药物分析实验指导书(11版大纲)探讨

药物分析实验指导书

实验一烟酸原料药的鉴别实验

一、实验目的

1、掌握鉴别烟酸的原理及方法

2、掌握紫外分光光度法鉴别烟酸的方法原理及紫外吸收图谱的解析

3、熟悉紫外分光光度计的操作要点及紫外分光光度法效能指标评价的内容与要求

二、实验原理

1、鉴别反应

（1）烟酸加2,4-二硝基氯苯加热溶化后，生成季铵化合物，再加乙醇制氢氧化钾溶液，即显紫红色，以此鉴别烟酸，反应式为：

N

OH

O

Cl

醇制KOH

N

CHOH

KOOC

NO2

2

NO2

NO2

本反应需在无水的条件下进行

（2）烟酸与氢氧化钠发生酸碱中和反应，遇石蕊试纸显中性，遇硫酸铜生成淡蓝色烟酸酮沉淀，以此鉴别烟酸，反应式为：

N

OH O

O

N

O

O

Cu

淡蓝色沉淀

（3）烟酸加水溶解后，照紫外-可见分光光度法测定，在262nm的波长处有最大吸收，在237nm的波长处有最小吸收，且237nm波长处的吸光度与262nm波长处的吸光度的比值应为0.35～0.39；而烟酰胺也在262nm的波长处有最大吸

收，在245nm波长处有最小吸收，在A254nm/A262nm为0.63～0.67。因此可用该方法来区别烟酸和烟酰胺。

三、实验内容与操作

（一）仪器和试剂

1、仪器紫外分光光度计、配对比色杯一对、试管（25ml，2支）、电炉、药物天平、烧杯（50ml，2只）、容量瓶（100ml、10ml各2只）、移液管（1ml，2只）、乳钵（小号1个，配乳槌）。

2、试剂烟酸、0.4%氢氧化钠试液（取氢氧化钠0.4g，加水使溶解成100ml，即得）、2,4-二硝基氯苯、乙醇制氢氧化钾试液（取氢氧化钾3.5g，加100ml95%乙醇使溶解，静止后取上清液）、硫酸铜溶液（取硫酸铜12.5g，加水溶解成100ml，即得），蒸馏水、95%乙醇

（二）实验步骤

1、鉴别

（1）取烟酸约4mg，加2,4-二硝基氯苯8mg，研匀，置试管中，缓缓加热溶化后，再加热数秒钟，放冷，加乙醇制氢氧化钾试液3ml，即显紫红色。

（2）取烟酸约50mg，加水20ml溶解后，滴加0.4%氢氧化钠溶液至遇石蕊试纸显中性反应，加硫酸铜试液3ml，即缓缓析出淡蓝色沉淀。

（3）取烟酸，加水溶解并稀释制成每1mL中约含20μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版附录ⅣA）测定，在262nm的波长处有最大吸收，在237nm的波长处有最小吸收；在237nm波长处的吸光度与262nm波长处的吸光度的比值应为0.35～0.39。

四、思考题

1、计算烟酸的A235nm/A262 nm

五、实验报告书写要求

1、实验目的；

2、实验原理；

3、主要仪器与试剂；

4、实验结果；

5、思考题答案。

实验二 阿司匹林原料药的鉴别试验及其特殊杂质的检查

一、实验目的

1、掌握鉴别阿司匹林的原理及方法。

2、掌握阿司匹林中游离水杨酸的检查原理及方法。

3、熟悉阿司匹林中由于合成工艺所带来的其它特殊杂质的检查原理及方法。

二、实验原理

1、鉴别反应

（1）阿司匹林加热水解产生的水杨酸在中性或弱酸性条件下与三氯化铁试液反应，生成紫堇色配位化合物，以此鉴别阿司匹林，反应式为： COOH COOH

3 + H 23COOH COOH

COO －

OH + 4FeCl 3 Fe + 12HCl

－)2Fe 3

本反应极为灵敏。反应适宜的pH 值为4—6，在强酸性溶液中配位化合物分解。

（2）阿司匹林与碳酸氢钠试液加热水解，得水杨酸钠及醋酸钠，加过量稀硫酸酸化后，则生成白色水杨酸沉淀，并发生醋酸的臭气，以此鉴别阿司匹林。反应式为：

COOH COONa

3 + Na 2CO 33COONa + CO 2

COONa COOH

OH + H

2SO

4

2OH + Na

2

SO

4

2 CH

3COONa + H

2

SO

4

2 CH

3

COOH + Na

2

SO

4

沉淀物于100℃—105℃干燥后，熔点为156℃—161℃。

2、特殊杂质检查

（1）溶液的澄清度本实验系检查碳酸钠试液中不溶物。不溶物杂质有未反应完全的酚类，或水杨酸精制时温度过高，产生脱羧副反应的苯酚，以及合成工艺过程中由副反应生成的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯等。这些杂质均不溶于碳酸钠试液，而阿司匹林可溶解，利用溶解行为的差异，由一定量的阿司匹林在碳酸钠试液中溶解应澄清来加以控制。

（2）游离水杨酸用高效液相色谱外标法对样品中游离水杨酸的量进行测定

三、实验内容与操作

（一）仪器和试剂

1、仪器烧杯（50ml， 4只）、电炉、药物天平、配对比浊管（内径15—16mm、平底、具塞、以无色、透明、中性硬质玻璃制成）2支、移液管（5ml 2支）、量瓶（10ml、50ml、 1000ml各2只）。

2、试剂阿司匹林、水杨酸、三氯化铁试液（取FeCl

3

9g，加水使溶解成

100ml，即得）、蒸馏水、碳酸钠试液（取无水Na

2CO

3

10.5g，加水使溶解成100ml，

即得）、稀硫酸（取硫酸57ml，加水稀释至1000ml,即得）、四氢呋喃、冰醋酸、乙腈（色谱纯）、甲醇。

（二）实验步骤