电子显微镜的发展历程
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“科学之眼“越来越亮
——电子显微镜的发展历程
摘要:Ruska和Knowll在1932年(有说是1931年和1933年的)研制成功第一台电
子显微镜。经过半个多世纪的发展,已广泛应用到自然科学的许多学科中,并且极大推动了这些学科的发展。在七十年代电子显微镜终于实现了人们直接观察原子的长期愿望,电子显微镜成了“科学之眼”。一门新兴的电子显微学因此而诞生。而Ruska也因此而获得1986年诺贝尔物理奖。在生命科学,由于电子显微镜技术的迅速发展和应用,改
变了细胞学、组织学、病毒学、分类学和分子生物学等的面貌,促使生物学从细胞水平进入到分子水平;它也成为生物学、医学、农林等学科研究工作中极为重要的手段。近年来,我国拥有越来越多的电子显微镜,应用也越广泛,不少高等院校都相继开设相关的课程。“科学之眼”不仅在外国,在我国也会越来越亮,开花结果,前途光明。
关键词:电子显微镜扫描电子显微镜透射电子显微镜扫描透射显微镜
正文:电子显微镜问世已有半个多世纪了,但其应用于医学、生物学,尤其是细胞
学的研究方面才只有二十余年的历史。我国学者在六十年代初期开始这方面的工作。下
面我们来看一下电子显微镜的总体发展历程。
一.电子显微镜的总体发展历程
人类对于生物微观世界的认识过程,有着一段漫长的历史。荷兰人列文虎克(Leeuwenhoek)在300年前创制成功世界上第一架显微镜,发现了当时人们还不知道的微生物世界。这是显微镜第一次显示其巨大作用。
早在一百年以前,朴率克(Plucker)就曾在盖斯雷管的阴极近管壁上发现过一种黄
绿色的光辉,但他当时对这一现象并无认识,未予重视。自从1924年德布罗意提出了
电子与光一样,具有波动性的假说和1926年Busch发现了旋转对称、不均匀的磁场可
作为一个用于聚焦电子束的透镜,就为后来的电子显微镜的问世奠定了理论基础,这就打开了电子光学的大门。经六年后,到1932年克诺露(Knoll)及鲁斯卡(Ruska)等人首
次发表了关于电子显微镜的实验和理论研究,并试制成功第一台电磁式电子显微镜。为了获得较大的放大能力,人们又研究制造了短焦距的电磁透镜,它除了会聚透镜外,再利用两个透镜作连续两次的造像。到1934年鲁斯卡和马顿(Marton)分别制成了新型复式电子显微镜。近代的电磁式电子显微镜在具体结构上已经有了很大改进。
Ruska和Knowll在1932年(有说是1931年和1933年的)研制成功第一台电子显微镜。经过半个多世纪的发展,已广泛应用到自然科学的许多学科中,并且极大推动了这些学科的发展。在七十年代电子显微镜终于实现了人们直接观察原子的长期愿望,电子显微镜成了“科学之眼”。一门新兴
的电子显微学因此而诞生。而Ruska也因此而获得1986年诺贝尔物理奖。在生命科学,由于电子显微镜技术的迅速发展和应用,改变了细胞学、组织学、病毒学、分类学和分子生物学等的面貌,促使生物学从细胞水平进入到分子水平;它也成为生物学、医学、农林等学科研究工作中极为重要的手段。近年来,我国拥有越来越多的电子显微镜,应用也越广泛,不少高等院校都相继开设相关的课程。“科学之眼”不仅在外国,在我国也会越来越亮,开花结果,前途光明。
如果说,光学显微镜是人类对微观世界的认识有了第一次飞跃,那么可以说,电子显微镜是人类对微观世界的认识有了第二次飞跃。的确,光学显微镜使人类看到了肉眼看不到的细菌和细胞,揭开了许多生物界的“谜”,但是因为光学显微镜的分辨率受光波波长的限制,使更多的“谜”仍无法解开。而电子显微镜是以电子束作为光源的,电子束的波长比可见光的波长短得多,使电子显微镜的分辨率大幅度提高。从此,人类用电子显微镜揭示了细菌、噬菌体、类病毒、DNA和蛋白质大分子等,甚至获取了“原子
核和电子云”的原子像。
总体历程了解后,下面我们来关注一下透射电子显微镜的发展历程:
二.透射电子显微镜的发展历程
1924年,德国科学家德布罗意(De Broglie)指出,任何一种接近光速运动的粒子都具有波动本质。1926---1927年,Davisson和Germer以及Thompson Reid用电子衍射
现象验证了电子的波动性,发现电子波长比X光还要短,从而联想到可用电子射线代替可见光照明样品来制作电子显微镜,以克服光波长在分辨率上的局限性。1926年德国学者Busch指出“具有轴对称的磁场对电子束起着透镜的作用,有可能使电子束聚焦成像”,
为电子显微镜的制作提供了理论依据。
1931年,德国学者诺尔(Knoll)和鲁斯卡(Ruska)获得了放大12~17倍的电子光学系统中的光阑的像,证明可用电子束和电磁透镜得到电子像,但是这一装置还不是真正的电子显微镜,因为它没有样品台。1931—1933年间,鲁斯卡等对以上装置进行了改进,做出了世界上第一台透射电子显微镜(简称透射电镜)。1934年,电子显微镜的分辨率已达到500Å,鲁斯卡也因此获得了1986年的诺贝尔物理学奖。
1939年德国西门子公司造出了世界第一台商品透射电子显微镜,分辨率优于
100Å.1954年又产生了著名的西门子ElmiskopⅠ型电子显微镜,分辨率优于10Å.在英国,透射电子显微镜的研究始于1935年,1946年设计了第一批商业透射电子显微镜,导致了EM型电镜的系列生产。在荷兰,1944年研制成第一台电镜,后来生产了著名的Philips EM和CM型透射电子显微镜。我国的透射电子显微镜研制始于20世纪50年代,1977年
已作出了分辨率为3Å的80万倍的透射电镜。
目前世界上生产透射电镜的主要是这三家电镜制造商:日本的日本电子(JEOL)和日立(Hitachi)以及美国的FEI(这家公司把荷兰的菲利浦电镜公司收购了)。他们生产的
透射电镜大致可分为三类。
(1)常规的TEM:加速电压为100~200kV。代表性产品有日本电子的JEM-2010,日立的H-8000,菲利浦的CM200,FEI的TECNAI20.200kV透射电
镜的分辨率可达1.9Å.
(2)中压TEM:加速电压为300~400kV。代表性产品有日本电子的JEM-3010、JEM-4000,日立的H-9500,FEI的TECNAI F30。300kV透射电镜的分辨率可达1.7Å,400kV透射电镜的分辨率可达1.63Å.
(3)高压TEM:加速电压为1000kV。代表性产品有JEM-1000,日立公司还制造了世界上最大的3000kV的透射电镜。目前1000kV的透射电镜最高
分辨率可达1Å.
目前用的最多的透射电镜是200kV和300kV的电镜,高压电镜由于价格昂贵,
体积庞大,用得很少。
1949年以前,由于很难制备出能让电子束穿过的薄金属样品,开始用透射电镜直接观察试样。随后,荷兰的Bollnan和英国剑桥大学的赫什(Peter B.Hirsch)研究组进一步发展这一技术。特别是Hirsch研究组,发展了电子衍衬理论,可以解悉电子束穿过试样形成的电子衍衬像,开创了用透射电镜直接观察试样的时代,为电
子显微镜在材料学的应用打下了基础。
20世纪70年代,美国亚利桑那州立大学的考利(John Cowley)和澳大利亚墨尔本大学的穆迪(Alex Moodie)建立了高分辨电子显微想的理论与技术,发展了高分辨电子显微学。20世纪80年代,发展了高空间分辨分析电子显微学,人们可采用高分辨技术、微衍射、电子能量损失谱、电子能谱仪等对很小范围内(约1nm)的区域进行电子像、晶体结构、化学成分的研究,将电子显微分析技术在材料学中的研究大大地拓展了。20世纪90年代,由于纳米科技的飞速发展,对电子显微分析技术的要求越来越高,进一步推动了电子显微学的发展。目前,透射电镜已发展到了球差校
正透射电镜的阶段。
早在1935年,Knoll在设计透射电子显微镜的同时,就提出了扫描电子显微镜的原理及设计思想。下面我们来关注一下扫描电子显微镜的发展历程。
三.扫描电子显微镜的发展历程
如果说光学显微镜处于“老年”、透射电镜处于“壮年”时代的话,那么扫描
电镜是刚进入“青少年”的时代。
扫描电子显微镜(scanning electron microscope,简称扫描电镜/SEM)的基本组成是透镜系统、电子枪系统、电子收集系统和观察记录系统,以及相关的电子系统。现在工人扫描电镜的概念最早是由德国的Knoll在1935年提出来的,1938年Von Ardenne在透射电镜上加了个扫描线圈做出了扫描透射显微镜(STEM)。第一台能观察厚样品的扫描电镜是Zworykin制作的,它的分辨率为50nm左右。英国剑桥大学的Oatley和他的学生McMullan也制作了他们的第一台扫描电镜,到1952年他们的