实验动物学实验报告图文

实验动物学课程实验报告实验内容:1. 小鼠的基本实验操作2. 小鼠皮肤移植试验、睾丸(或卵巢摘除术3. 豚鼠和兔的一般操作技术4. 大鼠实验的基本操作5. 大鼠性周期观察和大鼠急性肺水肿模型建立6. 小鼠无菌取胎术7. Beagle犬的一般操作和沙鼠、金黄地鼠、裸小鼠的特性实验一小鼠的基本实验操作一、实验目的:通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓取和固定、性别鉴定、编号、去毛、给药、采血、麻醉、处死,尤其是染色法编号、灌胃、眼球摘除法采血、腹腔注射、脊椎脱臼法处死。

二、实验动物:昆明小鼠4只(2雌2雄三、实验步骤1、抓取和固定2、性别鉴定3、编号(染色法4、去毛(脱毛剂法5、给药:消化道、腹腔注射、尾静脉注射6、采血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法7、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉8、处死:脊椎脱臼法、过量麻醉9、解剖:9.1 生殖系统:9.1.1雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明9.1.2雌性:双角子宫、卵巢9.2 肾上腺、胰腺、胆囊、甲状腺四、实验结果1、抓取和固定:抓取:抓小鼠的尾根部固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇指和食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指和无名指将尾巴固定在手掌面。

2、性别鉴定:观察肛门与生殖器间的距离和二者之间的毛发。

雄性:距离长,毛发密(和其他部位一样;雌性:距离短,毛发稀疏。

3、编号:3.1染色法:3.1.1用苦味酸(黄色在小鼠背面染色3.1.2逆毛发生长方向染色,自毛根开始3.1.3可编1-10号(10号为不编号3.2去毛:脱毛剂:8% Na2S,自毛发根部涂抹3.3 给药:3.3.1 灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针, 紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0.5ml3.3.2 注射给药:3.3.2.1腹腔注射:3.3.2.1.1从下腹部的两侧进针3.3.2.1.2进针时针与腹部成45°。

进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物3.3.2.2尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指和拇指将尾拉直,食指托住尾部,消毒后右手持带4号针头的注射器在图示A(背面,实为动脉位置进针注射0.5ml生理盐水。

注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。

尾动脉细小,且贴近皮肤,未注射成功。

小鼠尾静脉切面图3.4 采血3.4.1 :从眼角内侧0.5cm处进针。

(右图3.4.2 眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。

3.5 麻醉:0.5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重25g,按100mg/kg的药量给药,8分钟麻醉成功3.6 处死:3.6.1 脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死3.6.2 过量麻醉:追加0.5%氯胺酮过量(5ml腹腔麻醉3.7 解剖:3.7.1生殖系统:3.7.1.1 雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺3.7.1.2 雌性:双角子宫、卵巢3.7.2 肾上腺:米粒大小3.7.3 胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状3.7.4 胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明3.7.5 甲状腺:紧贴环状软骨五、实验讨论1、小鼠抓取的感受:小鼠性情较温顺,一般不会咬人,比较容易抓取固定。

通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。

在一些特殊的实验中,如进行尾静脉注射时,可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。

如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。

2、小鼠尾静脉注射感受:首先,注射前尾巴用稍热的水浸泡几分钟,有利于注射;其次,先远后尽,不要一开始就从尾根部,那样失败了不好办;再次,进血管后注意保持稳定,针尖很容易刺穿血管的。

尾静脉就在尾巴的正左右两边,先用酒精用力擦,可以去掉部分角质,然后按住近心端让充血,就很容易看到了。

进针大概1~2厘米是最合适的。

尾静脉注射时,可用45~50度的温水浸润半分钟或用酒精擦拭,可使血管扩张,同时也可软化表皮角质。

以左手拇指和食指夹住鼠尾,使静脉充盈,中指帮助无名指和小指捏住鼠尾末梢,右手持注射器(连5号细针头,针头与静脉夹角一般小于30度,从距尾尖2 - 3厘米处进针,此处皮薄易进入,先抽回血,见到血后再缓慢注入少量药液,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入。

一般推注速度为0.05 - 0.10ml/秒,一次注入量为0.05 -0.25ml/10g体重。

如反复注入,应尽可能从尾末端开始,以后向尾根部方向移动注射。

实验二小鼠皮肤移植试验、睾丸(或卵巢摘除术一、实验目的1.掌握近交系小鼠常用的皮肤移植试验(尾~背植皮法,尾~尾植皮法。

2.掌握小鼠卵巢摘除术和大鼠睾丸摘除术二、实验步骤1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验1.1 尾~背植皮法1.2尾~尾植皮法2、小鼠卵巢摘除术2.1 固定体位、麻醉2.2 卵巢摘除三、实验结果1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验1.1尾~背植皮法:1.1.1 将近交系小鼠(受体固定后(已麻醉,背部剪毛(约1.5cm×1.5cm大小, 75%酒精常规消毒。

用眼科剪在此部位剪开一个0.3cm×0.3cm大小的方形洞备用。

1.1.2将近交系小鼠(供体固定后(已麻醉,75%酒精常规消毒鼠尾。

用眼科剪沿尾静脉剪开一条缝,用止血钳将皮肤剥下,剪成0.5cm×0.5cm大小,刮掉皮片上的结缔组织。

1.1.3将供体皮片(0.5cm×0.5cm大小覆盖在受体背部的方形洞(0.3cm×0.3cm 大小内,铺平,用棉球吸去渗出的血液,使植皮紧贴受体的创面,并与宿主的边缘密切吻合。

1.1.4无菌纱布覆盖植皮区,胶布包扎(此步骤本实验中省略。

1.1.5 1~3周后观察结果1.2 尾~尾植皮法(本实验中为自体尾~尾移植:1.2.1 将近交系小鼠固定后(已麻醉,75%酒精常规消毒尾部皮肤。

1.2.2 固定鼠尾的根部,用4号手术刀在鼠尾背部切开一0.5cm×0.5cm大小的皮片,尽量不损伤局部血管,用止血钳将皮肤剥下。

1.2.3 将皮片旋转180°,镶嵌在创面上,棉球吸去局部渗出的血液和组织液,使其尽可能紧贴,可以不包扎。

1.2.4 1~3周后观察结果(100天2、小鼠卵巢摘除术2.1 固定体位、麻醉:选雌性小鼠,取左侧卧位,以左腹外侧区(左肋弓下缘为手术区,局部剪毛,75%酒精消毒两遍后,用0.5%氯胺酮以100mg/kg的剂量(本实验:0.5ml进行腹腔麻醉, 5分钟后小鼠静卧于手术台上,呼吸深大而有节律,频率略快,四肢肌肉松弛,麻醉成功。

2.2 卵巢摘除:用手术刀在左肋缘下,取腹正中线平行方向切开皮肤1cm,暴露腹腔内容物。

拨开肠管,找到右肾。

在右肾下方找到右侧卵巢和右侧子宫角。

游离右侧卵巢并摘除。

局部消毒,缝合腹膜、腹壁肌肉和皮肤。

按上述方法摘除左侧卵巢(另一位同学操作。

四、实验讨论1、近交系小鼠常用的皮肤移植试验1.1 皮肤移植实验是用于鉴定近交系动物组织相容性基因是否一致的简单而可靠的方法。

1.2 尾~背植皮法:将小鼠尾部皮肤移植到同品系的异体小鼠的背部,通过观察移植皮片和背部其他区域的毛发稀疏和皮肤光泽异同来鉴定二者的组织相容性。

如果组织相容性好,植皮色泽与周围一致,没有充血或炎症,移植皮片毛少而光泽。

若组织相容性基因不纯合,尾皮在术后1~3周内被排斥,,植皮脱落,背部留下一块伤痕。

另外,供体皮片应略大于受体创面以充分吻合,以免因皮片边缘缺血坏死而导致愈合后创面周边皮肤不连续。

1.3 自体尾~尾植皮法:可以鉴定植皮的脱落是否是手术失败而造成。

移植时应将皮片旋转180°,以利于术后通过毛发生长的方向观察植皮是否存活。

2、小鼠卵巢摘除术、大鼠睾丸摘除术2.1 小鼠卵巢摘除术:进入腹腔后,可以先找到肾脏。

然后在肾脏下方查找卵巢并摘除。

2.2 行卵巢或睾丸摘除术时应将两侧的卵巢或睾丸均摘除。

实验三豚鼠和兔的一般操作技术1.实验目的通过实际操作,掌握豚鼠和兔的一般操作方法和尸体解剖及病理取材方法,包括豚鼠和兔的抓取和固定、编号、性别鉴定、灌胃、给药途径、麻醉、采血和处死等方法。

2.实验动物:新西兰兔,豚鼠(各1只3.实验步骤3.1豚鼠的抓取和固定抓取豚鼠应先用手掌抓住背部,将手张开,用拇指和食指握住颈部,再拿起来。

3.2豚鼠的性别鉴定将豚鼠抓取后,观察肛门与生殖器之间的距离,距离近者为雌性,距离远者为雄性。

3.3豚鼠的给药腹腔注射:自下腹部两侧进针,可避免刺伤肝、脾或膀胱。

3.4豚鼠的采血心脏采血法:由助手抓取豚鼠,左手固定头部和两前肢,右手固定两后肢和尾部,使胸部突出。

操作者用酒精消毒皮肤,在左侧第3~4肋间用左手食指触摸心脏搏动。

右手持连有4~5号针头的注射器,选择心脏搏动最强处穿刺。

当针头刺入心脏内时,血液回流进注射器,即可进行采血。

3.5豚鼠的解剖观察器官:脾脏、小肠和大肠、肝脏、胆囊、胃、十二指肠和胰腺、肾上腺、肾脏、膀胱、睾丸、附睾或子宫、卵巢、肝脏、心脏、甲状腺、脑、垂体。

3.6兔的抓取和固定右手抓住颈部的被毛与皮肤,提起兔,然后用左手托住它的臀部。

3.7兔的性别鉴定左手抓去兔子的背部皮肤,右手拇指和食指把生殖器附近的皮肤扒开,雄兔可见有一圆孔,里面露出阴茎;雌兔此处为一条朝向尾巴的长缝,呈椭圆形间歇,下端有阴道开口处。

雌兔有8~12个乳头。

3.8兔的给药3.8.1经口灌胃法:灌胃时用一木制张口器横放于上下腭之间,用绳固定。

这时可用左手抓住动物的嘴,右手将一适当粗细的导尿管由张口器中央小孔插入,进入食管和胃。

将装有药液的注射器接上导尿管,即可慢慢灌入胃内。

3.8.2注射给药:耳缘静脉注射法:将兔固定好。

把去耳缘部被毛,用二甲苯擦拭耳缘,促使静脉充盈。

用左手拇指和食指压住耳根部,右手持连有4号针头的注射器,顺血管平行方向刺入静脉,进针约1cm,如有血液回流,即可进行注射。

注射完毕,拔出针头,用棉球压迫止血。

3.9兔的采血:耳缘静脉采血法:采血方法同兔耳缘静脉注射法。

3.10兔的处死:空气栓塞法:从兔的静脉内注入一定量的空气,使之发生空气栓塞。

3.11兔的解剖:观察器官:脾脏、小肠和大肠、肝脏、胆囊、胃、十二指肠和胰腺、肾上腺、肾脏、膀胱、睾丸、附睾或子宫、卵巢、肝脏、心脏、甲状腺、脑、垂体。

4.实验讨论4.1豚鼠生性胆小,不咬人,抓时不能太粗野,更不能用力抓腰腹,否则容易造成肝破裂而引起死亡。

4.2家兔比较驯服,不咬人,但爪尖利,不正确的抓取容易被其抓伤。