对氯苯肼分析
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
As=样品溶液中杂质顶峰区域
Ad=(a)溶液中4-氯苯肼盐酸盐顶峰区域
(c)：取20mg 4-氯苯肼盐酸盐标样至20ml容量瓶中，用（b）稀释至刻度（浓度：1.0mg/ml）；
系统适用性检测：
按照如下顺序注Leabharlann Baidu20μl溶液
注射次数
(c)
1
空白
1
（b）
1
样品溶液
1
（a）
1
当色谱仪注入（c）时，色谱仪系统可用来分析的h/v值不大于2.0。（h是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到基线的距离，v是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到3-氯苯肼盐酸盐和4-氯苯肼盐酸盐之间峰谷的距离）
样品的测定表示为4-氯苯肼盐酸盐（%w/w）
其计算公式为：
其中：
Vs=用于样品标定的氢氧化钠标准溶液的体积
Vb=用于空白标定的氢氧化钠标准溶液体积
W=样品重量
1790.5=产品分子量（=179.05）*滴定剂的当量浓度（=0.1N）*100
3.4 4-氯苯肼盐酸盐相关物质的检测：
3.4.1色谱柱：
Zorbax SB-C18,5μm（250mm*4.6mm ID)
3.4.2柱温：
40℃
3.4.3流动相：
缓冲液：用500ml水溶解1.36g磷酸二氢钾，再用磷酸调节PH值到3.1；
缓冲液/甲醇=500/500 v/v
3.4.4流速：
1.3ml/min
3.4.5进样量：
20μl
3.4.6检测波长：
210nm
3.4.7检测时间：
4-氯苯肼盐酸盐保留时间的10倍
3.4.8样品制备：
样品溶液：称取50mg样品至100ml容量瓶中，用流动相稀释溶解至刻度（浓度：0.5mg/ml);
(a)：移取2ml样品溶液至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，再取1ml上述溶液，用流动相稀释至10ml（浓度：2μg/ml);
(b)：在100ml容量瓶中,加入50mg盐酸苯肼、10mg 3-氯苯肼盐酸盐和2-氯苯肼盐酸盐，用流动相稀释至刻度；再取0.5ml上述溶液，用流动相稀释至50ml;
洗脱顺序是：
RRT
盐酸苯肼
~0.73
4-氯苯肼盐酸盐
1.00
3-氯苯肼盐酸盐
~1.06
2-氯苯肼盐酸盐
~1.13
4-氯苯胺盐酸盐
~1.61
计算：
样品中已知杂质的含量（w/w%），用以下公式计算：
其中：
As=样品溶液中杂质顶峰区域
Ar=（b）中杂质顶峰区域
Wr=杂质标准重量
Ws=样品重量
样品中其他杂质的含量（w/w%），用以下公式计算：
4-氯苯肼盐酸盐
1范围：
本标准适合对氯苯肼盐酸盐；
结构式：
分子式：C6H8Cl2N2
分子量：179.05
2规格:
对氯苯肼盐酸盐产品应符合下表要求
项目
指标
外观
鉴别HPLC
与标样一致
含量
≥95%
干燥失重
≤2%
相关物质（HPLC）
盐酸苯肼
≤0.2%
3-氯苯肼盐酸盐
≤0.1%
2-氯苯肼盐酸盐
≤0.1%
4-氯苯胺盐酸盐
≤0.2%
其他杂质
≤0.2%
总杂
≤1%
3 4-氯苯肼盐酸盐分析方法：
3.1鉴别：
用HPLC测定时，样品的保留时间和标准品保留时间一致。
3.2干燥失重：
精确称取1g产品在105℃的温度下烘干4小时，放入干燥皿中冷却一小时，称量。
3.3含量
使用试剂：
无水甲醇；
0.1N氢氧化钠标准溶液；
测定步骤：
称取200mg样品，用50ml无水甲醇溶解，用0.1N氢氧化钠溶液标定至终点；并进行空白滴定。
Ad=(a)溶液中4-氯苯肼盐酸盐顶峰区域
(c)：取20mg 4-氯苯肼盐酸盐标样至20ml容量瓶中，用（b）稀释至刻度（浓度：1.0mg/ml）；
系统适用性检测：
按照如下顺序注Leabharlann Baidu20μl溶液
注射次数
(c)
1
空白
1
（b）
1
样品溶液
1
（a）
1
当色谱仪注入（c）时，色谱仪系统可用来分析的h/v值不大于2.0。（h是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到基线的距离，v是3-氯苯肼盐酸盐的峰顶到3-氯苯肼盐酸盐和4-氯苯肼盐酸盐之间峰谷的距离）
样品的测定表示为4-氯苯肼盐酸盐（%w/w）
其计算公式为：
其中：
Vs=用于样品标定的氢氧化钠标准溶液的体积
Vb=用于空白标定的氢氧化钠标准溶液体积
W=样品重量
1790.5=产品分子量（=179.05）*滴定剂的当量浓度（=0.1N）*100
3.4 4-氯苯肼盐酸盐相关物质的检测：
3.4.1色谱柱：
Zorbax SB-C18,5μm（250mm*4.6mm ID)
3.4.2柱温：
40℃
3.4.3流动相：
缓冲液：用500ml水溶解1.36g磷酸二氢钾，再用磷酸调节PH值到3.1；
缓冲液/甲醇=500/500 v/v
3.4.4流速：
1.3ml/min
3.4.5进样量：
20μl
3.4.6检测波长：
210nm
3.4.7检测时间：
4-氯苯肼盐酸盐保留时间的10倍
3.4.8样品制备：
样品溶液：称取50mg样品至100ml容量瓶中，用流动相稀释溶解至刻度（浓度：0.5mg/ml);
(a)：移取2ml样品溶液至100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，再取1ml上述溶液，用流动相稀释至10ml（浓度：2μg/ml);
(b)：在100ml容量瓶中,加入50mg盐酸苯肼、10mg 3-氯苯肼盐酸盐和2-氯苯肼盐酸盐，用流动相稀释至刻度；再取0.5ml上述溶液，用流动相稀释至50ml;
洗脱顺序是：
RRT
盐酸苯肼
~0.73
4-氯苯肼盐酸盐
1.00
3-氯苯肼盐酸盐
~1.06
2-氯苯肼盐酸盐
~1.13
4-氯苯胺盐酸盐
~1.61
计算：
样品中已知杂质的含量（w/w%），用以下公式计算：
其中：
As=样品溶液中杂质顶峰区域
Ar=（b）中杂质顶峰区域
Wr=杂质标准重量
Ws=样品重量
样品中其他杂质的含量（w/w%），用以下公式计算：
4-氯苯肼盐酸盐
1范围：
本标准适合对氯苯肼盐酸盐；
结构式：
分子式：C6H8Cl2N2
分子量：179.05
2规格:
对氯苯肼盐酸盐产品应符合下表要求
项目
指标
外观
鉴别HPLC
与标样一致
含量
≥95%
干燥失重
≤2%
相关物质（HPLC）
盐酸苯肼
≤0.2%
3-氯苯肼盐酸盐
≤0.1%
2-氯苯肼盐酸盐
≤0.1%
4-氯苯胺盐酸盐
≤0.2%
其他杂质
≤0.2%
总杂
≤1%
3 4-氯苯肼盐酸盐分析方法：
3.1鉴别：
用HPLC测定时，样品的保留时间和标准品保留时间一致。
3.2干燥失重：
精确称取1g产品在105℃的温度下烘干4小时，放入干燥皿中冷却一小时，称量。
3.3含量
使用试剂：
无水甲醇；
0.1N氢氧化钠标准溶液；
测定步骤：
称取200mg样品，用50ml无水甲醇溶解，用0.1N氢氧化钠溶液标定至终点；并进行空白滴定。