柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定研究
高效液相色谱法测定柴黄口服液中黄芩苷的含量
高效液相色谱法测定柴黄口服液中黄芩苷的含量
马纪伟
【期刊名称】《卫生职业教育》
【年(卷),期】2016(034)015
【摘要】目的：建立柴黄口服液中黄芩苷含量的测定方法。
方法选用ZORBAX
SB-C18分析柱（5μm，4.6 mm×150.0 mm），甲醇-0.2%磷酸水溶液（46∶54）为流动相，检测波长276 nm，流速1.2 ml/min。
结果黄芩苷进样量为0.980～2.940μg时与峰面积具有良好的线性关系，回归方程为：Y=3×106X+16310，
r=0.9998，平均回收率为100.45%，相对标准偏差为1.13%。
结论高效液相色谱（HPLC）法简便、准确、灵敏度高、分离效果好，可作为柴黄口服液的质量控制标准。
【总页数】2页(P97-98)
【作者】马纪伟
【作者单位】南阳医学高等专科学校，河南南阳 473058
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷、连翘苷、汉黄芩苷的含量[J], 黄敬群;杨娟;李红
2.HPLC法测定柴黄口服液中黄芩苷含量 [J], 董常松;李贞泉
3.高效液相色谱法测定复方柴黄软胶囊中黄芩苷含量 [J], 刘自平;戴一
4.高效液相色谱法测定莲草口服液中野黄芩苷含量 [J], 王青博
5.高效液相色谱法测定柴黄软胶囊中黄芩苷的含量 [J], 金阳;姜玉洁
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HPLC-DAD法同时测定柴黄颗粒中5种成分的含量
ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ａｓ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｂｙ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ ａｔ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｏｆ １ ０ ｍｌ / ｍｉｎꎬｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ｍａｉｎ￣
( ＲＳＤ ＝ １ ６５％ ) ꎬ９６ ５９％ ( ＲＳＤ ＝ １ ３０％ ) ꎬ９２ ３３％ ( ＲＳＤ ＝ １ ９２％ ) ꎬ９４ ８７％ ( ＲＳＤ ＝ １ ４２％ ) ａｎｄ ９６ ７７％
( ＲＳＤ ＝ １ ７３％ ) ꎬｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ. Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｈａｓ ｔｈｅ ａｄｖａｎｔａｇｅｓ ｏｆ ｓｉｍｐｌｅ ｏｐｅｒａｔｉｏｎꎬｒａｐｉｄ ａｎａｌ￣
ｔｉｏｎ
０ 引言
柴黄颗粒是由柴胡药材和黄芩提取物组成的
中药成方制剂ꎬ收录于国家食品药品监督管理局
国家药品标准中ꎮ 柴胡退热解郁、疏肝ꎬ黄芩清热
泻火、燥湿解毒ꎬ二者合用在临床上主要用于上呼
吸道感染引起的感冒发热等症状 [１￣４] ꎮ 根据中药
质量标志物( Ｑ￣Ｍａｒｋ) 的概念ꎬ现代药理研究表明ꎬ
柴胡中发挥抗病毒、抗炎等作用的主要活性物质
１７１ ９ ｎｇ ( ｒ ＝ ０ ９９９ ９) 、黄芩素在 １ ９６４ ~ ９８ ２ ｎｇ ( ｒ ＝ ０ ９９９ ７) 、汉黄芩素在 ０ ９１６ ~ ４５ ８ ｎｇ ( ｒ ＝ ０ ９９９ ８) 、柴胡
皂苷 ａ 在 ２１ ６ ~ １ ０８０ ０ ｎｇ ( ｒ ＝ ０ ９９９ ９) 范围内线性良好ꎬ平均回收率分别为 ９５ １６％ ( ＲＳＤ ＝ １ ６５％ ) 、９６ ５９％
药物分析辅导：小柴胡颗粒含量测定方法
小柴胡颗粒处方为：柴胡240g，黄芩90g，半夏（姜制）90g，党参90g，生姜90g，甘草90g，大枣90g。
2005《中国药典》新增HPLC含量测定方法，现将有关其含量测定方法作一总结。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（47：53：0.2）为流动相；检测波长为315nm。
理论板数按黄芩苷峰计应不低于3000。
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约3g或约1.5g（无蔗糖），精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70%乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率50kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
沈静等用RP-HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。
采用Aettech液相色谱仪，AlltimaC18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-水-磷酸(60：40：0.2)；流速1.0ml/min；检测波长280nm；柱温室温。
回归方程为Y=14726+2319345.28X,r=0.9999，黄芩苷在0.06～0.60μg显示良好线性关系。
样品以甲醇为溶剂，超声提取。
潘雪英用HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。
采用HP1100高效液相色谱仪，AgilentC18色谱柱(150cm×4.6cm)；流动相为0.4%磷酸溶液-甲醇(56：44)；检测波长为280nm；柱温25℃。
样品以75%乙醇为溶剂，超声提取。
赵志军等用HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。
采用岛津LC-10ADVP液相色谱仪，色谱柱为USAAgilentZORBAXSB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm)；甲醇-水-冰醋酸(46：54：1)为流动相；检测波长为277nm；柱温室温。
样品以50%甲醇为溶剂，超声提取。
张惠萍等用ＲＰ－ＨＰＬＣ法对小柴胡颗粒中的黄芩进行了含量测定。
HPLC法测定小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量1
HPLC法测定小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量广西南宁市红十字会医院药剂科(530012) 李 欣 南宁市药检所(530001) 吴 毅 摘要 目的:建立小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量测定方法。
方法:采用反相高效液相色谱法。
色谱柱:Inert sil O DS-3 (5L m, 4.6×250m m)柱;流动相:甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2);检测波长:315nm。
结果:黄芩苷在0.2429～1.2144L g/ ml范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999),回收率100.0%,RSD=0.96%。
结论:本法可用于测定小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量。
关键词 高效液相色谱法 小柴胡颗粒剂 黄芩苷 含量测定 中图分类号 R943 小柴胡颗粒剂具有解表散热、疏肝和胃的功效,用于寒热往来,胸胁苦满,心烦喜吐,口苦咽干。
由柴胡、黄芩等九味中药组成(1),黄芩是方中主药之一。
黄芩是唇形科植物,其根味苦性寒,含数种黄酮苷类,黄芩苷(baicalin)是其主要有效成分。
黄芩苷具有清热解毒、利胆、降低转氨酶、抑菌、抗炎、抗变态反应等药理作用(2)。
临床上用于治疗上呼吸道感染、急性扁桃腺炎、急性咽炎、肺炎、肝炎、细菌性痢疾等疾病。
因标准中未收载有其含量测定方法,为进一步控制药品的质量,本人采用高效液相色谱法对小柴胡颗粒剂中黄芩苷的含量进行测定,实验结果表明,用本法测定该颗粒剂中黄芩苷的含量结果准确,方法简便易行。
1 仪器与试药1.1 仪器:高效液相色谱仪LC-14A(日本岛津)。
1.2 试药:黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所,9708)。
甲醇(上海陆都化学试剂厂,色谱纯)。
其他均为分析纯。
1.3 药品:小柴胡颗粒剂(广州光华药业股份有限公司,批号:001122、991116、991011、990708、000523)。
2 方法与结果2.1 色谱条件:色谱柱:Inertsil ODS-3(5L m,4.6×250mm)柱;流动相:甲醇-水-磷酸(45∶55∶0.2);流速1.0m l/min;检测波长:315nm;灵敏度: 0.08;柱温:35℃;进样量:20L l。
HPLC法测定大柴胡颗粒中黄芩苷含量
制备缺黄芩 的阴性 样品 溶液 ， 注入 液相 色谱仪 中测定 。 结果表明 ， 阴性样品不干扰 。
３ 加 样 回 收 率 试 验 ．
精密称取 黄芩 苷 对 照 品 ２ ｍｇ 加 甲醇 制 成 每 ｌ 含 ０ ， ｍｌ ４ｔ ０ ｇ的溶液 ， Ｌ 即得 。
２ ３ 供 试 品 溶 液 的 制 备 ．
表 １ 样品含量测定结果
别精密吸取 ２ ， 注 入液 相色谱 仪 中测定 ， 录色谱 图 和峰 ０ｌ ｕ 记 面积 。以各成分峰面积 （ 为纵 坐标 ， Ｙ） 质量 浓度 （ 为横 坐 Ｘ）
标， 得黄芩 苷线性方程 Ｙ ５３ ２ ６ ５ Ｘ一３９ ９ ． ２ 相关 一２ ２ ８ ０ ． ９ １６５１ ， 系数 ｒ ． ９ ９ 表明黄芩苷进样量在 ０ ２ ． ＝Ｏ ９９ ， ． ～１ ６ ｇ之间范 围 内与峰面积呈 良好 的线 性关 系 。
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２０ ０ ７年第 ２ ９卷第 ５ 期
湖北 中医杂志
・ ｌ ５ ・
ＨＰ Ｃ法 测 定 大 柴 胡 颗 粒 中黄 芩 苷 含 量 Ｌ
刘 博 ， 向 东， 自东 杨 史
（ 湖北省 医药工业 研 究 院 ， 北 武 汉 湖
关 键词 ：大柴胡颗粒 ； 黄芩 ； 黄芩苷 ； 高效液相 色谱 ； － ４ 量测定
中 图 分 类 号 ： ８ ． Ｒ２４ ２ 文献标识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ０ ０ ０ （０ ７ ０ －０ ５ －０ １０ － ７ ４ ２ ０ ） ３ ０ １ ２
４０ ６ ） ３ ０ １
大柴胡 颗粒是 由柴胡 、 黄芩 、 白芍 、 半夏（ 制） 枳实 （ 姜 、 麸 炒）大黄 、 、 生姜 、 枣等中药制成的中药颗粒剂 （ 大 原方大 柴胡
HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量研究
０ ． ０ ０ ２ ７ ２ ｕ ｇ 一 ０ ． ０ ５ ４ ４ ｍ ｇ ／ ｍ ｌ（ ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ９ ７ ） 范围具有 良好 的 线性 关 系，平 均回收 率为 ９ ９ ． ７ ２ ，Ｒ Ｓ Ｄ＝ ０ ． ４ ４ ％ 。结论 ：Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法测 定 小柴胡颗粒 中的黄芩 苷 方 法 简单 、 准确且 快速 ，可作 为 小 柴胡 颗 粒
５ ５：０ ． ２ ） ，ｗ ｉ ｔ ｈ ｌ ｆ ｏ ｗ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ １ ． ０ ｍ Ｌ・ ｍ ｉ ｎ 一，ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｗ ａ ｓ ｓ ｅ ｔ ａ ｔ ２ ８ ０ ｎ ｍ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍ ｉ ｎ ａ —
ＷＥ Ｉ Ｇ ｕ ｏ—ｂ ｉ ｎ ｇ ，Ｌ Ｉ Ａ Ｏ Ｆ ｕ— ｓ ｈ ｅ ｎ ｇ ，Ｈ Ｕ Ｑ ｉ — ｊ ｕ ｎ ，Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｘ ｉ ｕ— ｘ ｉ ｕ （ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｘ ｉ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｏ ｆＴ ｒ ａ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｅ ｎ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍ ｅ ｎ ｔ ｆＰ ｏ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ ，Ｎ ａ ｅｈ ｎ ａ ｎ ｇ ３ ３ ０ ０ ０ ４ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量研究
文章编号：1674-8085(2013)06-0078-03HPLC 法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量研究*韦国兵，胡奇军，廖夫生（江西中医药大学药学院，江西，南昌 330004）摘 要：目的 建立小柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定方法。
方法 采用高效液相色谱法。
色谱柱为Kromasil 100-5 ODS2（5 μm ，250 mm × 4.6 mm ），柱温25 ℃，流动相甲醇—水—0.1 mol/L 磷酸（45:55:0.2），流速为1 mL/min ，检测波长280 nm 。
结果 在上述条件下，黄芩苷在0.00272 μg/mL ~0.0544 μg/mL(r = 0.9997)范围具有良好的线性关系，平均回收率为99.72，RSD = 0.44%。
结论 本方法测定小柴胡颗粒中的黄芩苷含量操作简单、准确且快速，可作为小柴胡颗粒中黄芩苷的含量测定方法。
关键词：HPLC ；小柴胡颗粒；黄芩苷；含量中图分类号：R944.5 文献标识码：B DOI:10.3969/j.issn.1674-8085.2013.06.016DETERMINATION OF BAICALIN IN YINHUANG ORAL LIQUID BY HPLC*WEI Guo-bing ，HU Qi-jun ，LIAO Fu-sheng（Department of Pharmacy, Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang, Jiangxi 330004, China ）Abstract Objective ： To establish a HPLC method for determining the amount of baicalin in Xiaochaihu granules. Methods: HPLC analysis was carried out on a Kromasil 100-5 ODS2 (5 μm, 250 mm × 4.6 mm) column with the temperature at 25 ℃. The mobile phase was methanol - water-0.1 mol/L phosphoric acid ( 45: 55: 0.2) with the flow rate of 1.0 mL·min -1, and the detection wavelength was set at 280 nm. Results: The linear range of baicalin was 0.00272~0.0544 μg/mL (r =0.9997), the average recovery was 99.72%, and the RSD was 0.44%. Conclusion: The method is simple, rapid, accurate, and can be used for the quality control of the Xiaochaihu granules and its content determination. Key words: HPLC; Xiaochaihu granules; baicalin; content小柴胡颗粒由柴胡、人参、黄芩、大枣、半夏、生姜、甘草七味药组成，具有解表散热，舒肝和胃之功效。
HPLC法测定大柴胡颗粒中黄芩苷含量
HPLC法测定大柴胡颗粒中黄芩苷含量刘博,杨向东,史自东(湖北省医药工业研究院,湖北武汉430061)关键词:大柴胡颗粒;黄芩;黄芩苷;高效液相色谱;含量测定中图分类号:R28412文献标识码:A文章编号:1000-0704(2007)03-0051-02大柴胡颗粒是由柴胡、黄芩、白芍、半夏(姜制)、枳实(麸炒)、大黄、生姜、大枣等中药制成的中药颗粒剂(原方大柴胡汤载于汉#张仲景5金匮要略6),用于治疗急性胆囊炎。
黄芩为方中主药,其中黄芩所含主要有效成分为黄芩苷[1]。
笔者采用高效液相色谱法测定黄芩苷含量,为建立大柴胡颗粒科学的质量控制方法提供依据。
1仪器与试药高效液相色谱仪:美国光谱物理公司SP2000泵, U V2000紫外检测器,N2000色谱工作站。
黄芩苷对照品购自中国药品生物制品检定所。
大柴胡颗粒由湖北省医药工业研究院中药室提供。
其他试剂均为分析纯,水为双蒸馏水。
2方法211色谱条件[2-4]Iner tsil ODS-3色谱柱(150mm@416mm,5L m);流动相:甲醇-水-磷酸(46B54B012);检测波长为277nm;流速: 110ml/min;柱温:室温。
212对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品20mg,加甲醇制成每1ml含40L g的溶液,即得。
213供试品溶液的制备取本品适量,研细,取约012g,精密称定,置100ml量瓶中,加50%甲醇约95ml,超声处理30min,放冷,并稀释至刻度,摇匀。
滤过,弃去初滤液,取续滤液即得。
214标准曲线制备精密称取黄芩苷对照品10117mg,置100ml量瓶中,加甲醇适量,超声使溶解,放冷,并稀释到刻度,分别精密吸取1、2、4、6、8ml至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,分别精密吸取20L l注入液相色谱仪中测定,记录色谱图和峰面积。
以各成分峰面积(Y)为纵坐标,质量浓度(X)为横坐标,得黄芩苷线性方程Y=25238206159X-319695112,相关系数r=019999,表明黄芩苷进样量在012~116L g之间范围内与峰面积呈良好的线性关系。
RP-HPLC法测定金柴黄颗粒中黄芩苷的含量
２ 方 法 与 结 果
提 取 物 组 成 ， 方 在 柴 黄 颗 粒 及 银 黄 口 服 液 的 基 础 处 上进行 仿 创 结 合 组 合 而 成 ［ 。具 有 清 热 消 炎 作 用 ， １ ］
品溶 液 制 备 方 法 制 备 ， 行 测定 ， 果 ， 进 结 黄芩 苷 平 均
含 量 ８ ． ｍｇ ｇ， Ｄ 为 １ ５ 。 ７ ４ ／ ＲＳ ．６
Ａ ｓ ａ ｔ ［ ｂｅ ｔ ｅ ｏｅｔ ｂｉ ｈ ｏ ｔｎｓｄ ｔｒ ｎ ｇ ｍｅ ｎ ｆｂ ｉ ｌ ｉｃ ａ ｕ ｎ ｒｎ ｌｓ Ｍｅｈ ｄ ］ Ｂ ｉ ｌ ａ ｂｔ ｃ ： Ｏ ｊｃｉ ］Ｔ ｓａ ｌ ｈ ｔ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｅｅｍｉｉ ａ ｓｏ ａｃ ｉ ｉ Ｊｎ ｈ ｉ ａ ｇ ｇ ａ ｕ ｒ ｖ ｓ ｎ ａｎ ｎ ｈ ｅ ｔｏ ｓ ａ ａ ｎｗ ｓ ｃｉ ｃｒｉ ｕ ｂ Ｉ ． Ｒ ｓ ｌ ］Ｂ ｉ ｌ ｈ ｗｅ ｏ ｄｌ ｅ ｒｒｌｔ ｏ ｈｐａ ａｒｎ ｅ ｆ ． ５ — １ ２ ６ ｇ ｒ ． ９ ７ Ｔｈ ｖ ｒｇ ａ ｒ ｄｏ ｔ ｙ ＨＰ ［ ｅ ｕｔ ｅ Ｃ ｓ ａ ａｉ ｓ ｏ ｄａｇ ｏ ｎ ａ ｅ ｉ ｓ ｉ ｔ ａ ｇ １ ７ — ． ５ ／ ． 一０ ９ ９ ． ｅａ ｅａ ｅ ｃ ｎ ｉ ａａ ｏ０ ｘ ｒｃ ｖ ｒ ａ ０ ． １ ， ｎ Ｓ ａ ． ６ ． Ｃ ｎ ｌｓ ｎ Ｔｈ ｔ ｏ ｓａｅ ａｃ ｒ ｔ ａ ｄｑ ｉ ，ａ ｄ ｃ ｎ ｂ ｓ ｄｆ ｒｔｅｑ ａ ｔ ｅｏ ｅｙ ｗ ｓ１ １ ３ ａ ｄ Ｒ Ｄ ｗ ｓ１ ２ ｒ ｏ ｃｕ ｉ ￣ ｅｍｅ ｄ ｒ ｃ ｕ ａｅ ｎ ｕｃ ｏ ｈ ｋ ｎ ａ ｅ ｕ ｅ ｏ ｈ ｕ ｌ ｙ ｉ
反相高效液相色谱法测定柴黄片中黄芩苷的含量
反相高效液相色谱法测定柴黄片中黄芩苷的含量吴小愚，陈儒燕，李丛菊成都中医药大学药学院，成都（611130）E-mail：wxyxiaoyu@摘要：目的建立反相高效液相色谱法测定柴黄片中黄芩苷的含量的方法。
方法采用Alltima C18（5µm, 250×4.6mm）色谱柱，流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（60：40：0.2：2滴），检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温35℃。
结果黄芩苷在0.112～0.784µg范围线性关系良好，r=0.9999,平均回收率为100.03%（n=9）,RSD=0.60%。
结论方法可行，结果可靠，重现性好，可很好的应用于柴黄片中黄芩苷的含量测定。
关键词：柴黄片，黄芩苷，反相高效液相色谱法柴黄片由柴胡、黄芩等提取加工制成的中药片剂，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第三册，原标准仅收载了其性状鉴别方法，而无含量测定项，为有效控制其质量，我们采用HPLC法对黄芩主要成分黄芩苷进行含量测定。
经方法学考察，认为本法简便、准确、无干扰，可用于本品质量控制。
1.仪器、试剂与药品Agilent 1100型高效液相色谱仪，可变波长紫外检测器，柱温箱，四元泵，色谱工作站；超声波清洗器，电子分析天平，过滤装置，及微孔滤膜（0.45μm）。
黄芩苷对照品（批号0715-200211、中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。
流动相用水为重蒸水，所用甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
柴黄片及其缺黄芩空白样品（自制）。
2.方法与结果2. 1 色谱条件Alltima C18柱（5µm,250×4.6mm）；流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺（60：40：0.2：2滴），检测波长为280nm，流速为1.0ml/min，柱温35℃。
灵敏度0.05AUFS，进样量10µl。
在此条件下，样品中黄芩苷与其他组分峰达到基线分离，理论板数按黄芩苷峰计算为4194，黄芩苷保留时间为4.998min，空白实验表明无干扰。
紫外分光光度法测定柴黄片中黄芩苷的含量
Ａ
Ａ 。
含量 ／ｇ 片 ‘ ｍ・
４ ５３ ６． ４ ．００ ６ ４ ．６７ ６ ４ ．１６ ４ ４ ．９４ ２ ４ ．０５ ４ ４ ．９４ ２ ４ ．８４ ３ ４ ．５ ２ ８
２ ３ 阴 性对 照 品溶 液 的制 各 ．
除黄 芩外 ， 柴 胡 按 处 方 比 取
Ｏ ｎｕ Ｏ Ｏ
Ｏ Biblioteka 叭 叽 Ｏ Ｏ ９ｐ Ｈ值 到 １ ２ 水浴 ８ ℃保温 ３ ｉ ， ～， ０ ０ ｎ 冷却至 室温 ， ｍ 离心 ， 倾 弃上清液， 在沉淀中加 氯仿 １ Ⅱ ， ０ ｌ 超声处理 １ ｉ ， Ｌ ０ｍ ｎ 弃氯仿
液 ， 淀 用 ７％ 沉 ５ 乙醇 洗 脱 ， 洗 脱 液 ， ２ ０ Ｌ量 瓶 中 ， 得 置 ０ ｍ 加 ７％ ５ 乙醇 至 刻 度 ， 为 供 试 品 溶 液 。称 量数 据 见 表 １ 作 。
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伸 基 ２０ 年第２ 卷第Ｊ Ｇｎ ｕ ａｏＴＭ ２０ ｏ２ Ｎ． ‘ ０８ １ 期 ａ ｕｏｒ ｌ Ｃ ，０８ １１ ｏ ｓＪ ｎ ｆ Ｖ． １
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关键词
紫外分光光度法； 柴黄 片； 黄芩苷
文献 标 识 码 ： Ａ 文 章编 号 ： ４ ６ ５ （０ ８ ０ — ０ ９ ０ １ ０ － ８ ２ ２ ０） １ ０４ — ２ ０
中图 分 类 号 ：２ ５ ５ Ｒ ８ ．
柴黄片原于 《 中华 人 民共 和 国卫 生 部 药 品标 准 中 药 成
为分析纯 （ 天津化学试剂厂） 。
２ 方 法 与结 果
Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ Ｏ
方制剂》 ３ ， 第 册 标准号为 Ｗ ３ ０ ９ ￣ １ 为清热解 表药 ， Ｓ－ ５ ９９ ， 可 用于感 冒引起 的发热 ， 周身不适 ， 头痛 目眩 ， 咽喉肿痛［ 为 。
小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法
小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法针对小柴胡颗粒中的黄芩提取物的检查项，可以从以下几个方面进行补充检验方法：1.有效成分含量测定：黄芩的有效成分主要是黄芩苷，可以采用高效液相色谱法（HPLC）进行测定。
该方法可以通过对黄芩提取物中黄芩苷的特征峰进行定量，确定其含量是否符合质量标准。
同时，还可以通过比较不同批次样品的含量差异，保证产品质量的一致性。
2.质量控制指标的考察：除了黄芩苷的含量外，还需关注黄芩提取物中的其他成分含量情况。
可以采用质量控制指标中所要求的其他成分的检测方法，如黄芩酮的含量测定、黄酮类成分的含量测定等。
这些成分的含量反映了黄芩提取物的整体质量情况，也是评价小柴胡颗粒的质量的重要依据。
3.农药残留的检测：黄芩作为一种中药材，其种植过程中可能会使用农药，因此需要进行农药残留的检测。
可以采用液相色谱法（LC）或气相色谱法（GC）等方法，通过与农药库标样的比对，检测样品中各种农药的残留情况。
农药残留超标可能会对人体健康产生潜在危害，因此这一项检测非常重要。
4.微生物的检测：黄芩提取物的微生物污染是影响其质量的重要因素之一，因此需要进行微生物的检测。
可以采用菌落计数法、霉菌菌落计数法等方法，检测黄芩提取物中细菌和霉菌的污染情况。
此外，还需要检测沙门氏菌、大肠杆菌等致病菌的存在情况。
5.重金属的检测：黄芩提取物中含有一定量的金属元素，因此需要进行重金属的检测。
可以采用原子吸收光谱法、电感耦合等离子体质谱法等方法，检测黄芩提取物中各种重金属的含量情况。
重金属超标可能对人体健康带来潜在危害，因此这项检测也非常重要。
通过以上补充的检验方法，可以全面地评价小柴胡颗粒中黄芩提取物的质量情况，确保其安全有效。
同时，在实际检验过程中需要注意的是，确保检测方法的准确性和可重复性，对于检测结果的分析和解读要进行科学合理的判断，确保测试结果的可靠性和准确性。
HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量2
HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷的含量【摘要】目的：建立小柴胡颗粒中黄芩苷的的含量测定方法。
方法：采用Phenomenex Synergi C18 (4.6×250 mm，4 μm) 为色谱柱，以甲醇－0.1％磷酸溶液(47：53)为流动相，280 nm为检测波长，柱温为30 ℃。
结果：黄芩苷浓度在0.00308-0.308mg·mL-1范围内线性关系良好（r =0.999946），平均回收率为99.3%，RSD=2.1 %。
结论：该方法简便、准确，分离度好，可用于小柴胡颗粒的质量评价。
【关键词】小柴胡颗粒；黄芩苷；HPLC【Abstract】Objective：TO establish an HPLC method for determination of Baicalain in Xiaochaihu kernel. Method：A Phenomenex C18(4.6×250 mm，4 μm) column was used with a mobile phase of methanol-0.1% phosphoric acid （47：53）,and flow rate of 1.0 mL·min-1 ；The detection wavelength was set at 280 nm and the column temperature was set at 30 ℃.Result: The calibration curves were linear in the range of 0.012~0.60 m g·mL-1 for Baicalain（r =0.999946），The average recovery of Baicalain was 99.3%, RSD=2.1%.Conclusion:It is proved that the method with HPLC is reliable,simple,well separated and precise,that can be used as principles of quantitative analysis. [ Key words ] Xiaochaihu kernel；Baicalain；HPLC前言小柴胡颗粒是《伤寒论》中经典方小柴胡汤的现代制剂，主要成分为柴胡、黄芩、甘草、党参等七味药材，具有解表散热、疏肝和胃等功效，用于寒热往来、胸胁苦满、心烦喜吐、口苦咽干，其临床运用非常广泛。
中药中有效成分黄芩苷含量测定方法研究
中药中有效成分黄芩苷含量测定方法研究摘要：黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分，这种物质提取于黄芩干燥后的根部，是一种黄酮类化合物。
它对于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒有很好的效果。
本文中重点介绍了几种最普遍的检测方式，导数光谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法和液质联用法，对比了几种检测方法的优势与使用条件。
关键词：黄芩苷含量检测导数光谱法紫外分光光度法1、引言黄芩是一种双子叶植物唇形科植物的药材。
黄芩苷是由中药药材中黄芩中分离出的有效成分，这种物质提取于黄芩干燥后的根部，是一种黄酮类化合物。
它能够水解出黄芩素和葡萄糖醛酸，构成了黄芩的一个重要的有效成分。
黄芩苷是一种广泛使用的中药成分之一，常用于医治传染性肝炎、急性胆道感染和解铅中毒等疾病。
它具有一定的生物活性，可以抑制细菌，利于排尿，黄芩苷还具有对抗炎症、清火利咽、安胎保胎、止咳等功效。
黄芩苷别名为黄芩甙，分子式为C21H18O11，是一种黄色的结晶物质，它的熔点在223℃到225℃之间，溶于N，N-二甲基甲酰胺，吡啶，在碳酸氢钠、碳酸钠、氢氧化钠等碱性溶液中有良好的溶解度。
在冰醋酸中呈微溶状态，丙酮、甲酸和乙酸中呈现难溶状态。
在水、乙醚、氯仿和苯中基本不溶解，所以实验要避免使用这几种溶液作为溶剂。
图1 黄芩苷化学结构式2、测定的药品的含量与纯度的方法2.1、导数光谱法导数光谱法分为：一阶导数光谱法、二阶导数光谱法和四阶导数光谱法。
用一阶导数光谱法测定的时候最初利用紫外分光光度计分别将预先筹备好的黄芩苷标准品、样本溶液和阴性的对照组溶液进行吸光度的测定，记作A。
用A对测定波长求一阶导数，用求出的一阶导数对应波长作图，得到需要的一阶导数曲线图。
这样我们就可以直接确定出样品与黄芩苷标准品的最大吸收值，除掉阴性的干扰性，可以从图中直观看出对照溶液的波长（平行于基线）。
这样简单提取处理的样品就可以检测出黄芩苷的含量了，具有简单、高效、快捷的优点。
黄芩苷含量测定方法研究进展
Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
医
ＯＨ
药
信．息
２００９年第２６卷第４期
Ｖ０１．２６，Ｎｏ．４，２００９
Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａ】Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
串药研爨进展
黄芩苷含量测定方法研究进展
申去非，张莉＋，朱铁梁，王晓辉，陈莉
（武警医学院，天津３００１６２） 摘要：黄芩苷是中药黄芩的主要有效成分之一。许多舍黄芩的中药制剂均采用黄芩苷作为质量控制 指标，但其含量测定方法各异。故将检测黄芩苷的紫外分光光度法、薄层扫描法、高效液相色谱法、毛细 管电泳法和液相色谱一串联质谱法的适用范围和优缺点一一综述，以期为黄芩苷的含量测定研究提供 参考。 关键词：黄芩苷；含量测定；高效液相色谱法；毛细管电泳法；液相色谱一串联质谱法 中图分类号：Ｒ９２７．２１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—２４０６（２００９）０４—００１４—０３ 痤胶囊的质量控制标准采用高效液相色谱法对制剂中 的黄芩苷的含量进行测定。理论塔板数以黄芩苷计算 为３０００，样品牛黄芩苷得到很好的分离。黄芩苷在 ０．２００３—１．０００６斗ｇ范围内与峰面积呈良好的线性关 系：平均加样回收率为９８．６７％，ＲＳＤ＝１．４１％（１１＝ ６）。刘萍等［３】等采用反相高效液相色谱法测定了不 同部位和不同炮制方法的枯芩与子芩中黄芩苷的含 量。在其建立的液相条件下，黄芩苷的保留时间为 ４．９５ｍｉｎ。线性范周为０．０１８７５～０．１５０００ｍｇ。平均回 收率１００．３２％，ＲＳＤ值为２．０５９％。刘平等Ｍ１采取乙 醇加热回流提取的方法提取有效成分，以高效液相色 谱法测定开光复明片中黄芩苷的含量，避免了多种中 药材成分的相互干扰，理论塔板数按黄芩苷峰计算均 大于２５００；分离度符合要求；拖尾因子均在０．９５一 １．０５之间。黄芩苷检测浓度线性范围在４．９５— ４９．５“ｇ・ｍＬ～。李运景等忙１用甲醇一０．０２５ｍｏｌ・Ｌ叫 磷酸溶液（６０：４０，ｖ／ｖ），用三乙胺调节ＰＨ值（３．０
小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法
小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项补充检验方法小柴胡颗粒是一种常用于治疗中医药中气郁血瘀证的中药制剂。
其中的黄芩提取物是一种重要的活性成分，具有清热解毒、抗菌抗病毒、抗氧化等作用。
为了保证小柴胡颗粒的质量和安全性，需要对黄芩提取物进行检验。
本文将为您介绍小柴胡颗粒中黄芩提取物检查项的补充检验方法。
1.黄芩提取物含量测定黄芩提取物的含量是衡量小柴胡颗粒品质的重要指标。
传统的测定方法是采用高效液相色谱法（HPLC）进行含量分析。
HPLC分析不仅可以准确测定黄芩提取物的含量，还可以同时检测其他成分，为小柴胡颗粒的质量控制提供全面的信息。
2.黄芩提取物的纯度检测黄芩提取物的纯度是指其有效成分在提取物中的相对含量。
保证黄芩提取物的纯度有助于保证小柴胡颗粒的疗效稳定。
传统的纯度检测方法包括薄层色谱法和气相色谱法。
薄层色谱法可以用于检测提取物中的杂质和未去除的溶剂，气相色谱法可以用于检测提取物中的有机残留物。
3.黄芩提取物的微生物检测微生物污染是影响小柴胡颗粒质量的重要因素之一、常规的微生物检测方法包括总菌数、霉菌和酵母菌的测定。
传统的检测方法包括菌落计数法和聚合酶链反应法（PCR）。
近年来，基于PCR技术的快速检测方法逐渐得到应用，可以提高检测的准确性和灵敏度。
4.黄芩提取物的重金属检测重金属是常见的药材污染物之一，其存在可能会对人体健康造成潜在的危害。
因此，对黄芩提取物中重金属的含量进行检测是必要的。
传统的重金属检测方法包括原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法。
这些方法可以准确测定提取物中重金属的含量，确保产品的安全性。
5.黄芩提取物的质量评价除了单一成分的检测，还可以通过对黄芩提取物的多成分进行指纹图谱分析来评价其质量。
指纹图谱分析是一种将药材中复杂的化学成分进行综合分析的方法。
通过对提取物中的多个成分进行定量分析和相似度比较，可以评估提取物的质量稳定性和一致性。
总结起来，小柴胡颗粒中黄芩提取物的补充检验方法主要包括含量测定、纯度检测、微生物检测、重金属检测和质量评价。
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-3-
批号
表 2 3 批样品含量测定结果(n＝2)
样品（g）
峰面积
含量(mg/袋)
3091001 3091002 3091003
0.10072 0.10503 0.09957
555106 563397 549871
340.28 339.75 341.20
3.9 加样回收率试验
取已知含量的供试品 9 份（批号：3091001），每份约 0.05g，精密称定，分别置 100ml 量瓶中,分别加入黄芩苷对照品溶液（浓度：1.125mg/ml）3、4、5ml(每个水平平行三份)， 照拟定的方法制备供试品溶液并测定黄芩苷含量，按以下公式计算黄芩苷的回收率。结果见 表 1。
3.3 供试品溶液的制备
取装量差异项下的本品，研细，取约 0.1g，精密称定，置 100ml 量瓶中，加甲醇 80ml， 超声处理（功率 300W，频率 5KHz）20 分钟，取出，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤 过，精密量取续滤液 5ml 至 10ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2. 仪器与试药
2.1 仪器
SHIMADZU 高效液相色谱仪(LC-10ATVP 溶剂输送系统，LC-10AVP 检测器)；TIANHE C18(5µm,150mm×4.6mm) 色谱柱；十万分之一电子天平(Sartorius BP121S)；超声波清洗器 （DL-360 中国宁波）
2.2 试药
黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号 110715-200514，供含量测定用)，使用 前经 60℃减压干燥 4 小时；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
3.4 阴性供试品溶液的制备
取处方中除柴胡以外的其他原料，按工艺制备方法，并按供试品溶液的制备方法制得 阴性供试品溶液。
3.5 线性范围的考察
精密量取黄芩苷对照品溶液(55.04µg/ml)6µl、8µl、10µl、12µl、14µl 注入液相色谱仪， 记录色谱图，测定其峰面积，并以峰面积值(Y)对进样量(X)进行回归，得标准曲线方程为： Y=118006X+192743，r=0.9998。以峰面积值(Y)对进样量(X)作图，得一直线，结果表明在 0.3302µg～0.7706µg 范围内，黄芩苷线性关系良好。
测得黄芩苷峰面积的相对标准差分别为 0.67%和 0.72%，表明对照品和供试品溶液在 12 小 时内稳定。
3.8 重复性试验
按 3.1 拟定的含量测定方法，对同一批号样品(批号 3091001) ，同时制备 6 份样品供试 品溶液，精密吸取 10µl 注入液相色谱仪，计算黄芩苷含量，其相对标准偏差为 0.95%，表 明该方法重复性良好。
-1-
[mAU] 7.472
60
44
42
55
40
7.248
38
50
36
34 45
32
40
30
28
35
26
24
[mAU]
30
22
20
25
18
16
20
14
12
15
10
10.029 11.110 1 1 .6 3 7
8
10
6
0.719 1.688 2.302 3.990
5
0
-5
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
[min]
图 3 阴性样品色谱图
3.2 对照品溶液的制备
精密称取经 60℃减压干燥 4 小时的黄芩苷对照品 7.83mg，置 25ml 量瓶中，加甲醇溶 解并稀释至刻度，摇匀；精密吸取 5ml 置 25ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 （62.64µg/ml）
参考文献
[1] WS3-B-2009-95-2005.［S］.中华人民共和国国家药品监督管理局国家药品标准.柴黄颗粒质量标准.2005 [2] 刘广川,孙东凯,吴贵华. HPLC 法测定祛斑胶囊中黄芩苷的含量［J］．天津药学,2007. 19（6）：15-16 [3] 国家药典委员会编.中华人民共和国药典（一部）.北京：化学工业出版社，2005：211
Abstract Objective: To establish a method to Determination of the contents of Baicalin in Chaihuang Granules. Method: Alltima C18(5µm,150mm×4.6mm) was used with the mobile phase consisting of Methanol-0.3%H3PO4 (50:50), the detection wavelength was at 280nm. Result: The linear range of Baicalin was in the range of 0.3302µg～0.7706µg, r=0.9998, the average recovery as 101.05%, RSD = 1.39%(n=9). Conclusion: The method is simple、accurate and credible. It can be used for the quality control of Chaihuang Granules. Keywords: Chaihuang Granules; Baicalin; Determination
3.6 精密度试验
精密吸取同一对照品和供试品溶液 10µl 注入液相色谱仪，连续进样 5 次，测得黄芩苷 峰面积的相对标准差分别为 0.62%和 0.81%，表明仪器精密度良好。
3.7 稳定性试验
精密吸取同一对照品和供试品溶液 10µl，分别于 0、4、8、12 小时注入液相色谱仪，
-2-
Determination of the contents of Baicalin in Chaihuang Granules
Zhou Jingbo, Zen Dong, Guo Li,Chen Ruyan, Li Congju
Chengdu University of TCM, Chengdu (611137)
101.21
3
4.876
3.375
8.253
100.05
4
4.525
4.500
9.128
102.30
5
4.519
4.500
8.989
99.34
101.05
1.39
6
4.649
4.500
9.166
100.38
7
3.813
5.625
9.437
99.98
8
3.979
5.625
9.645
100.73
9
3.896
柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定研究
周静波，曾冬，郭力，陈儒燕，李丛菊
成都中医药大学，成都 (611137)
E-mail: zhoujb001@
摘 要：目的：建立柴黄颗粒中黄芩苷的含量测定方法。方法：采用
AlltimaC18(5µm,150mm×4.6mm) 色谱柱；流动相为甲醇-0.3％磷酸溶液（50：50）；检测波 长为 280nm。结果：黄芩苷峰与其他杂质峰分离良好，在 0.3302µg～0.7706µg 范围内，黄
5.625
9.606
101.50
结论：试验结果 RSD 为 1.39%，回收率在 95%～105%之间，表明本方法回收率良好
3.10 样品含量测定
按 3.1 拟定的含量测定方法，制备样品供试品溶液，对 3 批样品进行含量测定。考虑到 药材的来源、炮制加工、制剂生产及贮存等因素，确定其转移率不低于 90％，则柴黄颗粒 中黄芩苷含量应不低于 324mg/袋。结果见表 2
回收率(%)=
测得量(mg)－制剂中黄芩苷的量(mg) 加入黄芩苷量(mg)
×100%
编 供试品中黄芩苷
号
的量（mg）
1
4.431
表 1 加样回收率试验结果(n=2)
对照品加入量
测得量
回收率
（mg）
（mg）
（%）
3.375ຫໍສະໝຸດ 7.940103.97
平均回收率 （%）
RSD（%）
2
4.441
3.375
7.857
4. 讨论
在利用 RP-HPLC 法测定柴黄颗粒中黄芩苷的含量时，我们曾采用《中国药典》2005[3] 年版(一部)黄芩药材含量测定项下的色谱条件甲醇－水－磷酸（47：58：0.2）进行试验，结 果发现供试品溶液在该条件下测定效果良好，但保留时间较长，约为 10 分钟，经过筛选发 现用甲醇-0.3%磷酸（50：50）为流动相后保留时间可提前至 7 分钟左右，且能达到基线分 离。通过线性范围、精密度、稳定性、重现性、回收率等试验考察，证明该方法快速、简便， 结果准确可靠，能对柴黄颗粒中的黄芩苷进行测定，较大地提高了柴黄颗粒的质量控制方法。
4
5
2
0 0
-2
-4 -5
0
1
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3
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7
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[min]
0
1
2
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4
5
6
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9
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13
14
15
[min]
图 1 黄芩苷对照品色谱图
图 2 供试品溶液色谱图
[mAU]