注射用氨苄西林钠氯唑西林钠说明书.

注射用氨苄西林钠 /氯唑西林钠是氨苄西林钠和氯唑西

林钠按活性成分含量 11组成的复方制剂。由于氨苄西林

和氯唑西林的疏水性相差较大 , 在通常的反相色谱系统 [ 1]

中 , 氨苄西林的容量因子约为 1, 与有关物质的分离较差 ; 氯

唑西林的容量因子约为 30, 使得分析时间很长。本文建立采

用阳离子交换柱的 H PLC 法可同时测定注射用氨苄西林钠 /

氯唑西林钠中的氨苄西林和氯唑西林的含量 , 该法可在不足

10m in时间内有效分离氨苄西林、氯唑西林及其主要杂质。

1仪器与试药

高效液相色谱仪 ; 色谱柱 ( 200mm ! 46mm, 5m ; 氨苄

西林和氯唑西林对照品 (中国药品生物制品检定所 ; 注射用

氨苄西林钠 /氯唑西林钠 (上海新先锋药业有限公司 ; 磷酸

和磷酸氢二铵均为分析纯 , 乙腈为 HPLC 级 , 水为蒸馏水。

2色谱条件

流动相为磷酸盐缓冲液 ( 001m o l/L 磷酸氢二铵溶液 ,

用磷酸调节 pH 值 60 乙腈 ( 9010; 流速 10m l/m in; 柱温 25∀ ; 检测波长 225nm; 进样体积 20l 。

3方法与结果

对照品溶液取氨苄西林和氯唑西林对照品各 20m g,

精密称定 , 置 200m l量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻度 , 摇匀。供试品溶液取供试品 50m g, 精密称定 , 置 250m l量瓶中 , 加

水溶解并稀释至刻度 , 摇匀。系统适用性溶液称取供试品约

50mg, 置 50m l量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 室温

( 约 25∀放置 24h, 即得。氨苄西林峰和氯唑西林峰的理论

板数分别约为 3500 和 3000, 拖尾因子分别为 10 和 11, 两者间的分离度约为40。

31线性与范围取氨苄西林和氯唑西林对照品各 20m g,

精密称定 , 置 100m l量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻度 , 摇匀 , 作为贮备液。精密量取此液 75、 60、 50、 40 和 25m ,l 分别置 10m l量瓶中 , 加水稀释至刻度 , 摇匀 , 在上述色谱条件下分别

进样分析。以面积 ( A为纵坐标 , 浓度 ( C 为横坐标 , 回归方程分别为 : 氨苄西林 A= 1647C+ 76 r= 10000氯唑西林 A = 4585C+ 107 r= 10000 氨苄西林和氯唑西林分别在 45 ~ 134和 44~ 131g /m l范围内呈良好的线性关系。

32检测限和定量限氨苄西林和氯唑西林的检测限按信噪比 31 计均为 01g /m ,l 定量限按信噪比 101 计均为 03g /m l。

33精密度取同一批供试品 , 配制成 6份溶液 , 分别进样分析 , 氨苄西林和氯唑西林含量的平均值分别为 4467%

( RSD= 05%, n= 6和 4438% ( RSD= 06%, n= 6。

34耐用性另选用 2支相同品牌填料的色谱柱实验 , 均可得满意的色谱图。

35回收率精密量取同一份供试品溶液 10m ,l 分别置

20m l量瓶中 , 精密量取并加入对照品贮备液 5m ,l 加水稀释至刻度 , 摇匀。在上述色谱条件下进样分析。测得氨苄西林

和氯唑西林的平均回收率分别为 999% ( RSD = 04%, n= 6 和 1000% ( RSD= 05%, n= 6 。

36样品测定采用国家药品标准方法 [ 1] 对同一批供试品进行测定 , 测得氨苄西林和氯唑西林的含量分别为 4430% ( n= 3和 4491% ( n= 3 , 与本文方法的测定结果一致。 4讨论

离子交换 H PLC 法是建立在多重保留机理 ( 如反相和离

子交换上的 , 一般可提供独特的色谱选择性 , 同时又具有简便和重现性好的特点 [ 2]。研究结果显示 , 缓冲液中磷酸氢二

铵的浓度为 001mo l/L, pH 值由 50逐渐增至 70 时 , 氯唑

西林的保留值显著减少 , 氨苄西林的保留仅稍减弱 ; 缓冲液

pH 值为 60时 , 缓冲液中磷酸氢二铵的浓度由 001m o l/L逐

渐增至 0025m o l/L, 氯唑西林的保留值显著增加 , 氨苄西林

的保留仅稍增强。显然 , 由于 # 盐析∃效应 , 组分的保留随着

离子强度的增加而增强 , 表现出类似于化合物在疏水相互作

用色谱中的色谱行为 [ 2b]。鉴于两组分在本色谱系统中的

色谱行为与通常的离子交换色谱行为相反 , 即盐或缓冲液浓

度的增加反而导致组分保留的增强 , 故可以推断 , H ypersil

SCX 填料在本色谱系统中主要表现为疏水或反相色谱行为

的特征 [ 2b]。选择缓冲液中磷酸氢二铵的浓度为 001mo l/

L, pH 值为 6时 , 可在不足 10m in的分析时间内有效地分离

氨苄西林、氯唑西林及其主要杂质。本色谱系统尚可用于类

似品种如注射用阿莫西林钠 /双氯西林钠的含量测定 , 惟流

动相需稍作调整为磷酸盐缓冲液 ( 0005m o l/L磷酸氢二铵溶

液 , 用磷酸调节 pH 值为 64 乙腈 ( 9010 , 同样可在不

足 10m in的分析时间内有效地分离阿莫西林、双氯西林及其

主要杂质。

参考文献

[ 1 ] 国家食品药品监督管理局国家药品标准 WS10001(H D0620

2002注射用氨苄西林钠氯唑西林钠 [ S] , 2002: 7, 88

[ 2 ] Snyd er L R, K irk land J J, G lajch J LP racticalH PLC M ethod De velopm en t [ M ], 2nd edNew Y ork: John W iley & Son s, In c,

1997, a: 341; b: 345

收稿日期 : 2009 - 04- 13__