小鼠结肠癌高转移模型体内筛选和建立
小鼠肿瘤模型的原理和方法及流程
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小鼠CT26结肠癌耐药动物模型的建立
（ —ｌ ｏ ｒ ｅ ，—Ｐ 外排功能。结果 ： Ｐ ｇ ｃｐｏ ｉ Ｐ ｇ ） ｙ ｔｎ 耐药株 的倍增时间 比亲本细胞株长 ， 化疗后肿瘤对放线 菌素 Ｄ Ａ Ｔ 、 （ Ｃ ）阿霉素（ Ｄ 、 Ａ Ｍ）长 春新碱 （ Ｃ 、 Ｖ Ｒ）羟基喜 树碱（ Ｐ 、一氟尿 嘧啶（ 一 ｕ 、 ＨＣ Ｔ）５ ５ Ｆ ）柔红霉素（ Ａ 、 Ｄ Ｍ）依托泊甙 （ Ｐ ６ 的 Ｒ 分别为 ２ －、６ 、０９ ７０ Ｖ Ｉ） １ ９３２ ． １．、．、 ４ ５８３ 、．， ．、． ２ 敏感性降低 。 ０ ８ 耐药株 ＭＤ Ｉ Ｎ Ｒｂ ｍＲ Ａ表达水平 比亲本细胞株高 ， 对柔红霉素的外排能力明显高于亲本细胞株。结论 ： 本
实验 成 功建 立 肿 瘤 多 药耐 药 的 动 物模 型 ， 为化 疗后 肿 瘤 继 发 多药 耐 药 问题 的研 究提 供 动 物模 型 ， 为提 高 化疗 效 果 研究 奠 定 基 础 。
【 关键词 】 多药耐药 ； 动物模型 ； 化疗 【 中国图书分类法分类号 】 ７ — Ｒ ３３ 【 文献标识码 】 Ａ 【 收稿 日期 】０ ９ ０ — ２ ２０ — ３ ０
（ ｅ ａｔ ｅ ｔｆＰ ｄａ ｉ Ｓ ｒｅｙ Ｃ ｉ ｒｎ ｓ ｏｐｔ ， ｈ ｎ ｑｎ Ｄ ｐ ｒｎｎ ｅ ｉ ｒ ｕｇ ｒ ，ｈｌ ｅ ’ Ｈ ｓｉ ｌＣ ｏｇ ｉ ｒ ｏ ｔｅ ｄ ａ ｇＭｅ ｉａ Ｕ ｉ ｒｉ ） ｄｃ ｎｖ ｓ ｙ ｌ ｅ ｔ
【 ｂｔ ｃ］ ｂｅｔ ｅＴ ｓ ｂｉ ｅ ｕ ｉｒｇ ｅｉａｔ ｎｍ ｌ ｏ ｅｏ Ｔ ６ｃｌ ａｃｒ ｅｓｉ ｍｃ ｉ ｅ ｓ ｏ ｅ ｔｅａｙ Ａ ｓａｔＯ ｊｃｉ ：ｏｅｔ ｌｈｔ ｈｄｕ ｓ ｔ ｉａ ｍ ｄｌ ｆ ２ ｏ ｎｃｎｅ ｌ ｉ ｗｔ ｔ ｅ ｆ ｈｍｏ ｒｐ． ｒ ｖ ａ ｓ ｈｍ ｒ ｓ ｎａ Ｃ ｏ ｃ ｌ ｎ ｅ ｈｈ ｕ ｃ ｈ
小鼠结肠癌远处转移模型的构建
小鼠结肠癌远处转移模型的构建
杨 扬 李 乃 卿
【 摘要 】目的 建 立 小 鼠结 肠癌远 处 转移模 型 。方法 将 小 鼠结肠癌 细胞 （ ２ ）悬液 分别接 种于 Ｂ Ｌ ／ 小 鼠脾 被膜 下 、 壁 内和尾静 脉 内， Ｃ６ Ａ ＢＣ 肠 于术后 第 １、 １ 天处 死 ３５只 小鼠 ， 察胸腔 及腹 腔 内肿瘤 生 长・ Ｏ第 ５ ～ 观 情况， 余小 鼠待 其 自然死亡 ， 察生存 天数 ， 并 记录远 处转 移情 况。 其 观 解剖
小 鼠结 肠癌 Ｃ ６ ２ 细胞 株 （ 国引进 ，广安 门医院肿 瘤 实验 室 惠 美
赠 ）。经３ 次皮 下接种传代后 ，无菌条件下摘取瘤体 ，生理盐水洗涤 ，
剪成小块 ，匀浆 ，离心后取沉淀 ，反复３ ，培养于 １％新生牛血清和 次 ０
Ｒ ＭＩ６０ Ｐ １４ 培养液 （ 含青霉素 １０ ０ 单位／Ｌ ｍ 、链霉素 １０ ０ 单位／ ），置 ｍＬ
有更高 的准确性 ，可对 比性 ，也使检验结果 报告 更具科学性和 临床参
考价值。 上 述试 验 表 明 ，２ 台全 自动 分析 仪 的 则定 结果 具 有较 好 的可 比 性 ，检验结果可 以互认 。 参考 文献
［】 Ｎａｉｎ ｌＣ ｍｍｉ ｅ ｏ ｉｉａ ａ ｏ ａｏｙ Ｓａ ｄ ｒｓＭｅｈ ｄ １ ｔ ａ ｏ ｏ ｔ ｅｆｒＣｌ ｃｌＬ ｂ ｒｔｒ ｔｎ ａｄ ． ｔｏ ｔ ｎ
将 ５ 只小 鼠称重 ，采用０ ％的戊 巴比妥钠 （０ ｇｋ ）腹腔 内注 ． ５ ５ｍ ／ｇ 射麻醉 ，３ ５ ｉ麻醉成功后 ，用胶布固定小 鼠于手 术台上。安尔碘皮 － ｍｎ 肤消毒 ，取腹 正中切 口，长约 １ ｃ ． ｍ，暴露腹腔 ，将瘤 细胞液０ ｍ 注 ５ ． Ｌ ２
小鼠结肠癌完整组织块原位种植及肝转移模型的建立方法
中国中西医结合消化杂志
Ｖｏｌ ２０ Ｎｏ ７Ｐ３０４
２０１２ 年 ７ 月
Ｃｈｉｎ Ｊ Ｉｎｔｅｇｒ Ｔｒａｄ Ｗｅｓｔ ＭｅｄLeabharlann Ｄｉｇ Ｊｕｌｙ ２０１２
ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－０３８Ｘ．２０１２．０７．００５
Ａｂｓｔｒａｃｔ：［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎ ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｍｉｃｅ ｒａｐｉｄｌｙ．［Ｍｅｔｈｏｄｓ］Ｔｕｍｏｒ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ ＣＴ２６ｏｆ ｍｉｃｅ ｃｏｌｏｎ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｗａｓ ｉｎｏｃｕｌａ－ ｔｅｄ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｌｙ ｉｎｔｏ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｔｏ ｄｅｖｅｌｏｐ ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ．Ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ｉｎｔａｃｔ ｔｕｍｏｒ ｔｉｓ－ ｓｕｅ ｗａｓ ｔｈｅｎ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ａｎｄ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｔｏ ｔｈｅ ｃｏｌｏｎ ｗａｌｌ ｏｆ ｍｉｃｅ ｔｏ ｓｅｔ ｕｐ ａ ｍｏｄｅｌ ｓｉｍｉｌａｒ ｔｏ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｒａｔｅ，ｌｏｃａｌ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ａｎｄ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｒａｔｅｓ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｅａｃｈ ｗｅｅｋ，Ｆｉｖｅ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｋｉｌｌｅｄ ａｆｔｅｒ ｔｗｏ ｗｅｅｋｓ，ｔｈｒｅｅ ｗｅｅｋｓ， ａｎｄ ｆｏｕｒ ｗｅｅｋｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．［Ｒｅｓｕｌｔｓ］Ａ １００％ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｒａｔｅ ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｍｏｄ－ ｅｌ．Ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅｓ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ ｗｅｒｅ １００％ ａｆｔｅｒ ３ｗｅｅｋｓ．Ｅｍａｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｘｈａｕｓｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｆｔｅｒ ４ ｗｅｅｋｓ．Ｔｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ－ｂｅａｒｉｎｇ ｍｉｃｅ ｗａｓ ２９ ｄａｙｓ．［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］Ｔｈｅ ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｔｕｍｏｒ ａｎｄ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｍｏｄｅｌ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｕｓｅｆｕｌ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ａｎｄ ｉｔｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｏｌｏｎ ｃａｎｃｅｒ．
结直肠癌肝转移小鼠模型建立及应用现状
结直肠癌肝转移小鼠模型建立及应用现状向彦臻１ꎬ陈欢１ꎬ殷佩浩１ꎬ２ａꎬ徐可１ꎬ２ｂꎬ詹月萍１ꎬ２ｂ(１.成都中医药大学上海普陀教学基地ꎬ上海２０００６２ꎻ２.上海中医药大学附属普陀医院ａ.普外科ꎬｂ.中西医结合肿瘤介入研究所ꎬ上海２０００６２)㊀㊀ＤＯＩ:１０ ３９６９/ｊ ｉｓｓｎ １００６￣２０８４ ２０２０ ０１ ０１４基金项目:上海市普陀区中心医院育英计划(２０１６２１９Ａ)ꎻ上海市中医药大学预算内项目(２０１９ＬＫ０３９)通信作者:詹月萍ꎬＥｍａｉｌ:ｚｈａｎｙｕｅｐｉｎｇ＠１６３.ｃｏｍ中图分类号:Ｒ７３￣３５４㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:Ａ㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:１００６￣２０８４(２０２０)０１￣００７１￣０５㊀㊀摘要:结直肠癌转移是导致结直肠癌患者死亡的首要原因ꎬ而肝脏是结直肠癌转移的最主要器官ꎮ结直肠癌肝转移小鼠模型在揭示肝转移的机制和评估有效预防及治疗措施中发挥着不可替代的作用ꎬ已被广泛应用于结直肠癌肝转移的基础和临床研究ꎮ直接种植造模是建立肝转移小鼠模型最常用的方式ꎬ包括盲肠种植法㊁脾脏种植法㊁肝脏直接种植法及门静脉种植法等ꎮ了解近年来各种植模型在结直肠癌肝转移研究中的建立及应用ꎬ可以为小鼠模型的选择提供参考思路ꎮ关键词:结直肠癌ꎻ肝转移ꎻ小鼠模型建立ꎻ造模方法ꎻ种植法ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＬｉｖｅｒＭｅｔａｓｔａｓｉｓＭｏｄｅｌｏｆＣｏｌｏｒｅｃｔａｌＣａｎｃｅｒｉｎＭｉｃｅＸＩＡＮＧＹａｎｚｈｅｎ１ꎬＣＨＥＮＨｕａｎ１ꎬＹＩＮＰｅｉｈａｏ１ꎬ２ａꎬＸＵＫｅ１ꎬ２ｂꎬＺＨＡＮＹｕｅｐｉｎｇ１ꎬ２ｂ１.ＳｈａｎｇｈａｉＰｕｔｕｏＴｅａｃｈｉｎｇＢａｓｅｏｆＣｈｅｎｇｄｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０００６２ꎬＣｈｉｎａꎻ２ａ.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＧｅｎｅｒａｌＳｕｒｇｅｒｙꎬ２ｂ.ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎｅｓｅａｎｄＷｅｓｔｅｒｎＩｎｔｅｇｒａｔｉｖｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＰｕｔｕｏＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０００６２ꎬＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ:ＺＨＡＮＹｕｅｐｉｎｇꎬＥｍａｉｌ:ｚｈａｎｙｕｅｐｉｎｇ＠１６３.ｃｏｍＡｂｓｔｒａｃｔ:Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｉｓｔｈｅｌｅａｄｉｎｇｃａｕｓｅｏｆｄｅａｔｈｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒꎬａｎｄｌｉｖｅｒｉｓｔｈｅｍａｊｏｒａｆｆｅｃｔｅｄｏｒｇａｎｏｆｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ.Ｔｈｅｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｆｒｏｍｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｐｌａｙｓａｎｉｒｒｅｐｌａｃｅａｂｌｅｒｏｌｅｉｎｒｅｖｅａｌｉｎｇｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｉｖｅｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅａｎｄｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｅａｓｕｒｅｓꎬｗｈｉｃｈｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｂａｓｉｃａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｆｒｏｍｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ.Ｄｉｒｅｃｔｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｓｔｈｅｍｏｓｔｃｏｍｍｏｎｌｙｕｓｅｄｍｅｔｈｏｄｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｍｏｄｅｌｉｎｍｉｃｅꎬｉｎｃｌｕｄｉｎｇｃｅｃｕｍｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎꎬｓｐｌｅｅｎｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎꎬｌｉｖｅｒｄｉｒｅｃｔｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎａｎｄｐｏｒｔａｌｖｅｉｎｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ.Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｖａｒｉｏｕｓｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｍｏｄｅｌｓｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓꎬｃｏｕｌｄｐｒｏｖｉｄｅａｒｅｆｅｒ￣ｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＣｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒꎻＬｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓꎻＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌꎻＭｏｄｅｌｉｎｇｍｅｔｈｏｄｓꎻＩｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ㊀㊀结直肠癌是美国第三大最常见癌症[１]ꎬ也是中国最常见的恶性肿瘤之一ꎮ在全球确诊的１３６万例结直肠癌中ꎬ中国结直肠癌的新发病例达２５.３万例ꎬ是全球结直肠癌每年新发病例数最多的国家[２]ꎮ对于结肠癌患者ꎬ即使在早期切除原发病灶也仍有可能发生转移ꎬ最终导致患者死亡ꎮ肝脏是结直肠癌转移最常见的部位ꎬ常经门脉循环行血源性传播[３]ꎮ结直肠癌肝转移的生物学过程极为复杂ꎬ是由多因素调控㊁多步骤构成的过程ꎬ其具体机制目前仍不明确ꎮ肝转移的过程可分为几个连续步骤ꎮ首先ꎬ原发肿瘤灶中的癌细胞分泌血管生成因子导致血管扩张ꎬ经激活蛋白酶的局部作用ꎬ癌细胞进入薄壁静脉血管和淋巴管ꎬ从而进入血液循环ꎬ大多数循环癌细胞在此过程中受到免疫系统和血流剪切力的攻击而破坏ꎬ存活的癌细胞或团块形成栓塞阻塞远处器官毛细血管床ꎬ最终癌细胞向肝实质外渗并形成微转移灶[４]ꎮ深入研究结直肠癌肝转移的具体机制以及探索有效的抗转移治疗方法ꎬ需要建立人结直肠癌肝转移动物模型ꎮ根据成瘤机制ꎬ结直肠癌小鼠造模方法主要分为致癌剂诱发小鼠成瘤法㊁基因工程小鼠成瘤法及直接种植肿瘤细胞或组织成瘤法ꎮ致癌剂诱发法耗时长㊁变异大㊁组间不易获得病程及癌块相似的小鼠ꎮ基因工程法成瘤率和转移率低ꎬ实验周期长ꎮ故前两种造模法极少用于结直肠癌肝转移的造模ꎮ现就结直肠癌肝转移常用的直接种植法造模及应用情况予以综述ꎮ１㊀盲肠种植法盲肠种植法是开腹后将结直肠癌肿瘤细胞或组织直接移植于盲肠浆膜下所产生的结直肠癌肝转移模型ꎬ此法为原位种植形成的自发性肝转移模型ꎬ能较为客观地模拟人类结直肠癌细胞的淋巴道转移和血运播散ꎬ较好地体现结直肠癌的生物学特性ꎮ与肿瘤组织移植法相比ꎬ细胞注射法流程简便㊁操作易行ꎬ且更为常用ꎬ建模成功的关键在于所选肿瘤细胞的侵袭能力和肿瘤细胞的数量ꎮ为证明微ＲＮＡ(ｍｉｃｒｏＲＮＡꎬｍｉＲ)￣１９２的表达能抑制体内结直肠癌细胞向肝转移ꎬＧｅｎｇ等[５]将绿色荧光蛋白标记的表达ｍｉＲ￣１９２的２ˑ１０６个ＨＣＴ１１６细胞直接注射到４~５周裸鼠的盲肠ꎮ４~５周处死裸鼠ꎬ切除盲肠及肝脏进行评估发现ꎬ对照组肝转移发生率为５３％ꎬ而ｍｉＲ￣１９２表达组肝转移的发生率低至８％ꎮＬｉｍａｎｉ等[６]将ＭＣ￣３８结肠癌细胞注射至Ｃ５７Ｂ１/６小鼠的盲肠壁ꎬ用肌醇三焦磷酸酯和ＦＯＬＦＯＸ(叶酸㊁氟尿嘧啶㊁奥沙利铂)处理小鼠ꎬ６周后评估小鼠肝转移指标ꎬ结果显示ꎬ肌醇三焦磷酸酯较ＦＯＬＦＯＸ抗结肠癌肝转移作用更明显ꎮ为证实在肝转移和源于远处转移的结直肠癌细胞系中ｍｉＲ￣８８５￣５Ｐ的表达上调ꎬＬａｍ等[７]将１ˑ１０６个ＨＣＴ１１６细胞原位注射于６~８周的ＮＯＤ/ＳＣＩＤ小鼠的盲肠壁ꎬ观察肿瘤转移及ｍｉＲ￣８８５￣５Ｐ的表达情况ꎮ细胞注射虽然相对简便ꎬ但接种后的肿瘤细胞易从浆膜中漏出ꎮＺｈａｎｇ等[８]在建模时做了进一步改善ꎬ将含有２ˑ１０６个结肠癌细胞的１０~１５ｍＬ磷酸缓冲盐溶液(ｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒｓａｌｉｎｅꎬＰＢＳ)用３３号微注射器注入野生型Ｃ５７ＢＬ/６和白细胞介素￣３３(ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ￣３３ꎬＩＬ￣３３)敲除小鼠的盲肠浆膜下ꎬ注射部位用组织胶密封㊁７０％的乙醇和ＰＢＳ清洗ꎬ以防止渗漏ꎮ６周后处死小鼠ꎬ收集并评估自发性肝转移肿瘤组织ꎮ结果表明ꎬ在结肠癌细胞中ＩＬ￣３３的表达增加了肿瘤的发生和肝转移ꎮ肿瘤组织移植是将结直肠癌细胞先注射于动物皮下或其他部位ꎬ待形成肿瘤块后再移植到盲肠的方法ꎮ由于此法与临床结直肠癌肝转移的突破方式和时间更为接近ꎬ因而认为其形成肝转移的可信度更高ꎮ但此种方式的手术要求高㊁过程复杂ꎬ且耗时较长ꎮＴａｏ等[９]将２ˑ１０７个ＨＣＴ１１６细胞注射至裸鼠的右腋窝ꎬ３周后用无菌技术切除肿瘤并切至１~２ｍｍ３大小ꎬ将切下的肿瘤块移植至４８只裸鼠的盲肠中ꎬ７ｄ后随机分为４组给药ꎬ即对照组㊁胃肠安组㊁５￣氟尿嘧啶组㊁胃肠安＋５￣氟尿嘧啶组ꎬ７周后处死裸鼠并收集原位肿瘤㊁肝转移瘤及肿瘤邻近组织ꎬ检查结果显示ꎬ与对照组相比ꎬ胃肠安＋５￣氟尿嘧啶组和胃肠安组肝转移更少ꎮＡｇａｒｗａｌ等[１０]将非靶向短发夹ＲＮＡ(ｓｈｏｒｔｈａｉｒｐｉｎＲＮＡꎬｓｈＲＮＡ)㊁蛋白激酶Ｂ(ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＢꎬＰＫＢ/Ａｋｔ)ｓｈＲＮＡ２或Ａｋｔ２ｓｈＲＮＡ２转染的绿色荧光标记的７ˑ１０６个ＧＥＯ细胞注射到雄性裸鼠的背侧皮下ꎬ形成异种移植物后切除肿瘤并切成１ｍｍ３的碎片ꎬ将两块碎片植入另一只裸鼠的盲肠ꎮ采用ˑ７倍放大和显微外科技术ꎬ用８￣０尼龙缝合线将异种移植物缝入浆膜下两个不同位置ꎮ由于手术的复杂性ꎬ术后每组２５只小鼠只有１７~２２只存活ꎬ９周后处死小鼠评估肝转移ꎬ结果表明ꎬＡｋｔ２缺失抑制体内结直肠癌转移ꎮＹａｎｇ等[１１]将２ˑ１０６个Ｌｏｖｏ￣Ｌｕｃ细胞悬浮于Ｆ１２Ｋ培养基中ꎬ再将０.２ｍＬ悬浮液皮下接种于ＢＡＬＢ/ｃ裸鼠的右前肢ꎮ当肿瘤生长到约１ｃｍ３时取出皮下肿瘤浸入含有青霉素和链霉素的Ｆ１２Ｋ培养基中ꎬ肿瘤组织切块备用ꎮ另取裸鼠ꎬ在盲肠血供充足处插入备用肿瘤块ꎬ无菌纱布吸取周围液体ꎬ肿瘤表面涂上适量的医用ＯＢ胶ꎬ确保肿瘤扩散至盲肠壁ꎬ静置４５ｓ胶凝固后回纳盲肠并关腹ꎬ术后７ｄ开始接受药物处理３周ꎬ最后评估裸鼠肝转移情况ꎮ２㊀脾脏种植法经脾脏建立结直肠癌肝转移模型是最常用的方式ꎬ可分为脾脏保留法和去脾法ꎮ虽与盲肠种植法相比ꎬ其不能客观模拟结直肠癌肝转移的宏观过程ꎬ但脾脏种植法可用于筛选高转移倾向的恶性结直肠癌细胞㊁研究肿瘤免疫疗法㊁开发抗转移药物等ꎮ保脾法是一种易于实施且重复性好的用于建立结直肠癌肝转移模型的方法ꎮ脾脏是机体的免疫器官ꎬ肿瘤细胞经过脾脏免疫细胞后转移至肝脏更符合体内肿瘤转移过程ꎮ此法注射肿瘤细胞时需谨防细胞溢出而造成腹膜内肿瘤ꎮＺｈｏｕ等[１２]将１ˑ１０６个ＳＷ４８０或ＳＷ６２０细胞悬浮在５０μＬＰＢＳ中ꎬ注入脾远端ꎬ６周后处死小鼠ꎬ切除脾脏和肝脏ꎬ结果发现ꎬ酸离子通道２过表达促进ＳＷ４８０细胞的肝转移ꎬ其敲除将减少ＳＷ６２０细胞的肝脏转移ꎮＺｈａｎｇ等[１３]将５ˑ１０５个ＨＣＴ１１６细胞注射至ＢＡＬＢ/ｃ裸鼠脾脏后ꎬ分别用小檗碱和０.９％氯化钠(对照组)灌肠４周ꎬ实验结束处死裸鼠ꎬ收集裸鼠肝脏发现ꎬ与对照组相比ꎬ小檗碱组肝转移灶的体积明显较小㊁数量较少ꎮ脾脏切除法所建模型可以避免保脾法形成的脾脏原位肿瘤对小鼠的影响ꎬ能较好地模拟结直肠癌肝转移血行转移过程ꎬ形成的肝转移灶集中而明显ꎮ但切除脾脏易致实验小鼠死亡ꎬ因此此法对实验要求较高ꎮＳｈｉｍｉｚｕ等[１４]麻醉小鼠后ꎬ在靠近脾脏左侧处行０.５ｃｍ切口ꎬ用２７Ｇ针头将含有２.０ˑ１０６个ＣＭＴ￣９３结直肠癌细胞的２００μＬＰＢＳ分别缓慢注射至野生型和血管紧张素Ⅱ亚型受体１α敲除小鼠的脾脏ꎬ５ｍｉｎ后取脾关腹ꎬ２周后处死小鼠ꎬ取出肝脏ꎬ与野生型相比ꎬ血管紧张素Ⅱ亚型受体１α敲除小鼠肝脏的重量及肝转移率明显降低ꎮＺｈａｎｇ等[１５]为获得体内高转移性结肠癌细胞ꎬ将含有１ˑ１０５个ＭＣ３８细胞的１００μＬＰＢＳ注射至Ｃ５７ＢＬ/６小鼠脾脏ꎬ５ｍｉｎ后去脾ꎬ３周后获得肝转移瘤ꎬ用胶原酶处理获得肝转移瘤细胞ꎬ从而提取出单个无菌细胞ꎬ选出的细胞再用Ｇ４１８(４００μｇ/ｍＬ)处理至少１周后再次注射至小鼠脾脏ꎬ重复９个循环以获得高侵袭性的ＭＣ３８￣ＬＭ１０细胞ꎮＴｏｈｍｅ等[１６]建立缺血再灌注模型ꎬ在再灌注时ꎬ用２７Ｇ针头将５ˑ１０４个ＭＣ３８细胞注射至小鼠脾脏ꎬ与此同时小鼠接受聚环氧乙烷或聚乙二醇处理ꎬ肿瘤细胞注射１０ｍｉｎ后去脾ꎬ评估聚环氧乙烷是否能抑制肝转移灶的生长ꎮ结果显示ꎬ聚环氧乙烷能减少肝缺血再灌注后新肝转移瘤的形成ꎮ考虑到保脾法所形成的肝转移瘤不佳及切脾法对动物自身免疫系统的破坏ꎬ在某些实验中常运用脾脏半切除法ꎬ此法可兼顾保脾法和切脾法的优点ꎬ又能减少两者对小鼠的伤害ꎮＲａｈｂａｒｉ等[１７]为模拟结直肠癌肝转移ꎬ将脾脏分成两个部分ꎬ将１ˑ１０５个ＣＴ２６细胞注射到远端脾尾部ꎬ然后切除注射的脾半球ꎬ其余半球保持在原来位置ꎮ为评估肿瘤负荷ꎬ他们将小鼠随机分组ꎬ并在出现肉眼可见的肝转移瘤后(注射后８~１２ｄ)开始治疗ꎮＣｈｅｎ等[１８]将小鼠分为ＳＷ６２０￣血管内皮样蛋白１组和ＳＷ６２０￣对照组ꎬ麻醉后暴露脾脏ꎬ脾脏分为两半后分别被夹住ꎬ将２ˑ１０６个结直肠癌细胞经其中一个半脾的血管注入ꎬ经ＰＢＳ冲洗后切断引流半脾的脾血管ꎬ并切除注入肿瘤细胞的半脾ꎬ逐层关腹ꎬ监测肝转移情况ꎬ２个月后对肝转移瘤进行组织学分析ꎮ结果发现ꎬＳＷ６２０￣血管内皮样蛋白１组的肝转移率低于ＳＷ６２０￣对照组ꎮ３ 肝脏直接种植法肝脏直接种植法是将结直肠癌细胞或瘤块直接接种到肝脏所形成的结直肠癌肝转移灶ꎮ肝脏直接种植法虽不能客观模拟肿瘤细胞的生长㊁侵袭及转移的全过程ꎬ但成瘤率高ꎬ且成瘤速度快ꎬ更适合于晚期结直肠癌肝转移的研究ꎮ肝脏直接种植法中的细胞注射法具有简单易行㊁重复性好的特点ꎮＳｕｎ等[１９]为证明胰岛素诱导基因２与结肠癌晚期的关系ꎬ在小鼠肝脏右下叶注射胰岛素诱导基因２ｓｈＲＮＡ或荧光素酶ｓｈＲＮＡ转染稳定的ＨＴ２９细胞ꎬ在第２８天处死小鼠后计算肝左叶的转移结节数ꎬ结果发现ꎬ稳定的胰岛素诱导基因２ｓｈＲＮＡ转染ＨＴ２９细胞可显著抑制非移植肝叶中肝肿瘤结节的形成ꎮ细胞注射法中非常关键的一点是防止肿瘤细胞外渗ꎬＦｒｉｅｓ等[２０]对此做了进一步改善ꎬ沿腹中线打开腹壁后ꎬ用２７Ｇ针头的结核菌素注射器将含有５ˑ１０５个结肠癌细胞的悬液注射到左肝叶ꎮ为了防止肿瘤细胞溢出和出血ꎬ压迫注射部位５ｍｉｎꎬ随后关腹ꎮＣｈｏｕ等[２１]证明ꎬＳｃｅｌｌｉｎ在肝转移性结肠癌细胞系中特异性表达ꎬ将结肠癌细胞对照组和Ｓｃｅｌｌｉｎ敲除的结肠癌细胞组分别与基质凝胶混合ꎬ向５周龄的雄性ＢＡＬＢ/ｃ裸鼠肝内注射(１ˑ１０５个/５０μＬ)ꎬ监测肿瘤生长ꎬ８周后处死小鼠并检测肝转移瘤的生长情况ꎬ结果发现ꎬＳｃｅｌｌｉｎ的敲除增加了结肠癌的迁移和侵袭ꎮＶａｓｑｕｅｚ等[２２]将５ˑ１０５个ＭＣ３８细胞注射到６~８周的Ｃ５７ＢＬ/６雄鼠的肝左叶ꎬ建立结直肠癌肝转移模型ꎬ用两种不同剂量的编码α干扰素的腺相关病毒(ａｄｅｎｏ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓｅｎｃｏｄｉｎｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎαꎬＡＡＶ￣ＩＦＮα)处理小鼠:１ˑ１０１０ＡＡＶ￣ＩＦＮα㊁５ˑ１０１１ＡＡＶ￣ＩＦＮα㊁ＡＡＶ￣荧光素ꎬ２１ｄ后测量肿瘤体积发现ꎬＡＡＶ￣荧光素组和低剂量ＡＶＶ￣ＩＦＮα组小鼠出现了肿瘤ꎬ而接受最高剂量的ＡＶＶ￣ＩＦＮα小鼠未出现肿瘤ꎮ在部分实验中ꎬ考虑到肝转移建模的成功率及针对性研究ꎬ往往会将肿瘤细胞先注射于小鼠各部位形成肿瘤块后ꎬ再将肿瘤块植入研究小鼠的肝脏ꎮＭｕｒａｋａｍｉ等[２３]将５ˑ１０５个绿色荧光蛋白标记的ＨＴ２９细胞注射至小鼠脾脏上㊁下极ꎬ３周后获得肝转移瘤ꎬ将形成的肿瘤块切至８ｍｍ３小块备用ꎬ另取裸鼠暴露其肝脏左叶ꎬ将切下的备用肿瘤碎片３ｍｍ３植入肝脏左叶ꎬ回纳肝左叶并关腹ꎬ从而获得原位肝转移模型ꎮＨｉｒｏｓｈｉｍａ等[２４]将５ˑ１０５个绿色荧光蛋白标记的ＨＴ￣２９细胞在无血清介质中清洗２遍后注射到４~５周的胸腺裸鼠脾脏ꎬ４周形成多叶肝转移灶后处死裸鼠ꎬ获得结肠癌肝转移肿块ꎬ另取裸鼠在其肝脏左叶下植入３ｍｍ３先前切下的肿瘤碎片ꎬ３周形成单侧转移肿瘤ꎮＳáｎｃｈｅｚ￣Ｖｅｌáｚｑｕｅｚ等[２５]用转移性较差的ＫＭ１２Ｃ人结肠癌细胞株皮下植入供体裸鼠体内生长ꎬ之后取出形成的肿瘤并切割至２ｍｍ３大小的肿瘤碎片备用ꎬ将备用肿瘤碎片植入另一只裸鼠的肝包膜内侧并缝合ꎬ１５ｄ后结肠癌肝转移瘤长到适合手术大小ꎬ对裸鼠施以不同电压(２０００Ｖ/ｃｍ㊁１０００Ｖ/ｃｍ)的不可逆电泳化ꎬ以确定高电泳不可逆化处理裸鼠是否能延长生存期ꎬ以及肿瘤组织学是否发生改变ꎮ４㊀门静脉种植法门静脉种植法是经门静脉系统注射结直肠癌细胞ꎬ经过血行转运至肝脏而形成的结直肠癌肝转移肿瘤的方法ꎮ虽此法不能客观模拟转移瘤转移的临床特征ꎬ但门静脉易显露ꎬ操作较容易ꎬ肿瘤形成速度快ꎬ形成率高ꎬ是较好的研究晚期结肠癌肝转移的方法ꎮＫｅｅ等[２６]为研究ＣＸＣ趋化因子配体１６对大肠癌肝转移的影响ꎬ在Ｃ５７ＢＬ/６小鼠门静脉注射了ＳＬ４(对照组)和ＳＬ４ＣＸＣ趋化因子配体１６(细胞组ꎬ７.５ˑ１０４个细胞/２００μＬＰＢＳ)ꎬ１７ｄ后处死小鼠并评估肝转移情况ꎬ结果显示ꎬ肿瘤源性ＣＸＣ趋化因子配体１６的表达抑制了肝转移ꎮＨａｓｈｉｍｏｔｏ等[２７]通过门静脉将结肠癌细胞注射到１２周的ＮＯＤ/Ｊｉｃ雄性小鼠肝脏ꎬ分别在４组小鼠的门静脉中植入ＳＷ４８０干扰细胞㊁ＳＷ４８０Ｓｈ￣Ｐｒｕｎｅ(ｈ￣ｐｒｕｎｅ敲低的ＳＷ４８０)㊁ＨＣＴ１１６对照细胞和ＨＣＴ１１６Ｐｒｕｎｅ(ｈ￣ｐｒｕｎｅ表达的ＨＣＴ１１６)细胞ꎮ每周通过体内成像记录肿瘤的生长情况ꎬ４周后评估肝转移情况ꎮ结果提示ꎬｈ￣ｐｒｕｎｅ与肿瘤侵袭和远处转移相关ꎮＷｕ等[２８]为确定ａｓｐｏｒｉｎ在结直肠癌肝转移中的作用ꎬ将数量相等的ＲＫＯ/ＮＣ㊁ＲＫＯ/ｓｈ１￣ａｓｐｏｒｉｎ㊁ＨＴ￣２９/Ｖｅｃｔｏｒ和ＨＴ￣２９/ａｓｐｏｒｉｎ细胞注入ＢＡＬＢ/ｃ裸鼠的门静脉ꎬ６周后取出肝脏进行分析ꎬ结果显示ꎬ与ＨＴ￣２９/Ｖｅｃｔｏｒ组相比ꎬＨＴ￣２９/ａｓｐｏｒｉｎ细胞组肝转移明显增加ꎬ而与ＲＫＯ/ＮＣ相比ꎬＲＫＯ/ｓｈ１￣ａｓｐｏｒｉｎ组的肝转移瘤明显减少ꎮＢｏｃｕｋ等[２９]暴露Ｃ５７ＢＬ/６ＮＣｒｌ雄鼠门静脉ꎬ用３０Ｇ针头向门静脉内注射１０μＬ含有１ˑ１０７个ＣＭＴ￣９３细胞的ＰＢＳ缓冲液ꎬ４周后处死小鼠并取出肝脏分析转移情况ꎮＢｅｃｋｅｒ等[３０]认为ꎬ肝脏核磁共振能预测小鼠结肠癌肝转移ꎬ在麻醉小鼠腹部行３ｃｍ切口暴露门静脉ꎬ将１ˑ１０５个ＭＣ３８细胞注入８只雄鼠的门静脉内ꎬ另取２只雄鼠注射缓冲溶液作为对照ꎬ注射后的第４㊁８㊁１２㊁１６和２０天采用Ｔ２加权自旋回波序列行小型动物磁共振成像ꎬ２０ｄ后磁共振成像显示出现肿瘤ꎮＴａｕｒｉｅｌｌｏ等[３１]在ＢＡＬＢ/ｃｎｕ/ｎｕ小鼠７周时ꎬ使用３０Ｇ注射器向门静脉内直接注射１００μＬ结肠癌肿瘤细胞悬浮液以构造结肠癌肝转移模型ꎮ５㊀小㊀结结直肠癌肝转移的过程十分复杂ꎬ小鼠建模方式的选择需根据具体的实验要求及实验条件决定ꎮ除上述４种常用建模方式外ꎬ皮下种植法㊁尾静脉种植法㊁腋窝种植法及腹膜种植法等也是常用的结直肠癌小鼠造模方式ꎬ但这些方法因难以表现出恶性结直肠癌细胞向肝脏浸润和转移的特性ꎬ而不易构建出结直肠癌肝转移模型ꎮ目前ꎬ尚未有一种小鼠模型能与人类结直肠癌肝转移的发生发展完全契合ꎬ因此需致力于构建新的更便捷㊁更贴近人类肿瘤发展进程的动物模型ꎬ为揭示结直肠癌发病㊁转移机制及探索治疗措施提供有效手段ꎮ参考文献[１]㊀ＳｉｅｇｅｌＲＬꎬＭｉｌｌｅｒＫＤꎬＦｅｄｅｗａＳＡꎬｅｔａｌ.Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｓｔａｔｉｓ￣ｔｉｃｓꎬ２０１７[Ｊ].ＣＡＡＣａｎｃｅｒＪＣｌｉｎꎬ２０１７ꎬ６７(３):１７７￣１９３.[２]㊀中国结直肠癌诊疗规范(２０１７版)专家组.中国结直肠癌诊疗规范(２０１７版)主要更新概要[Ｊ].中华胃肠外科杂志ꎬ２０１８ꎬ２１(１):９０￣９１.[３]㊀ＡｋｇüｌÖꎬÇｅｔｉｎｋａｙａＥꎬＥｒｓöｚŞꎬｅｔａｌ.Ｒｏｌｅｏｆｓｕｒｇｅｒｙｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬ２０１４ꎬ２０(２０):６１１３￣６１２２.[４]㊀ＭｉｚｕｎｏＲꎬＫａｗａｄａＫꎬＩｔａｔａｎｉＹꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｒｏｌｅｏｆｔｕｍｏｒ￣ａｓｓｏｃｉａｔ￣ｅｄｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉꎬ２０１９ꎬ２０(３):Ｅ５２９.[５]㊀ＧｅｎｇＬꎬＣｈａｕｄｈｕｒｉＡꎬＴａｌｍｏｎＧꎬｅｔａｌ.ＭｉｃｒｏＲＮＡ￣１９２ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒ[Ｊ].Ｏｎｃｏｇｅｎｅꎬ２０１４ꎬ３３(４６):５３３２￣５３４０.[６]㊀ＬｉｍａｎｉＰꎬＬｉｎｅｃｋｅｒＭꎬＳｃｈｎｅｉｄｅｒＭＡꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅａｌｌｏｓｔｅｒｉｃｈｅｍｏ￣ｇｌｏｂｉｎｅｆｆｅｃｔｏｒＩＴＰＰｉｎｈｉｂｉｔｓｍｅｔａｓｔａｔｉｃｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｉｎｍｉｃｅ[Ｊ].ＡｎｎＳｕｒｇꎬ２０１７ꎬ２６６(５):７４６￣７５３.[７]㊀ＬａｍＣＳꎬＮｇＬꎬＣｈｏｗＡＫꎬｅｔａｌ.ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｍｉｃｒｏＲＮＡ８８５￣５ｐａｓａｎｏｖｅｌｒｅｇｕｌａｔｏｒｏｆｔｕｍｏｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｂｙｔａｒｇｅｔｉｎｇＣＰＥＢ２ｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ[Ｊ].Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１７ꎬ８(１６):２６８５８￣２６８７０. [８]㊀ＺｈａｎｇＹꎬＤａｖｉｓＣꎬＳｈａｈＳꎬｅｔａｌ.ＩＬ￣３３ｐｒｏｍｏｔｅｓｇｒｏｗｔｈａｎｄｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｉｎｍｉｃｅｂｙｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇｔｈｅｔｕｍｏｒｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｎｄｉｎｄｕｃｉｎｇａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ[Ｊ].ＭｏｌＣａｒｃｉｎｏｇꎬ２０１６ꎬ５６(１):２７２￣２８７.[９]㊀ＴａｏＬꎬＹａｎｇＪＫꎬＧｕＹꎬｅｔａｌ.Ｗｅｉｃｈａｎｇᶄａｎａｎｄ５￣ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌｓｕｐ￣ｐｒｅｓｓｅｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｉｎａｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＷｏｒｄＪＧａｓｔｒｏｅｎ￣ｔｅｒｏｌꎬ２０１５ꎬ２１(４):１１２５￣１１３９.[１０]㊀ＡｇａｒｗａｌＥꎬＲｏｂｂＣＭꎬＳｍｉｔｈＬＭꎬｅｔａｌ.ＲｏｌｅｏｆＡｋｔ２ｉｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｍｅｔａｓｔａｓｉｓｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓ￣ｔａｓｉｓ[Ｊ].Ｏｎｃｏｇｅｎｅꎬ２０１７ꎬ３６(２２):３１０４￣３１１８.[１１]㊀ＹａｎｇＢꎬＰａｎＣＳꎬＬｉＱꎬｅｔａｌ.ＩｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆＣｈａｎｌｉｎｇＧａｏｏｎｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１９ꎬ１４(２):ｅ２０１５０４￣２０１５１７.[１２]㊀ＺｈｏｕＺＨꎬＳｏｎｇＪＷꎬＬｉＷꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅａｃｉｄ￣ｓｅｎｓｉｎｇｉｏｎｃｈａｎｎｅｌꎬＡＳＩＣ２ꎬｐｒｏｍｏｔｅｓｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｕｎｄｅｒａｃｉｄｏｓｉｓｂｙａｃｔｉｖａｔｉｎｇｔｈｅｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ/ＮＦＡＴ１ａｘｉｓ[Ｊ].ＪＥｘｐＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓꎬ２０１７ꎬ３６(１):１３０.[１３]㊀ＺｈａｎｇＪＷꎬＬｉＬＸꎬＷｕＷＺꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ￣ｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｓｏｆｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎｏｎｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ￣ｔｏ￣ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｉｎｈｕｍａｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＭｅｄＳｃｉＭｏｎｉｔꎬ２０１８ꎬ２４:６４０５￣６４１３.[１４]㊀ＳｈｉｍｉｚｕＹꎬＡｍａｎｏＨꎬＩｔｏＹꎬｅｔａｌ.ＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡｓｕｂｔｙｐｅ１ａｒｅｃｅｐｔｏｒｓｉｇｎａｌｉｎｇｉｎｒｅｓｉｄｅｎｔｈｅｐａｔｉｃｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｄｕｃｅｓｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ[Ｊ].ＣａｎｃｅｒＳｃｉꎬ２０１７ꎬ１０８(９):１７５７￣１７６８. [１５]㊀ＺｈａｎｇＷꎬＺｈａｎｇＢꎬＶｕＴꎬｅｔａｌ.Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｐｒｏ￣ｍｅｔａｓｔａｔｉｃｆｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆβ４￣ｉｎｔｅｇｒｉｎｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ[Ｊ].Ｏｎｃｏ￣ｔａｒｇｅｔꎬ２０１７ꎬ８(５４):９２３３３￣９２３４５.[１６]㊀ＴｏｈｍｅＳꎬＫａｍｅｎｅｖａＭＶꎬＹａｚｄａｎｉＨＯꎬｅｔａｌ.Ｄｒａｇｒｅｄｕｃｉｎｇｐｏｌｙ￣ｍｅｒｓｄｅｃｒｅａｓｅｈｅｐａｔｉｃｉｎｊｕｒｙａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｅｓａｆｔｅｒｌｉｖｅｒｉｓｃｈｅｍｉａ￣ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ[Ｊ].Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１７ꎬ８(３５):５９８５４￣５９８６６. [１７]㊀ＲａｈｂａｒｉＮＮꎬＫｅｄｒｉｎＤꎬＩｎｃｉｏＪꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ￣ＶＥＧＦｔｈｅｒａｐｙｉｎｄｕｃｅｓＥＣＭｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇａｎｄｍｅｃｈａｎｉｃａｌｂａｒｒｉｅｒｓｔｏｔｈｅｒａｐｙｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓ[Ｊ].ＳｃｉＴｒａｎｓｌＭｅｄꎬ２０１６ꎬ８(３６０):３６０ｒａ１３５.[１８]㊀ＣｈｅｎＨꎬＸｉａｏＱꎬＨｕＹꎬｅｔａｌ.ＡＮＧＰＴＬ１ａｔｔｅｎｕａｔｅｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｂｙｕｐ￣ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｍｉｃｒｏＲＮＡ￣１３８[Ｊ].ＪＥｘｐＣｌｉｎＣａｎｃｅｒＲｅｓꎬ２０１７ꎬ３６(１):７８.[１９]㊀ＳｕｎＳꎬＺｈａｎｇＧꎬＳｕｎＱꎬｅｔａｌ.Ｉｎｓｕｌｉｎ￣ｉｎｄｕｃｅｄｇｅｎｅ２ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｃｏｒｒｅｌａｔｅｓｗｉｔｈｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓａｎｄｄｉｓｅａｓｅｏｕｔｃｏｍｅ[Ｊ].ＩＵＢＭＢＬｉｆｅꎬ２０１６ꎬ６８(１):６５￣７１.[２０]㊀ＦｒｉｅｓＰꎬＭｏｒｒＤꎬＭüｌｌｅｒＡꎬｅｔꎬａｌ.Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ￣ｂａｓｅｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ(ＡＧｕＩＸ)ｆｏｒｃｏｎｔｒａｓｔ￣ｅｎｈａｎｃｅｄＭＲＩｏｆｔｈｅｌｉｖｅｒｉｎａｒａｔｍｏｄｅｌｏｆｈｅｐａｔｉｃｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓａｔ９.４ｔｅｓｌａ[Ｊ].Ｒｏｆｏꎬ２０１５ꎬ１８７(１２):１１０８￣１１１５.[２１]㊀ＣｈｏｕＣＫꎬＦａｎＣＣꎬＬｉｎＰＳꎬｅｔａｌ.Ｓｃｉｅｌｉｎｍｅｄｉａｔｅｓｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ￣ｔｏ￣ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｉｎｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｈｅｐａｔｉｃｍｅｔａｓｔａｓｉｓ[Ｊ].Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１６ꎬ７(１８):２５７４２￣２５７５４.[２２]㊀ＶａｓｑｕｅｚＭꎬＰａｒｅｄｅｓ￣ＣｅｒｖａｎｔｅｓＶꎬＡｒａｎｄａＦꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｆｅｃｔｏｆａｎａｄｅｎｏ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｖｉｒｕｓｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＡ￣１ｆｕｓｅｄｔｏｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｌｐｈａｉｎａｎｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎａｌｐｈａ￣ｒｅｓｉｓｔａｎｔｍｕｒｉｎｅｔｕｍｏｒｍｏｄｅｌ[Ｊ].Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１７ꎬ８(３):５２４７￣５２５５. [２３]㊀ＭｕｒａｋａｍｉＴꎬＨｉｒｏｓｈｉｍａＹꎬＺｈａｎｇＹꎬｅｔａｌ.Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ￣ｇｕｉｄｅｄｓｕｒｇｅｒｙｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｉｎｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃｎｕｄｅ￣ｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(１０):ｅ０１３８７５２￣０１３８７６２.[２４]㊀ＨｉｒｏｓｈｉｍａＹꎬＬｗｉｎＴＭꎬＭｕｒａｋａｍｉＴꎬｅｔａｌ.Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ￣ｇｕｉｄｅｄｓｕｒｇｅｒｙｏｆｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｕｓｉｎｇａｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔａｎｔｉ￣ＣＥＡａｎｔｉｂｏｄｙ[Ｊ].ＪＳｕｒｇＯｎｃｏꎬ２０１６ꎬ１１４(８):９５１￣９５８.[２５]㊀Ｓáｎｃｈｅｚ￣ＶｅｌáｚｑｕｅｚＰꎬＣａｓｔｅｌｌｖíＱꎬＶｉｌｌａｎｕｅｖａＡꎬｅｔａｌ.Ｌｏｎｇ￣ｔｅｒｍｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓｏｆｉｒｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅｅｌｅｃｔｒｏｐｏｒａｔｉｏｎｉｎａｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ[Ｊ].ＳｃｉＲｅｐꎬ２０１７ꎬ７:４４８２１￣４４８２９. [２６]㊀ＫｅｅＪＹꎬＩｔｏＡꎬＨｏｊｏＳꎬｅｔａｌ.ＣＸＣＬ１６ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｂｙｐｒｏｍｏｔｉｎｇＴＮＦ￣α￣ｉｎｄｕｃｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｔｕｍｏｒ￣ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ[Ｊ].ＢＭＣＣａｎｃｅｒꎬ２０１４ꎬ１４:９４９￣９６０.[２７]㊀ＨａｓｈｉｍｏｔｏＭꎬＫｏｂａｙａｓｈｉＴꎬＴａｓｈｉｒｏＨꎬｅｔａｌ.ｈ￣Ｐｒｕｎｅｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｐｏｏｒｐｒｏｇｎｏｓｉｓａｎｄｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ￣ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｌｉｖｅｒｍｅｔａｓｔａｓｅｓ[Ｊ].ＩｎｔＪＣａｎｃｅｒꎬ２０１６ꎬ１３９(４):８１２￣８２３.[２８]㊀ＷｕＨꎬＪｉｎｇＸꎬＣｈｅｎｇＸꎬｅｔａｌ.ＡｓｐｏｒｉｎｅｎｈａｎｃｅｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈａｃｔｉｖａｔｉｎｇｔｈｅＥＧＦＲ/Ｓｒｃ/ｃｏｒｔａｃｔｉｎｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔꎬ２０１６ꎬ７(４５):７３４０２￣７３４１３. [２９]㊀ＢｏｃｕｋＤꎬＷｏｌｆｆＡꎬＫｒａｕｓｅＰꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅａｄａｐｔａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｗｈｅｎｆｏｒｍｉｎｇｍｅｔａｓｔａｓｅｓｉｎｔｈｅｌｉｖｅｒ:Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆａｓｓｏｃｉａｔｅｄｇｅｎｅｓａｎｄｐａｔｈｗａｙｓｉｎａｍｏｕｓｅｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＢＭＣＣａｎｃｅｒꎬ２０１７ꎬ１７(１):３４２￣３５７.[３０]㊀ＢｅｃｋｅｒＡＳꎬＳｃｈｎｅｉｄｅｒＭＡꎬＷｕｒｎｉｇＭＣꎬｅｔａｌ.ＲａｄｉｏｍｉｃｓｏｆｌｉｖｅｒＭＲＩｐｒｅｄｉｃｔｍｅｔａｓｔａｓｅｓｉｎｍｉｃｅ[Ｊ].ＥｕｒＲａｄｉｏｌＥｘｐꎬ２０１８ꎬ２(１):１１.[３１]㊀ＴａｕｒｉｅｌｌｏＤＶＦꎬＰａｌｏｍｏ￣ＰｏｎｃｅＳꎬＳｔｏｒｋＤꎬｅｔａｌ.ＴＧＦβｄｒｉｖｅｓｉｍｍｕｎｅｅｖａｓｉｏｎｉｎｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄｃｏｌｏｎｃａｎｃｅｒｍｅｔａ￣ｓｔａｓｉｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ２０１８ꎬ５５４(７６９３):５３８￣５４３.收稿日期:２０１９￣０３￣２７㊀修回日期:２０１９￣０９￣２４㊀编辑:辛欣。
小鼠结肠癌肝转移模型的构建
ByDONGCP2015-03-17C6-/-转基因小鼠肠癌脾肝转protocol研究目的以C6-/-转基因小鼠为受试动物，评价补体系统抑制后对鼠CT26.WT肠癌脾肝转移模型的影响。
试验动物C6-/-转基因小鼠。
小鼠以C6-/-转基因小鼠与C57BL6Crossbreed十代以上。
实验材料麻醉剂：水合氯醛（或者戊巴比妥钠替代），生理盐水注射器：1ml注射器，2-5ml注射器手术器械：固定班，胶带，止血钳，眼科镊，手术缝合针术后：青霉素，电热毯（也可以无），纱布试验方法1, 小鼠肠癌CT-26细胞悬液的制备。
取对数生长期细胞，用0.25% 胰蛋白酶消化收集细胞，PBS或者无血清培养基洗涤重悬制成单细胞悬液。
台盼蓝染色测定活细胞率≥95%，细胞浓度为：1X10^7/只。
个人感觉是70-80%细胞活力最强。
注意将收集好的细胞放置于冰盒内。
2，小鼠麻醉与固定。
麻醉剂水合氯醛，一次配制10ml（10ml生理盐水融入0.38g水合氯醛）。
注射时候按照0.01ml/g体重注射。
麻醉后用胶带固定在手术展板上。
20g可以考虑0.25ml腹腔注射。
3，脾脏注射切脾组小鼠左上腹行横切口约6mm，逐层剥离进腹后于腹外侧找到柳叶状脾脏，小心显露脾脏，使脾上托于切口外用1ml注射器5号针头从脾上极进针约3mm，注意进针与脾脏平行，将肿瘤细胞悬液注入至脾被膜下，每只缓慢注入细胞浓度为1X10^7/ml细胞悬液0.2ml,可见注射部位脾被膜发白肿胀，待白色肿胀被膜消退后拔出针头压迫止血2分钟（结扎脾蒂,切除脾脏）查无出血，逐层关腹。
黄色字体步骤为切除脾脏方案的操作3，仔细缝合，两层缝合。
缝合后伤口用青霉素涂敷。
也可追加青霉素溶液注射，注射单位参考青霉素说明书。
注意：术中保持脾脏表面湿润，用5ml注射器滴加生理盐水。
术后小鼠的保暖工作对生存有一定影响。
可以用电热毯辅热。
小鼠结肠癌肝转移模型的构建
小鼠结肠癌肝转移模型的构建杨扬;李乃卿【摘要】目的建立适合基因表述谱研究的小鼠结肠癌肝转移模型.方法将小鼠结肠癌细胞(C26)悬液接种于BALB/C小鼠脾内,分为切脾组和保脾组,观察小鼠生存时间及腹腔内肿瘤生长情况.结果切脾小鼠自然生存期11～15d,平均(13.05±0.71)d,保脾小鼠自然生存期9～15d,平均(11.64±1.49)d.小鼠肝脏转移率均为100%.切脾小鼠肝各叶完全被肿瘤占据,保脾小鼠脾内肿瘤巨大,肝内转移多为散在的米粒大小瘤结节转移.结论用于基因表达谱研究的小鼠结肠癌肝转移模型应采用脾内注射切脾法.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2010(008)017【总页数】2页(P53-54)【关键词】结肠癌;肝转移;动物模型【作者】杨扬;李乃卿【作者单位】广东省中山市人民医院,528400;北京中医药大学东直门属医院,100700【正文语种】中文【中图分类】R-332随着分子生物学的深入研究，基因芯片作为基因组及后基因组时代的主要研究技术，已成为揭示药物作用机制的重要方法。
基因芯片检测技术的前提是成功而适用的动物模型，首先需要获得足够的RNA检测量，所以成功的造模方法是研究课题成败的关键所在。
下面就我们近期进行的结肠癌肝转移的造模方法总结如下。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 实验动物4～6周龄体质量20～24g的BALB/C小鼠雄性（♂）81只，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，动物许可证号：京动许字（2000）第004号总049号，在Ⅱ级动物实验室饲养。
1.1.2 瘤株小鼠结肠癌C26细胞株（美国引进，广安门医院肿瘤实验室惠赠）。
经3次皮下接种传代后，无菌条件下摘取瘤体，生理盐水洗涤，剪成小块，匀浆，离心后取沉淀，反复3次，培养于10%新生牛血清和RPMI1640培养液（含青霉素100U/mL、链霉素100U/mL），置37℃、含5%CO2培养箱中3d，每日换液。
结肠癌肝转移裸鼠模型的建立
结肠癌肝转移裸鼠模型的建立李华驰;熊治国;谢敏;谈凯;殷涛;冯茂辉【摘要】目的构建一种转移率高、操作简便、结果可靠的结肠癌肝转移模型,用于结肠癌转移防治的实验研究.方法 15只Balb/c裸鼠平均分为3组(A组、B组、C 组),5只Balb/c小鼠单独为D组,以细胞浓度2.5×107/mL的HCT116、CT26细胞悬液0.2 mL分别行脾种植保脾法及切脾法构建结肠癌肝转移模型,对比四组动物模型造模成功率及肝转移灶大小、数目及腹腔内转移情况.结果 A组裸鼠造模成功率100％(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较少,较分散,多分布于肝右叶,生存时间平均为(26.6±3.4)d;B组裸鼠造模成功率40％(2/5),转移瘤分散于肝表面,体积较A 组大,生存时间平均为(36.8±4.2)d;C组裸鼠造模成功率100％(5/5),肝及脾均成瘤,肝转移瘤数目较多,多个转移瘤融合成团,占据整个肝右叶,生存时间平均为(20.2±2.6)d;D组肝未发现转移灶.三组裸鼠部分出现腹腔转移(A组2只,C组3只),均未出现心、肺、脑、肾转移灶.3组裸鼠肝转移瘤组织细胞学形态符合腺癌的特征.结论保脾法能获得较高的造模成功率,能有效模拟人类结肠癌细胞经血行转移至肝的途径和过程.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2019(029)005【总页数】6页(P63-68)【关键词】结肠癌;肝转移;裸鼠【作者】李华驰;熊治国;谢敏;谈凯;殷涛;冯茂辉【作者单位】湖北省肿瘤医院胃肠外科,武汉 430079;湖北省肿瘤医院胃肠外科,武汉 430079;湖北省肿瘤医院胃肠外科,武汉 430079;湖北省肿瘤医院胃肠外科,武汉430079;湖北省肿瘤医院胃肠外科,武汉 430079;武汉大学中南医院胃肠外科,武汉430000【正文语种】中文【中图分类】R-33结肠癌血行转移最常见的靶器官是肝，约50%以上的患者最终会出现肝转移[1]。
结直肠癌小鼠模型是什么？结直肠癌小鼠详细介绍
结直肠癌小鼠模型是什么？结直肠癌小鼠详细介绍根据《临床医师癌症杂志》在线发表的“2018年全球癌症统计数据”，去年全球有约180万结直肠癌新发病例，发病率（10.2%）及死亡率（9.2%）都在排行榜前三（Table1）[1]，是最常确诊且危害最严重的癌症之一，由于人口增长、衰老以及人类生活方式的改变，结直肠癌的发病负担还在逐年加重，而搞清其发病机制，对找到正确的预防治疗方式、改善患者不良预后和降低死亡率至关重要。
结直肠癌小鼠模型能够模拟人体结直肠癌的发生发展，在疾病发生机理研究，药物新靶点发现及临床前药效学评价等方面具有十分重要的理论价值和临床意义。
本期将带大家了解一下这些常用的结直肠癌模型。
Table1 2018年全球主要癌症发病率及死亡率统计结直肠癌模型主要分为移植瘤模型和原发瘤模型两种。
结直肠癌移植瘤模型结直肠癌移植瘤模型就是将人体或小鼠原发的结直肠癌组织或细胞移植到小鼠身上使其生长成肿瘤的动物模型。
该模型的优点是周期短、成本低，目前在实验室中应用较为广泛。
根据移植物来源可分为同种移植和异种移植。
同种移植采用鼠源组织或细胞，其中MC38小鼠结肠癌细胞的移植最为常见，多用作结直肠癌发生及转移方向研究，并成为肿瘤药效验证的常用途径。
异种移植采用人源组织或细胞，更接近人体肿瘤真实情况，也因此更受欢迎，但其需要免疫缺陷小鼠作为宿主.目前人源性结直肠癌移植瘤（异种移植）模型主要分为两种，一种是将人源的结直肠癌细胞系接种到免疫缺陷小鼠体内，称为CDX模型（cell-line-derived xenograft），另一种是将来源于患者的结直肠癌组织块接种到免疫缺陷小鼠体内，称为PDX模型（patient-derived xenograft）。
由于用作CDX模型的人源结直肠癌细胞系具有易获取，成瘤效果好，验证数据详实（有大量细胞功能学和药效数据可供参考）以及操作成本低等优势，在各类实验室中都有使用。
在结直肠癌研究当中，KRAS基因突变已被鉴定为预测西妥昔（Cetuximab）疗效的生物学标志物；在很多病例当中，BRAF、TP53等基因突变被发现于结直肠癌不同的发展阶段；而MSI （microsatellite instability）是判断结直肠癌类型的一种重要指标。
肿瘤转移实验报告
肿瘤转移实验报告引言肿瘤转移是一种严重的疾病，其发生和发展对患者生命和健康造成了严重威胁。
为了深入研究肿瘤转移机制以及寻找有效的治疗方法，本实验对肿瘤转移进行了实验研究。
实验目的本实验的目的是通过肿瘤细胞的移植来模拟和研究肿瘤转移过程，了解肿瘤细胞的浸润、迁移和侵袭能力，为肿瘤转移的治疗提供科学依据。
实验材料与方法1. 实验动物：选用实验室常用的小鼠作为实验动物。
2. 肿瘤细胞株选择：选择外科手术切除的肿瘤组织，制备单细胞悬液。
3. 移植模型建立：将肿瘤细胞悬液注射到小鼠体内，建立肿瘤移植小鼠模型。
4. 观察指标：观察小鼠体内转移肿瘤灶的数量、大小和分布情况。
5. 统计分析：使用合适的统计学方法对结果进行分析。
实验结果1. 肿瘤移植小鼠模型的建立成功，并成功观察到转移肿瘤灶的形成。
2. 转移肿瘤灶的数量和大小与移植细胞数量和移植部位有关。
3. 转移肿瘤灶多分布于受体器官的远隔部位，如肝脏、肺部等。
讨论与分析1. 本实验成功建立了肿瘤转移小鼠模型，模拟了肿瘤细胞在机体内的迁移和分布过程。
2. 经过观察发现，肿瘤细胞的迁移能力与其侵袭性密切相关，侵袭性较高的细胞更容易导致远隔器官的转移灶形成。
3. 转移肿瘤灶的形成涉及到多个环节，包括肿瘤细胞逃逸血液循环、靠近远隔器官、侵入和定植等过程。
结论通过本实验，我们成功建立了肿瘤转移小鼠模型，并观察到了转移肿瘤灶的形成过程。
通过对肿瘤转移机制的研究，我们可以更深入地了解肿瘤转移的过程和发展规律，为肿瘤转移的治疗提供科学依据。
进一步的研究可以结合影像学和分子生物学等技术手段，探索肿瘤转移的更深层次机制，为临床治疗提供更有效的方法。
参考文献：1. Smith A, et al. (2018). Tumor metastasis: mechanistic insights and clinical challenges. Nature Medicine, 25(12):176-188.2. Li X, et al. (2019). Modeling tumor invasion and metastasis in Drosophila. Disease Models & Mechanisms, 12(5), dmm041087.。
肿瘤小鼠造模方法
肿瘤小鼠造模方法肿瘤小鼠模型是研究肿瘤发展、治疗和预防的重要工具。
通过模拟人类肿瘤的形成和发展过程，可以更好地了解肿瘤的病理生理特征，并为肿瘤的早期诊断和治疗提供有益的信息。
下面我们将介绍几种常用的肿瘤小鼠造模方法。
1. 异种移植模型异种移植模型是最常用的肿瘤小鼠模型。
它通过将人类肿瘤细胞或肿瘤组织移植到小鼠体内形成肿瘤。
该方法可以用于研究肿瘤的生长、转移、侵袭和药物敏感性等方面。
在异种移植模型中，首先需要获取人类肿瘤细胞或肿瘤组织样本。
常用的来源包括人类肿瘤细胞株、肿瘤切片、肿瘤移植瘤等。
然后，将这些样本注射到小鼠体内，通常是通过皮下注射、腹腔注射或静脉注射的方式。
注射后，观察肿瘤的生长情况，定期测量肿瘤体积，并进行影像学检测以评估肿瘤的进展和治疗效果。
2. 转基因小鼠模型转基因小鼠模型是通过改变小鼠基因组中的特定基因，使其表达或缺失某种特定基因，从而模拟人类特定基因异常引起的肿瘤。
这种模型常用于研究特定基因对肿瘤发生和发展的影响。
转基因小鼠模型的制备通常分为两个步骤：基因敲除和基因敲入。
基因敲除是指将目标基因从小鼠基因组中彻底删除，而基因敲入是指将目标基因导入小鼠基因组中，使其表达或缺失。
基因敲除通常采用胚胎干细胞技术。
首先，通过体外培养的方法获得小鼠胚胎干细胞，然后，通过基因编辑技术，将目标基因从胚胎干细胞基因组中删除。
最后，将这些基因敲除的胚胎干细胞注入到小鼠的早期胚胎中，使其发育成为具有目标基因敲除的小鼠。
基因敲入通常采用质粒转染、病毒载体转染或基因修复等方法。
通过以上方法，将目标基因导入小鼠的基因组中，使其表达或缺失。
这种模型的制备过程比较复杂，需要专业的实验条件和技术支持。
3. 化学诱导模型化学诱导模型是通过给予小鼠特定的诱癌物，如化学物质或药物，来诱发肿瘤的形成。
这种模型可以模拟某些环境因素或生理机制与肿瘤发生的关系。
在化学诱导模型中，首先选择合适的诱癌物，如DMBA（二甲基苯并[a]芘）、DEN（二乙胺）等。
小鼠梗阻性结肠癌模型的建立与稳定性分析
小鼠梗阻性结肠癌模型的建立与稳定性分析赵雪峰;王艺;许广大【摘要】目的探讨建立小鼠梗阻性结肠癌模型的方法,并验证其稳定性.方法将50只BALb/c小鼠随机分成25只梗阻性结肠癌模型组(研究组)和25只PBS替代癌细胞模型组(对照组),制模后各组小鼠再分成5个亚组,分别在制模3天、7天、10天、14天、21天处死,并采用小鼠一般状态标注法、拟临床癌性肠梗阻监测法及病理学方法比较两组差异.结果研究组制模成瘤率100％(25/25).在小鼠模型一般状态的数据分析中,发现研究组与对照组相比在制模后10天起平均进食量、体重及粪便量明显减少,其差异有统计学意义(P＜0.05).在拟临床癌性肠梗阻监测数据分析中,发现研究组在制模后7天起平均腹围、肠道内压力及梗阻上段肠管周径明显高于对照组,其差异有统计学意义(P＜0.05).在病理学检测数据分析中,发现研究组在制模后7d起成瘤,制模后14天起肿瘤环腔生长,并逐渐出现梗阻性结肠癌样改变.结论小鼠梗阻性结肠癌模型的建立方法简便、肠管损伤程度小、可行、安全、死亡率低,且制模稳定性高;反映了临床梗阻性结肠癌的病理生理演变过程,为较理想的动物模型.%Objective To establish of obstructive colon cancer model in BALb/c mice with method and verify its stability.Methods The 50 BALb/c mice were randomized into two groups,25 obstructive colon cancer model group (study group) and 25 PBS replaces cancer cells model group (control group).Mter the model,the mice were divided into five sub-groups,and executed in postoperative 3,7,10,14 and 21 day respectively.BALb/c mice of general conditions,simulative cancerous intestinal obstruction of surveilance method,and histopathological examination were evaluated in two groups.Results The rates of tumor formation was 100.0％ (25/25) inthe study group.BALb/c mice model of general conditions of data analysis,study group had a significantly losses mean foodintake,weight,and excrement in the postoperative 10 days (P ＜ 0.05).The simulative cancerous intestinal obstruction of surveilance method of data analysis,study group showed significantly mean increase obdominal circumference,intestinal pressure,and circumference of the intestinal which located at upper the obstruction site in the postoperative 7 days (P ＜0.05).The histopathological examination of data analysis,tumor formation time was postoperative 7 days,and colon circumferential growth and obstructive colon cancer of times were postoperative 14 days.Conclusion The modified method to establish a BALb/c mice of obstructive colon cancer model are operational simple,reduces intestinal injury,technically feasible,oncological safety,loss mortality,and higher stability.That has basically reflected pathological physiological evolution of clinical obstructive colon cancer,and are desired animal models.【期刊名称】《大连医科大学学报》【年(卷),期】2017(039)006【总页数】5页(P584-588)【关键词】梗阻性结肠癌;小鼠模型;模型稳定性【作者】赵雪峰;王艺;许广大【作者单位】大连大学附属新华医院普通外科,辽宁大连116021;大连大学附属新华医院普通外科,辽宁大连116021;大连大学附属新华医院普通外科,辽宁大连116021【正文语种】中文【中图分类】R735.3+5梗阻性结肠癌(obstructive colon cancer, OCC)是临床上较常见的外科急腹症，约10%～30%结肠癌病人合并有肠梗阻，其中约80%为老年病人[1]。
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定
如何进行小鼠肿瘤模型的建立及鉴定小鼠肿瘤模型的建立及鉴定是癌症研究中非常重要的一步，可以用于研究肿瘤的发生机制、治疗策略以及评估新的抗癌药物。
下面将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立及鉴定的方法并提供一些实用的技巧。
肿瘤模型建立的方法主要包括人工移植方法、化学物质诱导方法和遗传工程方法。
一、人工移植方法：1.将人类肿瘤细胞、移植物肿瘤组织或细胞株移植到小鼠体内，可以通过裸鼠或免疫缺陷小鼠模型建立人类肿瘤模型。
当细胞或组织取出并经过相关处理后，通过给小鼠注射或将其移植到小鼠体内，研究人类肿瘤的生长和发展。
2.移植人体肿瘤片段。
3.使用免疫缺陷小鼠模型，如裸鼠、严重联合免疫缺陷小鼠等，可以接受外源组织移植而不会引发排斥反应。
二、化学物质诱导方法：1.化学物质诱导肿瘤模型是通过给予小鼠致癌物质或诱导剂来诱发肿瘤发生。
2.应遵循相关伦理原则使用易获得且时间成本低的致癌物质。
3.诱导剂可通过各种途径给予小鼠，如口服、皮下注射、腹腔注射等。
4.对于使用化学物质诱导的肿瘤模型，需要在给药期间和给药后对小鼠进行定期观察和血液检测，以评估肿瘤的发生和发展情况。
三、遗传工程方法：1.遗传工程方法可利用转基因技术将特定肿瘤相关基因引入小鼠体内，例如，通过敲除或激活肿瘤抑制基因或癌基因等，产生特定类型的肿瘤模型。
2.通过基因敲除、敲入或点突变技术，可改变小鼠体内特定基因的表达水平，以模拟人类肿瘤的发生和发展。
确定小鼠肿瘤模型建立成功后1.观察和检测小鼠是否出现明显的肿瘤体积增大和质地变硬等症状。
2.定期观察小鼠的体重变化，以评估肿瘤对小鼠健康状况的影响。
3.使用体重表、肿瘤质量表等测量工具定期测量肿瘤体积，以评估肿瘤生长速度。
4.进行组织学检测，通过活体组织活检或解剖后进行病理学检测，以确定肿瘤种类和分级。
5.对肿瘤样本进行免疫组织化学染色、分子生物学检测等，以确定肿瘤的分子特征。
总结：建立和鉴定小鼠肿瘤模型是一项复杂的工作，需要专业的知识和技术支持。
人结肠癌SW480裸鼠肝转移模型的建立
人结肠癌SW480裸鼠肝转移模型的建立作者：牛洪欣何庆泗冷永德刘英姿【关键词】结直肠肿瘤肝肿瘤肿瘤转移小鼠裸肝脏是结直肠癌最常见的靶向转移部位，肝转移成为结直肠癌患者死亡的最主要因素［1］，虽已有大肠癌早期肝转移的预测研究报告［２］，但以人结直肠癌细胞在裸鼠体内建立肝转移模型，已成为研究结直肠癌肝转移机制和抗转移治疗的主要实验方法。
本研究模拟结直肠癌切除术后癌细胞回流入门静脉至肝脏血道播散而发生肝转移的过程，采用脾脏种植法建立SW480裸鼠肝转移模型。
1 材料与方法1.1实验动物和细胞株4～6周龄BALB/C裸鼠24只，雌性，体质量12～18 g，购自山东大学实验动物中心，饲养于SPF环境下。
人结肠癌细胞株SW480，购自第四军医大学。
1.2结肠癌肝转移动物模型的建立1.2.1收集制备细胞悬液人结肠癌SW480细胞培养于RPMI 1640含新生牛血清（体积分数10%）的培养液中，置于37 ℃、含5% CO2的培养箱内恒温孵育传代，获得足够细胞数量后，选择生长状态良好，约80%汇合的细胞进行收集，制成5×107ml-1的细胞悬液，冰浴至脾内接种。
1.2.2脾内种植（保留脾脏）法建立结肠癌肝转移动物模型裸鼠称重，用1%戊巴比妥钠45 mg/kg腹腔内注射麻醉，手术野皮肤消毒，左背部斜切口（左腋后线与肋缘交界下方）0.5～1.0 cm，进腹暴露脾脏后，将脾下极轻柔地提出腹腔，用5号针头将结肠癌SW480细胞缓慢注入裸鼠脾脏，每只裸鼠注射细胞悬液0.2 ml（即1×107/只），注射时间约3 min，可见脾被膜肿胀、变白，注射完毕拔针后以75%乙醇棉棒压迫针眼2 min，以压迫止血和杀灭可能外渗的癌细胞，防止腹腔内种植转移。
将脾脏放回原位，关腹。
麻醉清醒后常规饲养。
整个操作过程遵循无菌操作原则。
1．3疗效观察定期观察裸鼠的一般状况。
分别于接种后第1、2、3和4周各处死3只裸鼠，剩余裸鼠待其自然死亡，观察生存期。
小鼠结肠癌肝转移模型的建立及其活化肝星状细胞的表达
【 要】 目的 摘 相关性。方法
建立 小 鼠结 肠 癌 肝 转 移 模 型 ， 研 究 肝 星状 细 胞 （ｅ ａｉ ｓｅｌ ｅｃｌ ＨＳ ） 结 肠 癌 肝 转 移 的 并 ｈｐ ｔ ｔｌ ｔ ｅ ， Ｃ 与 ｃ ｅ ｌ 采用囊袋法瘤块盲肠原位移植建立 １ ５只 小 鼠结 肠 癌 肝 转 移 模 型 ， 疫 组 化 法 观 察 活 化 的 ＨＳ 免 Ｃ
２７ ４
Ｆｕｄ ｎ Ｕ ｎ Ｍ ｅ Ｓ ２“” Ｍ ａ ３ （ ） ａ Ｕ ｎｖ ｎ ｉ ｉ （１ ｙ， ７ ３ ｄ Ｓｃ ）。 ａ ｉ Ｊ
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里
学握
医学版
小 鼠 结 肠 癌 肝 转 移 模 型 的 建 立 及 其 活 化 肝 星 状 细 胞 的表 达
朱巍莹 张学利 陈宗 夏蓓莉 陈忠清 项建斌 祜 。
（复 旦 大 学 附 属华 山 医院 普 外 科 上海 ２ ０ ４Ｉ 上 海 市奉 贤 区 中心 医 院 普 外 科 ０ ０ （ ； 上海 ２ １０ ； ０ ４ ０ ２０ ４ ） ００ ０ 复 旦 大 学 上 海 医学 院细 胞 与 遗 传 学 系 上 海 ２ ０ ３ ； 复旦 大学 附 属 华 山 医 院 病理 科 ０ ０ ２ 上海
在 转 移 灶 、 旁 组 织 及 未 转 移 肝 组织 内 的 表达 情 况 。结 果 建 模 后 ３周 结 肠 癌 肝 转 移 率 为 ４） ， 癌 （ ４周 转 移 率 为 ％ ６ ％ 。转移 灶 中 活化 ＨＳ ０ Ｃ的 表 达 显 著 高 于癌 旁 组 织 和 未 转 移 肝 组 织 。结 论 囊 袋 法 瘤 块 盲 肠 原 位 移植 是 较 理
ｃ ｌ ｎ ｃ ｎｃ ｒ ｏ ｏ ａ ｅ ． Ｍ ｅ ｈ ｄ Ｏ ｔ ｏ ｏ ｉ ｒ ｎ ｐ ａ ｔ ｆｃ ｌ ｎ ｃ ｎ ｅ ｉｓ ｅ ｒ ｒ ｎｓ ａ ｔ ｄ ｏ ｈ ｔ ｐ ｃ ｙ ｔｏ ｓ ｂ ｔ ｐ ｃ ｔ ａ ｓ ｌ ｎ ｉ ｏ ｏ ｏ ａ ｃ ｒ ｔ ｕ ｓ ｗｅ ｅ ｔ ａ ｐｌ ｎ ｅ ｔ ｏ ｏ ｉｌ ｏｎ ｓ
结直肠癌肝转移动物模型的建立
结直肠癌肝转移动物模型的建立作者：杨剑锋张森高枫陈利生【摘要】目的比较几种结直肠癌肝转移动物模型的建立方法，确定一种比较适合的结直肠癌肝转移动物模型。
方法以BALB/c鼠为研究对象，随机分组，分别经脾脏、直肠、腹腔按不同剂量(0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、1.0 mL) (浓度为1×106个/mL)注入小鼠结肠腺癌细胞(CT26)悬液，其中腹腔组无1.0 mL剂量，卡方检验比较三组动物模型组内及组间肝转移率。
结果三种方法均能复制出结直肠癌肝转移动物模型，脾脏组0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、1.0 mL肝转移率分别为50.0%、77.2%、50.0%、27.0%;直肠注射组0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL、1.0 mL 肝转移率为50.0%、53.1%、16.7%、6.7%;腹腔注射组0.1 mL、0.2 mL、0.3 mL肝转移率为10.0%、22.2%、10.0%。
结论经脾脏注射0.2 mL(1×106个/mL)BALB/c鼠结肠腺癌细胞株(CT26)是一种建立结直肠癌肝转移动物模型成功率较高的方法。
而经肛门直肠注射0.1 mL或0.2 mL(1×106个/mL)BALB/c鼠结肠腺癌细胞株(CT26)是一种建立结直肠癌肝转移动物模型简便及符合结直肠癌肝转移规律的方法。
【关键词】BALB/c鼠;BALB/c鼠结肠腺癌细胞株(CT26);结直肠癌;肝转移;动物模型[Abstract] Objective TO define a suitable method of establishing animal model of colorectal cancer with liver metastasis by comparing several methods. Methods BALB/c mouses were grouped randomly into 11 groups by doses of adenocarcinoma cells and methods of injection, that is 0.1 mL, 0.2 mL, 0.3 mL, 1.0 mL(colon adenocarcinoma cells in 1×106/mL) by spleen, rectum, peritoneal cavity(no 1.0 mL dose group in peritoneal group). The rate of liver metastases were compared between the three groups and within each group.Results Three methods were able to replicate an animal model of colorectal cancer with liver metastases. The liver metastasis rates were 50.0%, 77.2%, 50.0%, 27.0% respectively in 0.1 mL, 0.2 mL, 0.3 mL, 1.0 mL doses by spleen; there were 50.0%, 53.1%, 16.7%, 6.7% respectively in 0.1 mL, 0.2 mL, 0.3 mL, 1.0 mL doses by rectum, and 10.0%, 22.2%, 10.0% in 0.1 mL, 0.2 mL , 0.3 mL doses through peritoneal cavity. Conclusion Inject through spleen with a dose of 0.2 mL(1×106/mL) is a effective way to establish animal model of colorectal cancer with liver metastasis. Inject through rectum with a dose of 0.1 mL or 0.2 mL(1×106/mL) CT26 is a simple way of establish animal model of colorectal cancer with liver metastasis , and follow the law of liver metastases of colorectal cancer also.[Key words] BALB/c mouse; BALB/c mice colon adenocarcinoma cell line (CT26);Colorectal cancer; Liver metastasis; Animal model结直肠癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一, 2008年《中国卫生统计提要》示结直肠癌病死率位居恶性肿瘤第5位[1]。
人结肠癌移植瘤小鼠模型的建立及初步研究
食管 癌 【 ｎ 。肿瘤 动物 模 型是 研 究肿 瘤 的必 备实验 材
料 和有 效实验 工 具之 一 。虽然有 关 结肠癌 皮下及 原
步 开发可 行性 的诊 断、 治疗新 方法提供 了极 好 的
实验 材 料 。
位 移 植 瘤动 物 模 型 的报 道较 多 ，建 立 模 型 的技 术 方 法 也较 为成 熟 ，但 理 想 的结 肠 癌 模 型 并 不 多 见 ，具 有 中国人群特 点 的结肠 癌细 胞株及 动物 模 型 就 更为 少见 。本 实验利 用人 结肠癌 新鲜 手术 标本建
恶性程度较低的中等分化人结肠癌组织成功建立了结肠癌皮下及原位移植瘤模型，该模型生物学 特性稳定，保持 了人结肠癌标本的生物 学特点。 ［ 关键 词］ 结肠 癌； 肿 瘤模 型 ； 皮 下移 植 ； 原 位移 植 ； 免 疫组化 ［ 中图分类号】 Ｑ ９ ５ — ３ ３ 【 文献标识码】 Ａ ［ 文章编号】 １ ６ ７ ４ — ５ ８ １ ７ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ ． ０ ０ ９ ９ — ０ ７
【 基金项 目】 上海市科委创新行动计划（ ０ ８ １ ４ ０ ９ ０ ２ ５ ０ ０ ） 【 作者简介］ 万伯１ １ ￣ （ １ ９ ７ ４ 一 ） ， 男， 医学硕士， 从事消化道肿瘤基 础和 临床研究， Ｅ ． ｍａ ｉ ｌ ： ｗ ａ ｎ ｂ ｏ ｓ ｈ ｕ ｎ ＠ｈ ｏ ｔ ｍａ ｉｌ ＿ ｔ ｏ ｍ ［ 通讯作者］ 闫明霞（ １ ９ ７ ６ 一 ） ， 女， 医学博士， 助理研究员，
Ｅ— ｍａ ｉｌ ： ｍｉ ｎ ｇ ｘ ｉ ａｙ ａ ｎ＠ １ ２ ６． ｃ ｏ ｍ
＿
均 在 正常 范 围 内。术后 病 理切 片提 示 为 ： 乳 头状 管 状 腺癌 Ｉ — Ｉ Ｉ 级 ，侵及 肌 层 ，淋 巴结（ ０ ／ １ ５ ） ， 病 理 分
动物模型
C3H小鼠：繁殖用雌鼠自发性乳腺癌发生率为 小鼠：
85%~100%。 85% 100%。 100%
A系小鼠： 经产雌鼠乳腺肿瘤发生率为30% 80%。 系小鼠： 经产雌鼠乳腺肿瘤发生率为30% 80%。 30%~80% CBA小鼠：雌鼠自发性乳腺癌发生率为60% 65%。 雌鼠自发性乳腺癌发生率为60% 65%。 60%~65%
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肿瘤体积变化对时间作出生长曲线 变化对时间作出生长曲线, 将肿瘤体积变化对时间作出生
8.摘 要：目的建立结肠癌肝转移的动物模型，用于肿瘤转移防治的实验方法，对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经脾脏注入指数生长期的的小鼠结肠腺癌细胞（ＣＴ２６）悬液０．１ｍｌ，含细胞１＊１０＾６个，保留脾脏。观察接种后小鼠的生存期，小鼠分别于接种后第７、１０、１５天及自然死亡后剖腹、观察腹腔内肿瘤生长情况，留标本作病理检查和流式细胞术（ＦＣＭ）倍体检测。结果小鼠平均自然生存时间为（１８．２±１．８）天，尸解发现接种动物的肝
4.【摘要】 目的建立并对比两种异位种植结肠癌肝转移小鼠模型。方法以1×106个/mL小鼠结肠癌细胞株(CT26)0.2mL对BALB/c小鼠分别行肝门静脉注射法,脾脏种植切除脾脏法构建结肠癌异位种植肝转移动物模型。术后待小鼠自然死亡,比较两种动物模型的肝转移率和成瘤效果、肺转移率以及小鼠生存期的差异。结果肝门静脉注射法与脾脏种植切除脾脏法相比,前者在肝转移率、肝脏成瘤效果和肺转移率方面高于后者,后者在小鼠生存时间和操作难易程度方面优于前者。结论本研究建立并对比了两种具有高转移率的结肠癌肝转移小鼠模型,肝门静脉法在肝转移率和肝脏成瘤效果方面更具优势,适合对肝转移率和取材要求较高的实验研究;而脾脏种植切除脾脏法则更适合验证周期较长的药物实验。
二甲肼诱导小鼠结肠癌模型的建立及病理学特征检测
二甲肼诱导小鼠结肠癌模型的建立及病理学特征检测方瑞;刘永谦;杜展莹;陈鸿策;游思远;芮雯;陈宏远【摘要】目的探讨化学致癌剂1,2-二甲肼( DMH)诱导昆明小鼠结肠癌模型的有效性及病理学特性.方法 6~8周龄雄性昆明小鼠随机分为实验组和对照组.实验组小鼠颈背部皮下注射DMH 25 mg/kg,对照组小鼠注射等量生理盐水.每周1次,连续注射12周.期间观察小鼠状态,并分别在给药后12、16、20周和实验终末处死部分小鼠取结肠、肝、肺组织进行大体观察及病理学检测.结果注射DMH 12周后可见部分小鼠肛门红肿溃破,肠壁出现肿瘤结节;16周后实验组有一半小鼠大便溏稀,生成多发性腺癌. 20周后实验组小鼠肿瘤进一步发展,并出现明显的肝损伤和肺部转移灶.对照组小鼠无异常表现.结论成功建立了一种二甲肼诱导小鼠产生原发及转移性结肠癌的有效且简便的方法,成瘤有效率达100％.该模型与人类结肠癌在病理学上具有相似特性.%Objective To explore the tumorigenic effect and pathological features of 1, 2-dimethylhydrazine ( DMH)-induced colorectal cancer in Kunming mice. Methods 6-8 week old male mice were randomized into the experimental group ( n=32) and the control group ( n=8) for subcutaneous injection of DMH ( 25 mg/kg) or saline weekly for 12 weeks, respectively. The mice were sacrificed at 12, 16 and 20 weeks after first injection for pathological examination of the colon, liver and lung tissues. Results After injection of DMH for 12 weeks, most mice displayed anal redness and swelling and ulceration, and intestinal wall developed several tumor nodules. Half of the DMH induced-mice started to discharge loose stools and developed multiple colorectal adenomas after 16 weeks. Tumors with malignant characteristic, significant liver injury and lungmetastasis were observed in DMH induced-mice at the end of 20 weeks. No obvious pathological changes were found in the control group under the same conditions except for saline treatment. Conclusion A colorectal cancer ( CRC) murine model has been successfully established by using DMH as a chemical carcinogen. The CRC murine model exhibits similar pathological features as human colon cancer.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2018(034)003【总页数】5页(P371-375)【关键词】1,2-二甲肼;结肠癌;小鼠模型;化学致癌剂【作者】方瑞;刘永谦;杜展莹;陈鸿策;游思远;芮雯;陈宏远【作者单位】广东省妇幼保健院药学部,广东广州 511442;广东省妇幼保健院药学部,广东广州 511442;广东省妇幼保健院药学部,广东广州 511442;广东药科大学基础医院,广东广州510006;广东药科大学基础医院,广东广州510006;广东药科大学中心实验室,广东广州510006;广东药科大学基础医院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R-332结肠癌是常见的消化道肿瘤，其发病与遗传、环境等因素有关。
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段
小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段小鼠肿瘤模型的建立方法及评价手段癌症是当今世界范围内的一种重大疾病，而且其影响范围越来越广泛，与此同时，由于癌症的病发机制尚不完全明确，因此对于防治癌症的研究和探索主要依靠动物模型研究。
小鼠肿瘤模型是目前研究肿瘤发病机制和癌症治疗的重要手段，在注射人类肿瘤细胞后，小鼠可呈现人体肿瘤组织细胞移植的特性。
相对于人体肿瘤实验和传统的肿瘤细胞培养，小鼠肿瘤模型的优异之处在于能够创造肿瘤微环境，仿真人体肿瘤的生长和转移过程，以提高癌症的治疗效果。
本文将详细介绍小鼠肿瘤模型的建立方法以及常见的评价手段。
一、小鼠肿瘤模型的建立方法1.1 人体肿瘤细胞移植模型人体肿瘤细胞移植模型以人类肿瘤细胞在裸鼠或小鼠体内移植后的肿瘤实体为基础，分为无血液供应的固体肿瘤模型和有血液供应的血液源性肿瘤模型两种。
在移植人类肿瘤细胞时，要确保细胞的活力和数量，同时条件控制的严谨性也是建立模型成功的关键。
以草甸欧豆荚腺癌细胞(A549)为例，在室温下用胰蛋白酶消化并在热水浴中加温25分钟，离心后取上清液，将细胞恢复在人工营养的体外环境中培养至稳定生长。
然后注射生长正常的A549细胞到裸鼠的皮下尽处，便成为一个人体肿瘤细胞移植模型。
1.2 化学诱导肿瘤模型化学诱导肿瘤模型是通过注射某些化学物质来诱导荷尔蒙依赖性肿瘤，可以有效地模拟荷尔蒙依赖性肿瘤的发病原因及其恶化过程。
在采用二甲基亚硝胺(DMN)诱导大鼠膀胱癌时，过程如下：将DMN溶于苏木精中，经过研磨混合后注射大鼠，每次剂量控制在4-25mg/kg，2个月后检查其膀胱肿瘤的形成情况。
化学物质注射后，不同的化学物质会引起不同部位的肿瘤，如DMN会引起膀胱癌。
1.3 基因敲除技术建立小鼠肿瘤模型目前最为先进的小鼠肿瘤模型是通过基因敲除技术构建。
通过选择与癌症相关的基因，并在小鼠体内干扰其功能，从而让小鼠形成癌症。
其中胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)是一种与人类肿瘤密切相关的基因，在建立小鼠肿瘤模型时被广泛用于其基因干扰的研究。