溶血性实验室检测

实验方法
1. 取12支小试管，排成一排，按照下表操作：
试管编号 1 蒸馏水 （滴） 1%NaCl （滴） NaCl最终 2.4 2.8 3.2 3.6 4.0 4.4 4.8 5.2 5.6 6.0 6.4 6.8 浓度(g/L) 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
2. 用干燥消毒注射器静脉取血1ml ，将注射器平执，针
【实验原理】 PNH患者体内存在对补体敏感
的红细胞，在酸化的正常血清中（PH值6.6-
6.8），经孵育，补体被激活，红细胞被破坏，
产生溶血。而正常红细胞不被溶解，无溶血 现象出现。
实验方法
1. 取试管两支，Fra Baidu bibliotek下表操作：
测定管 正常人血清（ml） 0.2 mol/L HCL (ml) 50%被检者红细胞悬液（ml） 0.5 0.05 0.025 对照管 0.5 / 0.025
头斜面向上平搁在试管口，小心推动注射器，每管加入 1滴血，轻轻摇匀；若患者有贫血，可每管加两滴。
3. 各管置于室温静置2h，红细胞自然沉淀或溶解，从高浓
度管开始观察上层液体的颜色及管底沉淀。 4. 记录红细胞开始溶血（上层液体开始有淡红色出现，管 底尚有多量未溶的红细胞）和完全溶血（上层液体呈红 色，管底无红细胞）时NaCl浓度。
注意事项
1. NaCl必须干燥，准确称量，用前新配。
2. 加入血液前需将蒸馏水和NaCl溶液混匀. 3. 试剂加量要准确，血液应直接滴入液体中，不能沿 管壁流入。 4. 空针及针头必须干燥，以免溶血。红细胞在低渗液中 很容易被机械力所破坏，故不应用力振荡。
蔗糖溶血试验

【实验原理】
蔗糖溶血试验用于检测PNH患者的红细胞缺陷。患者的红细 胞在低离子强度的蔗糖溶液中对补体的敏感性增强，经孵 育，补体与红细胞膜结合加强，使其缺损，结果导致蔗糖 溶液通过缺损处进入红细胞，引起渗透性溶血。而正常人 红细胞则不发生溶血。
生理盐水（ml）
/
0.05
2.
混匀后，试管加塞，置37℃ 水浴1 h ，低速离心后，
观察上清液有无溶血现象。
【实验结果】 如阴性对照管不溶血而测定管溶血为阳性反
应，如测定管不溶血则为阴性反应。
注意事项
1. 一切用具要干燥，针头要粗，以免溶血。
2. 红细胞要洗净，HCL加量要准确，血清要新鲜，以免补体失活。 3. 加酸时勿加在管壁上，并将酸与血清混匀后，再加红细胞悬液，而 且红细胞悬液要直接滴入，不要沿管壁流下，以免溶血。 4. 血清酸化后用塞盖好，以免二氧化碳逸出而降低了血清的酸度，以 致溶血程度减低。 5. 若患者经多次输血，其血中所含的不正常红细胞将相对减少，可呈 弱阳性或阴性，对此，可延长孵育时间再观察各管有无溶血。 6. 血清最好用正常同型血清或AB型血清。

【实验方法】
1. 取健康人与患者同型或AB型新鲜血清0.05 ml，加10% 蔗糖溶液0.85 ml，混匀。
2. 加待测者50%的红细胞悬液0.1 ml，混匀。
3. 置37℃ 水浴箱30min 后，取出直接观察或低速离心后观 察有无溶血。

【实验结果】 上清液呈红色为阳性，无色为阴性。
酸化血清溶血试验
溶血性贫血实验室检测内容
红细胞渗透脆性试验

【目的】
掌握红细胞渗透脆性试验的原理、方法、注意事项及临床意义。

【实验原理】
红细胞渗透脆性试验是检测红细胞对不同浓度低渗盐溶液抵 抗力的一种半定量试验。红细胞在低渗盐溶液中会因为水的渗入 而逐渐膨胀，导致溶血，其脆性主要取决于细胞表面积与其体积 之比值。比值愈小，红细胞抵抗力愈小，渗透脆性增加。反之， 红细胞抵抗力愈大，渗透脆性减低。