4、霉菌的形态结构观察
实验四 放线菌、霉菌形态观察2
四、操作步骤
• 观察放线菌气生菌 丝和基内菌丝的区 别 取插片一片，直接 在显微镜下进行观 察，注意分界面两 侧菌丝形态的差异
玻璃纸法：与放线菌相似。 直接制片观察法：用解剖针挑取少量培养物置于预 先滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液中，制成霉菌制片 镜检。 50％乙醇用于洗去孢子；尽可能保持霉菌生长状 态；避免产生气泡。 特点：细胞不变形；不易干燥，易保存；防止孢子 飞散；增强反差。
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，而且孢子很容 易飞散，制真菌标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色 液。 用乳酸石炭酸棉蓝染色液制成的霉菌标本的特点 是：(a)细胞不变形； (b)具有杀菌防腐作用，不易干燥，能保持较长时 间； (c)溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。
微生物学实验
Lab work on Microbiology
三峡大学化学与生命科学学院 微生物学教学组
实验指导老师：涂璇、苏香萍、郭金玲、吕育财
实验四 放线菌、霉菌形态观察
一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材 四、实验步骤 五、实验报告
一、 实验目的
学习并掌握观察放线菌、霉菌形态的基本 方法。 初步了解放线菌和四类常见霉菌的基本形 态特征。
结 束
请注意实验台面清洁！ 请值日生留下来打扫卫生！
二、基本原理
放线菌（原核微生物）：
由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌 丝体。菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营 养菌丝（或称基内菌丝）和生长在培养基以上的 气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋 形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形 或杆状。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分 类的重要依据。
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.
实验4放线菌、酵母菌、霉菌形态观察.实验四放线菌、酵母菌、霉菌形态观察（一）放线菌的形态观察1 目的观察放线菌的基本形态特征掌握培养放线菌的几种方法2 原理放线菌一般由分枝状菌丝组成，它的菌丝可分为基内菌丝(营养菌丝)、气生菌丝或有孢子丝三种。
放线菌生长到一定阶段，大部分气生菌丝分化成孢子丝，通过横割分列的方式产生成串的分生孢子。
孢子丝形态多样，有直、波曲、钩状、螺旋状、轮生等多种形态。
孢子也有球形、椭圆形、杆状和瓜子状等等。
它们的形态构造都是放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落早期绒状同细菌菌落月牙状相似，后期形成孢子菌落呈粉状、干燥，有各种颜色呈同心圆放射状。
3 材料3.1 菌种灰色链霉菌(Str. griseus),天蓝色链霉菌(Str. coelicolor),细黄链霉菌（Str.microflavus）。
3.2 培养基高氏1号培养基。
3.3 器皿培养皿，载玻片、盖玻片、无菌滴管、镊子、接种环、小刀(或刀片)、水浴锅，显微镜，超净工作台，恒温培养箱。
4 流程4.1插片法: 倒平板→插片→接种→培养→镜检→记录绘图4.2压印法: 倒平板→划线接种→挑取菌落→加盖玻片→镜检→记录绘图4.3埋片法: 倒琼脂→切槽→接种→培养→镜检→记录绘图5 步骤5.1插片法5.1.1倒平板将高氏1号培养基熔化后，倒10~12毫升左右于灭菌培养皿内，凝固后使用.5.1.2插片将灭菌的盖玻片以45度角插入培养皿内的培养基中，插入深约为1/2或1/3(图5-1)。
5.1.3接种与培养用接种环将菌种接种在盖玻片与琼脂相接的沿线，放置28℃培养3～7天。
5.1.4观察培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用镊子将盖玻片抽出，轻轻擦去生长较差的一面的菌丝体，将生长良好的菌丝体面向的载玻片，压放于载玻片上。
直接在显微镜下观察。
5.2压印法5.2.1制备放线菌平板同5.1.1。
在凝固的高氏1号培养基平板上用划线分离法得到单一的放线菌菌落。
实验四、酵母菌和霉菌形态的
一、实验目的及内容
目的：1、了解霉菌的形态
2、观察并掌握酵母菌的个体形态
内容：1、学习自制水浸片观察霉菌的形态 2、通过制作美蓝浸片观察酵母菌的形态 特征
二、实验原理
酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比常见细菌大几倍甚至十 几倍。大多数酵母以出芽方式进行无性繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通 过接合产生子囊孢子。本实验通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察 酵母的形态和出芽生殖方式。 美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。用美蓝对酵 母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原 能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此，具有还原能力的 酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝 色，借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到 一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生抱子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖 菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的 宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约为3—10 µm)，常是细菌菌体宽度的几倍至 几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。
三、操作步骤
1、酵母菌美蓝浸片的制备 (1) 在载玻片中央加一滴0.1％吕氏碱性美蓝染色液，然后按无菌 操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀。 (2) 用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢慢将盖 玻片放下使其盖在菌液上。
(3) 将制片放置约3min后镜捡，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵 母的形态和出芽情况并根据颜色来区别死活细胞。
观察霉菌的形态结构
显微镜的使用----------观察霉菌的形态结构
实验班级＿＿＿＿姓名＿＿＿＿第＿＿组
实验目的进一步学习临时玻片标本的制作方法和显微镜的操作使用，通过观察霉菌形态结构让学生意识到食用霉变食物的可怕性，激发学生主动探究的欲望，在生活中提高学生学习生物科学的内在动力。
实验原理
霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。
霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。
营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。
营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如孢子囊、假根、匍匐菌丝、吸器等，常见于腐败的食物上，有些霉菌会产生毒素，对人体有致癌作用。
实验器材显微镜载玻片盖玻片擦镜纸吸水纸生理盐水(清水) 滴管镊子接种环(接种针) 透明胶带刀片带橡皮擦的铅笔
实验内容备注学法指导
一、温故知新：
1.制作人的口腔上皮细胞临时玻片标本的几个环节：( )-＞( )-＞( )-＞( )-＞( )-＞( )-＞( )
2.显微镜的使用步骤;
(1)
(2)
(3)
(4) 根据已学相关知识填空（课前完成）
—————组内成员可讨论交流，共同解决上述问题。
实验十八霉菌的形态观察
实验十八霉菌的形态观察目的要求学习霉菌的标本制备方法, 观察根霉、毛霉、青霉、曲霉、白地霉的形态构造。
材料1.菌种: 白地霉（Ceotrichum candidum）摇瓶培养液；根霉（Rhizopus sp. ）、毛霉（Mucorsp. ）、曲霉（Aspergillus sp. ）、青霉（Penicilli—um sp.）平板。
2.染料: 乳酸石炭酸棉蓝液。
3.其他：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、解剖针、培养皿、玻璃棒、滤纸、20％甘油。
原理霉菌菌丝较大, 细胞容易收缩变形, 孢子容易飞散, 在制备霉菌标本时, 常用乳酸石炭酸溶液作为介质, 具有不使细胞变形, 可杀菌防腐, 不易干燥, 能保持较长时间等优点, 若加入棉蓝, 又具有一定染色效果。
霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏, 影响观察, 可采用载玻片培养法。
此法便于直接显微镜下观察, 尤其适用于根霉的假根, 曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的生长情况的观察, 并且还可在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。
方法1. 白地霉的观察取一块干净的载玻片, 加一滴白地霉培养液, 加盖玻片制成水浸标本片, 在显微镜下观察白地霉菌丝及节孢子的形态。
2. 其他霉菌观察（1）一般观察法: 加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净的载玻片中央, 用解剖针从菌落的边缘处挑取少量带有孢子的菌丝, 放入乳酸石炭酸棉蓝液中, 再细心地把菌丝挑散开, 加盖玻片, 注意不要有气泡产生。
置于显微镜下观察, 菌丝呈蓝色, 颜色的深度随菌龄的增加而减弱。
观察根霉时, 注意观察其菌丝（无横隔）、假根、孢子囊柄（与假根相对着生）、孢子囊、囊轴、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。
观察毛霉时, 注意观察其菌丝（无横隔）、孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及厚垣孢子。
观察曲霉时, 注意观察其菌丝（有横隔）、足细胞, 分生孢子梗、顶囊、小梗（形状、层数及在顶囊上的着生情况）, 分生孢子的着生情况。
观察青霉时, 注意观察其菌丝（有横隔）, 分生孢子梗, 带状枝（小梗的轮数及对称性）, 分生孢子的着生情况。
几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察
微生物实验报告几种常见酵母菌、霉菌的形态结构观察姓名：学号：系别：班级：日期：同组成员：一、摘要通过对酵母菌、霉菌形态结构观察，了解酵母菌、霉菌形态结构的形态结构知识。
实验结果为：1、酵母菌一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬性。
菌落形态与细菌相似，但较大较厚，呈乳白色或红色，表面湿润、粘稠，易被挑起。
2二、实验目的1、学习酵母菌、霉菌形态结构。
2、学习酵母菌、霉菌观察方法。
3、了解酵母菌、霉菌在实际中的意义。
三、实验原理酵母菌：酵母菌多呈圆形、卵圆形，有的呈分支的菌丝状。
无性繁殖以出芽生殖为主，少数以分裂方式繁殖；有性生殖是通过不同遗传性的细胞接合产生子囊孢子的方式进行。
子囊孢子可用孔雀绿进行染色观察。
观察细胞形态和内部结构可采用染色的方法。
美蓝是无毒性的染料，新陈代谢旺盛的细胞具有较强的还原能力，使美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型；而死亡细胞无此还原力，故被染成蓝色。
霉菌：霉菌可产生复合分枝的菌丝体，分基内菌丝、气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍/高倍显微镜即可观察。
四、实验材料与仪器1、菌种：产黄青霉、黑曲霉、黑根霉、总状毛霉、酿酒酵母、热带假丝酵母斜面菌种。
2、培养基：PDA培养基、0.05%美蓝染液、5%孔雀绿染液、半固体PDA培养基、乳酸苯酚固定液等。
3、仪器及用具：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、滴管、吸水纸等。
五、实验内容和步骤酵母菌形态观察1、酵母菌活体观察及死亡率的鉴定（1）取酿酒酵母PDA斜面，以无菌水洗下菌苔制成菌悬液。
（2）取洁净载玻片一张，滴加0.05%美蓝染液1滴于载玻片中央，用接种环取酵母菌悬液与染色液混匀，染色2-3min，加盖玻片，在高倍镜下观察酵母菌个体形态。
实验四、霉菌的形态观察ppt课件
根霉孢子
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曲霉
40h曲霉散 落的孢子
曲霉电镜 片
低倍镜下的 青霉40h
高倍镜下的 青霉40h
青霉的孢子 及孢子链
油镜下青霉
散落大量青 霉孢子
青霉图片
青霉 孢子
未散开孢 子
根霉24h
低倍镜根 霉40h
高倍镜下 根霉40h
根霉孢子
根霉的根 尖的分化
实验四、霉菌的形态观察
一、实验目的：观察霉菌的个体和群体形态 二、实验原理：霉菌菌丝粗大、菌落蔓延 三、实验材料：毛霉、根霉、青霉、曲霉 四、实验内容：
菌落形态：干燥、蔓延 个体形态观察：子实体形态 方法：胶带粘取法 五、实验报告：绘出四种霉菌的个体形态
24h
24h曲霉
足细胞 曲霉24h
40h曲霉
霉菌的形态结构
霉菌的形态结构
霉菌是一类常见的真菌，广泛存在于自然界的各种环境中，如土壤、水体、空气中等。
霉菌的形态结构是其独特的特征之一，它们通常由菌丝、孢子和菌体组成。
说到霉菌的菌丝结构。
菌丝是霉菌的主要体部，由细长而分支的丝状结构组成。
菌丝可分为分生菌丝和母菌丝两种类型。
分生菌丝是生长活跃的部分，它们不断分裂增长，并向外延伸，形成菌丝网络。
母菌丝则起到支持和固定菌体的作用。
谈到霉菌的孢子结构。
孢子是霉菌的繁殖体，也是霉菌的重要传播方式。
霉菌的孢子形态多样，包括单孢子和多孢子两种类型。
单孢子是单个孢子形成的，而多孢子则是由多个孢子聚集在一起形成的。
孢子具有轻巧且易于飘散的特点，可以通过空气、水或其他介质传播到新的环境中，进一步繁殖和生长。
讨论霉菌的菌体结构。
菌体是霉菌的整体结构，由菌丝和孢子组成。
菌体的形态多样，有的呈圆形、半球形，有的呈扁平状。
菌体通常呈现出各种颜色，如白色、灰色、黑色等，这是由于菌体中所含有的色素的不同造成的。
菌体的表面通常覆盖着一层黏液物质，这有助于保护菌体并吸附营养物质。
总结一下，霉菌具有独特的形态结构，包括菌丝、孢子和菌体。
菌丝是霉菌的主要体部，由细长而分支的丝状结构组成。
孢子是霉菌
的繁殖体，可以通过空气、水或其他介质传播到新的环境中。
菌体是霉菌的整体结构，由菌丝和孢子组成，通常呈现出各种颜色，并覆盖着一层黏液物质。
了解霉菌的形态结构有助于我们更好地理解其生长和繁殖方式，从而更有效地控制和防治霉菌的相关问题。
微生物-第四节霉菌
6 ）子座 (stroma) ：很 多菌丝集聚在一起形 成较疏松的组织，呈 垫状、壳状或其他形 状，在子座内可形成 繁殖器官。子座作用 是：渡过不良环境； 作繁殖体一部分。
A、子座纵切面 B、结构的细部
7）菌核(sclerotium)：真菌生长到一定阶段，菌丝体不断 地分化，相互纠结在一起形 成一个颜色较深而坚硬的 菌丝体组织颗粒，称为菌核。其外层组织坚硬，颜色 较深；内层疏松，大多呈白色。如药用的茯苓、麦角 都是菌核。
1）匍匐菌丝(stolon)：又称匍匐枝。真菌在固体培养基上 形成与表面平行、具有延伸功能的菌丝。 2）假根(rhizoid)：有些低等真菌匍匐菌丝与固体基质接 触分化出来的根状结构，具有固着和吸附养料等功能。
3）吸器（haustorium）：有些专性寄生的真菌，在菌丝旁 生出拳头状或手指状的突起，能伸入到寄主细胞内吸取养 料，而菌丝本身不需进入寄主细胞，这种结构叫吸器。 • 如绣菌目、霜霉目和白粉菌目的一些种类。
（5）芽孢子（blastospore）：又叫芽生孢子，由母 细胞出芽生成。当芽长到正常大小时，脱离母细 胞或仍连在母细胞上。如玉蜀黑粉菌（Ustilago maydis）。
2、有性繁殖：
• 霉菌的有性繁殖可分为三个阶段，即质配、核配和减 数分裂。 • 霉菌的有性繁殖不经常发生，多发生在特定条件下。 （1）卵孢子(oospore) （2）接合孢子(zygospore) （3）子囊孢子(ascospore) （4）担孢子(basidiospore)
•子囊是一种囊状结构，绝大 多数子囊菌的子囊呈长形、 棒形或圆筒形，每个子囊内 通常含1~8个子囊孢子，颜色 也是多种多样的。
子囊多半集体产生。在多个子囊的外部，由菌丝体组成共同 的保护组织，整个结构成为一个子实体，子囊包在其中。 这种有性子实体称为子囊果。子囊果成熟后，子囊孢子从 子囊中释出来，在适宜条件下萌发成新的菌体。 子囊果主要有三种类型：闭囊壳、子囊壳、子囊盘。
霉菌形态、结构及功能
知识点：霉菌形态、结构及功能情境：霉菌形态观察任务一：霉菌形态、结构及功能课程：食品微生物技术霉菌形态、结构及功能1.霉菌定义霉菌：为丝状真菌的统称。
凡是在营养基质上能形成绒毛状、网状或絮状菌丝体的真菌（除少数外），统称为霉菌。
2.霉菌菌丝构成及其特点霉菌的生物个体称为菌丝体，有营养部分和繁殖部分组成。
基本单位是菌丝。
2.霉菌菌丝构成及其特点在形态结构上分为两种：一种无隔膜，是长管状的分枝，细胞内含有许多核，称为无隔菌丝。
其生长只有细胞核的分裂和原生质的增长，没有细胞数目的增多，如毛霉属和根霉属。
另一种由隔膜，整个菌丝有分支成串的多细胞组成，每个细胞内含一个或多个核，称为有隔菌丝。
如曲霉属和青霉属等大多数霉菌。
按分化程度分:营养菌丝（基内菌丝）:伸入到培养基内部，以吸收养分为主的菌丝。
气生菌丝:向空中生长的菌丝，气生菌丝发育到一定阶段可分化成繁殖菌丝。
真菌是一类低等真核生物，特点：1）具有细胞核,进行有丝分裂2）细胞质中含有线粒体但没有叶绿体,不进行光合作用，无根、茎、叶的分化3）以产生有性孢子和无性孢子两种形式进行繁殖4）营养方式为化能有机营养（异养）、好氧5）不运动(少数种类游动孢子有1-2根鞭毛) 6）种类繁多,形态各异、大小悬殊,细胞结构多样。
3.霉菌的菌丝细胞结构细胞膜液泡内质网细胞壁线粒体细胞核核糖体（1）细胞壁功能于细菌相同，但是化学结构不同，其中不含有肽聚糖，少数含有纤维素，大多数以几丁质为主。
称为真菌几丁质。
几丁质是由数百个N-乙酰葡萄糖胺分子以β-1，4糖苷键连接而成的。
几丁质和纤维素分别构成高等和低等霉菌细胞壁的网状结构—微纤丝。
微纤丝使细胞壁具有坚韧的机械性能。
组成真菌细胞壁的另一类成分为无定型物质，主要是一些蛋白质、甘露聚糖和葡聚糖，它们填充于上述纤维状物质构成的网。
（2）细胞膜典型的单位膜结构，主要由蛋白质、磷脂组成。
作用是对营养物质的吸收。
向内陷入、折叠形成的特殊构造，称为质膜体。
教学课件-霉菌形态观察.
作业
1.你能否通过显微镜观察，区分出上述四类霉菌。 2.将显微镜下所观察到的各种霉菌的形态结构描 绘出来，并注明名称。 3.列表比较各种霉菌在形态结构上的异同。 4.比较酵母菌、细菌、霉菌形态上的异同。
(4)待融化后的培养基冷却至45t左右时，接人标明菌 名的相应霉菌孢子一环，搅拌均匀，立即取大约3-4 环于载玻片中央，然后迅速盖上无菌盖玻片，并于载 玻片右上角标明菌名。
(5)往培养皿中倒人约3ml的无菌水。 (6)将上述制备好的载玻片置于培养皿中的玻片架上， 盖上皿盖，置于28℃培养箱中培养48-72h，取出， 置于显微镜下观察霉菌的形态。
微生物形态观察 —霉菌的形态观察
在生活中，你有没有见到过相似的情境？？ 食物表面长的是什么东东？？
霉菌的形态观察
原理： 霉菌为真核微生物，菌丝较粗大，有分枝或不分
枝的。菌丝体为五色透明或暗褐色至黑色，或呈现鲜 艳的颜色。 在显微镜下观察时，菌丝皆呈管状。在固体培养基上 生长，为绒毛状或棉絮状。一些较高等的霉菌丝状管 道中皆有横隔，由横格状菌丝隔成许多细胞。细胞易 收缩变形，而且孢子很容易分散，所以制标本时常用 乳酸石炭酸棉蓝染色液。该染色液使细胞不变形，具 有防腐杀菌作用，且不易干燥．，能保持较长时间， 溶液本身呈蓝色，有一定的染色效果。
方法（二）
(二)载玻片培养观察法 1.无菌培养皿的准备 在一洁净干燥的培养皿内，放一铝丝制载玻片架， 再放人分别用纸包好的洁净载玻片1-2片及盖玻片 1-2片，然后盖上皿盖，包扎后灭菌备用。 2.霉菌载玻片培养物的制备 （1）取约3ml经灭菌后的察氏培养基试管，标上 青(毛、根或曲)霉字样。 （2）以无菌操作方式取出无菌培养皿中的载玻片 和盖玻片，打开备用。 （3）取一标好字样的试管培养基，板培养物的制备 (1)在水浴锅中，融化大试管察氏培养基1管。 (2)将上述以融化的培养基以无菌操作方式注入已灭 过菌的空培养皿中，待凝。
实验七 霉菌的形态观察
一、目的要求
观察霉菌的菌落特征
观察霉菌个体形态及各种无性 孢子的形态
掌握霉菌的制片方法
二、基本原理
霉菌的营养体是分枝的丝状体
有隔菌丝——有横隔膜
无隔菌丝——无横膈膜
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子
容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉
溶液，菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆
圆滤纸片，上面放一U型玻棒，在U型玻棒上放一块载玻片和 两块盖玻片，盖上皿盖，于121℃灭菌30 min ，烘干备用
琼脂块制备：通过无菌操作，用解剖刀由马铃薯琼脂薄层
平板上切下 1cm2 左右的琼脂块，将其移至培养小室的载玻 片上，每片两块
接种： 挑取少量孢子，接种于培养小室中琼脂块边缘上，
将盖玻片覆盖在琼脂块上
培养： 在培养小室中圆滤纸片上加3-5ml灭菌的20%甘油
（用于保持湿度），盖上皿盖，于28℃培养。：霉菌菌落的观察
青霉
青霉的显微结构
曲霉
曲霉的显微的显微结构
根霉
根霉显微形态
五、实验结果与讨论
请在实验报告上汇出观察到的霉菌形态 细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别
透明胶带法
滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染液于载玻片上 用食指与拇指黏在一段透明胶带两端，使透明胶带 呈U形，胶面朝下，如下图 将透明胶带胶面轻轻触及黑曲霉或黑根霉菌落表面 将黏在透明胶带上的菌体浸入载玻片上的乳酸石炭 酸棉蓝染液，并将透明胶两端固定在载玻片两端， 用低倍镜和高倍镜镜检
载玻片培养观察法
培养小室准备及灭菌：在平皿皿底铺一张略小于皿底的
形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用
三、实验器材与试剂
菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉
实验五、霉菌形态结构的观察
结构特征
根霉
❖产淀粉酶等，用 于甜酒的酿制 ❖生产多种有机酸 ❖转化甾体类物质
曲霉
❖产蛋白酶、淀粉酶等， 用于酱油的酿制 ❖生产多种有机酸 ❖产毒素
青霉
❖生产青霉素 ❖纤维素酶和有机酸等
分生孢子
❖果品、物品腐烂
❖产生毒素
帚
状
小梗
结
梗基
构
分生孢子梗
气生菌丝
营养菌丝
实验内容与要求
1、用湿室培养制片观察青霉形态结构（观察菌丝有无横隔、 分生孢子梗和帚状结构）
2、用简易制片法观察黑曲霉、黑根霉形态结构
黑根霉：观察菌丝有无横隔、孢囊和孢囊孢子、假根、囊托和囊轴。 黑曲霉：观察菌丝有无横隔、分生孢子梗着生位置、足细胞、顶囊、
分生孢子着生位置、分生孢子。
3、装片
实验报告
• 绘图并标明各部分名称。 • 分析讨论
2、如何保证革兰氏染色结果的可靠性？ 选用对数生长期前期的菌种 严格各步操作 设置对照 重复试验
青霉菌丝 的横隔
青霉的分生孢子 穗-帚状结构
丝状微生物的主要制片方法
湿室培养方法(参见p63)
简易制片法——水浸片乳酸石碳酸美蓝染
色法（主要用于霉菌）
为什么？
插片法
印片法 （不适宜于霉菌）
湿室培养方法
实验材料
❖1、黑曲霉、黑根霉平板培养材料 ❖2、青霉湿室培养材料。 ❖3、装片
预习检查
• 关于根霉
– 应用 – 有无隔膜 – 营养菌丝特
无
有或无
丝
的
繁殖方式
无性 孢子
无性和（或） 特
有性孢子
化
形
态
气生菌丝的特化形态
放线菌和霉菌的形态观察
实验4 放线菌和霉菌的形态观察实验时间：20 18年4月18日星期三第789节实验地点：13- 1331. 实验目的学习并掌握观察放线菌形态的基本方法，并观察放线菌的形态特征学习并掌握观察四类常见霉菌形态的基本方法，并观察其形态特征2. 实验原理放线菌原理放线菌是由不同长短、纤细的菌丝所形成的单细胞的菌丝体。
菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝(或称基内菌丝，简称基丝)和生长在培养基以上的气生菌丝。
有些气生菌丝分化成孢子丝，呈螺旋形、波浪形或分枝状等，孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。
能否产生气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为放线菌分类鉴定的重要依据。
放线菌的菌落形态特征为: 形成干燥、不透明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉”的菌落。
菌落与培养基连接紧密，难以挑取，菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平板上有变形的现象，有泥腥味。
霉菌原理霉菌是一类可产生菌丝体的真核微生物的统称。
霉菌的菌落形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。
霉菌的菌丝体分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。
霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌粗的多，常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍。
霉菌菌丝较粗大，细胞容易收缩变形，而且孢子很容易飞散、所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。
此染色液制成的霉菌标本片特点是: (a) 细胞不变形: (b)具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间; (c) 溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。
霉菌的菌丝、分生孢子梗和分生孢子的形态常作为分类的重要依据。
3. 材料仪器1、菌种: 放线菌划线平板28C,3-5 天后培养物;产黄青霉，黑曲霉，黑根霉，等斜面或平板划线菌种28C培养2~3 天。
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实验四 结束 请交报告 报告！ 请交报告！
实 验 内 容Ⅱ
(二)制片观察
于洁净的载片中央， 于洁净的载片中央，滴加一小滴乳酸石炭酸 溶液， 溶液，然后用接种钩从菌落边缘挑取少许菌 丝体置于其中， 使其摊开， 轻轻盖上盖片( 丝体置于其中 ， 使其摊开 ， 轻轻盖上盖片 ( 注意勿出现气泡) 置于低倍镜、 中倍镜、 注意勿出现气泡 ) ， 置于低倍镜 、 中倍镜 、 高倍镜下观察。 高倍镜下观察。
实 验 四
霉菌的形态结构观察
目的要求
1. 观察霉菌菌落特征。 观察霉菌菌落特征。 2. 学习并掌握霉菌的制片方法。 学习并掌握霉菌的制片方法。 3. 观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有 性孢子的形态。 性孢子的形态。
实验材料
(一)菌种
产黄青霉、黄曲霉、黑根霉及红曲霉(培养好的 产黄青霉、黄曲霉、黑根霉及红曲霉( 平板各一个) 平板各一个)。
菌丝结构（及分化结构） 菌丝结构（及分化结构） 示无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊 示无隔菌丝、假根、匍匐枝、 梗、孢子囊 示有隔菌丝、分生孢子梗及其分枝方 示有隔菌丝、 式、小梗 示有隔菌丝、足细胞、顶囊、分生孢 示有隔菌丝、足细胞、顶囊、 子梗及小梗
无性孢 子 孢囊孢 子 分生孢 子 分生孢 子
思考题
实验内容Ⅱ
1．产黄青霉 • 观察菌丝体的分枝状况 ， 有无横隔 。 分生孢 观察菌丝体的分枝状况， 有无横隔。 子梗及其分枝方式、 小梗及分生孢子的形状。 子梗及其分枝方式 、 小梗及分生孢子的形状 。 • 利用平板插片法 ， 可观察到较为清晰的分生 利用平板插片法， 孢子穗， 孢子穗 ， 帚状分枝的层次状况及成串的分生 孢子。பைடு நூலகம்孢子。
• 填表说明细菌、放线菌、酵母菌、霉菌 填表说明细菌、放线菌、酵母菌、 菌落特征如何识别？这四大类菌在制片 菌落特征如何识别？ 方法上有何特点？ 方法上有何特点？
微生物类型
菌落大小 菌落形状 正反面颜色 菌落颜色 中央与边缘 颜色
细菌
放线菌
酵母菌
霉菌
含水程度 与培养基结合程度 嗅味 生长快慢 制片方法及其特点
(二)其他物品
乳酸石炭酸溶液、载片、盖片、显微镜、 乳酸石炭酸溶液、载片、盖片、显微镜、接种 针等。 针等。
实验内容Ⅰ
(一)霉菌菌落特征的观察
1. 观察产黄青霉、黄曲霉、黑根霉平板中的菌落， 观察产黄青霉、黄曲霉、黑根霉平板中的菌落， 描述其菌落特征。 描述其菌落特征。 2. 注意菌落形态的大小，菌丝的高矮，生长密度， 注意菌落形态的大小，菌丝的高矮，生长密度， 孢子颜色和菌落表面等状况。 孢子颜色和菌落表面等状况。 3. 将霉菌菌落与细菌、放线菌、酵母菌菌落进行比 将霉菌菌落与细菌、放线菌、 较。
实验内容Ⅱ
2．黄曲霉 • 观察菌丝体有无横隔 、 足细胞 ， 注意分 观察菌丝体有无横隔、 足细胞， 生孢子梗、 顶囊、 生孢子梗 、 顶囊 、 小梗及分生孢子着生 状况及形状。 状况及形状。
实验内容Ⅱ
3．黑根霉 • 观察无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊 观察无隔菌丝、假根、匍匐枝、 孢子囊及孢囊孢子。 梗、孢子囊及孢囊孢子。孢子囊破裂后 能观察到囊托及囊轴。 能观察到囊托及囊轴。 • 观察黑根霉接合孢子。 观察黑根霉接合孢子。
黑根霉 产黄青 霉 黄曲霉
实验报告内容
(二) 对产黄青霉、黄曲霉、黑根霉及红曲霉等四种霉菌制片，观察、 对产黄青霉、黄曲霉、黑根霉及红曲霉等四种霉菌制片，观察、 记录并绘制前三种霉菌的个体形态及生殖方式图。 记录并绘制前三种霉菌的个体形态及生殖方式图。
微生物名称 黑根霉( 黑根霉(糖化酶 酿酒) 、酿酒) 产黄青霉( 产黄青霉(青霉 素) 黄曲霉( 黄曲霉(蛋白酶 制酱油) 、制酱油)
实验内容Ⅱ
4．红曲霉 • 观察红曲霉的 子囊果、 子囊果、子囊 和子囊孢子( 有性孢子) 有性孢子)。
实验报告内容
(一)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落的颜色及特征。 描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落的颜色及特征。 微生物 名称 大小 表面 形状 菌丝 颜色 孢子 颜色 菌丝 高矮 与培养 基 生长 嗅味 密度 结合程 度