镜的构造及使用方法 荧光显微镜的构造及使用方法 激光扫描共聚焦显微镜的构造
及使用方法 透射电子显微镜与超薄切片技
术 扫描电子显微镜与样品制备
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显微镜分类：
➢ 光学 显微镜：
可把物体放大1500倍，分辨的最小 极限为0.2μm。
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镜头 低倍镜 高倍镜
油镜
表1-1 不同倍数物镜的比较
放大倍数 10× 40× 100×
镜身 短 较长 长
数值孔径 0.3 0.5 1.3
工作距离/mm 7 0.5 0.2
不同放大倍数物镜 的工作距离
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（生物科技行业）第二章细胞生物学实验技术
第二章细胞生物学研究方法
第壹节显微技术
显微镜是观察细胞的主要工具。
根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜俩大类。
前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。
—、光学显微镜
（壹）、普通光学显微镜
普通生物显微镜由3部分构成，即：①照明系统，包括光源和聚光器；②光学放大系统，由物镜和目镜组成，是显微镜的主体，为了消除球差和色差，目镜和物镜都由复杂的透镜组构成；③机械装置，用于固定材料和观察方便（图2-1）。
图2-1尼康E-600显微镜
显微镜物象是否清楚不仅决定于放大倍数，仍和显微镜的分辨力（resolution）有关，分辨力是指显微镜（或人的眼睛距目标25cm处）能分辨物体最小间隔的能力，分辨力的大小决定于光的波长和镜口率以及介质的折射率，用公式表示为：
R=0.61λ/N．A．N．A．＝ｎsinα/2
式中：n=介质折射率；α=镜口角（标本对物镜镜口的张角），N.A.=镜口率（numericaperture）。
镜口角总是要小于180?，所以sina/2的最大值必然小于1。
表2-1及中介质的折射率
制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。
对于干燥物镜来说，介质为空气，镜口率壹般为0.05~0.95；油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。
普通光线的波长为400~700nm，因此显微镜分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力是0.2mm，所以壹般显微镜设计的最大放大倍数通常为1000X。
（二）、荧光显微镜
图2-2尼康E800荧光DIC显微镜
细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后可发荧光；另有壹些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，荧光显微镜（图2-2，3，4）就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之壹。
图2-3落射式照明原理
荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别：
1.照明方式通常为落射式，即光源通过物镜投射于样品上（图2-3）；
2.光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜；
3.有俩个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人目。
图2-4荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色），图片来自http:///三、扫描隧道显微镜
扫描隧道显微镜（scanningtunnelingmicroscope，STM）由Binnig等1981年发明，
根据量子力学原理中的隧道效应而设计。
当原子尺度的针尖在不到壹个纳米的高度上扫描样品时，此处电子云重叠，外加壹电压（2mV~2V），针尖和样品之间产生隧道效应而有电子逸出，形成隧道电流。
电流强度和针尖和样品间的距离有函数关系，当探针沿物质表面按给定高度扫描时，因样品表面原子凹凸不平，使探针和物质表面间的距离不断发生改变，从而引起电流不断发生改变。
将电流的这种改变图像化即可显示出原子水平的凹凸形态。
扫描隧道显微镜的分辨率很高，横向为0.1~0.2nm，纵向可达0.001nm。
它的优点是三态（固态、液态和气态）物质均可进行观察，而普通电镜只能观察制作好的固体标本。
利用扫描隧道显微镜直接观察生物大分子，如DNA、RNA和蛋白质等分子的原子布阵，和某些生物结构，如生物膜、细胞壁等的原子排列。
四、显微操作技术
图2-20尼康NT-88NE显微操作/注射仪（图片来自http://）显微操作技术（micromanipulationtechnique）是指在高倍复式显微镜下，利用显微操作器（micromanipulator，图2-20）进行细胞或早期胚胎操作的壹种方法。
显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。
显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。
细胞核移植技术已有几十年的历史，Gordon等人（1962）对非洲爪蟾进行核移植获得成功。
我国著名学者童第周等在鱼类细胞核移植方面进行了许多工作，且取得了丰硕成果。