线粒体提取方法 - 360文档中心

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线粒体提取试剂盒

产品组成：

产品组成 BB-3601-1 BB-3601-2

规格 50T 100T

线粒体提取液A 20ml 40ml

线粒体提取液B 20ml 40ml

线粒体保存液 20ml 40ml

产品简介：

本试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的线粒体提取。不能用于冷冻样品

的线粒体提取。

细胞线粒体提取：

1.取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，

尽可能吸干，收集细胞；

2.用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3.加入400μl冷的试剂A，置冰上10分钟。

4.用Dounce匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。

5.快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。

6.在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。

7.在沉淀中加入400μl冷的试剂B，混匀。

8.在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。

9.弃上清，沉淀用线粒体保存液重悬。

10.即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。

组织线粒体提取：

a)取50-100mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。

b)用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。

c)加入400μl冷的试剂A，置冰上10分钟。

d)用Dounce匀浆器匀浆30-40下，然后在4℃，500×g条件下离心5分钟。

e)快速将上清吸入另一预冷的干净离心管。

f)在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。

g)在沉淀中加入400μl冷的试剂B，混匀。

h)在4℃，11000×g以上条件下离心20分钟。

i)弃上清，沉淀用线粒体保存液重悬。

j)即得到线粒体样品，置冰箱备用或直接用于下游实验。