蓖麻毒素的分离、提取及活性研究

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蓖麻毒素的分离、提取及活性研究

本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川I大学读书期间在侯太平教授指导下取得的,论文成果归四川I大学所有,特此声明。警2007@z衙4户j/杉四川大学硕}。学位论文蓖麻毒素的分离、提取及活性研究农药学专业研究生:高杉指导教师:侯太平本研究以蓖麻毒素灭鼠为目的,以小白鼠活性实验为筛选指标,研究了从蓖麻种子中分离蓖麻毒蛋白的方法,实现了对蓖麻毒素的最优提取,并利用得到的蓖麻籽粗提物对小白鼠进行灭鼠试验,来模拟高原鼠兔的灭鼠效果评价。最终在野外大面积应用实验中,取得了比较满意的效果。以蓖麻籽为原料,通过选用不同物质做浸提剂,单独研究了各种浸提剂对蓖麻毒素的最佳提取方法,在综合对各浸提剂在其最佳提取条件下的提取蓖麻毒素的效果后,最终确定,0.2mol/L的磷酸缓冲液在对去皮蓖麻籽的质量体积比为l:3(g/m1)时,浸提24小时后,所得混合物4000rpm离心30min,小心除去油

脂,以及离心所剩的渣滓,保留清液,在清液中加入(NH4)zS04盐析剂到80%饱和度,盐析24小时,10000rpm离心30min,再经透析,真空干燥后所得蓖麻毒素(粗毒)产率最高,同时该提取方法还兼顾到蛋白的稳定性及整个提取流程的经济性,正是要寻找的最佳工艺路线。应用提取出的蓖麻毒素(粗毒)对小白鼠做活性实验,’结果表明,蓖麻毒素对小鼠腹腔注射的LD∞为7.971ug/kg,其主要药效成分为蓖麻毒素。蓖麻毒素使小白鼠中毒后无明显异常反应,不容易造成拒食现象,能够提高灭鼠效率。而小白鼠从腹腔注射后30h开始出现死亡,直到96h后均有死亡,说明本毒饵是高效、慢性灭鼠刻。针对JlI西北高原的主要害鼠一高原鼠兔,应用蓖麻毒素灭鼠剂进行了野外四川r大学硕上学位论文防治实验,在大面积实验中,该粗毒以1%浓度配制毒饵对高原鼠兔的校正灭效为85%以上。小区实验的灭效在90%左右。通过连续半个月的观察,未发现鹰等天敌出现二次中毒现象,对受试绵羊也无明显影响,禁牧期后,未发现对牲畜造成危害。这些都充分说明,蓖麻毒素灭鼠剂在应用中是具有安全保障的。,上述研究结果说明,蓖麻毒素灭鼠剂作为一种新型的灭鼠剂,无二次中毒,对牛、羊等对非靶标生物未见明显危害,比较安全、无残毒,不造成环境污染。不失为一种优良的安全无公害灭鼠剂。关键词:蓖麻毒素;提

取分离;LDso;高原鼠兔;灭洞率四JI『人学硕}。学位论立ExtractionandResearchonBioactivityofRawToxinofRiciousMajor:PesticideScienceGraduate:GAOShanTutor:HOUTai—pingThepapermainlystudythederatiza

tionbyriein.Ittakesthewhitemouse’sactivenessexperimentastheindicator,studymethodsandtechnologyofextractionofricinfromth

ecasterbean.Finally,findouttheoptimumwayofextraction.andusingthecrudeextractofricin,Istudythekillingefficacytothewhite

mouse,simulatedtheplateaurodentstoderatizationeffectappraisal.Atlast,inthebigareaapplledexperiment,thisrodenticidehasobta

inedthequitesatisfactoryeffect.Choosecasterbeanastherawmaterial。throughselectsthedifferentextrac

tingagentstosoak,afterstudythebsetmethodofwithdrawingricinbyeachkindso

ftextractingagents,andcontrastextractingefficacy

underthebsetcondition,finallydetermin,theoptimum

methodofextractionis:extractedwith0.2mol/LPBS(casterbean:PBS,qualityvolumeratioisI:3(g/m1)),Aftersoakfor24hours,obtainedmixture4000rpmcentrifugated30min,degreasecarefully,removethesediment油ichthecentrifugalremains,keeptheclear1iquid,anduse(NH4)2S幽saltedoutinthe1iquid

to80%degreeofsaturation,Aftersalting—out3四川大学硕}:学位论文24hours,i0000rpmcentrifugaate30mia,dialysisandvacuumdrying.theproductionrateofricin(crudeextract)iShighest,simultaneouslythiSwithdrawmethodalSOgivedualattentiontotheproteinstabilityandeconomicalefficiencyofextractionmethod.SoitpreciselyiSthebestcraftroutewhichweseeked.Usingthericin(crudeextract)tostudythewhitemouseactivenessexperiment,finallyindicated,theLD50ofricinwhichinjectstothemouseabdominalcavityis7.971ug/kg,themaincomponentofrodenticideisricin.Afterthericincausesthe

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