第十章 凝集试验
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3.间接凝集抑制试验 (indirect agglutination inhibition test)
载体 可溶性抗原 致敏
用特异性抗 原致敏载体， 检测标本中 的相应抗体 的方法。
待测抗体
致 敏 颗 粒
NS
凝 集 颗 粒
已知抗体
载体
＋
致敏
致 敏 颗
粒
用特异性抗 体致敏载体， 检测标本中 的相应抗原 的方法。
• 将标本进行一系 列对比稀释后反 应，以出现阳性 反应的最高稀释 度为效价（滴度）
第一节 直接凝集技术
（direct agglutination test)
•直接凝集试验：细胞性抗原在有电解质的
参与下，直接与相应抗体结 合出现的凝集现象。
•凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。
•凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体
三、间接血凝试验(被动血凝试验)
（indirect hemagglutination test)
• 原理 将可溶性抗原(或抗体）
•操作步骤
吸附人的“O”型血红细胞 或绵羊或家兔的红细胞，
•方法评价： 敏感性较强、
制成致敏血红细胞,与相应
简便、快速、
抗体（或抗原）作用，在
成本低廉
适宜电解质参与下，出现 红细胞凝集现象。
直接与待测标本中相
RBC稳定、均一性好
应抗体（或抗原）发 2.与抗原结合的能力
生凝集反应。
及凝集性能不如RBC
年 五、间接凝集试验的应用
1. 抗体的检测
①检测细菌、病毒寄生虫感染后产生的抗体 ②自身免疫病患者的抗体的检测 ③变态反应患者的抗体的检测
2. 抗原的检测
第三节 其它凝集技术
一、抗球蛋白试验
•结果判断
红细胞 抗原 致敏
待测抗体
致 敏 红 细 胞
NS
红 细 胞 凝 集
结果示意图
- + ++ +++ ++++ ++++ 效价？
四、胶乳凝集试验
（indirect hemagglutination test)
• 原理
•操作步骤
将可溶性抗原(或 •方法评价：
抗体）与胶乳结合后， 1.胶乳颗粒的性能比
使其不能再与完全抗体 •类型 1.直接法
结合。
2.间接法
直接法
+
体内发生
RBC为Rh+
7S的IgG
抽血
作用：检测红细 胞表面结合的不 完全抗体。 临床意义：新生 儿溶血症和自身 免疫性溶血性贫 血的诊断。
抗IgG
RBC为Rh+
不完全抗 体试剂
+
作用：检测游离在血
清中的不完全抗体。
临床意义：输血前的
定型；以协助 传染病的早期 诊断。
原理图
混 合
SPA
IgG
SPA- IgG
SPA- IgG待测抗原 凝集颗粒
待测抗原
三、冷凝集试验
(cold agglutination test)
• 概念 冷凝集素是 红细胞某些 抗原的自身 抗体，只能 在低温时与 其相应的抗 原结合。
• 原理 冷凝集反应在 4℃时最强烈， 红细胞凝集最 明显；温度升 高后，抗原抗 体复合物解离， 凝块消失。
第二节 间接凝集技术
(indirect agglutination test)
一、载体种类及其处理方法 二、间接凝集技术类型 三、间接血凝试验 四、胶乳凝集试验 五、间接凝集试验的应用
概念
•间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原(或 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。
(antiglobulin test)
二、协同凝集试验
(coagglutination test)
三、冷凝集试验
(cold agglutination test)
一、抗球蛋白试验(Coombs试验)
(antiglobulin test)
• 原理
方法：将人球蛋白，注入
机体受某些抗原刺激 异种动物，获得抗球蛋白。 后产生“不完全抗体”，此种抗体加入表面结合有 其与相应抗原结合后不 不完全抗体的红细胞的复 出现可见的凝集现象， 合物中，就能出现可见的 但能封闭抗原决定簇， 凝集现象。
• 原理 • 是细菌或红细胞等
•操作步骤 •方法评价：
特异性易受影响
颗粒性抗原与相应抗 体在试管中直接凝集， 出现肉眼可见的凝集 现象。 • 多用以测定抗体
敏感性不高
•临床意义： 外斐试验、肥达试验 交叉配血试验
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5
菌液 1
2 3 45 6 7
结 果
试管凝集试验原理
第九章 凝集试验
第一节 直接凝集技术
（direct agglutination test)
第二节 间接凝集技术
(indirect agglutination test)
第三节 其它凝集技术
凝集反应 (agglutination)
概念
效价（滴度）
• 颗粒性抗原或可溶性抗原 （或抗体)与载体颗粒结合
成致敏颗粒后，它们与相 应抗体（或抗原）在一定 条件下，形成肉眼可见的 凝集团块的现象。
凝
NS
集
颗
粒
待测抗原
反向间接凝集试验
待测抗原
已知抗体
＋
特异 结合
NS
用抗பைடு நூலகம்致敏载体及 相应抗体作为诊断 试剂，用于检测标 本中是否存在与致 敏载体相同的抗原。
间接凝集抑制试验
抗 原 抗 体 复 合 物
致敏颗粒 无凝集颗
粒为阳性
待测抗原
已知抗体
＋
无结合
NS
间接凝集抑制试验
有凝集颗
粒为阴性
抗 原 抗 体 分 散 致敏颗粒
交叉配血、不相溶输血 后的抗体检测。检测母 体 Rh（D）抗体有助于 及早发现及避免新生儿 溶血症。
间接法
抗IgG
二、协同凝集试验
(coagglutination test)
• 原理 SPA能与血清中的IgG类
•应用
抗体的Fc段非特异性结合， 微生物的快速
而两个Fab段暴露在葡萄球 诊断、定种及
菌菌体表面，仍然保持正 常的抗体活性，与特异性 抗原相遇时，能出现特异 的凝集现象。
一、玻片凝集试验
(slideagglutination test)
• 原理
•操作步骤
通常以已知抗体作为
•方法评价：
诊断血清，与待测颗粒抗
特异性强、
原在有电解质存在下，作 用一定时间，通过凝集与 否，进行细菌或红细胞定
简便、快速 敏感度低
性（或定型）。
•临床意义
二、试管凝集试验
(tube agglutination test)
•载体(carrier)：试验体系中与免疫无关的颗粒。 •致敏：抗原(或抗体)偶联于颗粒表面的过程。 •致敏颗粒（sensitized particle):吸附有已知抗
原或抗体的颗粒。
载体 可溶性抗原 致敏
致 敏 颗 粒
NS
凝 集 颗 粒
一、载体种类及其处理方法
红细胞： 新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一
般先醛化后应用。
聚苯乙烯胶乳颗粒： 可物理吸附蛋白质；常制备带有化学
活性基团的颗粒
二、间接凝集技术类型
根据致敏用的试剂和反应方式分为：
1.(正向)间接凝集试验 （indirect agglutination test)
2.反向间接凝集试验 (reverse indirect agglutination test)
•意义 冷凝集素增 高常见于： 单核细胞增 多症和支原 体肺炎。恶 性淋巴瘤呈 现慢性增高。
冷凝集试验原理
混
37℃
合
抗原决定簇隐含，不能与抗体结合
37℃
混
4℃
合
暴露的抗原决定簇与抗体结合
载体 可溶性抗原 致敏
用特异性抗 原致敏载体， 检测标本中 的相应抗体 的方法。
待测抗体
致 敏 颗 粒
NS
凝 集 颗 粒
已知抗体
载体
＋
致敏
致 敏 颗
粒
用特异性抗 体致敏载体， 检测标本中 的相应抗原 的方法。
• 将标本进行一系 列对比稀释后反 应，以出现阳性 反应的最高稀释 度为效价（滴度）
第一节 直接凝集技术
（direct agglutination test)
•直接凝集试验：细胞性抗原在有电解质的
参与下，直接与相应抗体结 合出现的凝集现象。
•凝集原(agglutinogen)：凝集反应中的抗原。
•凝集素(agglutinin)：凝集参与反应的抗体
三、间接血凝试验(被动血凝试验)
（indirect hemagglutination test)
• 原理 将可溶性抗原(或抗体）
•操作步骤
吸附人的“O”型血红细胞 或绵羊或家兔的红细胞，
•方法评价： 敏感性较强、
制成致敏血红细胞,与相应
简便、快速、
抗体（或抗原）作用，在
成本低廉
适宜电解质参与下，出现 红细胞凝集现象。
直接与待测标本中相
RBC稳定、均一性好
应抗体（或抗原）发 2.与抗原结合的能力
生凝集反应。
及凝集性能不如RBC
年 五、间接凝集试验的应用
1. 抗体的检测
①检测细菌、病毒寄生虫感染后产生的抗体 ②自身免疫病患者的抗体的检测 ③变态反应患者的抗体的检测
2. 抗原的检测
第三节 其它凝集技术
一、抗球蛋白试验
•结果判断
红细胞 抗原 致敏
待测抗体
致 敏 红 细 胞
NS
红 细 胞 凝 集
结果示意图
- + ++ +++ ++++ ++++ 效价？
四、胶乳凝集试验
（indirect hemagglutination test)
• 原理
•操作步骤
将可溶性抗原(或 •方法评价：
抗体）与胶乳结合后， 1.胶乳颗粒的性能比
使其不能再与完全抗体 •类型 1.直接法
结合。
2.间接法
直接法
+
体内发生
RBC为Rh+
7S的IgG
抽血
作用：检测红细 胞表面结合的不 完全抗体。 临床意义：新生 儿溶血症和自身 免疫性溶血性贫 血的诊断。
抗IgG
RBC为Rh+
不完全抗 体试剂
+
作用：检测游离在血
清中的不完全抗体。
临床意义：输血前的
定型；以协助 传染病的早期 诊断。
原理图
混 合
SPA
IgG
SPA- IgG
SPA- IgG待测抗原 凝集颗粒
待测抗原
三、冷凝集试验
(cold agglutination test)
• 概念 冷凝集素是 红细胞某些 抗原的自身 抗体，只能 在低温时与 其相应的抗 原结合。
• 原理 冷凝集反应在 4℃时最强烈， 红细胞凝集最 明显；温度升 高后，抗原抗 体复合物解离， 凝块消失。
第二节 间接凝集技术
(indirect agglutination test)
一、载体种类及其处理方法 二、间接凝集技术类型 三、间接血凝试验 四、胶乳凝集试验 五、间接凝集试验的应用
概念
•间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原(或 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。
(antiglobulin test)
二、协同凝集试验
(coagglutination test)
三、冷凝集试验
(cold agglutination test)
一、抗球蛋白试验(Coombs试验)
(antiglobulin test)
• 原理
方法：将人球蛋白，注入
机体受某些抗原刺激 异种动物，获得抗球蛋白。 后产生“不完全抗体”，此种抗体加入表面结合有 其与相应抗原结合后不 不完全抗体的红细胞的复 出现可见的凝集现象， 合物中，就能出现可见的 但能封闭抗原决定簇， 凝集现象。
• 原理 • 是细菌或红细胞等
•操作步骤 •方法评价：
特异性易受影响
颗粒性抗原与相应抗 体在试管中直接凝集， 出现肉眼可见的凝集 现象。 • 多用以测定抗体
敏感性不高
•临床意义： 外斐试验、肥达试验 交叉配血试验
0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 弃掉0.5
菌液 1
2 3 45 6 7
结 果
试管凝集试验原理
第九章 凝集试验
第一节 直接凝集技术
（direct agglutination test)
第二节 间接凝集技术
(indirect agglutination test)
第三节 其它凝集技术
凝集反应 (agglutination)
概念
效价（滴度）
• 颗粒性抗原或可溶性抗原 （或抗体)与载体颗粒结合
成致敏颗粒后，它们与相 应抗体（或抗原）在一定 条件下，形成肉眼可见的 凝集团块的现象。
凝
NS
集
颗
粒
待测抗原
反向间接凝集试验
待测抗原
已知抗体
＋
特异 结合
NS
用抗பைடு நூலகம்致敏载体及 相应抗体作为诊断 试剂，用于检测标 本中是否存在与致 敏载体相同的抗原。
间接凝集抑制试验
抗 原 抗 体 复 合 物
致敏颗粒 无凝集颗
粒为阳性
待测抗原
已知抗体
＋
无结合
NS
间接凝集抑制试验
有凝集颗
粒为阴性
抗 原 抗 体 分 散 致敏颗粒
交叉配血、不相溶输血 后的抗体检测。检测母 体 Rh（D）抗体有助于 及早发现及避免新生儿 溶血症。
间接法
抗IgG
二、协同凝集试验
(coagglutination test)
• 原理 SPA能与血清中的IgG类
•应用
抗体的Fc段非特异性结合， 微生物的快速
而两个Fab段暴露在葡萄球 诊断、定种及
菌菌体表面，仍然保持正 常的抗体活性，与特异性 抗原相遇时，能出现特异 的凝集现象。
一、玻片凝集试验
(slideagglutination test)
• 原理
•操作步骤
通常以已知抗体作为
•方法评价：
诊断血清，与待测颗粒抗
特异性强、
原在有电解质存在下，作 用一定时间，通过凝集与 否，进行细菌或红细胞定
简便、快速 敏感度低
性（或定型）。
•临床意义
二、试管凝集试验
(tube agglutination test)
•载体(carrier)：试验体系中与免疫无关的颗粒。 •致敏：抗原(或抗体)偶联于颗粒表面的过程。 •致敏颗粒（sensitized particle):吸附有已知抗
原或抗体的颗粒。
载体 可溶性抗原 致敏
致 敏 颗 粒
NS
凝 集 颗 粒
一、载体种类及其处理方法
红细胞： 新鲜红细胞吸附蛋白质的能力差。一
般先醛化后应用。
聚苯乙烯胶乳颗粒： 可物理吸附蛋白质；常制备带有化学
活性基团的颗粒
二、间接凝集技术类型
根据致敏用的试剂和反应方式分为：
1.(正向)间接凝集试验 （indirect agglutination test)
2.反向间接凝集试验 (reverse indirect agglutination test)
•意义 冷凝集素增 高常见于： 单核细胞增 多症和支原 体肺炎。恶 性淋巴瘤呈 现慢性增高。
冷凝集试验原理
混
37℃
合
抗原决定簇隐含，不能与抗体结合
37℃
混
4℃
合
暴露的抗原决定簇与抗体结合