冰冻切片和石蜡切片各自的优劣之处

冰冻切片和石*6切片各自的优劣之处是什么

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冰冻切片(Frozen suction)是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度，然后进行切片的方法。因其制作过程较石蜡切片快捷、简便，而多应用于手术中的快速病理诊断。冰冻切片的种类较多，有低温恒冷箱冰冻切片法，二氧化碳冰冻切片法，甲醇循环制冷冰冻切片法等。这些方法，随着时代的变迁，科技的发展，许多年前被认为是非常重要的技术，现在也逐步被淘汰了。当然有些技术，如低温恒冷箱冰冻切片法，正在受到青睐。

编辑本段冰冻切片的应用

(1)在手术进行中，突然发现病人的病变与原诊断，原定手术方案不相符

合，或者怀疑时，需要病理确定。

⑵ 了解淋巴结内是否有转移的肿瘤细胞，或者转移的程度，以利于确定是否需要彻底扫除淋巴结或者其它的治疗措施。

(3)对于已确定为恶性肿瘤的患者，则需要了解其手术范围是否足够，

上下切缘是否有残存的肿瘤组织。

(4)在做剖腹探查时所发现的肿块或者异样的组织。

(5)显示组织中的脂肪和脂类物质，这常见于某些病例如脂肪瘤及肉瘤, 某些科研组织等。

(6)某些酶的显示如ATP酶，琥珀酸脱氢酶等。

(7)神经病理学技术中的某些染色法如：Eger氏法，Marchi氏法，Cajal 氏法，Hortega氏法和Holzer氏法等。

(8)对某些物质所进行的免疫荧光的研究。

编辑本段冰冻切片的制作方法

低温恒冷箱冷冻切片制作法

以Shandon As 620 E型恒温箱冷冻切片机为例，该机的箱面上有电于控制板，装有即时冷冻键和除霜键，启动即时冷冻键，机器马上进行工作状态，并可持续lOminso启动即时除霜键，可将工作间顶部后面的制冷栅上的霜除掉，并可持续15minso有照明键一个，启动该键可照明工作间，有利工作及观察组织的冰冻状况。配有消毒键一个，当进行一周的工作或者一天的工作后，启动该键，可对工作间进行消毒。当每天工作完毕时，可启动密锁键，锁住工作间。除此之外，箱面的左边有四个按键，两个为快速自动进退键，两个为微小进退键，还有一个手动旋钮，调节修组织块时的进退。

冷冻箱内左边的冷冻台，温度可达-6()°C左右，冷冻箱的中间为一台切片

机，工作间的温度在()-30°C间可任意调节，并在箱面上的荧屏显示岀来。

操作方法及步骤

①取材，未能固定的组织取材，不能太大太厚，厚者冰冻费时，大者难

以切完整，最好为24X24X2mmo

②取出组织支承器，放平摆好组织，周边滴上包埋剂，速放于冷冻台上, 冰冻。小组织的应先取一支承器，滴上包埋剂让其冷冻，形成一个小台后，再放上细小组织，滴上包埋剂。

③将冷冻好的组织块，夹紧于切片机持承器上，启动粗迸退键，转动旋钮，将组织修平。

④调好欲切的厚度，根据不同的组织而定，原则上是细胞密集的薄切，

纤维多细胞稀的可稍为厚切，一般在5-lOum间。

⑤调好防卷板。制作冰冻切片，关键在于防卷板的调节上，这就要求操

作者要细心，准确地将其调较好，调校至适当的位置。切片时，切出的切片能在第一时间顺利地通过刀防卷板间的通道，平整地躺在持刀器的铁板上。这时便可掀起防卷板，取一载玻片，将其附贴上即可。

⑥应视不同的组织选择不同的冷冻度。冷冻箱中冷冻度的高低，主要根

据不同的组织而定，不能一概而论。女口：切未经固定的脑组织，肝组织和淋巴结时，冷冻箱中的温度不能调太低，在-10--15°C左右，切甲状腺、脾、肾、肌肉等组织时，可调在-15〜2()°C左右，切带脂肪的组织时，应调至-25°C左右, 切含大it的脂肪时，应调至-30°C。

冰冻切片时的注意事项

①防卷板及切片刀和持刀架上的板块应保持干净，需经常用毛笔挑除切

片残余和用柔软的纸张擦。有时需要每切完一张切片后就用纸擦一次。因为这个地方是切片通过和附贴的地方，如果有残余的包埋剂粘于刀或板上，将会破坏甚至撕裂切片，便切片不能完整切出。

②多例多块组织同时需做冰冻切片时，可各自放于不同的支承器上，于

冷冻台上冻起来，然后依据不同的编号，依序切片，这样做既不费时也不会

乱。

③放置组织冰冻前，应视组织的形状及走势来放置，所谓“砍柴看柴势”，切片也是如此，如果胡乱放置，就不能收到很好的效果。

④组织块不须经各种固定液固定，尤其是含水的固定液，在未达到固定前，更不能使用。临床快速冰冻切片，不须要预先固定，一是为了争取时间, 二是固定了的组织，反而增加了切片的难度。如果使用未完全固定的组织做冰冻切片，就会出现冰晶。这是因为含水的固定液在组织未经固定前，其中的水份也可渗入到组织中去，当冰冻发生时，这些水份就存留于组织中，形成了冰晶。

⑤当切片时，如果发现冰冻过度时，可将冰冻的组织连同支承器取出来, 在室温停留片刻，再行切片，或者用口中哈气，或者用大拇指按压组织块，以此来软化组织，再行切片。另者，调高冰冻点。

⑥用于附贴切片的载玻片，不能存放于冷冻处，于室温存放即可。因为当附贴切片时，从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差，当

温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时，由于两种物质间温度的差别, 当它们碰撞在一起时，分于彼此间发生转移而产生了一种吸附力，使切片与载玻片