第24章 免疫增殖性疾病及其免疫检测
绪论思考题
思考题绪论1. 免疫应答主要分为哪几个阶段？2.中枢免疫器官对免疫细胞的发育起什么作用？3.外周免疫器官主要由哪些组织与器官组成？在免疫应答中发挥什么作用？淋巴细胞、B淋巴细胞与NK细胞的主要功能分别是什么？5.补体系统的主要激活途径有何不同6.免疫辅助细胞在特异性免疫应答中发挥什么作用？7.7.临床免疫学主要的研究方向是什么？8.8.免疫学检验可分为几个部分？9.9.临床免疫学及免疫检验在移植免疫、肿瘤免疫中的意义。
10.10.现代免疫学技术包括了哪些方法？第二章抗原抗体反应1．什么是抗原抗体反应？抗原抗体反应的原理是什么？2．抗原抗体的结合力有哪些？3．抗原抗体反应有哪些特点？4．如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？5．什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？6．如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力？7．抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗体的最适比例？8．抗原抗体反应有哪些影响因素？9．基于抗原抗体反应的免疫学检测技术有哪些？10．什么是标记免疫技术？标记免疫技术有哪些类型？第三章免疫原和抗血清的制备1．什么是免疫原？2．如何制备可溶性抗原？3．常用的细胞破碎方法有哪些？4．连接半抗原的载体有哪些？制备半抗原性免疫原的方法有哪些？5．纯化抗原的鉴定包括有哪些内容？6．什么是免疫佐剂？免疫佐剂有哪些种类？免疫佐剂的作用机制有哪些？7．什么是抗血清？什么是多克隆抗体？8．如何制备抗血清？9．动物采血有哪些方法？10．抗血清的鉴定包括哪些内容？第四章单克隆抗体与基因工程抗体的制备1．杂交瘤技术是如何问世的？其基本原理是什么？2．什么是单克隆抗体？其特性和局限性如何？与多克隆抗体有何异同？3．杂交瘤细胞的克隆方法有哪些？4．细胞株冻融的原则是什么？5．大量制备单克隆抗体的方法有哪些，各有哪些优缺点？6．单克隆抗体的性质鉴定的方法有哪些？7．叙述单克隆抗体的制备流程和应用。
8．叙述基因工程抗体的概念和优点。
临床免疫学课件：免疫增殖性疾病及电泳技术
常用電泳技術簡介
三、免疫固定電泳：
• 免疫固定電泳（IFE）包括瓊脂糖凝膠電 泳和免疫沉澱兩個過程，具體操作要點包 括： 瓊脂糖凝膠電泳 ----免疫沉澱 ----顯色
• 瓊脂糖凝膠電泳：將待檢的含混合抗 原的血清蛋白質在瓊脂糖凝膠介質上 進行區帶電泳，使不同蛋白質由於所 帶淨電荷不同，不同帶電微粒或分子 的電泳遷移率也各異而進行分離；
• 免疫沉澱：應用固定劑和各型免疫 球蛋白及輕鏈抗血清，加於凝膠表 面的泳道上，經孵育讓固定劑和抗 血清的在凝膠內滲透並擴散後，若 有對應的抗原存在，則在適當位置 形成抗原抗體複合物。
• 顯色：經染色後蛋白質電泳參考泳 道和抗原抗體沉澱區帶被氨基黑著 色，根據電泳移動距離分離出單克 隆組分，可對各類免疫球蛋白及其 輕鏈進行分型。
• 綜合了高效液相色譜和凝膠電泳的共同優點，具 有快速、高效、高靈敏度、易定量、重現性好及 自動化、線上檢測等優點 ；
常用電泳技術簡介
四、毛細管電泳：
• 基本原理是根據在電場作用下離子遷移的速度不 同而對組分進行分離和分析，以極小內徑 （20µm~200µm）的毛細管為工具，在高壓電場 作用下，根據在緩衝液中各組分之間遷移速度和 分配行為上的差異，正離子、中性分子和帶負電 荷的分子依次流出，在靠負極的一端開一個視窗， 可用各種檢測器直接測定待測組分。
二、聚丙烯醯胺凝膠電泳：
臨床應用：可用於蛋白質、酶、核酸等生 物大分子的分離、定性、定量，SDSPAGE可用於蛋白質分子量的測定。
常用電泳技術簡介
二、聚丙烯醯胺凝膠電泳：
Western blot
SDS-PAGE過程
Western blot
【實驗原理】： Western Blot 印跡方法，又稱為免疫印 記，是將獲得的蛋白質樣品通過SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳 ，對不同分子量的蛋白質進行分離，並通過轉移電泳將凝 膠上分離到的蛋白質轉印至固相支持物（NC膜或PVDF 膜 ）上，用抗靶蛋白的非標記抗體（一抗）與轉印後膜上的 靶蛋白進行特異性結合，再與經辣根過氧化物酶標記（偶 聯）的二抗結合，最後用ECL超敏發光液試劑檢測。如果 轉印膜上含有靶蛋白，經X 光片曝光、 顯影後，則會在X光片上出現特異性蛋白條帶。
免疫增殖性疾病的免疫学检验
单击此处添加副标题
汇报人：
目录
01
添加目录项标题
02
免疫增殖性疾病概述
03
免疫学检验在免疫增殖性疾病诊断中的应用
04
免疫增殖性疾病的免疫学检验结果分析
05
免疫增殖性疾病的免疫治疗与免疫学检验的关联
06
免疫增殖性疾病的预防与控制策略
添加目录项标题
01
免疫增殖性疾病概述
02
淋巴细胞亚群分析：通过分析淋巴细胞亚群的数量和功能，了解免疫增殖性疾病的免疫学特征和发病机制。
免疫学检验在诊断中的价值与局限性
局限性：免疫学检验结果可能受到多种因素的影响，如样本质量、操作方法等，因此需要结合其他检查结果进行综合分析
免疫增殖性疾病的免疫学检验结果分析
04
免疫学检验结果解读
免疫学检验结果解读的注意事项与建议
疾病分类：免疫增殖性疾病分为良性免疫增殖性疾病和恶性免疫增殖性疾病，其中恶性免疫增殖性疾病包括淋巴瘤等
临床表现与诊断依据
临床表现：发热、淋巴结肿大、肝脾肿大等
诊断依据：血液检查、骨髓检查、淋巴结活检等
免疫学检验在免疫增殖性疾病诊断中的应用
03
免疫学检验的目的与意义
目的：通过免疫学检验方法，对免疫增殖性疾病进行诊断、鉴别诊断和病情监测
生活方式调整：保持健康的生活方式，如均衡饮食、适量运动等
控制策略与政策支持
预防策略：通过疫苗接种、改善生活习惯等方式预防免疫增殖性疾病的发生
控制策略：通过药物治疗、手术等方法控制免疫增殖性疾病的发展
政策支持：政府出台相关政策，提供资金和技术支持，推动免疫增殖性疾病的预防和治疗工作
社会参与：加强公众教育，提高公众对免疫增殖性疾病的认识和预防意识
免疫增殖病的检验
超声检查
反映病变代谢情况
正电子发射断层显像技术是一种反映病变代谢情况的影像学检查方法。
对淋巴瘤的诊断和分期具有重要价值
对淋巴瘤的诊断和分期具有重要价值，可用于监测治疗效果及判断预后。
正电子发射断层显像技术
05
免疫增殖病的治疗与预后
针对致病细胞和分子进行精准打击，抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
靶向治疗
定期复查
定期进行影像学检查，观察病情变化。
心理辅导
针对患者的心理问题进行心理辅导，帮助其调整心态，积极面对疾病。
预后与康复指导
THANKS
感谢观看
手术治疗
手术方式
根据病情和医生建议选择合适的手术方式。
手术适应症
可有效切除肿瘤，缓解症状，提高患者生存率。
手术效果
免疫治疗
通过激活患者自身的免疫系统来攻击肿瘤细胞。
基因治疗
通过导入外源基因或调节基因表达来抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
免疫治疗与基因治疗
健康生活
保持健康的生活方式，如合理饮食、适量运动、戒烟限酒等。
免疫增殖病的检验
xx年xx月xx日
免疫增殖病概述免疫增殖病的实验室检查免疫增殖病的病理学诊断免疫增殖病的影像学诊断免疫增殖病的治疗与预后
contents
目录
01
免疫增殖病概述
免疫增殖病是由免疫细胞或免疫分子异常增殖引起的疾病。
定义
根据免疫增殖的细胞类型，免疫增殖病可分为T细胞免疫增殖病、B细胞免疫增殖病和NK细胞免疫增殖病等。
分类
定义与分类
病因
免疫增殖病的病因包括遗传因素、感染、免疫系统异常等多种因素。
病理机制
免疫增殖病的病理机制主要包括细胞过度增殖、细胞凋亡减少、细胞分化异常等。
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第二十四章 自身免疫性疾病及其免疫检测(附答案解析 )
主管检验师资格考试临床免疫学和免疫检验复习习题第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测（附答案解析）一、A1型题1、可检出RF免疫球蛋白类别的方法是（）。
A、胶乳凝集B、速率散射比浊法C、ELISA法D、电泳法E、TRUST2、RF免疫球蛋白的主要类别是（）。
A、IgGB、IgAC、IgMD、IgEE、IgD3、关于RF描述错误的是（）。
A、以变性IgG为靶抗原的自身抗体B、抗人或动物IgGFab片段的抗体C、与人或动物变性IgG结合D、不与正常IgG发生凝集E、多见于类风湿关节炎患者4、自身抗体的特征不包括（）。
A、是自身免疫性疾病的主要标志B、高效价自身抗体是自身免疫性疾病的特点C、自身抗体是临床确诊的重要依据D、自身抗体是指导临床用药的重要依据E、自身免疫性疾病可不伴有特征性自身抗体谱5、下列哪一种自身免疫病患者最可能检出抗自身IgG抗体（）。
A、恶性贫血B、重症肌无力C、自身免疫性溶血D、类风湿性关节炎E、肺肾出血性综合征6、下列哪种疾病是非器官特异性自身免疫疾病（）。
A、重症肌无力B、慢性甲状腺炎C、慢性溃疡性结肠炎D、系统性红斑狼疮E、特发性血小板减少性紫癜7、不属于自身免疫性溶血性贫血特点的是（）。
A、体内出现抗红细胞自身抗体B、抗人球蛋白试验阳性C、红细胞寿命缩短D、多见于青年男性E、多继发于淋巴系统恶性病、结缔组织病、感染和药物应用后8、以下叙述正确的是（）。
A、ANA无器官特异性，有种属特异性B、ANA无器官特异性，无种属特异性C、ANA有器官特异性，无种属特异性D、ANA无器官特异性，有种属特异性E、ANA既有器官特异性，又有种属特异性9、下列说法错误的是（）。
A、抗核抗体（ANA）是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称B、ANA的性质主要是IgG，也有IgM、IgA和IgDC、ANA主要存在于血清中，也可存在于胸腔积液、关节滑膜液和尿液中D、ANA阳性一定患有自身免疫性疾病E、正常老年人也可有低效价的ANA10、下列哪种疾病是非器官特异性自身免疫疾病（）。
自身免疫性疾病及其免疫检测
对于临床表现相似的疾病，免疫检测 可以帮助区分不同的自身免疫性疾病 ，如类风湿性关节炎与骨关节炎等。
病情监测与疗效评估
病情监测
定期进行免疫检测可以监测疾病的进展 情况，及时调整治疗方案，有助于控制 病情。
VS
疗效评估
通过比较治疗前后免疫检测结果的变化， 可以评估治疗的有效性，为调整治疗方案 提供依据。
度。
分子免疫检测
单克隆抗体技术
利用单克隆抗体特异性识别抗原的特性， 检测细胞表面抗原的表达情况。
蛋白质组学技术
利用蛋白质组学技术分析蛋白质的表 达和功能，了解疾病状态下蛋白质的
改变。
基因芯片技术
通过检测基因表达谱的变化，了解疾 病状态下免疫细胞的基因表达特征。
表观遗传学技术
研究基因表达的表观遗传学调控机制， 了解疾病状态下基因表达的调控特征。
比较其优缺点和应用范围。
免疫检测在临床实践中的应用研究
诊断价值
01病的早
期诊断和鉴别诊断。
监测病情
02
通过定期检测自身抗体水平，评估疾病的活动度和治疗效果，
指导临床治疗方案的调整。
预后判断
03
某些自身抗体与疾病的发展和预后相关，通过免疫检测可预测
疾病的发展趋势和预后情况。
常见症状与诊断
常见症状
自身免疫性疾病的症状因疾病类型而异，但常见的症状包括关节疼痛、肿胀、僵硬、发热、皮疹、疲 劳等。
诊断
自身免疫性疾病的诊断依赖于详细的病史、体格检查和实验室检查。实验室检查包括全血细胞计数、 血沉、C反应蛋白、自身抗体检测等。通过这些检查，医生可以评估患者的免疫系统状态和是否存在 自身抗体，从而做出诊断。
02 自身免疫性疾病的免疫检 测方法
免疫增殖病的检验
细胞凋亡与坏死检测
总结词
细胞凋亡与坏死检测有助于了解免疫增殖病 的发展和转归，为临床治疗提供参考。
详细描述
细胞凋亡是指细胞程序性死亡的过程，而坏 死则是细胞意外死亡的方式。在免疫增殖病 中，细胞凋亡与坏死的平衡被打破，导致大 量增殖的免疫细胞在体内积聚，进一步加剧 了疾病的发展。通过对细胞凋亡与坏死的检 测，可以了解疾病的发展趋势和治疗效果， 为医生提供重要的参考依据。
疫苗接种
针对某些免疫增殖病，如风湿热、系统性红斑狼疮等 ，疫苗接种可以预防和控制疾病的发生和复发。
THANKS
感谢观看
自身免疫性疾病
与免疫增殖病在病理学特 征和病因上存在差异，需 要进行鉴别诊断。
其他恶性肿瘤
如淋巴瘤等恶性肿瘤也可 能出现免疫增殖病的相关 表现，需要进行鉴别诊断 。
病情评估与预后判断
病情评估
通过对患者的临床表现、实验室检查和病理学特征进 行综合评估，判断病情的严重程度和进展情况。
预后判断
根据患者的年龄、身体状况、病情类型和进展情况等 因素，对患者的预后进行预测，为制定治疗方案提供 参考。
诊断
根据病史、体格检查和实验室检查进行诊断。实验室检 查可发现异常的免疫细胞或免疫分子，如自身抗体阳性 、淋巴细胞计数异常等。
实验室检查与病理学诊断
实验室检查
包括血常规、尿常规、生化检查、免疫学检查等 ，可发现异常的免疫细胞或免疫分子，如自身抗 体阳性、淋巴细胞计数异常等。
病理学诊断
通过组织活检、细胞学检查等方法，观察病变组 织的病理学改变，为诊断提供依据。
免疫增殖病的检验
汇报人：
日期:
目录
• 免疫增殖病概述 • 免疫增殖病的实验室检查技术 • 免疫增殖病的特异性抗体检测 • 免疫增殖病的细胞因子与细胞免
《临床免疫学检验》教学大纲
《临床免疫学检验》教学大纲课程类别：专业核心课程课程性质：必修英文名称：Clinical immunology examinations总学时：96 讲授学时：48 实验学时：48学分：4.5先修课程：仪器分析、人体解剖学、组织学与胚胎学、生理学、细胞生物学、病理学、病理生理学、药理学、生物化学、医学免疫学、病原生物学、医学遗传学、分子生物学、临床生物化学检验。
适用专业：医学检验技术开课单位：医学院一、课程简介临床免疫学检验是研究免疫系统功能异常与相应疾病发病机制及其诊断和防治措施的科学。
通过学习本课程，使学生获得免疫功能异常所致的病理过程及其机制以及免疫学理论和技术在疾病预防、诊断和治疗中的应用等方面的基本知识。
同时结合教学实践，培养学生分析问题和解决问题的能力以及严谨的科学作风。
二、教学内容及基本要求第一章临床免疫学与检验概论（1学时）教学内容：1.1 免疫学技术概论1.2 临床免疫性疾病及检验概论教学要求：1.了解免疫学技术在医学中地位和应用；了解免疫学技术的发展简史。
2.了解临床免疫学及其检验在医学中的作用。
授课方式：讲授第二章抗原抗体反应（1学时）教学内容：2.1 抗原抗体反应的原理2.2 抗原抗体反应的特点2.3 影响抗原抗体反应的因素2.4 免疫学检测技术的类型教学要求：1.掌握抗原抗体反应的原理。
2.掌握抗原抗体反应的特点。
3.掌握影响抗原抗体反应的因素。
4.掌握免疫学检测技术的类型。
授课方式：讲授第三章免疫原和抗体的制备（2学时）教学内容：3.1 免疫原的制备3.2 免疫血清的制备3.3 单克隆抗体的制备3.4 基因工程抗体的制备教学要求：1.掌握颗粒性抗原的制备和半抗原的制备；了解可溶性抗原的制备。
2.掌握免疫血清的制备。
3.掌握单克隆抗体的概念；掌握B细胞杂交瘤技术的基本原理。
4.掌握基因工程抗体的概念；了解基因工程抗体的制备。
授课方式：讲授第四章凝集反应（2学时）教学内容：4.1直接凝集反应4.2间接凝集反应4.3抗球蛋白试验教学要求：1.掌握直接凝集反应的原理和应用。
免疫学及免疫学检验学题库答案
一、名词解释第1章概论1.免疫学：2.免疫分子：3.补体：4.临床免疫学：第2章抗原抗体反应5.抗原抗体反应：6.抗原抗体反应特异性7.可逆性8.比例性9.抗原抗体反应的等价带zoneofequivalence10.最适比optimalratio11.带现象zonephenomenon第3章免疫原和抗血清的制备12.免疫原immunogen13.半抗原14.免疫佐剂15.多克隆抗体polyclonal antibody, pcAb第5章凝集反应16.凝集反应17.直接凝集反应18.间接凝集反应19.明胶凝集试验第6章沉淀反应20.沉淀反应21.絮状沉淀试验22.免疫浊度测定23.凝胶内沉淀试验24.单项扩散试验25.双向扩散试验26.免疫电泳技术27.对流免疫电泳28.火箭免疫电泳29.免疫电泳30.免疫固定电泳第19章补体检测及应用31.补体32.免疫溶血法33.补体结合试验第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应36.Ⅰ型超敏反应37.Ⅱ型超敏反应38.Ⅲ型超敏反应39.Ⅳ型超敏反应第24章自身免疫性疾病及其免疫检测40.自身耐受41.自身免疫42.自身免疫病43.自身抗体44.抗核抗体第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测45.免疫增殖性疾病46.免疫球蛋白增殖病47.本周蛋白48.血清区带电泳49.免疫电泳50.免疫固定电泳第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验51.免疫缺陷病52.获得性免疫缺陷综合征第27章肿瘤免疫与免疫学检验53.肿瘤免疫学54.肿瘤抗原55.肿瘤标志物第28章移植免疫及其免疫检测56.移植57.主要组织相容性复合体58.移植排斥反应59.移植物抗宿主反应GVHR60.血清学分型法二、填空题;第1章概论1.推动现代生命科学前进的三架战车：分子生物学、免疫学、细胞生物学;2.免疫学的发展历史可分为三个时期：经验时期、免疫学科形成时期、现代免疫学时期;3.为保持机体内环境稳定,免疫系统的三大生理功能分别是：免疫防御、免疫自稳、免疫监视;4.免疫应答的过程主要分为：识别阶段、活化阶段、效应阶段5.免疫系统的组成包括三部分,分别是：免疫器官、免疫细胞、免疫分子;6.补体的三条激活途径分别是：经典途径、甘露糖结合凝集素途径、旁路途径;第2章抗原抗体反应7.在抗原抗体反应中,主要的结合力有：静电引力、范德华力、氢键、疏水作用力;8.在抗原抗体反应中,主要的特点有：特异性、可逆性、比例性、阶段性;第3章免疫原和抗血清的制备9.组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备过程中,常用的方法有：反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法任写出二种均可得分;10.在免疫原和抗血清的制备过程中,可溶性抗原的纯化方法：超速离心法、选择性沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等任写出二种均可得分;11.在免疫原和抗血清的制备过程中,纯化抗原的鉴定的内容主要有：蛋白含量测定、分子量测定、纯度鉴定、免疫活性鉴定;12.在免疫原和抗血清的制备过程中,抗血清的鉴定内容有：抗体特异性的鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲合力的鉴定;第5章凝集反应13.在凝集反应中,间接凝集反应的类型主要有：正向间接凝集反应、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应、协同凝集反应;14.抗球蛋白试验,又称Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法;第6章沉淀反应15.免疫电泳技术类型主要包括：对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、免疫固定电泳;第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.在外周血单个核细胞分离实验中,对分离介质的基本要求有：对细胞无毒、基本等渗、不溶于血浆或分离物质、有一定密度;17.在淋巴细胞分离过程中,其中的单核细胞去除方法有：贴壁黏附法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分层液法; 第15章免疫细胞功能检测技术18.在免疫细胞功能检测技术方面,针对T细胞功能检测方法有：T细胞增殖试验、 T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验、体内试验;第19章补体检测及应用第22章感染性疾病与感染免疫检测19.目前公认的肝炎病毒至少有5种：甲型肝炎病毒HAV、乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV、丁型肝炎病毒HDV、戊型肝炎病毒HEV;20.在乙肝病毒检测的过程中,主要检测的五项指标有：HBsAg、抗HBs、抗HBc、HBeAg、抗HBe;21.在先天性感染中,临床上将以上4种病原菌称为“TORCH”,为产前检查的重点项目,分别是：弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒;第23章超敏反应性疾病及其免疫检测22.根据免疫反应的速度和组织损伤的机制不同,将超敏反应分为四种类型,分别是：第 I 型速发型超敏反应、第II 型细胞毒或溶细胞型超敏反应、第III型免疫复合物型超敏反应、第IV 型延缓型或迟发型超敏反应;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测23.在抗核抗体ANA检测方法中,常见的ANA荧光图形有：周边型核膜性、均质性、斑点性、核仁型、着丝点型;第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测24.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有：多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病、轻链病、良性单克隆免疫球蛋白病;25.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有：血清区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白定量、本周蛋白的检测;第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验26.在免疫缺陷性疾病中,常见的免疫缺陷病一般特征包括：反复感染、恶性肿瘤、伴发自身免疫病、遗传倾向、多系统病变;27.在免疫缺陷性疾病中,原发性免疫缺陷性疾病主要有：原发性B细胞缺陷病、原发性T细胞缺陷病、原发性联合免疫缺陷病、原发性吞噬细胞缺陷病、原发性补体系统缺陷病;28.在免疫缺陷性疾病中,继发性免疫缺陷性疾病主要有：继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷、继发性补体缺陷;第27章肿瘤免疫与免疫学检验29.在常见肿瘤标志物中,胚胎抗原类肿瘤标志物主要有：甲胎蛋白、癌胚抗原;30.在常见肿瘤标志物中,酶类肿瘤标志物主要有：前列腺特异性抗原PSA 、神经元特异性烯醇化酶NSE、α-L-岩藻糖苷酶测定AFU;31.在常见肿瘤标志物中,激素类肿瘤标志物主要有：人绒毛膜促性腺激素 hCG、降钙素calcitonin, CT;32.在常见肿瘤标志物中,蛋白质类肿瘤标志物主要有：β2-微球蛋白β2M 、铁蛋白;第28章移植免疫及其免疫检测33.在移植免疫实验中,排斥反应类型主要包括四种,分别是：超急性排斥反应、急性排斥反应、慢性排斥反应、移植物抗宿主反应GVHR;34.常见的组织或器官移植有：肾脏移植、肝脏移植、心脏移植与心肺联合移植、骨髓与其他来源的干细胞移植;三、单项选择题1.免疫应答是一个复杂的连续过程,依次分为哪几个阶段AA. 识别阶段、活化阶段、效应阶段B. 效应阶段、识别阶段、活化阶段C. 活化阶段、效应阶段、识别阶段D. 活化阶段、识别阶段、效应阶段2.抗原抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为CA. 抗体略多于抗原B. 抗原略多于抗体C. 抗原抗体比例合适D. 抗体显着多于抗原3.用已知抗原或抗体检测相应的抗体或抗原,是根据抗原抗体反应的AA. 特异性B. 比例性C. 可逆性D. 阶段性4.弗氏不完全佐剂的组成包括 BA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗5.沉淀反应中的钩状效应是因为BA. 抗体过量B. 抗原过量C. pH浓度过高D. pH浓度过低6.细胞活力测定常用的简便方法是BA. 伊红染色B. 台盼蓝染色C. HE染色D. 美蓝染色7.正常人外周血T淋巴细胞转化率为CA. <40%B. 40%～50%C. 60%～80%D. 80%8.在CH50试验中,溶血程度和补体含量之间的关系为 BA. 直线B. S形曲线C. 抛物线D. 正态分布曲线9.正常血清中,补体含量最高的是CA. C1B. C2C. C3D. C410.发生III型超敏反应性疾病的始动环节是 BA. 大分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜B. 中等大小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜C. 小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜D. 补体激活11.用免疫荧光法检测ANA有多种核型,不正确的是DA. 周边型B. 均质型C. 斑点型或颗粒型D. 原生质型12.血清中检测到M蛋白不提示下列疾病DA. 多发性骨髓瘤B. 巨球蛋白血症C. 重链病或轻链病D. 肾病13.本-周蛋白的本质是BA. 尿中微球蛋白B. 尿中游离的免疫球蛋白轻链C. 尿中游离的白蛋白D. 尿中游离的管型物14.多发性骨髓瘤属于哪种细胞异常CA. T细胞B. B细胞C. 浆细胞D. 单核细胞15.血清中免疫球蛋白含量缺乏,一般应考虑何种病 CA. 轻链病B. 重链病C. 免疫缺陷病D. 免疫增殖病16.切除胸腺的新生动物的淋巴结中缺乏何种细胞 BA. B淋巴细胞B. T淋巴细胞C. 粒细胞D. 巨噬细胞17.沉淀反应中抗体过量的现象称为AA. 前带B. 后带C. 等价带D. 带现象18.弗氏完全佐剂的组成包括AA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗19.直接Coombs试验检测的抗体是AA. 结合在红细胞表面的IgGB. 游离的IgGC. 结合在红细胞表面的IgMD. 游离的IgM20.单项扩散试验出现双环的沉淀线是因为DA. 两种抗原B. 两种抗体C. 抗体为多克隆抗体D. 抗原为性质相同的两个组分扩散率不同21.Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为CA. 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B. 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C. 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞22.淋巴细胞转化为淋巴母细胞后,其形态学特征为BA. 细胞大小由大变小B. 出现核仁1～4个C. 胞浆内空泡逐渐消失D. 细胞伪足消失23.溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能BA. T细胞B. B细胞C. NK细胞D. 吞噬细胞24.Boyden小室常用于测定 BA. 白细胞吞噬功能B. 中性粒细胞趋化功能C. 白细胞杀伤功能D. 淋巴细胞抑制功能25.在溶血反应中检测试剂中,加入少量钙、镁离子的目的是CA. 使反应液保持等渗B. 抑制补体的活性C. 有助于补体激活D. 维持反应液的pH值26.乙型肝炎感染后最早出现的病毒标志物是AA. HBsAgB. HBeAgC. HBcAgD. 抗-HBs27.新生儿溶血症发生的条件是CA. 母亲Rh+、胎儿Rh+B. 母亲Rh+、胎儿Rh-C. 母亲Rh-、胎儿Rh+D. 母亲Rh-、胎儿Rh-28.造成系统性红斑狼疮病人免疫损伤的主要机制是 CA. I超敏反应B. II超敏反应C. III超敏反应D. IV超敏反应29.人类MHC位于第几对染色体上 CA. 第12对染色体短臂B. 第12对染色体长臂C. 第6对染色体短臂D. 第6对染色体长臂30.HLA交叉配型的目的是 BA. 检测供者血清有无抗受者HLA抗体B. 检测受者血清有无抗供者HLA抗体C. 检测供者淋巴细胞表面的HLA抗原D. 检测受者淋巴细胞表面的HLA抗原四、简答题第1章概论1.T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞的主要功能分别是什么2.在临床免疫学与免疫检验中,现代免疫学检验技术包括哪些方法第2章抗原抗体反应3.抗原抗体反应有哪些影响因素4.什么是标记免疫技术标记免疫技术按检测现象可分为哪些类型第3章免疫原和抗血清的制备5.常用的细胞破碎方法有哪些6.连接半抗原的载体有哪些制备半抗原性免疫原的方法有哪些7.免疫佐剂有哪些种类其作用机制是什么8.动物采血有哪些方法9.抗血清的鉴定包括哪些内容第5章凝集反应10.什么叫直接凝集反应什么叫间接凝集反应它们之间有何不同11.叙述抗球蛋白试验的类型、特点以及临床应用第6章沉淀反应12.单向扩散试验的概念和应用13.平板法双向免疫扩散试验的概念和应用14.免疫固定电泳的概念及临床应用15.抗原性质分析出现哪三种结果现象结果解释第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.外周血单个核细胞分离,其分离介质的基本要求是什么17.外周血单个核细胞悬液富含淋巴细胞,但又混杂有单核细胞、红细胞和血小板,请问去除单核细胞的方法有哪些第15章免疫细胞功能检测技术18.T细胞功能检测内容有哪些19.B细胞功能检测内容有哪些20.NK细胞活性测定方法有哪些21.在检测T细胞的功能时,可选择T细胞增殖试验,请回答其基本原理第19章补体检测及应用22.在补体总活性测定中,一般采用CH50测定法,请说明其基本原理;23.在单个补体成分的测定中,一般采用免疫溶血法,请简述其概念及原理;24.请简述补体结合试验的概念、实验原理及结果解释第22章感染性疾病与感染免疫检测25.请列出目前公认的肝炎病毒种类26.乙型肝炎的诊断标志物主要检测指标有哪些27.在临床中,乙肝病毒检测常见的指标俗称：两对半有哪些28.什么叫先天性感染常见的病原菌“TORCH”只要只的是哪些病毒第23章超敏反应性疾病及其免疫检测29.试比较Ⅰ～Ⅳ型超敏反应特点30.使用青霉素可能引起哪些类型超敏反应简述其发病机制; 答：青霉素临床应用时有可能引起的超敏反应类型有：I、II、III、IV型;1I 型超敏反应：指青霉素过敏性休克,其发病机制是青霉素本身并无免疫原性,其降解产物为半抗原,与体内蛋白质结合而产生免疫原性,刺激机体产生特异性IgE,使机体处于致敏状态;当机体再次使用青霉素时,可发生过敏性休克;2II 型超敏反应：指青霉素过敏性血细胞减少症,其发病机制是青霉素降解产物能与血细胞膜蛋白或血浆蛋白结合获得免疫原性,从而刺激机体产生抗体;这种抗体与和药物结合的红细胞、粒细胞和血小板作用,引起药物性溶血性贫血、粒细胞减少症和血小板减少性紫癜;3III型超敏反应：指使用大剂量青霉素等药物可引起类似血清病样的反应,其发病机制是因为患者体内已产生特异性抗体,而大剂量药物尚未完全排除,两者结合形成中等大小免疫复合物所致;4IV型超敏反应：指青霉素引起的接触性皮炎,其发病机制是青霉素小分子半抗原与体内蛋白质结合成完全抗原,使T细胞致敏;当机体再次接触青霉素时,可发生接触性皮炎;31.血清病与血清过敏性休克分属哪型超敏反应比较发病机制;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测32.自身免疫病都具有哪些共同特性33.什么叫自身抗体,其主要特点有哪些第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测34.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有哪些35.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有哪些第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验36.请列出免疫缺陷病的一般特征37.原发性免疫缺陷性疾病有哪些38.继发性免疫缺陷病有哪些39.什么叫获得性免疫缺陷综合征其临床特点及典型特征是什么第27章肿瘤免疫与免疫学检验40.什么叫肿瘤抗原,其产生的可能机制有哪些41.什么叫肿瘤标志物,理想的肿瘤标志物具有哪些特性第28章移植免疫及其免疫检测42.什么叫移植排斥反应,根据排斥反应发生的时间、免疫损伤机制和组织病理改变,如何进行分类43.常见的组织或器官移植有哪些44.排斥反应的免疫监测包括哪些方面。
《诊断学》第二版PPT第二十四章 临床常用免疫学检测
血清免疫球蛋白分类
根据重链稳定区的分子 结构和抗原特异性的不 同，分为五类：IgG、 IgA、IgM、IgD、IgE
血清免疫球蛋白分类
检测方法
酶联免疫法（ELISA) 放射免疫（RIA) 荧光标记免疫(IFA) 化学发光法（CLIA) 免疫透射比浊、免疫散射比浊
减低：免疫复合物性疾病（如肾小球肾炎）、 自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病 毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良 和遗传性补体成分缺乏症等
二、补体C3检测
是一种由肝脏合成的β2-球蛋白。C3在补体系 统各成分中含量最多，是经典途径和旁路途径 的关键物质。它也是一种急性时相反应蛋白。
参考值
参考值 0.5 ～2.6 g/L
临床意义
IgM增高 见于初期病毒性肝炎、肝硬化、类 风湿关节炎、SLE等，原发性巨球蛋白血症时， IgM呈单克隆性明显增高
IgM降低 见于IgG型重链病， IgA型MM，先 天性免疫缺陷病，使用免疫抑制剂，淋巴系统 肿瘤和肾病综合症。
四、免疫球蛋白E的检测
– 半分子病：系由一条重链和一条轻链组成的单克隆 Ig片段。
– 恶性淋巴瘤：血液中可出现M蛋白。 – 良性M蛋白血症：
第二节 血清补体检测
补体是一组具有酶源活性的糖蛋白，由传统途 径的九种成分C1(C1q/C1r/C1s）-C9，旁路途 径的三种成分及其衍生物B/D/P/H/I等因子组 成
参与机体的抗感染和免疫调节,介导病理反应
识别阶段
细胞膜
C3转化酶的形成
活 化 阶 段
C4b2b 为C3转化酶
C4b
C5转化酶的形成
《医学检验综合》(代码708)考试大纲
《医学检验综合》（代码：708）考试大纲一、考试范围临床免疫学检验技术临床生物化学检验技术临床血液学检测技术临床微生物学检验技术二、考试要求要求考生系统掌握以上学科的基础理论、基本知识和基本技能，并且够运用这些知识分析解决实际问题。
三、考试形式和试卷结构（一）试卷满分及考试时间本试卷满分为300分，考试时间为180分钟。
（二）答题方式答题方式为闭卷、笔试。
（三）试卷内容结构临床免疫学检验技术、临床生物化学检验技术、临床血液学检测技术、临床微生物学检验技术各占约1/4。
（四）试卷题型结构A型题第1~90小题，每小题1.5分，共135分第91~120小题，每小题2分，共60分B型题第121~150小题，每小题1.5分，共45分X型题第151~180小题，每小题2分，共60分四、考查内容（一）临床免疫学检验技术1. 临床免疫学检验概论临床免疫学检验技术的发展2. 抗原和抗体及其结合反应抗原抗体反应的原理。
抗原抗体反应的特点。
3. 抗体的制备免疫原的制备、半抗原的制备和载体的选择；免疫佐剂的种类、免疫生物学作用以及引起免疫应答增强的机制。
抗血清的制备：免疫动物的选择、免疫途径与方法、收获血清的方法；抗血清的鉴定和保存；抗血清的纯化方法和单价特异性抗血清的纯化方法；杂交瘤技术的原理；单克隆抗体的制备技术：单克隆抗体的产生、纯化和鉴定。
4. 凝集反应凝集反应的原理、特点和常见的直接凝集反应、间接凝集反应和抗球蛋白试验。
5. 沉淀反应沉淀反应的特点和液体内沉淀试验、单向扩散试验和双向扩散试验的方法。
6. 放射免疫技术放射免疫技术的特点及放射免疫分析、免疫放射分析的基本原理、放射免疫分析和免疫放射分析的异同。
7. 荧光免疫技术荧光技术中的相关概念和常用的荧光物质、荧光标记抗体的制备和免疫荧光显微技术；荧光显微镜、荧光分光光度计的基本结构和使用。
8. 化学发光免疫分析技术发光酶免疫分析的原理、技术要点及方法学评价；化学发光免疫分析的原理、技术要点及方法学评价；电化学发光免疫分析的原理、技术要点及方法学评价；发光现象、化学发光剂种类及化学发光标记物的制备。
疫增殖性疾病及其免疫检测
4、血清相对粘度↑，＞4；
5、本周蛋白尿（10～30%患者可有，常为 κ）。
三、重链病
是由于浆细胞发生突变和异常增 生，致使血清和尿中出现大量游离的 无免疫功能的免疫球蛋白重链所导致 的疾病。
根据重链的不同可进一步进行免 疫分型，以γ、α、μ型为多见。
四、轻链病
第一节 免疫增生性疾病的概念及分类
一、概念
免疫增殖病（immunoproliferative diseases， IPD）主要是指免疫器官、免疫组织或免疫细胞（淋 巴细胞、单核-巨噬细胞）异常增生（良性或恶性） 所引起的疾病，多属于血液病范围。
这类疾病的表现有免疫功能异常及免疫球蛋白质 和量的变化。
3、轻链分子量小，扩散快，应每隔10分钟观 察一次结果。
三、免疫固定电泳
是血清区带电泳加免疫沉淀反应的一 项定性实验。是一种分类鉴定方法。
血清行区带电泳后，分别在电泳条上 加入不同类型的单克隆抗体，相应的抗原 将与抗体在某一区带形成抗原抗体复合物， 经漂洗和染色可清晰地显示出抗原抗体反 应带。（图4）
第三节 单克隆免疫球蛋白增殖病
该病突出的特点是患者血清中存在异常 增多的单克隆蛋白（M蛋白），其在类别、亚 类、H链、L链抗原结构等方面完全相同，但 多无免疫活性，又称副蛋白。
本周蛋白（Bence-Jones protein）——为过量合成的κ或λ型轻链， 游离存在于血清中，可从患者尿中排出。
一、多发性骨髓瘤
⑴ 免疫球蛋白多克隆增殖：指血清中两个 克隆以上的浆细胞同时增生，体内多种Ig 异常增高和/或尿中出现游离轻链或重链的 病理现象。多为良性反应性增殖或继发某 一疾病。
⑵ 免疫球蛋白的单克隆增殖：是由
自身免疫性疾病的免疫学检验ppt课件
斑点型
核内颗粒状荧光
抗ENA
MCTD、SLE、PSS、SS、PM
核仁型
核仁有荧光
抗核仁抗体
PSS、雷诺现象、SLE
着丝点型
核浆细小相同颗粒荧光
抗着丝点
PSS、CREST综合征
34
均质型
抗核抗体核型
着丝点型
核仁型
斑点型
35
例：间接免疫荧光法（IIF法） 测定抗dsDNA抗体
36
用ELISA间接法检测抗dsDNA抗体、抗组蛋白抗体和抗核小体抗体。
2. ELISA法
37
SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
待检血清
按分子大小分开不同区带
分离
转印
NC膜上
抗ENA与膜上相应抗原带结合
抗人IgG·HRP
NC—ENA—抗ENA—抗人IgG·HRP—显色
3. IBT法
38
类风湿因子(rheumatoid factor,RF): 是抗变性IgG的 自身抗体，为19S的IgM，也可见7S的IgG和IgA。 与人变性IgG结合，不与正常IgG发生凝集反应。 RF出现在类风湿性关节炎（RA）患者中，约70%～ 90%的血清中和约60%的滑膜液中可检出IgG类RF；
对SLE有高特异性;SLSLE活动期增高
药物疗效
抗dsDNA抗体
抗DNA抗体
26
抗组蛋白抗体（anti-histonic antibody,AHA）： 由H1、H2A、H2B、H3和H4五个亚单位，各自都 有特异性抗体；
AHA
检出百分率
抗dsDNA
50
70
90
100
药物诱导性狼疮只能检出此
临床检验技术士《基础知识》模拟试卷二
临床检验技术士《基础知识》模拟试卷二[单选题]1.静脉采血法的采血部位首选A.股静脉（江南博哥）B.手背静脉C.肘部静脉D.颈外静脉E.内踝静脉参考答案：C参考解析：正确采集血标本是获得准确可靠实验结果的关键。
静脉采血法：凡位于体表的浅静脉均可采用，首选肘静脉，也可用手背静脉、内踝静脉或股静脉。
幼儿可用颈外静脉采血。
掌握“采血方法3,4”知识点。
[单选题]2.积液一般为漏出液的是哪种疾病A.结核性感染B.乳腺癌C.细菌感染D.转移性肺癌E.晚期肝硬化参考答案：E参考解析：漏出液常见于静脉回流受阻、充血性心力衰竭和晚期肝硬化等，而渗出液则常见于结核性、细菌性感染，转移性肺癌、乳腺癌。
掌握“浆膜腔积液检测的临床应用2,4”知识点。
[单选题]3.酮体是指A.β-羟丁酸、乙酰乙酸、乙酸B.β-羟丁酸、乳酸、丙酮酸C.β-羟丁酸、柠檬酸、丙酸D.β-羟丁酸、乙酰乙酸、丙酮E.草酰乙酸、乳酸、丙酮酸参考答案：D参考解析：尿酮体是尿液中乙酰乙酸（占20%）、β-羟丁酸（占78%）及丙酮（占2%）的总称。
酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间代谢产物，当糖代谢发生障碍、脂肪分解增高，酮体产生速度超过机体组织利用速度时，可出现酮血症，酮体血浓度一旦越过肾阈值，就产生酮尿。
掌握“尿液化学检查各指标定义及概述1,3”知识点。
[单选题]4.造血干细胞的免疫标记A.CD14B.CD19C.CD34D.CD38E.CD41参考答案：C参考解析：只有CD34是造血干细胞的免疫标记。
掌握“造血干细胞分化与调控1,3”知识点。
[单选题]5.主要功能是通过摄取Ch进入细胞内的是A.HDL受体B.LDL受体C.清道夫受体D.VLDL受体E.TG受体参考答案：B参考解析：考查脂蛋白受体的生理功能，低密度脂蛋白受体能和LDL结合之外，还能和含有APOE的VLDL、β-VLDL、LDL残基等结合，将它们吞入细胞内，使细胞从所摄取的脂蛋白中获得脂质（主要为胆固醇）。
第章免疫增殖性疾病及其免疫检测
免疫增殖性疾病及其免疫检测什么是免疫增殖性疾病？免疫增殖性疾病（Immunoproliferative disease）是指一类由于免疫系统异常而导致的疾病，包括多发性骨髓瘤、恶性组织细胞病、淋巴瘤、白血病、自身免疫性疾病等。
这类疾病的发展过程中，免疫细胞异常增生，导致诸如肝脾增大、贫血、感染、出血等一系列临床表现。
疾病的罹患与免疫系统的失调密切相关，是因为机体无法消除或者抑制免疫系统异常增生细胞的增殖。
免疫增殖性疾病的免疫检测对于免疫增殖性疾病的检测方法，很多免疫学的检测手段都可以用于辅助临床诊断，如常规血常规、血电解质、血清肝功能及肾功能、免疫球蛋白测定、T细胞和B细胞检测、肿瘤标志物等。
临床医生还需要结合详细的临床病史、体格检查及影像学检查等，综合分析，进行综合判断。
免疫球蛋白测定在免疫增殖性疾病中，病人的免疫系统会异常增生细胞，同时分泌异常的免疫球蛋白。
因此，测定病人的免疫球蛋白，对于诊断和评估免疫增殖性疾病的病情至关重要。
1.总免疫球蛋白测定总免疫球蛋白测定是测定病人血液中IgG、IgM以及IgA三种免疫球蛋白的总量。
在多发性骨髓瘤病人的血清中，三种免疫球蛋白的总量均会升高，因为瘤细胞分泌大量异常的IgG、IgM和IgA，导致病人总免疫球蛋白的水平升高。
2.免疫电泳免疫电泳是一种以电泳原理为基础的技术，将血液中的免疫球蛋白分离并鉴定它们的种类和数量。
在多发性骨髓瘤的诊断中，血浆蛋白免疫电泳检查是非常重要的检查手段。
由于瘤细胞活跃分泌异常Ig，因此在电泳之后，Ig会暴露在凝胶表面，可以很容易地发现瘤细胞分泌的异常Ig,从而诊断出多发性骨髓瘤。
T细胞和B细胞检测T细胞和B细胞检测是检测免疫增殖性疾病的重要方法之一。
在多发性骨髓瘤等疾病的发展过程中，免疫细胞异常增生，而其中又包含了B细胞和T细胞。
B细胞是制造抗体的细胞，T细胞则是调节体内免疫反应的重要细胞类型。
1.流式细胞术流式细胞术是一种检测细胞表面标志物、检测细胞包括B细胞和T细胞个数的手段。
临床免疫学06-免疫增殖性疾病及电泳技术
Western blot
Western blot
流 程
Western blot
印迹过程
二维聚丙烯酰胺凝胶电泳
• 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电 聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离） 以及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（根 据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术 结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最 有效的一种电泳手段。
存活和增殖传代。因此只有杂交瘤细胞才能在HAT培养液中生长繁殖
各类抗体的特点
抗体制备
多克隆抗体
技术简单 来源广泛 反应性好 价格便宜 交叉反应
单克隆抗体 基因工程抗体
特异性强 随时制备 多为鼠源 反应性弱
任意修饰 技术复杂 可原核表达 价格昂贵
常用电泳技术简介
四、毛细管电泳：
• 毛细管电泳(Capillary electrophoresis，CE)是一 类以毛细管为分离通道，以高压直流电场为驱动 力的新型液相分离分析技术；
免疫球蛋白增殖性疾病
• 多克隆增殖性疾病：
Polyclonal proliferation diseases ★ 5种 Ig 全面增加 ★ 只有一种 Ig 增殖，κ/λ比值正常。
常用电泳技术简介
四、毛细管电泳：
2、毛细管凝胶电泳（CGE）：是将板上的 凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳。 凝胶具有多孔性，起类似分子筛的作用， 溶质按分子大小逐一分离。
常用电泳技术简介
四、毛细管电泳：
2、毛细管凝胶电泳（CGE） ：常用聚丙 烯酰胺在毛细管内交联制成凝胶柱，可 分离、测定蛋白质和DNA 的分子量或碱 基数 。
• 免疫沉淀：应用固定剂和各型免疫 球蛋白及轻链抗血清，加于凝胶表 面的泳道上，经孵育让固定剂和抗 血清的在凝胶内渗透并扩散后，若 有对应的抗原存在，则在适当位置 形成抗原抗体复合物。
临床检验技师-临床免疫学和免疫检验(2019)讲义第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测
第二十四章自身免疫性疾病及其免疫检测自身免疫耐受：正常情况下，机体能识别“自我”，对自身的组织细胞成分不产或仅产生微弱的免疫应答，是维持机体免疫平衡的重要因素。
自身免疫：在某些情况下，自身耐受遭到破坏，机体免疫系统对自身成分发生免疫应答。
其发生是机体免疫系统产生了针对自身成分的自身抗体或自身反应性T淋巴细胞（致敏T淋巴细胞）。
由自身免疫应答引起的疾病称为自身免疫性疾病（AID）。
第一节概述一、自身免疫性疾病的分类按受累器官组织的范围将自身免疫性疾病分为器官特异性和非器官特异性两大类。
非器官特异性自身免疫性疾病中部分疾病的病变常累及多种器官及结缔组织，故又称这部分疾病为结缔组织疾病或胶原病。
二、自身免疫性疾病的共同特征1.可以有诱因，也可以无诱因，但多数病因不清。
2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加。
3.有遗传倾向，已发现有些特定基因与自身免疫病的发病有密切关系。
4.血清中有自身抗体或体内有针对自身组织细胞的致敏T淋巴细胞。
自身抗体在不同的自身免疫病中有交叉和重叠现象。
部分疾病有相关的特征性自身抗体。
5.疾病的重叠现象，即一个患者可同时患一种以上自身免疫病。
6.一般病程较长，多迁延为慢性。
病程中病情发展和缓解常反复交替，病情的严重程度与自身免疫调节紊乱程度密切相关。
7.病理损伤的局部可发现有淋巴细胞、浆细胞、中性粒细胞浸润。
8.免疫抑制剂治疗多可取得较好的疗效。
第二节自身免疫性疾病与免疫损伤发生自身免疫病的关键是机体产生了针对自身组织成分的自身抗体和致敏T淋巴细胞，并在体内发生了自身免疫应答，导致自身组织细胞的损伤。
一、自身抗原生物、物理、化学因素引起的自身组织细胞结构与成分发生改变，并能引起机体免疫系统针对这些自身组织细胞成分产生免疫应答反应的抗原物质称为自身抗原。
（一）隐蔽抗原的释放体内某些组织成分，如精子、眼内容物、脑等，在正常情况下从未与免疫细胞接触过。
因手术、外伤、感染等原因破坏隔绝屏障，便与免疫系统接触。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
三、常见免疫球蛋白增多病
（四）轻链病 轻链病(light chain disease, LCD)是由于异常的 浆细胞产生过多的轻链，而重链的合成相应减少，过多 游离轻链片段在血清或尿液中大量出现而引起的疾病； 一旦免疫球蛋白轻链在全身组织中沉积，引起相应的临 床表现，即为轻链沉积病(light chain deposition disease, LCDD)。 患者以不明原因的贫血、发热、周身无力、出血倾 向，浅表淋巴结及肝、脾肿大，继而出现局限性或多发 性骨痛、病理性骨折或局部肿瘤等症状为特征。
及淋巴母细胞性淋巴结病等。
恶性增生主要指单克隆增殖性疾病，是一个B细胞 在某一分裂阶段发生突变，然后急剧分化、增殖，并大 量表达某种单一的免疫球蛋白。
免疫增殖性疾病的概念及分类
因单克隆免疫球蛋白异常增多也可继发于某些疾病 和表现为良性增多，某些淋巴系统的增殖性疾病也可分 泌单克隆免疫球蛋白，故单克隆免疫球蛋白增多病又可 分为三类: 1. 原发性恶性单克隆丙种球蛋白病 包括多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、孤立性 浆细胞瘤、淀粉 样变性、重链病、轻链病、恶性淋巴 瘤和慢性淋巴细胞白血病等。 2. 继发性单克隆丙种球蛋白病 包括非淋巴网状系统肿瘤、单核细胞白血病、风湿 性疾病、慢性炎症、冷球蛋白血症、原发性巨球蛋白血 症性紫癜、丘疹性粘蛋白沉积症和家族性脾性贫血等。
三、常见免疫球蛋白增多病
IgM重链(链)病 1. 报道较少。 2. 患者表现为病程漫长的慢性淋巴细胞性白血病 或其他淋巴 细胞增殖性疾病的征象。 3. 本-周蛋白尿(型)见于10%～15%患者。 4. 血清区带电泳通常正常或显示低丙种球蛋白血 症。 5. 免疫电泳如果发现一种血清成分可与抗链的抗 血清起反应， 但不与抗轻链的抗血清起反应，可作出 诊断。 6. IgD重链(链)病，罕见。 7. IgE重链(链)病，罕见。
到只与相应抗重链抗血清而不与抗轻链抗血清反应的异常血清
成分。
三、常见免疫球蛋白增多病
IgA重链(链)病： 1. 最常见，10岁～30岁。 2. 几乎所有患者都有弥漫性的腹部淋巴瘤和吸收不良综 合征。
3. 血清区带电泳可能不出现孤立的M峰，2与-球蛋白区
出现宽带或-球蛋白带组分减少。
4. 本-周蛋白阴性。
三、常见免疫球蛋白增多病
免疫学检测： 1. 血清区带电泳时在区带内可见高而窄的尖峰或密集 带，免疫电泳证实为单克隆M带，M蛋白以IgG型最多，约占60%， IgA和IgM型各占20%，未见IgD和IgE型MGUS的报道。 2. M蛋白浓度增高，但IgG一般<30g/L，如为IgA或IgM则
<10g/L。
免疫增殖性疾病的概念及分类
免疫增殖性疾病 是由免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增生所致 的一组疾病。
包括良性增生和恶性增生两类。
主要表现为免疫球蛋白异常（质和量）和免疫功能
异常。
免疫增殖性疾病的概念及பைடு நூலகம்类
良性增生多见于多克隆增殖性疾病，由产生各种免 疫球蛋白的B细胞全面增殖所致。包括慢性肝病/肝硬化、 结缔组织病、慢性感染、恶性肿瘤、获得性免疫缺陷症
3. 尿液中没有或仅有微量M-蛋白。
三、常见免疫球蛋白增多病
（六）淀粉样变性(amyloidosis) 是患者体内产生的淀粉样蛋白质沉积到一处或多处组织器 官的细胞间，压迫组织，影响其功能的一组疾病 可分为系统性（主要是淋巴细胞和浆细胞相关的淀粉样变 性）和非系统性（即器官或系统的局限性淀粉样变性） 淀粉样物质主要是多糖蛋白复合体，在光镜下呈无定形的 均匀的嗜伊红性物质，用刚果红染色偏光观察可见特异的绿光 双折射或红绿双折射 约80%原发性系统性淀粉样变性患者血清和尿中有单克隆 免疫球蛋白成分，最常见为游离单克隆轻链。AL型淀粉样变性 患者的链与链的比率为3:1
链时，则血清中游离轻链增加，易从尿中排出，称本-周
蛋白（Bence Jones protein, BJP）。
三、尿液轻链蛋白检测及其临床意义
经典的检测方法是将尿液标本（一般是尿蛋白阳性
的尿液）置56℃水浴15分钟，如有浑浊或沉淀，再将试
管放入沸水中煮沸3分钟，如果混浊变清则提示本-周蛋 白阳性。 检测本-周蛋白对轻链病的诊断是必不可少的项目，并 对多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病等疾病
三、常见免疫球蛋白增多病
免疫学检测：
1. 血清免疫球蛋白定量可见各种免疫球蛋白正常或减少
，轻链/比值异常。 2. 血清区带电泳可能出现轻链带。 3. 免疫固定电泳各重链泳道均无免疫沉淀带，只有轻链 出现异常免疫沉淀带。 4. 尿免疫球蛋白定量可见单克隆轻链蛋白，轻链/比值 异常，本-周蛋白阳性。
肾病综合征血清区带电泳
二、免疫电泳
三、常见免疫球蛋白增多病
（三）重链病(heavy-chain disease, HCD) 是一组少见的淋巴浆细胞恶性增殖性疾病。其特征为单克 隆免疫球蛋白重链过度生成。 包括IgA重链(链)病、IgG重链(链)病、IgM重链(链)病、 IgD重链(δ 链)病和IgE重链(ε 链)病。
重链病的免疫学诊断需在免疫电泳或免疫固定电泳中检测
三、常见免疫球蛋白增多病
免疫球蛋白增多病特指由浆细胞的异常增殖而导致 的免疫球蛋白异常增多进而造成机体病理损伤的一组疾
病。
常见免疫球蛋白增多病包括多发性骨髓瘤、巨球蛋 白血症、重链病、轻链病、意义不明的丙种球蛋白血病 和淀粉样变性等。
三、常见免疫球蛋白增多病
（一）多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM) 也称为浆细胞骨髓瘤，是由合成和分泌免疫球蛋白 的浆细胞发生恶变，造成大量单克隆的恶性浆细胞增生 所致。
一、异常免疫球蛋白分子的特点
免疫增殖性疾病中，免疫球蛋白的合成可出现以 下三种异常： 1. 合成量高：突变的B细胞转化为前B细胞或浆细
胞活性极高，可快速合成免疫球蛋白。
2. 合成时间短：合成一条H链约需2.5分钟，合成
一条L链则只需1分钟。
3. 多余轻链：每合成1分子免疫球蛋白则会剩余3 条轻链，多余的轻链由尿中排出，可达1mg/ml以上。
对多发性骨髓瘤进行进一步的鉴定和分型。
三、常见免疫球蛋白增多病
（二）巨球蛋白血症（macroglobulinemia） 是由淋巴细胞和浆细胞无限制的增殖，并产生大量 单克隆IgM所引起。 以高粘滞血症、肝脾肿大为特征,患者血清常分离 不出或呈胶冻状。 男性患者多于女性患者，中位年龄65岁。 免疫学检测： 1. 血清区带电泳在-球蛋白带内可见高而窄的尖峰 或密集带，免疫电泳证实为单克隆IgM。 2. 尿液中有单克隆轻链存在。
细胞表面并影响其对其它生物信息的接收，继而影响B细胞的增
殖、分化和抗原提呈。
二、免疫增殖性疾病的免疫损伤机制
异常免疫球蛋白增多所造成的病理损伤 浆细胞 异常增殖产生大量无活性的异常免疫球蛋白或其片段，沉 淀于组织后可引起组织变性和淋巴细胞浸润，进而导
致相应器官的功能障碍。此外，免疫球蛋白浓度过高
还可导致血液黏稠度增加，产生一系列直接或间接的 病理损害。 溶骨性病变 浆细胞瘤患者大多伴有溶骨性破坏， 可能是由骨质形成细胞调节功能紊乱所致。
5. 免疫学诊断需在免疫电泳上检测到只与抗IgA抗血清而 不与抗轻链抗血清反应的异常成分。
三、常见免疫球蛋白增多病
IgG重链(链)病
1. 老年男性,患者通常有淋巴结肿大和肝脾肿大。
2. 常见贫血、白细胞减少、血 小板减少、嗜酸性 粒细胞增多以及外周血出现不典型的淋巴细胞或浆细胞。 3. 诊断的依据是免疫电泳或免疫固定电泳在血清 和尿中检出游 离的单克隆IgG重链碎片，未检出与单克 隆轻链的生成有关的证据。
的诊断、鉴别和预后判断均有一定帮助。
第三节
异常免疫球蛋白的检测方法及 应用原则
重点提示
血清区带电泳 免疫电泳 免疫固定电泳 血清免疫球蛋白定量 异常免疫球蛋白检测的应用原则
一、血清区带电泳
常采用醋酸纤维素膜和琼脂糖凝胶电泳两种方法：
正常血清区带电泳
单克隆增殖血清区带电泳
多克隆增殖血清区带电泳
肝硬化血清区带电泳
三、常见免疫球蛋白增多病
（五）意义不明的单克隆丙种球蛋白病(monoclonal
gammophathy of undetermined significance, MGUS) 指患者血清或尿液中出现单克隆免疫球蛋白或轻链， 但排除 恶性浆细胞病，其自然病程、预后和转归暂时无 法确定的疾病。 M蛋白多为IgG，IgA和IgM共占1/4左右。
第一章 血液标本采集与处理
临床免疫学检验技术
第二十四章 免疫增殖性疾病及其免疫检测
陈福祥
目 录
第一节 概述 第二节 免疫增殖性疾病常用检验项目及其临床意义 第三节 异常免疫球蛋白的检测方法及应用原则
第一节
概述
重点提示
免疫增殖性疾病的概念及分类 免疫增殖性疾病的免疫损伤机制 常见免疫球蛋白增多病
一、异常免疫球蛋白分子的特点
继而导致出现以下三种结果： 1. 免疫球蛋白大量合成，血中含量大大增加，高 于正常人数倍到数十倍。 2. 大量异常免疫球蛋白成分是同一型别，理化性 质十分均一，但无与抗原结合的活性，也无其他免疫活
性。
3. 正常成分减少，即多样性免疫球蛋白减少，正
常免疫功能下降。
二、M蛋白检测及其临床意义
3. 原发性良性单克隆丙种球蛋白病 包括一过性单克隆丙种球蛋白增多病和持续性单克隆丙 种球蛋白增多病等。
二、免疫增殖性疾病的免疫损伤机制
浆细胞恶性增殖
浆细胞异常增殖 在内因和外因的作用下，浆细胞发生永 生性病变。 正常体液免疫抑制 浆细胞瘤患者体内IL-6水平异常增高， 致使IL-4的产生受到抑制，从而抑制了正常体液免疫反应。此 外，浆细胞瘤细胞可以分泌大量无抗体活性的免疫球蛋白，其 Fc段可与正常B细胞及其他有Fc受体的细胞结合，从而封闭这些