全波长薄层色谱法测定及应用

激光粒度分析

化学化工学院研究生实验报告

南 华 大 学 实 验 报 告

实验项目名称： 薄层色谱法测定及应用 班级 学号 姓名 同组人 实验教师 实验日期 审批

【实验目的】

1.了解薄层色谱的原理及其全波长薄层色谱扫描仪的构造

2.掌握薄层色谱应用于有机物分离的实验操作

3.学习选择操作条件和提高数据的处理能力。 【实验原理】

有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值R f 表示。

R

f

原点至层析斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离

【实验仪器】

仪器： 玻板，用10cm×20cm （8块）要求光滑，平整、洗净后的不附水珠，晾干； 固定相或载体：最常用的有硅胶G 其颗粒大小，一般要求直径为10—40µm ；涂布器； 点样器； 展开室；全波长薄层色谱扫描仪。

试剂：（不知道） 【实验内容】

1 薄层板制备：将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.2—0.3mm ），取下涂好薄层的玻璃板，

置水平台上于室温下晾干，后在75℃烘30分钟。即置有干燥剂的干燥箱中备用。

2 点样：用点样器点样于薄层板上，在薄层板下端约2cm 处，用铅笔轻轻画一直线，在横线上做三个记号为原点，原点间距离为2cm 。用毛细管分别蘸取A ，B ，C 在三个原点处点样，使斑点的直径约为2mm 左右，晾干。

3 展开：展开室如需预先用展开剂饱和，可在室中加入足够量的展开剂，并在壁上贴二条与室一

样高、宽的滤纸条，一端浸入展开剂中，密封室顶的盖，使系统平衡。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中，浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5—1.0cm （切勿将样点浸入展开剂中），密封室盖，等展开至规定距离（一般为10—15cm ），取出薄层板，晾干。

4测试：用薄层扫描仪对色谱斑点作扫描检出，以及直接在薄层上对色谱斑点作扫描定量。

【实验结果】 1、（不知道） 2、 3、

【实验注意事项】

1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。

2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm 以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。

3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂0.5cm 以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5－1cm 时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。

【思考题】

1、展开时，若层析筒盖不严密，对薄层分离是否有影响？为什么？

2、如果展开时间过长或过短，对混合物分离有何影响？