实验 植物染色体的组型分析
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实验植物染色体的组型分析
【课前预习】
染色体组分析通常包括哪些内容,怎么计算?
【目的要求】
1.学习染色体组分析的技术。
2.掌握染色体组分析的方法。
【基本原理】
染色体组通常是指生物体细胞染色体所有可测定的表型特征的总称,包括染色体的总数,染色体组的数目,组内染色体基数、每条染色体大小、形态等。
它是物种特有的染色体信息之一,具有很高的稳定性和再现性。
染色组型分析是对染色体进行分组,对核型的各种特征进行定量和定性的描述,如对染色体长度、着丝点位置、臂比和随体有无等。
对染色体组型进行分析,可以帮助我们掌握物种的特征,确定物种的亲缘关系,分析物种的变异和进化过程,对单条染色体进行识别以及基因定位,同时还应用于染色体疾病、产前诊断等临床领域。
【实验用品】
豌豆根尖染色体图片(2n=14),剪刀,毫米尺。
【实验步骤】
一.测量:
对照片测量各条染色体的长臂(P)短臂(Q)的臂长(分别量到着丝点中部),特殊染色体的附加部分等的长度(毫米)。
二.计算有关指标的数值(指标指数):
1 染色体数目
在同一物种中染色体的数目一般是稳定的。
应该注意的是,染色体记数不应仅仅根据一个或少数细胞确定,至少要统计5-10个个体、30个以上效果较好的细胞为宜,然后取其众数(大于85%)确定。
2 染色体形态
分析染色体形态时,一般利用体细胞分裂中期的染色体,因为此时染色体已充分缩短而稳定。
而早中期或晚期的染色体正处于收缩过程中,各部分收缩程度不大一致误差较大。
分析染色体形态常用如下指标:
①染色体绝对长度(或实际长度)
均以微米(μm)表示。
一般在放大照片或描图上测量,按下列公式换算:
放大的染色体长度(mm)÷放大倍数×1000
绝对长度不是一个可靠的,可比较的数值,因为预处理条件不同,染色体缩短程度不同。
细胞分类学中,多用相对长度。
②相对长度(relativelength,RL)
均以百分比表示。
相对长度=染色体长度÷单倍染色体总长度×100 (精确到0.01)③染色体长度比
指核型中最长染色体与最短染色体的比值。
即:
Lt/st=最长染色体÷最短染色体
可以简写成为Lt/st。
这一数值是衡量核型不对称程度的主要指标之一。
④臂比(r)
指同一染色体长臂(q)与短臂(p)的比值。
r=长臂长度(q)÷短臂长度(p)(精确到0.01)
臂比是划分染色体类型的重要指标。
臂比为1.0~1.7的归为中间着丝粒染色体,用m 表示;1.7~3.0的归为亚中间着丝粒染色体,用sm表示;3.0~7.0的归为亚端部着丝粒,用st表示;7.0~更大的归为端部着丝粒染色体,用T表示。
用SAT代表具有随体的染色体,计算染色体长度时,可以包括随体也可以不包括,但要注明。
⑤染色体编号
通常按染色体长度编号,如果两对染色体长度相等,则按短臂长度排列,长者在前,短者在后(动物的性染色体排在最后)。
三.将照片剪分成各单个的染色体
按表型特征将全部染色体配同源对(或同源组),配对的根据是随体的有无及大小,臂比是否相等,染色体长度是否相等。
四.将染色体全部的同源对排列
①全部着丝点对齐在同一水平线上,②短臂朝上长臂在下,③按大小降序从左到右依次排队(等长的染色体,短臂长者排在前头),④具随体染色体、性染色体排放在最后(蚕豆染色体组型例外);若有二对以上具随体染色体,则大随体染色体在前,小随体染色体在后。
五.编上序号
将排好的染色体对(组)按先后顺序粘贴在绘图纸上,编上序号
【实验结果】
【实验报告】
完成下表并对染色体排列编号
【注意事项】
尺子尽量沿着染色体的长度量,保证数据尽可能准确。