药理实验设计

实验设计1.X提取物（药物）降血糖作用实验设计
1.高血糖动物模型的建立
1.1材料与试剂
正规实验动物中心采购的健康，成熟，体重为24-26g的清洁级48只ICR 种小鼠。

正规厂家生产的四氧嘧啶，血糖试剂盒，生理盐水，阳性对照药品。

1.2方法
小鼠应饲养3d，空腹(禁食不禁水)18h后测其体重，以200 mg/kg剂量腹腔注射四氧嘧啶，连续注4d后，尾静脉取血，用血糖仪测空腹血糖，筛选出血糖值高于12.0mmol/L的小鼠作为高血糖模型。

2.分组与给药
取12只正常小鼠作空白对照组，取12只高血糖模型做为模型组，取12只高血糖模型做为阳性对照组，取12只高血糖模型做为给药实验组。

空白对照组和模型组每日按Mg体重给予NmL生理盐水，阳性实验对照组给予Nml阳性实验药品（二甲双胍，格列吡嗪等），给药实验组每日按每Mg体重给予NmL X 提取物（药物），连续灌胃Yd。

3.血糖测定
最后1次灌胃给药后，禁食不禁水20 h，从各组小鼠尾静脉取血，用血糖仪测空腹血糖值。

4.数据处理
对测定的结果用SPSS 11.5软件进行统计处理，试验前后比较采用配对t 检验，各组之间比较采用方差分析。

实验设计2.X提取物（药物）抗肿瘤作用实验设计
1.体外实验
1.1材料与方法
1.1.1试验菌株
应尽量多的选取病变细胞菌株，至少十种，其中应包括鼠源病变细胞菌株，如小鼠S-180，以及人源病变细胞，如人肝癌7721细胞，人宫颈癌HeLa细胞
人胃癌MGC-803细胞。

1.1.2 X提取物（药物）溶液制备
取X提取物（药物）适量，加蒸溜水适量溶解，过滤，滤液浓缩至规定浓度的浓缩液，过滤除菌，用含10%小牛血清的培养基稀释成不同浓度的药液(根据预试验结果而定，浓度均以相当的生药量表示)，保存备用。

1.1.3分组与给药
分为实验组，阳性对照组，阴性对照组。

实验组给予不同浓度的药液，阳性对照组加入环磷酰胺，阴性对照组用相应培养液。

1.2实验方法
取对数生长期形态佳X种（X>=10）瘤细胞，分别处理后，用含10%小牛血清培养液将瘤细胞制成l.5x105/ml细胞的悬液，加入96孔培养板，每孔1ml，置5%CO2，37℃的培养箱中，培养24小时后，吸出培养液。

按分组与给药中所述方法操作。

1.3结果统计
将培养板置于培养箱内培养，48h后终止培养，取出镜下观察其抗肿瘤作用的效果，并记录和照像。

用0.4%胎盼蓝染色，分别计数各孔的死活细胞数，并计算出细胞生长抑制率公式如下:
肿瘤抑制率=［1—（实验组活细胞）/（对照组活细胞）］×100%
2.体内实验
2.1材料与试剂
体外实验中抑制效果明显的肿瘤细胞，昆明种小鼠体重18-22g，雌雄均可。

2.3肿瘤模型建立
取体外实验中抑制效果明显的肿瘤细胞种类，将生长旺盛的肿瘤细胞在无菌条件下研磨制成l.5x105/ml细胞的悬液，相应宿主每鼠足趾皮下接种MmL/只，次日给药。

2.2给药与分组
实验分为三组：实验组，阳性对照组，阴性对照组，每组Y只。

实验组给与低浓度（LD50/30）中等浓度（LD50/20）高浓度（LD50/10）的X提取物（药物）溶液，采用灌胃给药，每天一次，连续M天。

阴性对照用相应培养液。

阳性对照组静脉滴注环磷酰胺。

2.4结果统计
二周后处死各组动物截取足趾称重，按下列公式计算肿瘤抑制率。

肿瘤抑制率=［（空白对照组瘤足趾平均重—给药组瘤足趾平均重）/空白对照组瘤足趾平均重］×100%。